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Avaliação pré-clínica da combinação de benznidazol e curcumina no tratamento etiológico da infecção por T. cruzi

SARTINI, Marcus Vinícius Pessoa 17 December 2015 (has links)
A Tripanossomíase Americana ou doença de Chagas representa uma doença tropical negligenciada causada pelo parasito protozoário Trypanosoma cruzi. A doença de Chagas representa a principal causa de cardiomiopatia não isquêmica em todo o mundo. Embora a quimioterapia com benznidazol seja indicada como referência no tratamento etiológico da doença, após o parasito se instalar em múltiplos órgãos do hospedeiro vertebrado, a cura geralmente não é alcançada. Assim, novas drogas e esquemas terapêuticos têm sido testados na busca por estratégias mais eficientes e toleráveis no tratamento da doença. Devido a sua atividade anti-inflamatória, antioxidante e imunomoduladora, a currumina tem mostrado efeitos promissores no tratamento de doenças parasitárias como malária, leishmaniose e esquistossomose. Entretanto a aplicabilidade da curcumina no manejo terapêutico da doença de Chagas ainda é pouco conhecida. Dessa forma, o presente estudo foi delineado para investigar a influência do tratamento com benznidazol e curcumina sobre o parasitismo sanguíneo e cardíaco, resposta inflamatória, dano oxidativo e remodelamento morfológico do miocárdio em camundongos infectados por T. cruzi. Oitenta e quatro camundongos suiços fêmeas com oito semanas de vida foram igualmente divididos em sete grupos: G1, não infectados; G2 , infectados; G3, infectados + benznidazol (100 mg/kg); G4, infectados + benznidazol (50 mg/kg); G5, infectados + curcumina (100 mg/kg); G6, infectados + benznidazol (100 mg/kg) + curcumina (100 mg/kg); G7, infectados + benznidazol (50 mg/kg) + curcumina (100 mg/kg). Os animais infectados foram inoculados intraperitonealmente com 2000 formas tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi. O benznidazol e a curcumina foram oralmente administrados uma vez a dia, durante 20 dias, por meio de gavagem. Os resultados indicaram que a curcumina apresentou efeitos antiparasitários limitados, mas que quando combinada ao benznidazol, essa molécula potencializou a ação terapêutica da quimioterapia de referência. Aparentemente, esse efeito foi mediado por uma maior redução da parasitemia, carga parasitária, processo inflamatório e dano oxidativo cardíaco, bem como bloqueio da reativação da infecção após o término do tratamento. Além de aumentar a sobrevivência e taxa de cura em camundongos infectados, o tratamento combinado também atenuou a toxicidade hepática induzida pelo benznidazol, impedindo a reativação da infecção mesmo quando os animais foram tratados com a metade da dose terapêutica recomenda para o benznidazol. / The American trypanosomiasis or Chagas disease is a neglected tropical disease caused by protozoan parasite Trypanosoma cruzi. Chagas' disease is the leading cause of non-ischemic cardiomyopathy worldwide. Although chemotherapy with benznidazol is recommended as a reference in the etiological treatment of the disease, after the parasite settling in multiple organs of the vertebrate host, healing is usually not achieved. Thus, new drugs and therapeutic schedules have been tested in the search for more tolerable and effective strategies for the treatment of disease. Due to its anti-inflammatory activity, antioxidant and immunomodulatory, the currumina has shown promising effects on the treatment of parasitic diseases such as malaria, leishmaniasis and schistosomiasis. However, the applicability of curcumin in the therapeutic management of Chagas disease is still unknown. Thus, the present study was designed to investigate the influence of treatment with benznidazol and curcumin on blood and cardiac parasitism, inflammatory response, oxidative damage and morphological myocardial remodeling in mice infected with T. cruzi. Eighty-four Swiss female mice eight weeks of life were equally divided into seven groups: G1, uninfected; G2, infected; G3 infected benznidazol + (100 mg / kg); G4 infected benznidazol + (50 mg / kg); G5, infected + curcumin (100mg / kg); G6 infected benznidazol + (100 mg / kg) + curcumin (100mg / kg); G7 infected benznidazol + (50 mg / kg) + curcumin (100mg / kg). The infected animals were inoculated intraperitoneally with 2000 trypomastigotes of T. cruzi Y strain. The benznidazol and curcumin were administered orally once daily for 20 days by gavage. The results showed that curcumin had limited antiparasitic effects, but when combined with benznidazol, this molecule enhanced the therapeutic action of the reference chemotherapy. Apparently, this effect was mediated by a greater reduction in parasitemia, parasite load, inflammation and cardiac oxidative damage and block the reactivation of the infection after completion of treatment. In addition to increasing the survival and cure rate in infected mice, the combined treatment also attenuated hepatic toxicity induced by benznidazol, preventing reactivation of infection even when the animals were treated with half the therapeutic dose recommended for benznidazol.
