Dengue é uma doença infecciosa não contagiosa causada pelo vírus da dengue (gênero Flavivirus, família Flaviviridae), transmitida pela picada de artrópodes do gênero Aedes, principalmente Aedes aegypti, e sendo atualmente um importante problema de saúde pública em todo o mundo. Segundo a Organização Mundial de Saúde, cerca de 50 a 100 milhões de pessoas se infectam anualmente em mais de 100 países de todos os continentes. A dengue apresenta-se em três formas clínicas principais; doença febril indiferenciada, febre clássica do dengue (DF) e dengue hemorrágico com ou sem choque (DHF/DSS). Recentemente, viu-se um dramático aumento do número de casos de DHF/DSS nas Américas, e este aumento coincidiu com a introdução do dengue tipo 3, genótipo III. Neste trabalho, caracterizamos completamente o genoma de um vírus brasileiro de dengue tipo 3 (D3BR/RP1/2003) isolado de um paciente com dengue clássica. O genoma viral possui um tamanho de 10707 nucleotídeos e contém uma única região codificadora (posição 95 a 10264) flanqueada por duas regiões não codificadoras (RNC5, 1 a 94; RNC3, 10268 a 10707). A comparação do genoma viral com outros vírus isolados de pacientes com DF e DHF não mostrou diferenças significativas que sugerissem a presença de um fator genético associado à virulência. A analise filogenética baseada no genoma completo, mostra que a cepa D3BR/RP1/2003 pertence ao genótipo III e encontra-se proximamente relacionada a outro vírus isolado no Rio de Janeiro em 2002. Entretanto, quando essa análise filogenética é realizada com as regiões codificadoras das proteínas E e NS5 individualmente, a cepa D3BR/RP1/2003 encontra-se mais proximamente relacionada a um vírus isolado na Ilha de Martinica no Caribe. Este achado sugere que o isolado D3BR/RP1/2003 pode ter sido originado através de um evento de recombinação entre duas cepas virais distintas antes ou após sua introdução no Brasil. Dados sugestivos de recombinação foram observados também quando analisada a relação filogenética entre vírus isolados na Ásia. / Dengue is an infectious disease caused by dengue virus (genus Flavivirus, family Flaviviridae), transmitted by the bite of arthropods of the Aedes genus, mainly Aedes aegypti, and being currently an important problem of public health worldwide. According to the World Health Organization, about 50 the 100 million people are infected annually in more than 100 countries of all continents. Dengue can be presented in three main clinical forms; undifferentiated febrile illness, classic dengue fever (DF) and hemorrhagic dengue fever with or without shock (DHF/DSS). Recently, a dramatically increase of DHF/DSS cases in the Americas have been seen, and this increase coincided with the introduction of the dengue type 3, genotype III. In this work, we have completely characterized the genome of a Brazilian dengue type 3 (D3BR/RP1/2003 strain) isolated from a DF patient. The viral genome possesses a size of 10707 nucleotides and has a unique open reading frame (position 95 to 10264), flanked by two untranslated regions (UTR5\', 1 to 94; UTR3\', 10268 to 10707). The comparison of the viral genome with other viruses isolated from patients with DF and DHF did not show significant differences to suggest the presence of a genetic factor associate with virulence. Phylogenetic analysis based on the complete genome showed that D3BR/RP1/2003 strain belongs to genotype III and is close related to another virus isolated in Rio de Janeiro in 2002. However, when the phylogenetic analysis was based on the individual coding regions of E and NS5 proteins, D3BR/RP1/2003 strain was closely related to a virus isolated in the Island of Martinique in the Caribbean. This finding suggests that D3BR/RP1/2003 strain could have been originated through an event of recombination between different virus strains before or after its introduction to Brazil. Data supporting recombination events between viruses isolated in Asia have also been observed.

Ultimamente, a análise fractal (AF) vem sendo utilizada com sucesso na área de processamento digital de voz, especialmente para fins de segmentação de palavras e fonemas, que é uma das etapas fundamentais dos sistemas de reconhecimento automático de fala (Automatic Speech Recognition - ASR ) e identificação automática de locutor (Automatic Speaker Identification - ASI). O uso prático da AF para ASR e ASI depende de dois fatores básicos: baixo custo computacional, para permitir o uso em tempo-real, e precisão nos resultados, para produzir a segmentação correta e entregar dados coerentes à etapa de classificação. Visando atender a esses objetivos, o presente trabalho propõe uma técnica de segmentação de sinais de voz baseada na dimensão do fractal, obtida com o uso da transformada wavelet discreta (DWT). Diversas famílias de wavelets são testadas e comparadas, sendo que os testes foram realizados com algumas sentenças extraídas da base de dados TIMIT do Linguistic Data Consortium (LDC). / Nowadays, fractal analysis has been successfully applied to digital speech processing, particularly for words and phonemes segmentation, which represents one of the fundamental steps in automatic speech recognition and speaker identification systems. The practical use of fractal analysis for these purposes should match two principles: low computational cost, to allow use in real-time, and accuracy in the results, to produce a correct segmentation, delivering consistent data to the classifier. Aiming at meeting these two requirements, this work proposes a technique for speech segmentation based on the fractal dimension, obtained by using the discrete wavelet transform (DWT). Many families of wavelets were tested and compared, being the experiments performed with speech data collected from TIMIT corpus provided by the Linguistic Data Consortium.

