Exhaled breath is a rich and complex matrix containing many hundreds of compounds. Every breath offers the potential of a non-invasive measurement of the biochemical processes occurring in the human body and it is this notion that has led to the application of breath analysis for the detection of disease. With the majority of research in the field being focused on the detection of biomarkers, little has been presented on how the seemingly homeostatic matrix of breath varies during the course of normal life events. The research in this thesis describes how a subject's emotional state, physical state, and daily activities can alter the composition of exhaled breath.

[pt] Este trabalho consistiu na implementação, e consequente validação, de metodologia para determinação de bifenilas policloradas (PCBs) em amostras de água e material particulado por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas em tandem (GC-MS/MS). O método de análise de água superficial foi desenvolvido para a determinação simultânea de 41 PCBs; utilizando a Extração Acelerada por Solvente (ASE) para o material particulado em suspensão e a Extração em Fase Sólida (SPE) para a fração dissolvida. A quantificação foi realizada no modo de Monitoramento Seletivo de Reação (SRM), com monitoramento de dois padrões de fragmentação m/z precursor-produto. A linearidade das curvas analíticas foi confirmada pelo valor do coeficiente de determinação (R2), além do comportamento aleatório do gráfico de resíduos e pelo teste F na análise da variância (ANOVA) da regressão. A homocedasticidade dos dados foi confirmada pelo teste de Cochran. O Limite de Detecção (LD) para cada um dos dois métodos de extração utilizados variou de 0,06 a 0,50 ng L(-1) para o SPE e 0,01 a 0,12 ng L(-1) para o ASE. A repetibilidade, expressa através dos coeficientes de variação (CV), apresentou valores inferiores a 20 por cento. A recuperação média dos analitos variou de 60 por cento a 118 por cento quando da extração em fase sólida (SPE) e de 65 a 106 por cento para o material particulado suspenso. A seletividade do método foi avaliada pelo Teste F (Snedecor) de homogeneidade de variâncias e pelo Teste t (Student) de comparação de médias. Possíveis perdas durante o processo foram monitoradas pelo uso do padrão surrogate e encontraram-se em limites aceitáveis. O método validado foi aplicado para a análise da água do Canal do Mangue, região central do Rio de Janeiro, e o intervalo encontrado para o somatório de PCBs totais variou de 2,17 ng L(-1) a 5,29 ng L(-1). / [en] The aim of this work consists of the implementation and validation of a methodology for determination of polychlorinated biphenyls (PCBs) in water samples and particulate matter by gas chromatography coupled to tandem mass spectrometry (GC-MS/MS). The surface water analysis method was developed for the simultaneous determination of 41 PCBs; using the Solvent Accelerated Extraction (ASE) for the suspended particulate matter and the Solid Phase Extraction (SPE) for the dissolved fraction. Quantification was performed in Selective Reaction Monitoring (SRM) mode, with monitoring of two m/z precursor-product fragmentation patterns. The linearity of the analytical curves was confirmed by the coefficient of determination (R2), the random behavior of the residual plots and by the F test in the analysis of variance (ANOVA) for the regression. The homoscedasticity of the data was confirmed by the Cochran test. The limit of detection (LD) for each one of the two extraction methods used vary in a range of 0.06 to 0.50 ng L(-1) for the SPE and 0.01 to 0.12 ng L(-1) for the ASE. Regarding the repeatability studies, the coefficients of variation (CV) found were less than 20 per cent. The average recovery of the analytes ranged from 60 per cent to 118 per cent on Solid Phase Extraction (SPE) and from 65 to 106 per cent for the suspended particulate matter. The Method selectivity was evaluated by the F (Snedecor) test of homogeneity of variances and by the t-Test (Student) of means comparison. Possible losses during the process were monitored by using surrogate standards that were within acceptable limits. The validated method was further applied to analyze the surface water of Mangue Canal, central region of Rio de Janeiro, and the sum of total PCBs ranged from 2.17 ng L(-1) to 5.29 ng L(-1).