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Efeito de fungos entomopatogênicos em Periplaneta americana / Efficacy of entomopathogenic fungi to Periplaneta americana

Hubner-Campos, Rayssa Fátima 09 December 2011 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2014-12-03T20:21:41Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rayssa Fátima Hubner-Campos - 2011.pdf: 2511470 bytes, checksum: ee6ac73ef51b071c0cfb2f0afc90bff9 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2014-12-05T14:27:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rayssa Fátima Hubner-Campos - 2011.pdf: 2511470 bytes, checksum: ee6ac73ef51b071c0cfb2f0afc90bff9 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-05T14:27:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rayssa Fátima Hubner-Campos - 2011.pdf: 2511470 bytes, checksum: ee6ac73ef51b071c0cfb2f0afc90bff9 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2011-12-09 / Periplaneta americana is a synanthropic cockroach that carries pathogens, contaminates food and the environment, and causes severe health problems, such as recurrent episodes of asthma and other allergies, especially in children. Actually, the control of this pest is difficult due to acquired multiple resistance to chemical insecticides and the ineffectiveness of these products in oothecae. Entomopathogenic fungi are used for biological control against insects of medical and veterinary importance. However, there is little information about the effectiveness and the potential of entomopathogenic fungi to combat P. americana. In present study the pathogenicity of 11 fungal strains belonging to seven different genera was evaluated in nymphs of P. americana. Fungi that caused mortality > 90% in nymphs in the first test, were assayed in oothecae of P. americana. For the test with adults the fungus that caused higher mortality in nymphs and oothecae was selected. Conidia were formulated in oil-in-water (Graxol® 10%) at 108 conidia/ml. Nymphs, oothecae and adults were then treated topically with 0.5 µl, 2.5 µl and 50 µl of the formulate, at a final dose of 5 x 104 conidia/nymph, 2,5 x 105 conidia/oothecae and 5x103, 104, 5x104, 105 or 5x105 conidia/adult, respectively, and incubated in a humid chamber at 25 ± 1ºC and 12 h photophase. The mortality of nymphs and adults was checked daily for 25 days and the growth of fungi on the surface of the cadavers evaluated for up to 15 days. The development of the inoculated fungus on the ootheca was assessed daily during 45 days and subsequent hatching of nymphs monitored for another 15 days. Control nymphs, adults and oothecae were treated with the emulsion without conidia. Adults and nymphs whether treated as adults and nymphs or nymphs hatched from treated oothecae, were fed with dry cat food (0.5 g) (Whiskas®) and water through moistened cotton (0.1 ml) arranged in small containers. First dead nymphs were observed two days after treatment with Beauveria bassiana IP 361, Metarhizium robertsii IP 34, M. anisopliae sensu lato IP 46, B. bassiana IP 3, M. frigidum ARSEF 4561 and Purpureocillium lilacinum IP 320. Beauveria bassiana IP 361, M. robertsii and M. anisopliae caused mortality in more than 80% of the tested nymphs. The other fungi tested caused less than 20% mortality in nymphs. In adults mortality depended on the dose and did not differ between the sexes. The inoculated fungus began to grow distinctly on the cadavers three days after incubation of dead nymphs and adults in a humid chamber. Testing activity of IP 34 and IP 46 in oothecae, mycelium grew on the surface of the treated ootheca 11 days after incubation and new conidia were formed at ≥ 20 days. In 31% of oothecae treated with IP 46 and 23% treated with IP 34, oothecae had shrunk and no nymphs had hatched. In all controls and oothecae treated with conidia, nymphs began to hatch 33 days after incubation. All hatched nymphs survived for the following 25 days. M. anisopliae, M. robertsii and B. bassiana IP 361 were pathogenic to nymphs and have potential for biological control of P. americana. / Periplaneta americana é uma barata sinantrópica que veicula patógenos, contamina ambientes e alimentos e provoca graves problemas de saúde, como episódios recorrentes de asma e outras alergias especialmente em crianças. Atualmente, o controle desta praga é difícil devido à resistência adquirida a vários inseticidas químicos e a ineficácia destes produtos sobre a fase de ooteca. Fungos entomopatogênicos são usados para o controle biológico de insetos de importância médica e veterinária. Entretanto, há poucas informações sobre a eficiência e o potencial de fungos entomopatogênicos para combater P. americana. O presente estudo avaliou a patogenicidade de 11 fungos pertencentes a sete diferentes gêneros, sobre P. americana. Os fungos que causaram mortalidade > 90% em ninfas, em um primeiro experimento, foram testados também em ootecas desta espécie. Em adultos, selecionou-se o fungo que causou maior mortalidade em ninfas e ootecas. Conídios foram formulados em óleo-água (Graxol® a 10%) a 108 conídios/ml. Ninfas, ootecas e adultos foram tratados topicamente com 0,5 µl, 2,5 µl e 5,0 µl do formulado, numa dose final de 5x104 conídios/ninfa, 2,5x105 conídios/ooteca e 5x103, 104, 5x104, 105 ou 5x105 conídios/adulto, respectivamente, e incubados em câmara úmida a 25 + 1º e 12 h de fotofase. A mortalidade de ninfas e adultos foi verificada diariamente por 25 dias e o crescimento do fungo sobre a superfície dos cadáveres acompanhado por até 15 dias. Durante 45 dias foram avaliados diariamente o desenvolvimento do fungo inoculado sobre a ooteca e a eclosão de ninfas, e a sobrevivência destas após a eclosão, foi acompanhada por mais 15 dias. As ninfas, ootecas e adultos do grupo controle foram tratados com a emulsão sem conídios. Os adultos e as ninfas tratadas ou eclodidas de ootecas tratadas foram alimentadas com ração para gatos (0,5 g) (Whiskas®) e água através de algodão umedecido (0,1 ml) oferecidos em pequenos containers. Primeiras ninfas mortas foram observadas dois dias após o tratamento com Beauveria bassiana IP 361, Metarhizium robertsii IP 34, M. anisopliae sensu lato IP 46, B. bassiana IP 3, M. frigidum ARSEF 4561 e Purpureocillium lilacinum IP 320. B. bassiana IP 361, M. robertsii e M. anisopliae causaram mortalidade em mais de 80% das ninfas. Os demais fungos testados causaram mortalidade em ninfas inferior a 20%. Em adultos a mortalidade dependeu da dose e não diferiu entre os sexos. O fungo inoculado iniciou crescimento distinto sobre os cadáveres após o terceiro dia de incubação das ninfas e adultos mortos em câmara úmida. Micélio cresceu sobre a superfície das ootecas tratadas com fungos IP 34 e IP 46 após 11 dias de incubação e os novos conídios foram visualizados com ≥ 20 dias. 31% das ootecas tratadas com IP 46 e 23% com IP 34 tornaram-se ressecadas e abauladas e nenhuma ninfa eclodiu dessas ootecas. Em ootecas do grupo controle e em ootecas tratadas com conídios, a eclosão de ninfas iniciou após 33 dias de incubação. Todas as ninfas eclodidas dessas ootecas sobreviveram durante 25 dias. M. anisopliae, M. robertsii e B. bassiana IP 361 foram patogênicos para ninfas e apresentam potencial para o controle biológico de P. americana.