Apoptose é uma forma de morte celular extremamente conservada que tem papel primordial no desenvolvimento animal e na homeostasia celular, agindo como mecanismo de controle de qualidade com a função de remover células danificadas, em excesso ou não-funcionais. Este processo tem papel importante no desenvolvimento embrionário pré-implantacional, pois as células embrionárias estão sujeitas aos danos no DNA que podem ativar mecanismos de reparo de DNA ou induzir apoptose, que culmina com a ativação da enzima caspase-3 responsável pela clivagem de vários substratos celulares. Deste modo, o presente trabalho teve como objetivos determinar a presença da Caspase-3 ativa (+casp-3) e sua influência no desenvolvimento de embriões suínos no estágio de pré-implantação, bem como investigar a detecção de proteínas que atuam no mecanismo de lesão e reparo do DNA. Foram realizados 4 experimentos com oócitos imaturos de fêmeas pré-púberes, obtidos de ovários oriundos de abatedouro, maturados in vitro (MIV) por 44-46 horas. Oócitos em metáfase II (MII) foram ativados partenogeneticamente (AP) com ionomicina e cloreto de estrôncio e cultivados in vitro em PZM3 a 38ºC e 5% CO2 em ar e alta umidade. No primeiro experimento os embriões foram classificados em 4 grupos de acordo com o tempo de clivagem e o número de células: R4 - clivado às 24 horas e com &ge;4 células às 48 horas; R2 - clivado às 24 horas e com 2 ou 3 células às 48 horas; L4 - não clivado às 24 horas e com &ge;4 células às 48 horas; L2 - não clivado às 24 horas e com 2 ou 3 células às 48 horas. Os embriões foram então avaliados no D-6 do CIV para determinação do índice de desenvolvimento até o estágio de blastocisto. Os embriões do grupo R apresentaram maiores índices de blastocisto, R4 - 66,1 (174/263) e R2 - 59,6 (62/104) e maior número de núcleos por blastocisto, R4 - 40,1 e R2 - 37,8, quando comparados ao grupo L, L4 - 15,4 (6/39) e L2-16,8 (13/77); L4-18,5 e L2-18,3 (Qui-quadrado e Tukey-Kramer, respectivamente, P<0,05); entretanto, não houve diferença entre os grupos R4 e R2 e L4 e L2. Para o segundo experimento utilizou-se apenas embriões R e L, classificados às 24hs do início do CIV. Ambos os grupos (R e L) foram destinados à análise de imunocitoquímica para +casp-3 fixados nos D2, D4 e D6, sendo cada um destes dias considerado um sub-experimento e realizado em manipulações diferentes. Foi observada localização citoplasmática da +casp-3 do D2 ao D6 e nuclear a partir do D5 de cultivo. A quantificação relativa da +casp-3 nos grupos R e L de cultivo foi de 2,4 vs 1,4; 1,1 vs 1,0 e 1,1 vs 1,2 para o D2, D4 e D6, respectivamente. Para avaliar a influência da +casp-3 no desenvolvimento de embriões suínos foi realizado o terceiro experimento utilizando o inibidor de caspase z-DEVD-fmk (100uM) durante a MIV, no início (D0 ao D2) ou no final (D4 ao D6) do cultivo. Embriões produzidos sem inibidor foram usados como controle. A presença do inibidor durante a MIV e no final do cultivo não afetou os índices de blastocistos. No entanto, a presença do inibidor durante as primeiras 48 horas de cultivo resultou em maior índice de blastocisto do que o grupo controle, 55,1 (59/107) e 37,5 (39/104) (Qui-quadrado, P<0,05). O último experimento foi realizado para investigar a presença das proteínas de reparo de lesão de DNA, &gamma;H2AX, 53BP1, NSB1 e RAD52, em embriões desenvolvimento R e L. Não foi detectada 53BP1 em embriões suínos AP durante o desenvolvimento inicial. Embriões do grupo L apresentaram maior quantidade de &gamma;H2AX no D-5 quando comparado ao grupo R; entretanto, não houve diferença de marcação para NSB1 e RAD52. Estes dados indicam que o mecanismo de apoptose interfere no desenvolvimento embrionário inicial com efeito positivo do inibidor de caspase, na taxa de blastocisto de embriões suínos AP. Embriões de desenvolvimento L apresentaram um aumento da sinalização às injúrias do DNA, entretanto, a diferenças quanto ao potencial de