The regulatory agencies are becoming increasingly stringent as regards the quality of the food. Thus, the development of analytical methods that help monitoring of pesticide residues, and it is essential in routine laboratories. This study aimed at the development and validation of an analytical method for sample preparation and determination of multiclass pesticide residues in grape variety Isabel. The sample preparation was based on the QuEChERS procedure with determination by gas chromatography coupled to mass spectrometry. Several sorbent materials were tested in the cleaning step of the sample preparation, such as PSA, C18, Florisil, alumina and active carbon, with the sorbent with the highest efficiency in cleaning the extract was the Florisil. The method was defined as follows: 10 g of the sample, peel, pulp and seeds, processed in a blender was added 10 mL of acetonitrile with 1% acetic acid, 4 g of magnesium sulfate and 1 g of sodium acetate. This mixture was stirred manually for 1 minute, centrifuged at 3,000 rpm for 20 minutes. 2 mL of the supernatant was collected and mixed with 300 mg of magnesium sulfate and 400 mg of florisil, which were agitated and centrifuged again. 1 mL of the supernatant was pipetted and brought to a concentrator and the volume reduced to 200l. The efficiency of the method was proven through validation, with detection limits below the maximum residue limits allowed by regulators and recoveries between 70 and 120% with RSD lower than 20% for most pesticides studied, except for trifloxystrobin, tebuconazole and tetradifon. Using the technique matrix matched is extremely important, since it was observed that there was a large positive influence on the performance of the array analysis by increasing the signal chromatographic all analytes studied. / Os órgãos regulamentadores estão se tornando cada vez mais rigorosos no que se refere à qualidade dos alimentos. Assim, o desenvolvimento de métodos analíticos, que auxiliem monitoramento de resíduos de agrotóxicos, e torna-se fundamental em laboratórios de rotina. Este estudo objetivou o desenvolvimento e validação de um método analítico para o preparo da amostra e determinação multiclasse de resíduos de agrotóxicos em uva da variedade Isabel. O preparo de amostra baseou-se no procedimento QuEChERS com determinação por Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas. Diversos materiais sorventes foram testados na etapa de limpeza do preparo da amostra, como PSA, C18, Florisil, Carvão ativo e alumina, sendo que o sorvente que apresentou maior eficiência na limpeza do extrato foi o Florisil. O método ficou assim definido: a 10 g da amostra, casca, polpa e sementes, processada em liquidificador foram adicionados 10 mL de acetonitrila com 1% de ácido acético, 4 g de sulfato de magnésio e 1 g de acetato de sódio. Essa mistura foi agitada manualmente por 1 minuto, centrifugada a 3.000 rpm por 20 minutos. 2 mL do sobrenadante foram coletados e misturados com 300 mg de sulfato de magnésio e 400 mg de Florisil, que foram novamente agitados e centrifugados. 1 mL do sobrenadante foi pipetado e levado a um concentrador e o volume reduzido a 200 μL. A eficiência do método foi comprovada através da validação, apresentando limites de detecção abaixo dos Limites Máximos de Resíduos permitidos pelos órgãos reguladores e recuperações entre 70 e 120% com RSD menor que 20%, para a maioria dos agrotóxicos estudados, com exceção para trifloxistrobina, tebuconazol e tetradifona. A utilização da técnica matrix matched é de extrema importância, uma vez que foi observado que houve grande influência positiva da matriz na realização da análise, aumentando o sinal cromatográfico de todos os analitos estudados.