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Ação in vitro o laser hélio-neônio sobre o fungo Paracoccidioides brasiliensis / Effects of helium-neon (HeNe) laser on Paracoccidioides brasiliensis yeast cells

Di Gangi, Rosaria, 1987- 07 April 2012 (has links)
Orientadores: Liana Maria Cardoso Verinaud, Luciana Campos Paulino / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campoinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-20T22:23:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DiGangi_Rosaria_M.pdf: 3869352 bytes, checksum: 6c11f8a4be727a58eb3974501efd287e (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A paracoccidioidomicose (PCM), uma micose sistêmica, cujo agente etiológico é o fungo Paracoccidioides brasiliensis, acomete primariamente os pulmões e pode causar lesões secundárias na pele e mucosas, que são extremamente dolorosas e de difícil tratamento por métodos convencionais com drogas anti-fúngicas. Estudos anteriores, conduzidos em nosso laboratório, usando modelos experimentais para PCM, mostraram a capacidade do laser HeNe em aumentar a produção de citocinas pró-inflamatórias e a síntese de fibras colágenas, reticulina e de elementos de matriz extracelular, como laminina e fibronectina. Estes eventos levaram a uma cicatrização tecidual mais rápida e eficaz das lesões. Além disso, as células fúngicas recuperados a partir das lesões após tratamento com laser mostrou nenhuma capacidade de crescimento, quando cultivadas in vitro. Neste trabalho foi avaliada a ação direta do laser HeNe sobre o fungo com o objetivo de fornecer suporte para o uso desta terapia durante a infecção PCM. Os resultados mostraram que o tratamento com laser de HeNe reduziu a capacidade de crescimento e a viabilidade de células fúngicas em 90% e 30%, respectivamente. Ademais, as células tratadas apresentaram núcleo mais eletrondenso, sugerindo que a irradiação com laser induz alterações ultra-estruturais que podem afetar a viabilidade e/ou a virulência do fungo. Entretanto, a patogenicidade do fungo não foi afetada, uma vez que nenhuma diferença foi observada no pulmão de animais infectados com o fungo tratado e não tratado. Além dos efeitos sobre a resposta inflamatória, acreditamos que o laser de HeNe modifica, ou mesmo destrói, estruturas que são usadas pelo patógeno como mecanismos de resistência. Certamente, esta atividade fungistática/fungicida do laser também desempenha um papel importante na aceleração da cicatrização de feridas e, deste modo, a terapia com o laser de HeNe pode ser considerada como um tratamento adjuvante na cura de lesões da pele observados durante PCM / Abstract: Paracoccidioidomycosis (PMC), caused by the fungus Paracoccidioides brasiliensis (Pb), mainly affects the lungs and also causes painful lesions in the skin and mucous membranes that can remain active for months even after the beginning of antifungal treatment. In this work, we evaluated the effects of laser treatment on fungal cells, aiming to provide support for the use of this therapy during PCM. Pb yeast cells were exposed to laser for three consecutive days and then analyzed for growth inhibition, viability, 43-kDa glycoprotein (gp43) expression, infectivity, and ultra-structural alterations. HeNe laser treatment reduced the growth capacity and the viability of fungal cells, and increased gp43 expression. Laser-treated cells also showed pronounced structural alterations, since they were collapsed and presented deep folds. Additionally, remarkable changes were observed in the nucleus that presented a very electrondense form. The pathogenicity of P. brasiliensisafter laser treatment was also evaluated,and no differences were observed in pulmonary lesions comparing animals infected with laser-treated and non-treated yeast cells. Possibly HeNe laser is able to modify fungal structures involved in resistance and virulence mechanisms and therefore can be considered as an adjunctive therapy in the treatment of skin lesions observed during PCM / Mestrado / Imunologia / Mestre em Genética e Biologia Molecular

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