reparo do DNA lesado em embriões de diferentes potenciais de desenvolvimentos, ainda precisam ser melhor investigadas. / Apoptosis is a highly conserved form of cell death that plays a major role in animal development and cellular homeostasis by acting as a quality control mechanism to remove cells that are damaged, nonfunctional, misplaced or supranumerary. This form of cell death plays a major role on preimplantation embryonic development since embryonic cells are often subject to DNA damage, triggering either DNA damage and repair mechanisms or apoptosis. Once initiated the apoptotic process leads to caspase activation and cleavage of cellular substrates. The aim of the present study was to quantify active Caspase-3 (+casp-3) and to determine the role of this pro-apoptotic enzyme on the development of preimplantation porcine embryos, as well as to investigate the presence and localization of DNA damage and repair proteins. Four experiments were conducted using slaughterhouse immature oocytes collected from pre-pubertal gilt ovaries and in vitro matured (IVM) for 44-46 h. Metaphase II (MII) oocytes were parthenogenetically activated (PA) using ionomycin and strontium chloride and cultured in PZM-3 at 38&ordm;C, 5% CO2 in air and high humidity. In the first study embryos were distributed into 4 groups according to cleavage time and cell number: R4 - cleaved at 24 h with &ge;4-cells at 48 h; R2 - cleaved at 24 h with 2-3 cells at 48 h; L4 - non-cleaved at 24 h with &ge;4-cells at 48 h; L2 - non-cleaved at 24 h with 2-3 cells at 48 h. Group R embryos showed higher blastocyst rates R4-66.1 (174/263) and R2-59.6 (62/104) and more nuclei per blastocyst, R4-40.1 and R2-38.9, when compared to group L L4-15.4 (6/39) and L2-16.8 (13/77); L4-18.5 and L2-18.3 (Chi-square and Tukey-Kramer, P<0.05); however, there were no differences between R4 and R2 or L4 and L2. The second experiment used only early-(R) and late-cleaved embryos (L), classified at 24 h of IVC, fixed at D-2, D-4 and D-6 and then stained for +casp-3 immunofluorescence. In this embryos fixed at D-2, D-4 and D-6 were considered as sub-experiments conducted in different replicates. Active Caspase-3 cytoplasmic signal was detected in cultured embryos from D2 to D6 and nuclear signal was detected from D5 to D6. The relative amount of immunofluorescence signal for +casp-3 for groups R and L at D2, D4 and D6 of culture was 2.4 vs. 1.4; 1.1 vs. 1.0 and 1.1 vs. 1.2, respectively. A third experiment was conducted to evaluate the role of +casp-3 on porcine preimplantation embryos. In this study the Caspase inhibitor Z-DEVD-fmk (100 uM) was supplemented during maturation of porcine oocytes or embryo culture (D0 to D2 or D4 to D6). Addition of the caspase inhibitor during IVM or D4 to D6 of culture did not affect blastocyst rate. However, caspase inhibition from D0 to D2 increased development of porcine embryos to the blastocyst stage [55.1 (59/107) and 37.5 (39/104) for control and Z-DEVD-fmk, respectively; Chi-square, P<0.05). The last experiment investigated the presence of DNA damage and repair proteins &gamma;H2AX, 52BP1, NSB1, and Rad52 in early- and late-cleaved embryos by immunofluorescence. There was no 53BP1 signal in PA porcine embryos at beginning of IVC. Late-cleaved embryos showed higher &gamma;H2AX signal than early-cleaved embryos; however, there was no difference between NSB1 and Rad52 staining between these embryos. In conclusion, apoptosis and DNA damage and repair mechanisms play a role on development of porcine embryos. Active caspase-3 is present in porcine embryos throughout the preimplantation period and inhibition of this enzyme at early stages of in vitro culture can increase blastocyst rate of PA embryos. Moreover, late-cleaved embryos carry higher DNA damage than early-cleaved embryos. Therefore, the relationship between DNA repair mechanism and developmental potential of porcine embryos need to be further investigated.

