Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-08-30T20:48:41Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Pollyana Guimarães de Oliveira - 2014.pdf: 1550661 bytes, checksum: 2c614da0d23de4cac81d9260ef077071 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-08-30T20:48:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Pollyana Guimarães de Oliveira - 2014.pdf: 1550661 bytes, checksum: 2c614da0d23de4cac81d9260ef077071 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-30T20:48:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Pollyana Guimarães de Oliveira - 2014.pdf: 1550661 bytes, checksum: 2c614da0d23de4cac81d9260ef077071 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-10-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Dendritic cells (DCs) are a heterogeneous group of cells and the major activators of naive T lymphocytes. During antigen presentation, different types of cytokines are produced and they will interfere with the immune response profile generated. IL-12p70 promotes the differentiation of Th1 phenotype and IL-23 p enhances the Th17 response. Given the major role of IL-12 and IL-23 on the stabilization of the acquired immune response, the production of these cytokines is highly controlled and it is an issue for several studies. The objective of this work was to characterize a new lineage of DC, described as AP284, based on their surface markers and evaluate the ability of these cells to produce IL-12p40, IL-12p70 and IL-23 after different stimulus in vitro. Additionally it will be evaluate their phagocytic capacity and their ability to induce a Th1 and Th17 response in vivo. The expression of the markers was analyzed by flow cytometry and the quantitation of IL-12 and IL23 was performed by ELISA after stimulation of cells AP284 in vitro with lipopolysaccharide (LPS) and Escherichia coli. AP284 cells express MHC class II, CD11c and 33D1 on its surface, which are characteristic markers of DCs. After stimulus with LPS or E.coli, AP284 cells produce large amounts of IL-12p40 and IL-23 but do not produce IL-12p70. The production of IL-12p70 was not detected even when IFN-γ is added to prime cultures, moreover, priming the cells with IFN-γ promoted inhibition of IL-12p40 and IL-23. Our data sugest that the AP284 is a DC17 lineage. Thus, AP284 can be an important tool to study the mechanisms of induction or regulation of IL-23 production and a possible tool to study generation and maintenance of a Th17 profile. / As células dendríticas (DCs) constituem um grupo heterogêneo de células e são as principais ativadoras de linfócitos T virgens. Durante a apresentação de antígenos são produzidos diferentes tipos de citocinas que interferem com o perfil de resposta imune que será gerado. A produção de IL-12p70 favorece a diferenciação do perfil Th1 e a produção de IL-23 potencializa o perfil de resposta Th17. Devido à importância da IL-12 e IL-23 na estabilização de uma resposta imune adquirida, a produção destas citocinas é altamente controlada e alvo de diversas pesquisas. O objetivo deste projeto foi de caracterizar uma nova linhagem de DC AP284 a partir dos seus marcadores de superfícies e avaliar a capacidade destas células em produzir IL-12p40 e IL-23 após diferentes estímulos in vitro, além de avaliar a sua capacidade fagocítica e indução de um perfil de resposta Th1 ou Th17 in vivo. A expressão dos marcadores foi analisada por citometria de fluxo e a dosagem de IL-12 e IL23 por ELISA após o estímulo de células AP284 in vitro com lipopolisssacáride (LPS) e Escherichia coli. Células AP284 expressam MHC classe II, CD11c e 33D1 em sua superfície, sendo estes marcadores característicos de populações de DCs. Após estímulos com LPS e E.coli, células AP284 produzem grande quantidade de IL-12p40 e IL-23, mas não produzem IL-12p70. A produção de IL-12p70 não foi detectada mesmo após a adição de IFN-γ às culturas, além disso, a primagem das células com IFN-γ promoveu a inibição de IL-12p40 e IL-23. Neste trabalho foi demonstrado que células AP284 são DCs, pois além de expressarem MHC classe II expressam marcadores que são característicos deste grupo celular. Nossos dados ainda suportam a ideia de que a linhagem AP284 seja uma linhagem de DC17, pois produziram grandes quantidades de IL-12p40 e IL-23, mas nenhuma quantidade de Il-12p70. Assim, AP284 pode ser uma ferramenta importante para o estudo dos mecanismos de indução e de regulação da produção da IL-23 e uma possível ferramenta para o estudo da geração e manutenção de um perfil de resposta Th17.