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Avaliação de diferentes extratos enzimáticos fúngicos sobre ovos de Ancylostoma spp / Evaluation of different fungal enzyme extract of eggs of ANCYLOSTOMA spp

Hofstatter, Bianca Delgado Menezes 28 February 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_bianca_delgado_menezes_hofstatter.pdf: 621009 bytes, checksum: d3e850b42136cff101d9f300aaadacaf (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / The role of companion animals or pets as zoonotic disease reservoirs has been recognized as a significant public health hazard throughout the world. Ancylostoma caninum and A. braziliense are zoonotic parasites which are transmitted to man through contact with soil contaminated with both eggs and larvae of these ancylostomids. The considerable prevalence of environmental contamination by Ancylostoma spp eggs, together with the difficulties of applying control measures and soil disinfection, as well as the development of resistance to anthelmintic therapy, highlights the need for alternative methods to help control these helminths. Taking into account that these nematodes spend part of their life cycle in the soil and that nematophagous fungi usually found in this ecosystem establish parasitic or predatory relationships with these parasites, thus playing an important role as natural enemies, the use of these agents in the effective control of nematodes is viable and desirable. Thus, nematophageous fungi can be used when the environment is already contaminated. This study aimed to determine helminth prevalence in dog feces collected on streets and parks in Pelotas County, Rio Grande do Sul State, Brazil, as well as to evaluate the in vitro ovicidal activity of different crude enzymatic extract preparations of CG193 and MICLAB 009 Paecilomyces lilacinus, MICLAB 008 Trichoderma virens and CG502 Trichoderma harzianum fungal isolates on Ancylostoma spp. eggs. Fifteen random feces samples were collected from 14 different places in town between January and March 2012, totaling 210 samples, which were submitted to coproparasitological tests. The fungal isolates evaluated were grown in minimum liquid medium under agitation at 28ºC for five days. Fungal preparations consisted of supernatant liquid medium without filtration (crude extract), filtered (filtered extract), macerated mycelium (crude macerate), and macerated mycelium submitted to filtration (filtered macerate). Ancylostoma spp. eggs were obtained from the feces of naturally parasitized dogs. In vitro assays consisted of four treatments and one control group. 4mL of each fungal extract was poured into Petri dishes added with a 1 mL suspension containing approximately 103 Ancylostoma spp. eggs. The control group consisted of 1mL suspension containing 1000 Ancylostoma spp. eggs added with 4mL sterile distilled water. All dishes were incubated at 25º C for 24 hours. Each assay had five replicates. Following, the total number of larvae present in each treatment and in the control group was counted. The results obtained showed that the overall prevalence of environmental contamination on public streets and parks was 57,6%, including both mono (67,8%) and multi (32,2%) infections. Ancylostoma spp. was the most frequent occurrence (88,4%), followed by Trichuris vulpis. (38,8%). When evaluating the in vitro ovicidal activity, the different fungal formulations tested for each fungus were found to differ (p<0,05) from the control group, showing a relevant ovicidal effect. When the egg hatching reduction percentage was calculated, the highest reduction occurred when the crude macerate preparation was used, showing 68,43% and 47,05% MICLAB 009 and CG193 P. lilacinus and 56,43% T. harzianum reduction percentages, respectively. The crude macerate reduction percentage for the T. virens isolate (52,25%) was slightly lower than that for the filtered macerate (53,64%). The finding that 88,4% of the feces were positive for Ancylostoma spp. eggs not only reveals the high environmental contamination rates in the municipality of Pelotas, but also warns of the urgent need to implement health education and responsible dog ownership programs, as well as the need to adopt additional control measures. The evaluation of the ovicidal activity showed that, regardless of the fungal extract tested, the fungus species evaluated were effective in reducing Ancylostoma spp. egg hatchability, and thus are potential candidates for the biological control of this nematodeThe role of companion animals as reservoirs of zoonotic diseases has been recognized as significant public health problem worldwide. / O papel dos animais de companhia como reservatórios de doenças zoonóticas tem sido reconhecido como significativo problema de saúde pública em todo o mundo. Ancylostoma caninum e A. braziliense são parasitos zoonóticos transmitidos ao homem pelo contato com solos contaminados com ovos e larvas destes ancilostomídeos. As consideráveis prevalências de contaminação ambiental por ovos de Ancylostoma spp., aliada as dificuldades de medidas de controle e desinfecção do solo, assim como o surgimento de resistência a terapia anti-helmíntica, evidenciam a necessidade de métodos alternativos que auxiliem no controle destes helmintos. Considerando-se o fato que os nematoides que infectam animais gastam parte do seu ciclo de vida no solo e que os fungos nematófagos, comumente encontrados nesse ecossistema, desenvolvem relações parasíticas ou predatórias com esses parasitos, desempenhando importante papel como inimigos naturais, torna-se viável e desejável o emprego destes agentes no controle eficaz de nematoides. Desta forma, os fungos nematófagos podem ser utilizados em situações em que o ambiente já está contaminado. Os objetivos do presente estudo foram verificar a prevalência de helmintos em fezes de cães coletadas em vias públicas do município de Pelotas, RS, Brasil, e avaliar a atividade ovicida in vitro de diferentes preparações de extratos brutos enzimáticos dos isolados fúngicos Paecilomyces lilacinus CG193, P. lilacinus MICLAB 009, Trichoderma virens MICLAB 008 e Trichoderma harzianum CG502 sobre ovos de Ancylostoma spp. No período de janeiro a março de 2012 foram coletadas aleatoriamente 15 amostras de fezes em 14 pontos do município, totalizando 210 amostras, as quais foram submetidas a exames coproparasitológicos. Os isolados fúngicos avaliados foram cultivados em meio mínimo líquido, em agitação, durante cinco dias a 28ºC. As preparações fúngicas consistiram do meio líquido sobrenadante sem filtração (extrato bruto) e filtrado (extrato filtrado), do micélio macerado (macerado bruto) e micélio macerado submetido a filtração (macerado filtrado). Os ovos de Ancylostoma spp. foram obtidos a partir de fezes de cães naturalmente parasitados. Os ensaios in vitro consistiram em quatro tratamentos e um grupo controle. Em placas de Petri foram vertidos 4mL de cada extrato fúngico e a esse volume foi acrescido 1mL de uma suspensão contendo aproximadamente 103 ovos de Ancylostoma spp. O grupo controle consistiu de 1mL de suspensão contendo 1000 ovos de Ancylostoma spp. acrescido de 4mL de água destilada estéril. Todas as placas foram incubadas a 25ºC, durante 24 horas. Cada ensaio foi constituído de cinco repetições. Após esse período, o número total de larvas presente em cada tratamento e no grupo controle foi contato. Os resultados obtidos demonstram que a prevalência geral de contaminação ambiental em vias públicas foi de 57,6% tanto em mono (67,8%) como em multi-infecções (32,2%). Ancylostoma spp. ocorreu em maior frequência (88,4%), seguido de Trichuris vulpis. (38,8%). Na avaliação da atividade ovicida in vitro foi observado que as diferentes formulações fúngicas testadas em cada fungo diferiram (p<0,05) do grupo controle, evidenciando relevante efeito ovicida. Quando calculado o percentual de redução de eclosão dos ovos, evidenciou-se que o maior valor de redução ocorreu quando utilizada a preparação macerado bruto, com percentuais de redução de 68,43% e 47,05% em P. lilacinus MICLAB009 e CG193, respectivamente, e 56,43% em T. harzianum. Apenas no isolado T. virens o percentual de redução do macerado bruto (52,25%) foi levemente inferior ao macerado filtrado (53,64%). O encontro de 88,4% de fezes positivas para ovos de Ancylostoma spp., além de evidenciar as altas taxas de contaminação ambiental no município de Pelotas, alertam para urgente implementação de programas de educação sanitária e de posse responsável dos cães, assim como para a necessidade da adoção de medidas complementares de controle. A avaliação da atividade ovicida mostrou que independente do extrato fúngico testado, as espécies de fungos avaliadas foram eficazes em reduzir a eclodibilidade de ovos de Ancylostoma spp. e, portanto, constituem-se em potenciais candidatos para o emprego no controle biológico deste nematoide.
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Efeito leishmanicida de derivados benzofenônicos e estudo comparativo do potencial de inibição enzimática in silico e in vitro

ALMEIDA, Letícia de 19 February 2013 (has links)
As leishmanioses são causadas por protozoários do gênero Leishmania e apresentam diversas manifestações clínicas, sendo consideradas uma doença tropical negligenciada. Encontram-se atualmente presentes em 88 países, afetando 12 milhões de pessoas, com dois milhões de novos casos por ano. O tratamento das leishmanioses é realizado até hoje pelos mesmos quimioterápicos usados na década de 40, apesar da persistência dos efeitos colaterais. Neste sentido, o objetivo do trabalho consistiu na avaliação da atividade de derivados de benzofenonas em L. (L.) amazonensis. Além de buscar entender possíveis mecanismos de ação, através da avaliação da dosagem de óxido nítrico e do potencial de inibição enzimática nos contextos in silico e in vitro. Foram testados três benzofenonas precursoras (CM-A, CM-B e CM-C) comercialmente disponíveis e nove derivados (LFQM-115, LFQM-116, LFQM-117, LFQM-118, LFQM-119, LFQM-120, LFQM-121, LFQM-122 e LFQM-123). Inicialmente os testes foram realizados em formas promastigotas de L. (L.) amazonensis, apesar de todos os derivados serem mais eficazes que seus precursores, os melhores resultados foram exibidos por LFQM-115, LFQM-118 e LFQM-123 (IC50-PRO = 4,90; 5,05 e 5,94 μg/mL; respectivamente). A toxicidade a macrófagos peritoniais murinos foi também avaliada, e constatou-se que os derivados LFQM-117, LFQM-120, LFQM-121, LFQM-122 e LFQM123 foram os menos citotóxicos (CC50 = 140,06; 87,10; 116,20 e >160,00 μg/mL; respectivamente). A avaliação de atividade em formas amastigotas de L. (L.) amazonensis procedeu-se apenas com os derivados, sendo LFQM-120 o mais efetivo em formas intracelulares. O QlogP dos derivados de benzofenonas pode ser correlacionado com a atividade antipromastigota, bem como com a antiamastigota. A partir de então, os derivados que mostraram melhor perfil de atividade em ambas as formas do parasito e em macrófagos murinos foram selecionados (LFQM-116, LFQM-117, LFQM-119, LFQM-120 e LFQM-121) para os demais ensaios. Foi realizada a dosagem da produção de óxido nítrico (NO) nos sobrenadantes de cultura de macrófagos peritoneais murinos infectados com L. (L.) amazonensis. Neste verificou-se que os derivados benzofenônicos LFQM-119 e LFQM-120 estimularam a produção de NO, porém apenas o derivado LFQM-120 induziram uma produção de NO equivalente ao produzido por LPS. Algumas enzimas importantes para tripanossomatídeos (cruzaína, oligopeptidase B, ornitina descarboxilase e tripanotiona redutase) e representantes de importantes famílias de enzimas (papaína e tripsina) foram usadas na análise por docking molecular. Algumas destas foram também utilizadas para a avaliação do potencial de inibição enzimática experimental (papaína, cruzaína, tripsina e oligopeptidase B), tendo o derivado LFQM-116 exibido valores de IC50 = 7,54; 8,44; 8,59 e 14,25 μg/mL; respectivamente. Adicionalmente, é possível verificar a ação multi-alvo do derivado LFQM-120. Portando, este trabalho mostrou a ação de derivados de benzofenonas em ambas as formas de L. (L.) amazonensis, descrevendo ainda o ganho na atividade biológica com as modificações estruturais feitas em seus precursores. Além de ajudar a entender possíveis mecanismos de ação de tais compostos e ainda possibilitar a seleção dos compostos mais efetivos in vitro, os quais poderão então ser utilizados em futuros testes in vivo. / Leishmaniasis are caused by protozoa of the genus Leishmania and present diverse clinical manifestations being considered a neglected tropical disease. Are currently present in 88 countries affecting 12 million people with two million new cases per year. Treatment of leishmaniasis is held today by the same chemotherapy used in the 40s, despite the persistence of side effects. In this sense, the goal of the study was to evaluate the activity of benzophenone derivatives in L. (L.) amazonensis. Besides seeking to understand possible action mechanisms by evaluating the measurement of nitric oxide and the potential of enzyme inhibition in the contexts in silico and in vitro. Were tested three benzophenone precursors (CM-A, CM-B and CM-C) commercially available and nine derivatives (LFQM-115, LFQM-116, LFQM-117, LFQM-118, LFQM-119, LFQM-120-LFQM 121, LFQM-122 and LFQM-123). Initially tests were performed in promastigotes