A apoptose é um processo fisiológico que desempenha papel crucial no desenvolvimento, remodelagem e senescência teciduais, inclusive placentários. A placenta, enquanto órgão temporário, atravessa todas estas fases em aproximadamente 10 meses, na espécie bubalina. O crescimento da placenta e a nutrição fetal requerem altas taxas de renovação e diferenciação celulares, e a maturação placentária está relacionada à redução das células epiteliais das criptas carunculares maternas. As modificações morfológicas celulares decorrentes do processo de apoptose são fruto de eventos bioquímicos complexos promovidos por uma família de cisteína-proteases, as caspases, especialmente as caspases executoras, dentre as quais se destaca a caspase-3, capaz de degradar várias proteínas citoplasmáticas e nucleares. Durante a apoptose, ocorre a clivagem caspase-mediada da citoqueratina 18, proteína dos filamentos intermediários do citoesqueleto, e com isso a formação de um neoepítopo específico. Por meio de métodos imunoistoquímicos pode-se detectar a presença tanto deste neoepítopo, quanto da forma ativa da caspase-3, o que demonstra que a célula entrou em estágio irreversível de morte celular. Morfologicamente, algumas das principais alterações celulares observadas são condensação da cromatina, a degradação e fragmentação do DNA, a formação de ?blebs? (pregas/bolhas) na membrana plasmática, além da fragmentação celular em corpúsculos apoptóticos, os quais podem ser identificados em cortes corados pelo método de rotina hematoxilina e eosina, utilizando-se microscópio de imunofluorescência, devido à eosinofluorescência das células em apoptose. Assim como a apoptose, a proliferação celular participa no equilíbrio homeostático tissular. Neste estudo, pretende-se avaliar a ocorrência de apoptose e proliferação celular em 42 placentônios de diferentes animais em diversas fases gestacionais (2-10 meses de gestação), em tecidos fixados em 4% paraformoldeído, incluídos em paraplast e submetidos à imunoistoquímica (anticorpo monoclonal M30 CytoDeath; Caspase-3 Clivada; PCNA - antígeno de marcação nuclear), sendo também avaliada a presença de corpúsculos apoptóticos eosinofluorescentes nas amostras. Utilizando-se M30 e caspase-3 clivada pudemos constatar a ocorrência de apoptose nos epitélios uterino e trofoblástico, em células gigantes placentárias e, ocasionalmente, em células mesenquimais fetais, do estroma uterino e endoteliais. Não houve diferenças significativas (p<0.05) entre os métodos adotados, mas sim entre os estágios gestacionais. Para o M30, houve um aumento significante da apoptose do primeiro grupo (2-4.5 meses) em relação ao quarto grupo (9-10 meses); no caso da Caspase-3 Clivada houve um aumento estatísticamente significante (p<0.05) entre os três primeiros grupos (2-4.5; 5-6.5; e 7-8.5 meses de gestação, respectivamente) de animais em relação ao quarto grupo. Para o PCNA, ocorreu uma diminuição no número de células em proliferação dos dois primeiros grupos de animais em relação ao quarto grupo (p<0.05). A presença de corpúsculos apoptóticos eosinofluorescentes pôde ser observada em todas as amostras. Nossos resultados sugerem haver uma relação entre a ocorrência de apoptose e a maturação, senescência e liberação placentárias em ruminantes. / Apoptosis is a physiological process that plays a crucial role in the development, remodeling and aging of the placenta. The placenta is a temporary organ that undergoes growth and development, followed by senescence and death in 10 months in the buffalo species. Placental growth and fetal nutrition require high rates of cellular turnover and differentiation, and placental maturation is correlated to the reduction of the number of epithelial cells of the maternal crypts. The morphological changes of the apoptotic cells are product of complex variety of biochemical events promoted by a family of cystein-proteases, the caspases, mainly the effectors caspases, and among them the caspase-3, which is able to degrade cytoplasmic and nuclear proteins. During apoptosis, the caspase-mediated cleavage of cytokeratin 18, which is one of the first intermediate filament proteins of the cytoskeleton, leads to the formation of a specific neo-epitope. It is possible to detect the presence of this neo-epitope by immunohistochemistry, as well as the active form of caspase-3, showing that the cell has entered an irreversible stage of cell death. Morphologically, some of the main observed cellular alterations are condensation of the chromatin, degradation and spalling of the DNA, blebbing of the cell membrane and the formation of apoptotic bodies. These bodies can be identified in slides stained by hematoxilin and eosin with a fluorescent microscope, due to the eosinofluorescent property of the apoptotic cells. Like apoptosis, cellular proliferation also contributes to the tissue homeostasis. In the present study, we intend to evaluate the occurrence of apoptosis and cellular proliferation in 42 placentomes, collected from different animals in several gestacional phases (2-10 months of gestation), fixed in 4% paraformaldehyde, processed for embedding in paraplast and cut in sections, through immunohistochemistry (monoclonal antibody M30 CytoDeath; Cleaved Caspase-3; PCNA - antigen of nuclear proliferation). The presence of eosinofluorescent apoptotic bodies were also studied in the samples. M30 and Cleaved Caspase-3 allowed to show the occurrence of apoptosis in the uterine and trophoblastic ephitelium, in placental giant cells and, occasionally, in the fetal mesenquimal cells, in the uterine stroma and endothelium cells. There were no significant differences (p<0.05) between the adopted methods, although there were differences between the gestational phases studied. For M30, there was an increase of the number of apoptotic cells (p<0.05) from the first group (2-4.5 months) in relation to the fourth group of animals (9-10 months); for the Cleaved Caspase-3 there was a statistical significant increase (p<0.05) between the first three groups of animals (2-4.5; 5-6.5; and 7-8.5 months of gestation, respectively) and the last one. In relation to the PCNA, a decrease in the number of proliferative cells occurred from the first two groups of animals to the fourth group (p<0.05). The occurrence of eosinofluorescent apoptotic bodies was observed in all the samples studied . Our data suggest a relationship between apoptosis and the maturation, senescence and release of the ruminant placenta.