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Lettuce (Lactuca sativa) has a great, being mainly consumed in natura. In order to ensure greater productivity, pesticides from different chemical classes have been used to improve its production. Although these pesticides bring benefits, increasing agricultural production, their toxicity should be considered. As for this reasor it is necessary to have effective analytical methods to verify the presence of pesticide residues in lettuce. The literature presents Few methods are present in the liberahone for determining pesticides in lettuce. Thus, this paper aims to develop a new method based on MSPD and GC-MS. Techiniques to determine residues of malathion, parathion methyl, pirimicarb, procymidone , α-endosulfan and β-endosulfan in lettuce. The method dispersion matrix solid phase was developed and tested for different types and amounts of sorbents, alumina, Florisil, silica, and organic solvents (20 and 30 mL) and cyclohexane, dichloromethane, ethyl acetate, n-hexane and acetonitrile at different ratios (1:1, 7:3, 8:2, 9:1, 85:15, v/v). The best recoveries for the pesticides malathion, parathion methyl, pirimicarb, procymidone, α-endosulfan and β-endosulfan were obtained through the system silica / alumina, using a volume of 30 mL of acetonitrile with average recovery ranging from 50 to 120% and coefficients of variation varying from 0,6 to 8.0% for concentration levels of 0.1, 0.25, 0.5, 1.0, 1.5 and 2.0 μg g-1 The limits of detection and quantification for the method were 0.08 and 0.11 μg g-1, respectively. / A alface (Lactuca sativa L) é a hortaliça folhosa de grande importância econômica, sendo consumida principalmente na forma in natura. Visando assegurar maior produtividade, pesticidas de diferentes classes químicas têm sido empregados nas etapas de produção de alface. Embora estes pesticidas tragam benefícios no aumento da produção agrícola, sua toxicidade deve ser considerada, e para isso torna-se necessário dispor de métodos analíticos eficientes para verificar a presença de resíduos de pesticidas na produção. A literatura apresenta poucos métodos para determinar pesticidas em alface. Em vista disto, este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de método baseado nas técnicas de dispersão da matriz em fase sólida e cromatografia a gás acoplada à espectrometria de massas (GC/MS) para determinar resíduos dos pesticidas malationa, parationa metílica, pirimicarbe, procimidona, α-endossulfam e β-endossulfam em alface. O método por dispersão da matriz em fase sólida foi desenvolvido, testando-se diferentes tipos e quantidades de sorventes, alumina, Florisil, sílica, e solventes orgânicos (20 e 30 mL) como ciclohexano, diclorometano, acetato de etila, n-hexano e acetonitrila em diferentes proporções (1:1, 7:3, 8:2, 9:1, 85:15, v/v). As melhores recuperações para os pesticidas malationa, parationa metílica, pirimicarbe, procimidona, α-endossulfam e β-endossulfam em análises por GC/MS foram obtidas por meio do sistema sílica/alumina, utilizando um volume de 30mL do solvente acetonitrila com valores médios de recuperação variando de 50 a 120% e coeficientes de variação na faixa de 0,6 a 8,0% para os níveis de concentração de 0,1; 0,25; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0 μg g-1. Os limites de detecção ficaram na faixa de 0,01 e 0,03 μg g-1. E os limites de quantificação foram de 0,08 e 0,11 μg g-1, respectivamente.