of L. (L.) amazonensis, although all derivatives being more effective than their precursors, the best results were exhibited by LFQM-115, LFQM-118 and LFQM-123 (IC50-PRO = 4.90, 5.05 and 5.94 μg/mL, respectively). The toxicity to murine peritoneal macrophages was also evaluated, and it was found that derivatives LFQM-117, LFQM-120, LFQM-121, LFQM-122 and LFQM-123 were less cytotoxic (CC50 = 140.06, 87.10, 116.20 and > 160.00 μg/mL, respectively). The assessment of activity in amastigotes of L. (L.) amazonensis proceeded only with derivatives, being LFQM-120 the most effective in intracellular forms. The QlogP of benzophenone derivatives can be correlated with antipromastigote activity, as well as antiamastigote one. Since, derivatives that showed better activity profile in both forms of the parasite and in murine macrophages were selected (LFQM-116, LFQM-117, LFQM-119, LFQM -120 and LFQM-121) for the remaining tests. Was performed the dosage of nitric oxide (NO) in the culture supernatants of murine peritoneal macrophages infected with L. (L.) amazonensis. In this, it has been found that benzophenone derivatives LFQM-119 and LFQM-120 stimulated NO production, but only the derivative LFQM-120 induced a NO production equivalent to that produced by LPS. Some important enzymes in trypanosomatids (cruzain, oligopeptidase B, ornithine decarboxylase and trypanothione reductase) and representatives of major families of enzymes (papain and trypsin) were used in the analysis by molecular docking. Some of these were also used to assess the potential for experimental enzyme inhibition assay (papain, cruzain, trypsin and oligopeptidase B), the results exhibited by LFQM-116 were IC50 = 7.54, 8.44, 8.59 and 14.25 μg/ml, respectively. Additionally, it’s possible to check the multi-target action of the derivative LFQM-120. Therefore, this work shows the action of benzophenone derivatives in both forms of L. (L.) amazonensis, also describing the gain in biological activity with structural changes made to their precursors. Besides helping to understand possible mechanisms of action of these compounds and also allow the selection of the most effective compounds in vitro, which may then be used in future in vivo tests. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG
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Avaliação do metabolismo energético in vitro de formas epimastigotas de trypanossoma cruzi pré e pós tratamento específico com benzonidazol / In vitro energetic metabolism evaluation of epimastigote forms of trypanosoma cruzi before and after specific treatment with benzonidazole

Nogueira, Kamilla Soares 12 August 2015 (has links)
Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2018-03-06T20:14:19Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamilla Soares Nogueira - 2015.pdf: 1269034 bytes, checksum: 57bf041ae63db9b0edaaf9382d4a5698 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-03-07T12:13:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamilla Soares Nogueira - 2015.pdf: 1269034 bytes, checksum: 57bf041ae63db9b0edaaf9382d4a5698 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-07T12:13:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamilla Soares Nogueira - 2015.pdf: 1269034 bytes, checksum: 57bf041ae63db9b0edaaf9382d4a5698 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-08-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Chagas disease is a zoonosis of huge worldwide impact that has such as vector triatomine insects belonging to the hemiptera order and such as etiological agent Trypanosoma cruzi a flagellate that presents different evolutive manners. The evolutive manners of Trypanosoma cruzi can gain energy from various sources, for example glucose and amino acids. This capacity in gain energy from various sources lead to understand how this parasite can be able to adapt and survive in different environment, be it on the vector insects or on the vertebrate host. The aim of this work was evaluate the energetic metabolism in vitro of epimastigote forms of Trypanosoma cruzi pre and post-treatment with different concentrations of benznidazole. The parasites were grown in means of Liver infusion triptose - LIT and the organic acids referring to them energetic metabolism were measured for 3º, 6º, 9º e 12º days of growing. For evaluation of the drug effect on the parasite's metabolism was added in the growing medium the following concentrations: 100 μmolar, 50 μmolar, 25 μmolar, 12.5 μmolar e 6.25 μmolar. It was possible to detect organic acids referring to glycolytic path, oxidation of fatty acids, urea cycle and citric acid of parasites in every analyzed day. It was possible to observe that the largest concentrations of drug (25, 50 e 100μmolar) induced anaerobic way of energy production. This way before the non-detection of glicossomais and mitochondrias final products, it can conclude that one of the mechanisms of action of this drug is to prevent the aerobic metabolism of the parasite, inhibiting mitochondria paths and glicossomais. / A doença de Chagas é uma zoonose de grande impacto mundial que tem como vetor insetos triatomínios pertencentes à ordem hemíptera e como agente etiológico Trypanosoma cruzi um flagelado que apresenta diferentes formas evolutivas. As formas evolutivas de Trypanosma cruzi podem obter energia de diversas fontes, como por exemplo glicose e aminoácidos. Essa capacidade em obter energia de várias fontes leva a entender como este parasito consegue se adaptar e sobreviver em diferentes ambientes seja ele no inseto vetor ou no hospedeiro vertebrado. O objetivo deste trabalho foi avaliar o metabolismo energético in vitro de formas epimastigotas de Trypanosoma cruzi pré e pós tratamento com diferentes concentrações de benzonidazol. Os parasitos foram cultivados em meio Liver infusion triptose - LIT e os ácidos orgânicos referentes ao seu metabolismo energético foram quantificados aos 3º, 6º, 9º e 12º dias de cultura. Para avaliação do efeito do fármaco no metabolismo do parasito foi adicionado ao meio de cultura às seguintes concentrações: 100 μmolar, 50 μmolar, 25μmolar, 12.5 μmolar e 6.25μmolar. Foi possível detectar ácidos orgânicos referentes à via glicolítica, oxidação de ácidos graxos, ciclo da uréia e do ácido cítrico nos parasitos em todos os dias analisados. Foi possível observar que as maiores concentrações do fármaco (25, 50 e 100μmolar) induziram a via anaeróbia de produção de energia. Desta forma, diante da não detecção de produtos finais glicossomais e mitocondriais pode-se concluir que um dos mecanismos de ação deste fármaco é impedir o metabolismo aeróbio do parasito, inibindo vias mitocondriais e glicossomais.