RESUMO Este trabalho objetivou relacionar o grau de importância dos atributos de imagem à imagem percebida de três hipermercados situados na Grande São Paulo. Para isto, o trabalho desdobrou-se em duas fases. Na primeira, pesquisa a respeito das diversas dimensões de imagem até alcançar os conceitos de imagem de marketing, de loja, de usuário, corporativa, de marca, de classe de produto e de local de origem. A segunda parte tratou de pesquisa de campo de caráter exploratório sobre as primeiras quatro dimensões de imagem, entrevistando-se 300 consumidores: 200 com residência próxima a dois hipermercados e 100 com residência próxima a um terceiro hipermercado. A partir dos resultados obtidos verificou-se, no pronunciamento espontâneo com a utilização de questões abertas, que os atributos de imagem de marketing e de imagem de loja foram mais lembrados pelo consumidor que os atributos de imagem de usuário e corporativa, e que a primeira lembrança do consumidor quanto ao nome de hipermercado esteve intimamente relacionada ao fator localização. Verificou-se também que a imputação de elevada importância a um atributo não implica necessariamente na concordância de que o atributo esteja presente nos hipermercados pesquisados. De maneira geral, os atributos de imagem de marketing, imagem de loja e imagem corporativa foram considerados de elevada importância, enquanto que os atributos de imagem de usuário foram considerados de média importância. A elevada importância e a baixa ou média concordância podem indicar oportunidades de melhoria da imagem com conseqüente elevação da participação de mercado. / ABSTRACT The objective of this work was to relate the degree of importance of image attributes to perceived image of three hypermarkets located in Great São Paulo. For this, the work was unfolded in two phases. The first one consisted in researching image dimensions to reach the following concepts of image: marketing, store, user, corporate, brand, product class and place of origin. The second part was a field work of exploratory character on the first four image dimensions, being interviewed 300 consumers: 200 with close residence to two hypermarkets and 100 with close residence to a third hypermarket. Results obtained revealed that, in the spontaneous pronouncement with the use of open-ended questions, marketing and store image attributes were remembered more by consumer than user and corporate image attributes, and the top of mind was deeply related to location factor. It was also verified that the imputation of high importance to an attribute did not necessarily implicate in the agreement that attribute was in researched hypermarkets. In general, marketing, store and corporate image attributes were considered of high importance, while user image attributes were considered of medium importance. High importance and low or medium agreement might indicate opportunities of image improvement with consequent increase in market share.

Neste trabalho estamos apresentando o estudo fitoquímico das partes totais da espécie Trichogonia menthaefolia Gardner (Asteraceae-Eupatorieae). O material vegetal foi coletado em Furnas ? MG e a partir do pó seco foram preparados os extratos em diclorometano e em metanol, em seqüência. Do extrato diclorometânico foram isolados: o sesquiterpeno 6?- angeloiloxi-eudesm-4(15)-eno, o triterpeno 3?-hidroxi-olean-12-eno, os triterpenos lupeol, taraxasterol, pseudotaraxasterol e 3?-hidroxi-olean-12-eno (identificados em mistura), os esteróides ?-sitosterol, estigmasterol, campesterol, estimast-7-en-3?-ol e espinasterol (identificados em mistura) e o flavonóide ramnocitrina. Do extrato metanólico foi isolado o flavonóide ramnocitrina 3-O-?-galactopiranosídeo. Estas substâncias, após isolamento e purificação por métodos cromatográficos, foram identificadas com o auxílio de várias técnicas espectroscópicas como: EM, EM-EM, RMN de 1H, 13C (PND; DEPT 135º) e a técnica bidimensional HMQC. Na identificação das misturas de triterpenos e esteróides a cromatografia de fase gasosa também foi utilizada.Neste trabalho estamos apresentando o estudo fitoquímico das partes totais da espécie Trichogonia menthaefolia Gardner (Asteraceae-Eupatorieae). O material vegetal foi coletado em Furnas ? MG e a partir do pó seco foram preparados os extratos em diclorometano e em metanol, em seqüência. Do extrato diclorometânico foram isolados: o sesquiterpeno 6?- angeloiloxi-eudesm-4(15)-eno, o triterpeno 3?-hidroxi-olean-12-eno, os triterpenos lupeol, taraxasterol, pseudotaraxasterol e 3?-hidroxi-olean-12-eno (identificados em mistura), os esteróides ?-sitosterol, estigmasterol, campesterol, estimast-7-en-3?-ol e espinasterol (identificados em mistura) e o flavonóide ramnocitrina. Do extrato metanólico foi isolado o flavonóide ramnocitrina 3-O-?-galactopiranosídeo. Estas substâncias, após isolamento e purificação por métodos cromatográficos, foram identificadas com o auxílio de várias técnicas espectroscópicas como: EM, EM-EM, RMN de 1H, 13C (PND; DEPT 135º) e a técnica bidimensional HMQC. Na identificação das misturas de triterpenos e esteróides a cromatografia de fase gasosa também foi utilizada. / In this study we are presenting the results of the phytochemical investigation of the Trichogonia menthaefoli Gardner (Asteraceae-Eupatorieae). This specie was collected in Furnas ? MG. Dicholorometanic and methanolic extracts were prepared from the dried powder plant material. These extracts were fractioned through chromatoghraphic methods. The dichloromethanic extract furnished the: sesquiterpene 6?-angeloyloxy-eudesm-4(15)-ene; triterpenes: 3?-hydroxy-olean-12-ene, lupeol, taraxasterol, pseudo-taraxasterol and 3?- hydroxy-olean-12-ene (identified in mixture) and the steroids: sitosterol, stigmasterol, stigmast-7-en-3?-ol, spinasterol and campesterol (identified in mixture) and the flavonóide rhamnocitrin. The methanolic extract afforded the flavonoid rhamnocitrin 3-O-?- galactopyranoside. Compound identification was performed by using a variety of spectroscopic methods, such as: MS, MS-MS, 1H and 13C NMR and HMQC bidimensional technique. The identification of mixtures (triterpenes and steroids) was also performed by gas chromatography in addition to other spectroscopic methods.

