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Citogenética e citometria de fluxo de espécies de Dorstenia (Moraceae) endêmicas da Floresta AtlânticaFernandes, Alda Francisca Rodrigues de Sousa 27 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-27 / CAPES / Moraceae compreende plantas latescentes de porte arbóreo como as figueiras
(Ficus), de porte arbustivo como as espécies de Sorocea, ou herbáceas como as
espécies de Dorstenia. O gênero Dorstenia é o único herbáceo dentro da família,
com cerca de 105 espécies, e possui princípios ativos ligados a diversas funções
terapêuticas. Além do uso medicinal, os carapiás, como são conhecidas
popularmente as espécies de Dorstenia, também apresentam grande potencial
como plantas ornamentais. Alguns estudos envolvendo sistemática, filogenia,
molecular e fitoquímica são relatados para algumas espécies de Dorstenia. No
entanto, são poucos os relatos a respeito dos dados citogenéticos e conteúdo de
DNA no gênero, provavelmente em virtude da dificuldade de encontrar
populações naturais em campo e à situação vulnerável que compromete grande
parte das espécies. Dados citomorfológicos associados com o valor 2C de DNA
podem gerar informações sobre a evolução cromossômica e colaborar com os
aspectos sistemáticos e taxonômicos de um grupo. Diante do exposto, o objetivo
do presente trabalho foi caracterizar, por meio da citogenética e citometria de
fluxo, três espécies de Dorstenia: D. arifolia Lam., D. bonijesu Carauta & C.
Valente e D. elata Hook. Para isso, o número cromossômico foi determinado,
parâmetros morfométricos e de assimetria intercromossômica (A2) foram
estabelecidos e o conteúdo de DNA nuclear foi mensurado. O material vegetal foi
coletado em Mata das Flores, ES. Para a citogenética, raízes foram obtidas por
meio de sistema hidropônico, tratadas com APM nas concentrações de 3, 4 e 5
μM, por 16 a 18 h e fixadas em metanol: ácido acético (3:1), para posterior
digestão, coloração e observação das lâminas. Para citometria de fluxo indivíduos
jovens foram coletados. As folhas foram utilizadas como material de análise para
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quantificar o conteúdo de DNA nuclear. A metodologia citogenética possibilitou a
obtenção de material adequado para análise. Encontraram-se 32 cromossomos e
foi possível montar o primeiro cariograma para as três espécies. Com os dados
morfométricos, a classificação dos cromossomos foi determinada e foram
confirmadas as diferenças entre os três cariótipos. O índice de assimetria A2
variou entre as espécies: D. bonijesu apresentou A2 = 0,16, seguido por D. arifolia
A2 = 0,14 e D. elata A2 = 0,13. As análises de citometria de fluxo possibilitaram
mensurar o conteúdo de DNA nuclear de 2C = 3,49 picogramas (pg) para D. elata,
2C = 4,05 pg para D. bonijesu, e 2C = 5,47 pg para D. arifolia. Apesar das três
espécies apresentarem o mesmo número de cromossomos (2n = 32), os valores
de conteúdo de DNA evidenciados pela citometria de fluxo e os resultados do
índice assimétrico foram diferentes. De acordo com os valores de A2 e dados
descritos na literatura D. elata pode ser a espécie mais derivada em relação a D.
bonijesu e D. arifolia, por possuir o menor índice de assimetria e menor conteúdo
de DNA nuclear. Assim, os dados da presente pesquisa permitiram caracterizar,
pela primeira vez, três espécies de Dorstenia, contribuindo para diferentes áreas
como ecologia, filogenia, sistemática e evolução. / Moraceae comprises latescentes plant tree size as the fig trees (Ficus), shrub
species as Sorocea, or herbaceous species as Dorstenia species. The Dorstenia
is the only herbaceous within the family, with about 105 species, and it has active
ingredients linked to several therapeutic functions. Besides the medical use, the
"carapiás", as popularly known, the Dorstenia species also have a high potential
as ornamental plants. Some studies involving systematic, phylogeny, molecular
and phytochemical are reported to some species of Dorstenia. However, there are
few reports about the cythogenetic data and DNA content in the gender, probably
due to the difficulty to find natural populations in the field and the vulnerable
situation that affects most species.Cytomorphological data associated with the
DNA 2C value can generate information on the chromosomal evolution and
cooperate with systematic and taxonomic aspects of a group. That being said, the
objective of this study was to characterize, by using cytogenetics and flow
cytometry, three species of Dorstenia:. D. arifolia Lam., D. bonijesu Carauta & C.
Valente and D. elata Hook. For this, the chromosomal number was determined,
morphometric and intrachromosomal asymmetry (A2) parameters were established
and nuclear DNA content was measured. The plant material was collected in Mata
das Flores, ES. To cytogenetics, roots were obtained by using the hydroponic
system, treated with APM in the concentrations of 3, 4 and 5 uM, for 16 to 18 h
and fixed in methanol: acetic acid (3:1), for later digestion, coloring and
observation of the slides. For flow cytometry young individuals were colected. The
leaves were used as material of analysis to quantify the nuclear DNA content. The
Cytogenetic methodology allowed to obtain suitable material for analysis. It was
found 32 chromosomes and it was possible to mount the first karyogram to the
three species. With the morphometric data, the classification of chromosomes was
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determined and the differences were confirmed between the three karyotypes. The
A2 asymmetry index varied between the species: D. bonijesu showed A2 = 0.16,
followed by D. arifolia A2 = 0.14 and D. elata A2 = 0.13. The flow cytometric
analysis allowed to measure the nuclear DNA content of 2C = 3.49 picograms (pg)
for D. elata, 2C = 4.05 pg for D. bonijesu , and 2C = 5.47 pg for D. arifolia. Despite
of the fact that the three species have the same chromosome number (2n = 32),
the DNA content values obtained by flow cytometry and the results of the
asymmetric index were different. According to the A2 values and data described in
the literature D. elata can be the species more derivative in relation to D. bonijesu
and D. arifolia, for having the lowest asymmetry index, and the lowest content of
nuclear DNA. Therefore, the present research data allowed to characterize, for the
first time, three species of Dorstenia, contributing to different areas such as
ecology, phylogeny, systematics and evolution.
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