Honey, main beekeping product, used as food, sweetneer and to terapic purpose, has the image of being natural, healthy and clean. However, today this product is produced in a poluted environmental by different sources of contamination such as pesticides that diffuse around the world and can reach the population by the comsumption of contaminated food, as honey. The matrix solid phase dispersion (MSPD) combined to the modern chromatographic techniques such as gas chromatography (GC) is an alternative to avoid the different inconvenient found in the classical methods extraction. The present study develops a procedure for extraction of pirimicarb, malathion, bifenthrin and procymidone residue pesticides in honey Apis mellifera bee by MSPD and GC analysis with mass spectrometry detector (MS). In order to obtain a more adequate method for extraction their pesticides, assays with Florisil, silica, alumina and C18 were carried out twice to the appropriate sorvent choic as such as amounts and kinds of solvents by elution such as dichloromethane, acetonitrile, ethyl acetate and n-hexane. The efficiency of the method was determined in terms of mean percentual recoveries of the pesticides by assays with sorvent silica and elution 10 mL of the acetonitrile in three fortification levels. Recovery results for method were between 45-56%, 46-64%, 49-64%, 34-43% for the pesticides pirimicarb, malathion, procymidone and bifenthrin, respectively, witch relative standard deviations lower than 8,5%. Limits of detection and quantification for the analytes investigated ranged from 0,02 0,088 μgmL-1 and 0,07 0,282 μgmL-1, respectively. / O mel, principal produto da atividade apícola, utilizado como alimento, adoçante e para fins terapêuticos (apiterapia), tem a imagem de ser natural, saudável e limpo. Entretanto, esse produto é produzido atualmente em ambientes poluídos por diversas fontes de contaminação, tais como pesticidas que se difundem pelo planeta e podem atingir a população pela ingestão de alimentos contaminados, como o mel. A dispersão da matriz em fase sólida (MSPD) combinada às técnicas cromatográficas modernas como cromatografia a gás (GC) e cromatografia a líquido (HPLC) é uma alternativa para evitar os diversos inconvenientes encontrados nos métodos clássicos de extração. Este trabalho desenvolve um método para extração de resíduos dos pesticidas pirimicarbe, malationa, bifentrina e procimidona em mel de abelha Apis mellifera por MSPD e análise por GC com detecção por espectrometria de massas (MS) bem como dos pesticidas coumafós, flumetralina, fluvalinato e piraclostrobina por HPLC-UV/DAD. Ensaios com Florisil, sílica gel, alumina e C18 foram realizados em duplicata para escolha do adsorvente apropriado bem como quantidades e tipos diversos de solventes para eluição tais como diclorometano, acetonitrila, acetato, hexano e mistura deles. A eficiência do método foi determinada em termos de recuperação percentual dos analitos de ensaios com sílica como sorvente e eluição com 10 mL de acetonitrila em três níveis de fortificação diferentes. Os resultados obtidos levam a valores de recuperação entre 45-56%, 46-64%, 49-64%, 34-43% para os pesticidas pirimicarbe, malationa, procimidona e bifentrina respectivamente, com desvios padrão relativos menores que 8,5%. Os limites de detecção e quantificação para os analitos em investigação foram entre 0,02-0,088 μg mL-1 e 0,07-0,282 μg mL-1, respectivamente.

The aim of the work was to develop method for determining pyrimethanil, pirimicarb and buprofezin residues in environmental water using solid-phase microextraction and gas chromatography-mass spectrometry. To perform the SPME, a 100 μm polydimethylsiloxane (PDMS) fiber was used for the extraction of the pesticides from water samples. Using univariate optimization process, the main factors affecting the SPME process, such as saline concentration (0 %), stirring rate (900 rpm), pH effect (6.0) and desorption time (7 min.) were studied. The method was validated for the pesticides and the intermediate precision (< 15 %) was shown to be satisfactory. The detection and quantification limits ranged from 0.058 to 0.231 ng L−1. The linearity was studied in the range of 0.1 - 4.0 μg L−1 obtaining good correlation coefficients (> 0.991). The results obtained in the validation of SPME-GC-MS for the determination of 3 pesticides in water showed that the method is fast, simple, sensitive and very useful in routine laboratories. The developed method has been used to monitor pyrimethanil, pirimicarb and buprofezin contaminations in superficial