Made available in DSpace on 2016-08-19T18:16:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Ana Gregoria.pdf: 3461170 bytes, checksum: 243ffe696e34289efe111c11281cd8e7 (MD5) Previous issue date: 2012-03-16 / Maturity onset diabetes of young 3 (MODY 3) is the most common monogenic autosomal dominant diabetes caused by mutations in the HNF 1A and characterized by a defect in insulin secretion, decreased renal threshold for glucose and sensitivity to sulfonureia. It is often misdiagnosed as DM 1 or DM 2. By this evidence, this study aims to investigate the HNF 1A gene mutations in patients treated at the outpatient clinic of the University Hospital of DM1 UFMA Sao Luis - MA (HUUFMA), characterize epidemiologically the study population, and identify and describe the mutations found in the gene, correlating them with the chronic complications of diabetes that these patients may have. We evaluated by questionnaire 60 patients with a previous diagnosis of DM 1. These, 20 patients were selected for their clinical features suggestive of MODY for molecular analysis of the HNF 1A gene by sequencing technique. Eleven patients were females and nine males with a mean age of 24.35 ± 6.91 years. Twenty five per cent had retinopathy, 55 %, nephropathy, neuropathy 35 % and 15 % ischemic heart disease. Among the gene variations were found 53 mutations, of these, a deletion in the promoter. Of the 52 variations that occurred in exons, 15 were silent. Among the non- silent, there were 29 missense mutations, seven deletions and one nonsense. Of these, 11 mutations were found in the A isoform, two in the AB isoform and 24 in the ABC isoform. Regarding the fields of protein, it was found: one missense mutation in the dimerization domain, nine mutations in the DNA-binding domain and 25 mutations in the transactivation domain. By correlating the types of mutations, their locations in their respective gene or protein domains with typical chronic complications of diabetes, there was no relationship. However, it was observed that patients with frameshift mutations associated with missense mutations in the transactivation domain had a worse metabolic control than patients with missense mutations in the same domain. With these results we conclude that changes in gene HNF 1A are very common among diabetic patients with a typical characteristics of MODY in this sample, suggesting that the MODY 3 can be cause of DM in many of these patients and the type of mutation and its location in the field protein may be associated with metabolic control in these patients. / Maturity onset diabetes of young 3 (MODY 3)é o mais frequente diabetes mellitus (DM) monogênico autossômico dominante causado por mutações no gene HNF 1A e caracterizado por defeito na secreção de insulina, diminuição no limiar renal de glicose e sensibilidade a sulfonureia, na maioria das vezes. Com frequência é diagnosticado erroneamente como DM 1 ou DM 2. Frente a esta evidência este trabalho tem como objetivo a investigação das mutações do gene HNF 1A em pacientes atendidos no ambulatório de DM1 do Hospital Universitário da UFMA São Luís MA (HUUFMA), assim como caracterizar epidemiologicamente a população de estudo, além de identificar e descrever as mutações encontradas no gene, correlacionando-as com as complicações crônicas próprias do DM que estes pacientes possam apresentar. Foram avaliados por meio de questionário 60 pacientes com diagnóstico prévio de DM 1, destes, 20 pacientes foram selecionados por suas características clínicas sugestivas de MODY para análise molecular do gene HNF 1A pela técnica de sequenciamento. Onze pacientes foram do sexo feminino e nove do sexo masculino com uma média de idade de 24,35 ± 6,91 anos. Destes, 25% apresentavam retinopatia, 55%, nefropatia, 35% neuropatia e 15% cardiopatia isquêmica. Dentre as variações gênicas, foram encontradas 53 mutações, destas, uma deleção no promotor. Das 52 variações que ocorreram nos éxons, 15 eram silenciosas. Entre as não-silenciosas, observaram-se 29 missense, sete deleções e uma nonsense. Destas, 11 mutações encontraram-se na isoforma A, duas na isoforma AB e 24 na isoforma ABC. Em relação aos domínios da proteína, verificou-se: uma mutação missense no domínio de dimerização, nove mutações no domínio de ligação do DNA e 25 mutações no domínio de transativação. Ao se correlacionar os tipos de mutações, suas localizações no gene ou em seus respectivos domínios de proteína com as complicações crônicas típicas do DM, não se observou qualquer relação. Contudo, foi observado que pacientes apresentando associação de mutações frameshift com missense no domínio de transativação apresentavam um pior controle metabólico que pacientes com mutações missense no mesmo domínio. Com estes resultados concluímos que alterações no gene HNF 1A são muito frequentes entre os paciente com DM 1 com características típicas de MODY, sugerindo que o MODY 3 possa ser causa do DM de muitos destes pacientes e que o tipo de mutação e sua localização no domínio de proteína pode ter associação com o controle metabólico destes pacientes.