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Análises proteômicas de conídios do fungo patogênico humano Paracoccidioides sp / Proteomic analisys of conidia of human pathogenic fungus Paracoccidioides sp

Moreira, André Luís Elias 22 August 2014 (has links)
Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-09T13:39:32Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - André Luís Elias Moreira - 2014.pdf: 2397469 bytes, checksum: 4a631b1ca63986a489d7e4bec3dfe90c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-09T13:41:32Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - André Luís Elias Moreira - 2014.pdf: 2397469 bytes, checksum: 4a631b1ca63986a489d7e4bec3dfe90c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-09T13:41:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - André Luís Elias Moreira - 2014.pdf: 2397469 bytes, checksum: 4a631b1ca63986a489d7e4bec3dfe90c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-08-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The paracoccidioidomycosis (PCM) is a systemic disease caused by the thermo dimorphic fungus Paracoccidioides spp.. The route of infection of the PCM occurs by the inhalation of conidia or mycelia fragments. Until now, no proteomic studies were performed with conidia of Paracoccidioides sp. In this sense, characterize the proteome of the conidia, may contribute to the detailed knowledge of the proteins expressed during the propagation phase and their potential roles in virulence and pathogenicity, providing possible targets for antifungal strategies. For the conidia production, the mycelia of isolate Pb01 (ATCC MYA-826) were cultured in potato agar medium during 90 days at 18 ºC. After production, the conidias were collected and purified. The proteins were extracted and subjected to tryptic digestion with subsequent identification by NanoUPLC-MSE. We identified a total of 242 proteins of conidia of Paracoccidioides. The in silico analysis were used to characterize the proteins present in Paracoccidioides conidia. Proteins as GAPDH, enolase, triosephosphate isomerase, and some glycoproteins like ECM33 and β-1,3-glucanosyltransferase gel2 were identified during analysis. Some of these have been described as adhesins in Paracoccidioides and in other pathogenic fungi. Were also identified proteins related to signal transduction pathways, such as: Ras GTPase, RhoA GTPase and calmodulin, described in other fungi involved in morphologic changes. Proteins related to evasion, defense and virulence of the fungus, such as HSP90, catalase, mitochondrial peroxiredoxin Prx1, have been described with functions related to temperature shifts or oxidative stress provided by the host environment, were also identified. These results highlight that Paracoccidioides conidia contain proteins that can contribute to its maintenance in the environment and have molecules related to important processes necessary for the initial steps of infection in the host. / A paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada pelo fungo termodimórfico Paracoccidioides spp.. A principal rota de infecção da PCM ocorre por inalação de conídios ou fragmentos de micélio. Até o momento, estudos proteômicos não foram realizados com conídios de Paracoccidoides sp. Neste sentido, caracterizar o proteoma do conídio poderá contribuir para o conhecimento detalhado das proteínas expressas durante a fase de propagação e seus potenciais papéis na virulência e patogenicidade, fornecendo prováveis alvos para estratégias antifúngicas. Para a produção de conídios, o micélio do isolado Pb01 (ATCC MYA-826) foi cultivado em meio ágar batata durante 90 dias a 18 ºC. Após a produção, os conídios foram coletados e purificados. As proteínas foram extraídas e submetidas a digestão tríptica com subsequente identificação por NanoUPLC-MSE. Foram identificados um total de 242 proteínas de conídios de Paracoccidioides. As análises in silico foram utilizadas para caracterizar as proteínas presentes em conídios de Paracoccidioides. Proteínas como a GAPDH, enolase, triosefosfato isomerase e algumas glicoproteínas como ECM33 e β-1,3-glicanosiltransferase Gel2 foram identificadas durante as análises. Algumas destas já foram descritas como adesinas em Paracoccidioides e em outros fungos patogênicos. Também foram identificadas proteínas relacionadas as vias de transdução de sinais, tais como: Ras GTPase, RhoA GTPase e calmodulina, descritas em outros fungos envolvidas em alterações morfológicas. Proteínas relacionadas à evasão, defesa e virulência do fungo, tais como HSP90, catalase B, peroxiredoxina mitocondrial Prx1, foram descritos com funções relacionadas a mudanças de temperatura ou estresse oxidativo proporcionado pelo ambiente hospedeiro, também foram identificados. Esses resultados demonstram que o conídio de Paracoccidioides contem proteínas que podem contribuir para sua manutenção no meio ambiente e possuem moléculas relacionadas a processos importantes necessários para os passos iniciais da infecção no hospedeiro.
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Comunidades parasit?rias de tr?s esp?cies de peixes carn?voros do Reservat?rio de Tr?s Marias, Alto Rio S?o Francisco, Minas Gerais, Brasil. / Parasite community of three species of carnivorous fishes from Tr?s Marias Reservoir, Upper S?o Francisco River, Minas Gerais, Brazil.