water samples collected around irrigated areas of Platô de Neópolis (Neópolis/SE) and Senador Nilo Coelho (Petrolina/PE). The concentrations of buprofezin and pirimicarb ranged from undetectable to 0.013 μg L−1 and 0.20 to 1.0 μg L−1, respectively. Pyrimethanil was not observed in the samples. The concentrations of the pesticides in the real samples were in accordance with European legislation. / O objetivo deste trabalho foi desenvolver um método analítico por microextração em fase sólida (SPME) para a determinação de resíduos dos pesticidas pirimetanil, pirimicarbe e buprofezina em matrizes aquosas ambientais por cromatografia gasosa com detector de espectrometria de massas (GC-MS). Através do planejamento univariado, o procedimento de SPME foi otimizado para possibilitar a extração dos analitos da matriz e os valores ótimos dos parâmetros que influenciam a extração por SPME foram definidos: tipo de fibra (PDMS 100 μm), concentração salina na amostra (0%), velocidade de agitação da amostra (900 rpm), pH = 6, tempo de extração (30 min.) e tempo de dessorção (7 min.). O método foi validado apresentando resultados satisfatórios de precisão intermediária (repetitividade) com R.S.D < 15% para os pesticidas. Os limites de detecção e quantificação variaram de 0,042 e 0,135 μg.L-1 (buprofezina); 0,048 e 0,150 μg.L-1 (pirimetanil) e 0,446 e 1,361 μg.L-1 (pirimicarbe) respectivamente. A curva analítica foi feita utilizando a matriz contendo os pesticidas, de 0,1 a 4,0 μg.L-1 com coeficientes de determinação (R2) > 0,991. Amostras de águas superficiais do Platô de Neópolis-SE e Distrito de irrigação Senador Nilo Coelho em Petrolina-PE, área de irrigação para diversas culturas dos referidos estados, foram analisadas e apresentaram os seguintes resultados para buprofezina < LQ ; 0,14 μg L-1 e < LQ para pirimicarbe, único pesticida não detectado nas amostras foi pirimetanil. O método analítico desenvolvido para extração de pirimimetanil, pirimicarbe e buprofezina em amostras de águas superficiais por DI-SPME/GCMS mostrou-se rápido, sensível, robusto, seletivo, eficiente e com ausência de solventes orgânicos. As concentrações para a buprofezina e pirimicarbe das amostras reais estavam dentro do estabelecido pela legislação européia.

Este trabalho apresenta o desenvolvimento e aplicação de técnicas miniaturizadas de preparo de amostras para análises ambientais via GC-MS. Dentre elas aplicou-se a técnica de Extração em Fase Sólida (SPE) na análise do regulador de crescimento de plantas, paclobutrazol (PBZ), em amostras de solo. Um método foi desenvolvido, otimizado e validado para o emprego da técnica acoplada à cromatografia gasosa e espectrometria de massas (GC-MS) na análise de PBZ em solo. Foram desenvolvidas também barras in-house, para Extração por Sorção em Barras de Agitação (SBSE), preparadas com PDMS, otimizadas, validadas e aplicadas na extração de pesticidas organoclorados no modo headspace acoplado a GC-MS. Adicionalmente, novos recobrimentos para SBSE a partir da modificação do PDMS comumente utilizado visando mudanças nas características de polaridade das fases sortivas foram desenvolvidos. Seguindo a tendência de miniaturização desenvolveu-se um novo sistema nomeado de Extração Sortiva Refrigerada (RSE), a qual considera a teoria de equilíbrio da HSSE e da SPME refrigerada. A técnica foi otimizada e aplicada em amostras de água do rio de Atibaia, coletadas na região de Paulínia-SP. / This study describes the development and application of different miniaturized sample preparation techniques for environmental analysis via gas chromatography and mass spectrometry (GC-MS). Among those techniques, the Solid Phase Extraction (SPE) was applied to the analysis of plant growth regulator, called paclobutrazol (PBZ), in soil samples. A method was developed, optimized and validated for the application of the technique coupled to GC-MS for the analysis of PBZ in soil. In-house Stir Bar Sorptive Extraction (SBSE) was also developed, optimized, validated and applied to organochlorine pesticides extraction in water samples in headspace mode followed by GC-MS. Additionally, new coatings for SBSE based on the PDMS modification commonly used to change the polarity characteristics of the sorptive phases were developed. Following the miniaturization trend, a new system called Refrigerated Sorptive Extraction (RSE) was successfully developed. This system was built with similar refrigerated SPME and HSSE equilibrium. Such technique was optimized and applied on water samples from Atibaia´s river, collected in the region of Paulínia-SP.