Por constatar-se uma severa dificuldade na produção textual por parte de futuros alfabetizadores, graduandos em Pedagogia, buscou-se balizas na psicanálise, sobretudo nos estudos da Angústia empreendidos por Freud e Lacan, que permitissem desenvolver uma pesquisa a respeito do que gera tal dificuldade e que guiassem uma análise teórica sobre o envolvimento subjetivo que resulta na marca diferencial entre determinados tipos de escrita. Sustenta-se a hipótese de que há um receio por parte do sujeito em desvelar-se através do suporte (escrita textual) e que a inibição decorra disto. Questionou-se também se determinados textos, que sugerem ausência do sujeito, são resultado de uma leitura assídua que, ao invés de gerar escrita sublimatória, funciona apenas para importar discurso alheio, poupando as próprias formas de o sujeito ver o mundo e as diferenças sexuais. Discutiu-se o formato operacional vigente no trabalho com a literatura, dentro das instituições escolares, e a possibilidade de uma aproximação com as obras consagradas que trafegue por uma via diversa daquela cognitiva. Propôs-se que uma abordagem que autorize o subjetivo, resulta numa particular transferência e sublimação de forma que a leitura se configura em autoria podendo fazer, por acréscimo, efeito de relançamento na escritura. / For evidencing a severe difficulty in the literal production by the future teacher of children, graduated in Pedagogy, searched beacons in the psychoanalysis, over all in the studies of the Anguish undertaken by Freud and Lacan, that allowed to develop a research regarding what it generates such difficulty and that they guided a theoretical analysis on the subjective envolvement that results in the distinguishing mark between determined types of writing. It is supported hypothesis of that has a distrust on the part of the subject in reveal itself through the support (written literal) and that the inhibition elapses of this. It was also questioned if definitive texts, that suggest absence of the subject, are resulted of a frequent reading that, instead of generating sublimation written, it only functions to import other people\'s speech, saving the proper forms of the subject to see the world and the sexual differences. The effective operational format in the work with literature was discussed, inside of the school institutions, and the possibility of an approach with the consecrated workmanships that passes through a diverse way of that cognitive. It was considered that a boarding that authorizes the subjective, results in a particular transference and subliming so that the reading configures itself in authorship being able to make, for addition, effect of relaunching in the writing.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-07T18:47:53Z No. of bitstreams: 1 Aline Alves Courtes.pdf: 830792 bytes, checksum: f4e235b098c3ac508c33359985b6608b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-07T18:47:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aline Alves Courtes.pdf: 830792 bytes, checksum: f4e235b098c3ac508c33359985b6608b (MD5) Previous issue date: 2014-08-25 / A doença de Huntington (DH) é uma desordem neurodegenerativa, hereditária autossômica dominante, caracterizada por alterações motoras progressivas, distúrbios emocionais, movimentos involuntários anormais e demência, os quais podem ser atribuídos à morte de neurônios estriatais e corticais. Apesar de ser uma etiologia ainda não totalmente conhecida, tem-se sugerido que o estresse oxidativo contribua para o desenvolvimento dessa condição. Nesse contexto, o ácido 3- nitropropiônico (3-NP), um inibidor da enzima mitocondrial succinato desidrogenase (SDH), têm sido utilizado em modelos animais por desenvolver as características fenotípicas observadas na DH. De um modo geral, o efeito do 3-NP está relacionado a capacidade do mesmo em causar disfunção mitocondrial e gerar espécies reativas. Nesse cenário, a pesquisa por terapias em que se busque neutralizar os efeitos deletérios das espécies reativas são de grande importância. A Luehea divaricata (L. divaricata), popularmente conhecida no Brasil como açoita cavalo contêm numerosos polifenóis, os quais poderiam atuar como agentes neuroprotetores em estudos in vitro e in vivo de doenças neurodegenerativas. Diante do exposto, buscamos nesse estudo testar a hipótese que o extrato aquoso de L. divaricata pode exercer efeito antioxidante e neuroprotetor frente às alterações comportamentais e oxidativas induzidas pelo 3-NP em ratos. Nossos dados demonstraram que o 3-NP induziu os sintomas da DH, uma vez que provocou mudanças de comportamento, evidenciados pela diminuição da atividade locomotora no Campo Aberto e Rota Rod; bem como alterações oxidativas evidenciadas pelo aumento dos níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS) e peroxidação lipídica; redução nos níveis de glutationa reduzida e na atividade da acetilcolinesterase. O extrato