Santos, Michelle Daniele dos 07 March 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T20:15:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008- Michelle Daniele dos Santos.pdf: 4513796 bytes, checksum: 6e30b689e7e80bd061f7b0549c5982dc (MD5) Previous issue date: 2008-03-07 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / This work had as purposes to identify the metazoan parasite species of three species of carnivorous fishes from the Tr?s Marias Reservoir and analyze the structure of the component parasite community, besides describe the dynamic of the parasite infracommunities and their interspecific relations. A total of 388 fishes were collected in the Tr?s Marias Reservoir, along the influence of Borrachudo River (18?12'59"S, 45?17'34"W), Upper S?o Francisco River, Minas Gerais State, between July and August, 2004 and 2005 (dry period) and January, 2004 and December, 2004 to January, 2005 (wet period). Of these total, 108 specimens were of Pygocentrus piraya (Cuvier, 1819) and 168 of Serrasalmus brandtii (L?tken, 1875) (Characiformes, Characidae, Serrasalminae) and 112 of Cichla kelberi Kullander & Ferreira, 2006 (Perciformes, Cichlidae). At least 27 taxa of metazoan parasites were found among the three species of fishes analyzed: one of Digenea: Austrodiplostomum sp. (metacercariae); seven of Monogenea: Rhinoxenus sp., Amphithecium sp., Gussevia sp., Anacanthorus spp. (at least three species) and one unidentified species of Gyrodactylidae; three of Eucestoda: an unidentified plerocercoid, Proteocephalus macrophallus (Diesing, 1850) and Proteocephalus microscopicus Woodland, 1935; ten of Nematoda: being five species of adult specimens Procamallanus inopinatus Travassos, Artigas & Pereira, 1928, Cystidicoloides fischeri (Travassos, Artigas & Pereira, 1928), Capillostrongyloides sentinosa (Travassos, 1927), Rhabdochona sp. and Philometra sp., four species of larval specimens Hysterothylacium sp., Contracaecum sp. Type 1, Spiroxys sp. and Goezia sp. and one juvenile specimen of Spinitectus rodolphiheringi Vaz & Pereira, 1934; four of Copepoda: Brasergasilus bifurcatus Santos, Thatcher & Brasil-Sato, 2007, Gamidactylus sp., Ergasilus sp.1 and Ergasilus sp.2; one of Isopoda: Braga fluviatilis Richardson, 1911 and one of Branchiura: Argulus multicolor Stekhoven, 1937. Six species of endoparasites were common in the three parasite fauna analyzed (P. inopinatus, C. sentinosa, Hysterothylacium sp., Contracaecum sp., Spiroxys sp. and Goezia sp.). The parasite species more prevalent and considered core species in P. piraya were Anacanthorus spp., B. bifurcatus and P. inopinatus, in S. brandtii were Anacanthorus spp. and in C. kelberi didn t have core species. Pygocentrus piraya presented a rich parasite fauna among the carnivorous fishes and that of S. brandtii was more related with it, being intermediate between the communities of P. piraya and C. kelberi. The pair Pygocentrus piraya and S. brandtii had high endoparasitic qualitative similarity, while S. brandtii and C. kelberi had high quantitative similarity. The structure of the metazoan parasite fauna of P. piraya, S. brandtii and C. kelberi was similar, due of few core species, limited number of secondary species and the presence of numerous satellite species, low number of significant interspecific associations, besides the absence of dominance. All these characteristics classify the three parasite fauna as isolationist evidencing the availability of niches for possible establishment of other parasite species. This is the first report of all the parasite species in respective hosts, except for P. inopinatus and Contracaecum sp., thus expanding the host list and their known geographical distribution to the S?o Francisco River Basin. / Este trabalho teve como objetivos identificar as esp?cies de parasitos metazo?rios de tr?s esp?cies de peixes carn?voros do Reservat?rio de Tr?s Marias, analisar a estrutura das comunidades parasit?rias componentes e descrever a din?mica das infracomunidades parasit?rias e seus relacionamentos interespec?ficos. Um total de 388 peixes foram coletados no Reservat?rio de Tr?s Marias, na ?rea de influ?ncia do Rio Borrachudo (18?12'59"S, 45?17'34"W), Alto Rio S?o Francisco, Estado de Minas Gerais, no per?odo compreendido entre julho a agosto de 2004 e 2005 (per?odo de estiagem) e janeiro de 2004 e dezembro de 2004 a janeiro de 2005 (per?odo chuvoso). Deste total, 108 esp?cimes eram de Pygocentrus piraya (Cuvier, 1819) e 168 de Serrasalmus brandtii (L?tken, 1875) (Characiformes, Characidae, Serrasalminae) e 112 de Cichla kelberi Kullander & Ferreira, 2006 (Perciformes, Cichlidae). Pelo menos 27 esp?cies de parasitos metazo?rios foram encontradas nas tr?s comunidades componentes. Em Digenea, foram encontradas metacerc?rias de Austrodiplostomum sp.; em Monogenea sete esp?cies, Rhinoxenus sp., Amphithecium sp., Gussevia sp., Anacanthorus spp. (pelo menos tr?s esp?cies) e uma esp?cie n?o identificada alocada em Gyrodactylidae; em Eucestoda tr?s esp?cies, plerocerc?ides n?o identificados, Proteocephalus macrophallus (Diesing, 1850) e Proteocephalus microscopicus Woodland, 1935; em Nematoda cinco esp?cies cujos esp?cimes eram adultos, Procamallanus inopinatus Travassos, Artigas & Pereira, 1928, Cystidicoloides fischeri (Travassos, Artigas & Pereira, 1928), Capillostrongyloides sentinosa (Travassos, 1927), Rhabdochona sp. e Philometra sp., quatro esp?cies cujos esp?cimes eram larvais, Hysterothylacium sp., Contracaecum sp. Tipo 1, Spiroxys sp. e Goezia sp. e uma esp?cie cujo esp?cime era juvenil, Spinitectus rodolphiheringi Vaz & Pereira, 1934; em Copepoda, quatro esp?cies: Brasergasilus bifurcatus Santos, Thatcher & Brasil-Sato, 2007, Gamidactylus sp., Ergasilus sp.1 e Ergasilus sp.2; em Isopoda, Braga fluviatilis Richardson, 1911 e em Branchiura, Argulus multicolor Stekhoven, 1937. Seis esp?cies de endoparasitos foram comuns aos tr?s hospedeiros: P. inopinatus, C. sentinosa, Hysterothylacium sp., Contracaecum sp., Spiroxys sp. e Goezia sp. As esp?cies mais prevalentes e consideradas centrais nas comunidades foram em P. piraya, Anacanthorus spp., B. bifurcatus e P. inopinatus; em S. brandtii somente Anacanthorus spp. e em C. kelberi n?o houve esp?cie central. Pygocentrus piraya apresentou fauna parasit?ria mais rica, tendo sido a comunidade parasit?ria de S. brandtii a mais pr?xima, e que estabeleceu um n?vel intermedi?rio de riqueza e diversidade parasit?rias entre as comunidades de P. piraya e C. kelberi. Houve maior similaridade qualitativa de endoparasitos entre o par P. piraya - S. brandtii e maior similaridade quantitativa para o par S. brandtii - C. kelberi. A estrutura das comunidades parasit?rias de P. piraya, S. brandtii e C. kelberi foi semelhante, pela baixa ocorr?ncia de esp?cies centrais, pela presen?a de v?rias esp?cies sat?lites, poucas associa??es interespec?ficas significativas, al?m da aus?ncia de domin?ncia. Todas essas caracter?sticas permitiram caracterizar as tr?s comunidades como isolacionistas, evidenciando disponibilidade de nichos para poss?vel estabelecimento de outras esp?cies de parasitos. O registro das esp?cies encontradas nos respectivos hospedeiros, com exce??o de P. inopinatus e Contracaecum sp., possibilitou ampliar a lista de hospedeiros e a extens?o da distribui??o geogr?fica conhecida delas para a Bacia do Rio S?o Francisco.