A monitorização terapêutica permite a individualização do regime de dosagem, assegurando a eficácia clínica e minimizando os efeitos adversos dos fármacos prescritos. Atualmente, as estatinas têm sido monitoradas, pois, embora eficazes e muito utilizadas, apresentam alguns efeitos adversos não desejáveis. Neste trabalho, as técnicas SPME e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS) foram avaliadas para a análise de estatinas (fluvastatina, simvastatina e atorvastatina) em plasma humano para fins de monitorização terapêutica. As condições de extração e derivatização foram otimizadas empregando planejamento experimental e avaliando a influência dos principais parâmetros envolvidos. Para otimização das condições de extração avaliou-se parâmetros como tempo e temperatura de extração, pH, volume de solução tampão e força iônica; e para otimização das condições de derivatização avaliou-se parâmetros como volume de reagente derivatizante, volume de agente pareador iônico e pH. A extração foi realizada utilizando fibras de PDMS-DVB, e a dessorção feita termicamente no injetor do cromatógrafo a gás. O método desenvolvido foi validado segundo normas da ANVISA, apresentando linearidade na faixa de 20 a 500 ng mL-1, precisão com coeficientes de variação menor que 14% e recuperação relativa de 20 a 40%. Concluída a validação analítica, a metodologia proposta foi aplicada em amostras reais de plasma de pacientes em terapia com simvastatina concedidas pelo Laboratório Médico Dr. Maricondi e pela Casa de Saúde de São Carlos. / Therapeutic drug monitoring allows individualization of dosage regimen, ensuring the clinical efficacy and minimizing the adverse effects of prescribed drugs. Currently, statins have been monitored; despite they are effective, some statins have undesirable adverse effects. In this work, SPME technique and gas chromatography / mass spectrometry (GC-MS) were evaluated for analysis of statins (fluvastatin, simvastatin and atorvastatin) in human plasma for therapeutic drug monitoring. The extraction and derivatization conditions were optimized using experimental design and evaluating the influence of the main parameters involved in the SPME procedure. To optimize the extraction conditions were evaluated parameters such as time and extraction temperature, pH, volume of buffer and ionic strength, and to optimize the derivatization conditions were evaluated parameters as derivatization reagent volume, ionic agent pareador volume and pH. The extraction was performed using PDMS-DVB fibers, and thermal desorption performed in the injector of the gas chromatograph. The method was validated according to ANVISA, showing linearity in the range 20 to 500 ng mL-1, the precision with coefficients of variation less than 14% and relative recovery from 20 to 40%. The proposed methodology was applied to real samples of plasma from patients on therapy with simvastatin provided by the Laboratório Médico Dr. Maricondi and Casa de Saúde of São Carlos.

O estudo objetivou desenvolver uma novo método de extração para analisar os poluentes orgânicos persistentes (POPs), no sedimento da Represa Billings em São Paulo, via cromatografia a gás com espectrometria de massas (GC/MS). O Tratado de Estocolmo realizado na Suécia em 1972, patrocinado pela ONU, possuindo 113 países participantes, inclundo o Brasil objetivou a eliminação de menos doze POPs, colaborando com a questão ambiental. Os POPs são compostos que persistem no meio ambiente e são altamente estáveis, podendo ultrapassar a barreira placentária. Neste trabalho foram abordados o Aldrin, Endrin, Dieldrin, DDT. DDE, DDD e Heptacloro. Para garantir a confiabilidade dos resultados analíticos, foram realizados ensaios de validação do método, baseados nas diretrizes do INMETRO. O método de extração dos analitos foi o Quechers, obtendo resultados de recuperação entre 40 e 120% para todos os POPs analisados neste trabalho, valores aceitáveis para matrizes complexas como o sedimento. Os limites de detecção e quantificação fora, 0,3 e 0,5 &mu;g/kg respectivamente. As amostras analisadas não apresentaram contaminação significativa por POPs perante a Legislação Brasileira vigente. / The objective of this study was to develop a new extraction method to analyze persistent organic pollutants (POPs) in the Billings Reservoir sediment in São Paulo, using gas chromatography with mass spectrometry (GC / MS). The 1972 Stockholm Treaty, sponsored by the UN, with 113 participating countries, including Brazil, aimed at eliminating at least twelve POPs, collaborating with the environmental issue. POPs are compounds that persist in the environment and are highly stable and can overcome the placental barrier. In this work were approached: Aldrin, Endrin, Dieldrin, DDT. DDE, DDD and Heptachlor. In order to guarantee the reliability of the analytical results, validation tests of the method were carried out, based on INMETRO guidelines. The method of extraction of the analytes was Quechers, obtaining results of recovery between 40 and 120% for all POPs analyzed in this work, acceptable values for complex matrices such as sediment. The limits of detection and quantification were, respectively, 0.3 and 0.5 &mu;g / kg. The analyzed samples did not present significant contamination by POPs before the current Brazilian Legislation.