aquoso de L. divaricata preveniu as alterações comportamentais e oxidativas induzidas pelo tratamento com 3-NP, sugerindo possível efeito neuroprotetor da L. divaricata contra a toxicidade do 3-NP, o qual pode ser devido a suas propriedades antioxidantes. Consequentemente, a planta poderia ser utilizada como um agente terapêutico para a prevenção dos sintomas da DH. / Huntington's disease (HD) is a neurodegenerative disorder, autosomal dominant, characterized by progressive motor disorders, emotional disturbances, abnormal involuntary movements and dementia, which can be attributed to the death of striatal and cortical neurons. Although a etiology is not fully known, it has been suggested that oxidative stress contributes to the development of this condition. In this context, the 3-nitropropionic acid (3-NP), an inhibitor of the mitochondrial enzyme succinate dehydrogenase (SDH), have been used in animal models to develop the phenotypic characteristics observed in HD. In general, the effect of 3-NP associated with the same capacity to cause mitochondrial dysfunction and generating reactive species. In this scenario, the search for treatments that seek to neutralize the deleterious effects of reactive species are of great importance. Luehea divaricata (L. divaricata), popularly known in Brazil as “açoita cavalo” contain numerous polyphenols, which could act as neuroprotective agents in in vitro and in vivo neurodegenerative diseases. Given the above, this study sought to test the hypothesis that the aqueous extract of L. divaricata may exert antioxidant and neuroprotective effect front and behavioral changes induced by oxidative 3-NP in rats. These data demonstrate that the 3-NP induced the symptoms of HD, because changes in behavior caused evidenced by the decrease in locomotor activity in the Open Field and Rota Rod; and oxidative changes evidenced by increased levels of reactive oxygen species (ROS) and lipid peroxidation; reduction in the levels of reduced glutathione and acetylcholinesterase activity. The aqueous extract of L. divaricata was able to prevent the oxidative and behavioral changes induced by 3-NP treatment, suggesting the possible neuroprotective effect against 3-NP toxicity, which may be due to its antioxidant properties. Consequently, this plant could be used as a potential therapeutic for the prevention of HD-like simptoms.

Resumo Em diversas formulações industriais, encontram-se, facilmente, vários exemplos da utilização de biopolímeros derivados de celulose em conjunto com tensoativos. Entretanto, na literatura, há divergências se ocorre realmente uma interação entre um polímero não iônico, como os derivados aquo-solúveis de celulose, em conjunto com tensoativos catiônicos. Desta forma, neste projeto de Mestrado, foram investigadas as interações entre três derivados de celulose (2-hidroxietil celulose, 2-HEC; hidroxipropil celulose, HPC e hidroximetilpropil celulose, HMPC) e três tensoativos catiônicos (cloreto de benzil-hexadecildimetilamônio, CBz; cloreto de fenil-hexadecildimetilamônio, Fenil e cloreto de 2-feniletil hexadecildimetilamônio, 2-Feniletil) obtendo-se informações sobre a estrutura dos agregados formados por este sistema através de medidas de condutividade, fluorescência no estado estacionário e viscosidade. Estas técnicas forneceram os parâmetros de concentração de agregação crítica (cac), concentração micelar crítica (cmc), grau de dissociação micelar e viscosidade das soluções. Em uma segunda etapa, foi investigada a variação da cmc do tensoativo zwitteriônico, coco amido propil betaína (CAPB), em soluções aquosas com diferentes pHs, visando futuros estudos de interação deste compostos com os biopolímeros derivados ou não de celulose. / There are many industrial formulations that are consisted of a biopolymer, such as cellulose derivatives, and surfactants. However, in literature, there are some divergences if there is a cooperative interaction between non-ionic polymers, and cationic surfactants. For this reason, in this project, the interactions between three cellulose derivatives (2- hydroxyethyl cellulose, 2-HEC, hydroxypropyl cellulose, HPC, and hydroxymethylpropyl cellulose, HPMC), and cationic surfactants (benzyl hexadecyldimethylammonium chloride, CBz, phenylhexadecyldimethylammonium chloride, Fenil, and 2-phenylethyl hexadecyl dimethylammonium chloride, 2-Feniletil) were studied through conductivity, steady-state fluorescence and viscosity measurements. The critical aggregation concentration (cac), critical micelle concentration (cmc), micelle dissociation degree, and viscosity were determined for each polymer surfactant system. In addition, the cmc of a zwitterionic surfactant, coco amido propyl betaine (CAPB), was measured in aqueous solutions of different pHs. This last experiment was performed as a preliminary essay to study the interaction of zwitterionic surfactant with several types of biopolymers.