Os metilenodioxi derivados estão entre as drogas sintéticas de uso ilícito mais consumidas no ocidente, são substâncias que causam alterações motoras e psíquicas e tem causado grande ameaça a segurança no trânsito, pois estes efeitos afetam o desempenho dos condutores, podendo causar acidentes de trânsito. O humor vítreo é uma matriz biológica disponível apenas nas análises postmortem, e é de grande relevância para toxicologia forense. Constitui uma matriz simples, de fácil coleta e manuseio, boa estabilidade, muito indicada principalmente nos casos de corpos politraumatizados, parcialmente carbonizados ou em estado de decomposição. Isto porque o humor vítreo localiza-se em uma área anatomicamente isolada, relativamente protegida contra a contaminação externa e invasão de microorganismos. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver e validar uma metodologia analítica para detectar e quantificar metilenodioxi derivados em amostras de humor vítreo em vítimas fatais de acidentes de trânsito. Para desenvolvimento do método foi utilizado 1 mL de humor vítreo, extração líquido-líquido com solvente acetato de etila, derivatização com anidrido heptafluorobutírico (HFBA) e detecção por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG/MS). A metologia foi validada de acordo com os parâmetros preconizados pela ANVISA e demonstrou linearidade de 10 a 400 ng/mL. Os limites de detecção variaram entre 1 a 2,5 ng/mL, a exatidão variou entre 97,1% -103,7%, na precisão intra-ensaio foram obtidos valores entre 4,54%-9,14% e na precisão inter- ensaio, valores entre 6,92%-10,59%. A recuperação encontrada foi superior a 57,87%. A metologia validada foi aplicada em humor vítreo de vítimas fatais de acidentes de trânsito coletadas no Centro de Medicina Legal de Ribeirão Preto (CEMEL). / The methylenedioxy derivatives are among synthetic drugs of illicit use most consumed in the occident, these are substances cause mental and motor disorders and has caused major threat to traffic safety, these effects affect the performance of drivers and may lead to traffic accidents. The vitreous humor is a biological matrix available in postmortem analysis, and has great relevance to forensic toxicology. It is a simple matrix, clean, easy collection and handling, good stability, highly recommended especially in cases of body injuries, partially carbonization or in a state of decomposition. This is because the vitreous humor is located in an anatomically isolated area, relatively protected from external contamination and invasion of microorganisms. The purpose of this study was to develop and validate an analytical methodology to detect and quantify methylenedioxy derivatives in samples of vitreous humor in fatal traffic accidents. To develop the method we used 1 mL of vitreous humor, liquid-liquid extraction with ethyl acetate solvent, derivatization heptafluorobutyric anhydride (HFBA) and detection by gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS). The methodology was validated according to the parameters established by ANVISA and demonstrated linearity from 10 to 400 ng /mL. The limits of detection were between 1,0 ng/mL and 2,5 ng / mL. The accuracy had values between 97.1% -103.7%, the intra-assay precision was 4.54% -9.14% and inter assay precision between 6.92% -10.59%. The recovery was higher than 57.87%. The methodology validated was applied in vitreous humor of victims of fatal traffic accidents collected in the Centre of Forensic Medicine of Ribeirão Preto (CEMEL)