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Avalia??o experimental e estudos a campo relacionados a Theileria equi (Laveran, 1901) Mehlhorn & Schein, 1998 em Canis familiaris no Munic?pio de Serop?dica Estado do Rio de Janeiro, Brasil / Experimental Assessment and Field studies about Theileria equi (Laveran, 1901) Mehlhorn & Schein, 1998 in Canis familiaris in municipality of Serop?dica State of Rio de Janeiro Brazil

Silva, Gil Vicente Oliveira da 19 April 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006-Gil Vicente Oliveira da Silva.pdf: 2177431 bytes, checksum: 46c0c2291cd76db4f34ccb7eeaa34c10 (MD5) Previous issue date: 2006-04-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The equines piroplasmosis are diseases that may cause debilitating progress or fatal episodies, its etiologic agents are the species Theileria equi and Babesia caballi. The maintenance of these species in nature, as well as the widespread ability, are limitants factor to genetic improvement of equines herds in view of the internationals restrictions referring the accomited animals transit with these patogens. In Brazil, in economic terms these patogens have a great importance because the national erd is stimated in 5,800,000 of animals, that dropped with the asinines, arrive in 8,300,000 of animals. The eluciding of links to the natural disease history, overall the ones that propitiate the perpetuation of it in our herds, becomes urgent and necessary. Note that some species have a sight convivence with equines, among it is the Canis familiaris. With purpose to evaluate the possibility of C. familiaris to be involved on epizootiologic natural chain of T. equi, we used two boarding: experimental and epizootiologic. For the first, using material from seventeen dogs and puppies that were divided in three groups: G1 Puppies; G2 Dogs; G3 immunossuprimitted dogs and puppies, both ixodids-free since birth until end of experimental evaluations referring the possibility to C. Familiaris to be a able host to T. equi. to evaluate the occurrence of T. equi in these animals, were used some diagnostic tools, as follow: parasitologic aspect blood smears in immersion optical microscopy (IOM); sorology: using research of antibodies against T. equi, with immunofluorescence indirect test (IFT); and molecular using four differents protocols of polimerase chain reaction (PCR), in follow material: blood with EDTA; fragment of tissues; Boophilus microplus nymphs and Rhipicephalus sanguineus in adult stage. In the second moment, evaluated, for three times, twelve dogs from enzootic stability area to T. equi with a sight convivence with horses since birth occasions, using for it IMO and IFT, forming G4 group. The results were negatives in all observations. Concluding that the T. equi specie did not show the ability to establishment and development in C. Familiaris; and that specie do not involved in epizootiologic natural chain of T. equi, in municipality of Seropedica, State of Rio de Janeiro, Brazil. / As piroplasmoses eq?inas s?o doen?as que variam de progress?o debilitante a fatal, tendo como agentes causais ?s esp?cies Theileria equi e Babesia caballi. A manuten??o dessas esp?cies na natureza, bem como a habilidade de dispers?o das mesmas, s?o fatores limitantes quanto ao melhoramento gen?tico dos plant?is eq?inos tendo em vista as restri??es internacionais referentes ao tr?nsito de animais acometidos com estes pat?genos. No Brasil, em termos econ?micos estas parasitoses assumem grande vulto tendo em vista que o plantel nacional de eq?inos ? estimado em 5.800.000 de cabe?as que somado aos asininos chega-se ao total de 8.300.000. A elucida??o dos elos referentes ? hist?ria natural da doen?a, sobretudo os que propiciam a perpetua??o da mesma em nossos plant?is, torna-se urgente e necess?rio. Nota-se que algumas esp?cies mant?m um conv?vio estreito com eq??deos dentre as quais a Canis familiaris. Com o prop?sito de avaliar a possibilidade da esp?cie C. familiaris estar envolvida na cadeia epizootiol?gica da esp?cie T. equi, utilizamos duas abordagens: experimental e epizootiol?gica. Para a primeira, utilizando materiais procedentes de dezessete c?es adultos e filhotes os quais foram divididos em tr?s grupos: G1 C?es filhotes; G2 C?es adultos; G3 C?es adultos e filhotes imunossuprimidos, mantidos livres de ixod?deos, desde a ocasi?o do nascimento at? o t?rmino das avalia??es experimentais referentes ? possibilidade da esp?cie C. familiaris ser hospedeira vi?vel de T. equi. Para avaliar o estabelecimento da T. equi nestes animais, foram utilizadas para isto as seguintes ferramentas diagn?sticas: aspecto parasitol?gico - esfrega?os sangu?neos ? microscopia ?ptica de imers?o; sorol?gico - por meio de pesquisa de anticorpos anti-T. equi, utilizando a rea??o de imunofluoresc?ncia indireta (RIFI); e molecular, utilizando quatro diferentes protocolos de rea??o de polimeriza??o em cadeia (PCR), nos seguintes materiais: sangue total com EDTA; fragmentos de diversos ?rg?os; ninfas de Boophilus microplus e adultos de Rhipicephalus sanguineus. No segundo momento, Avaliou-se, por tr?s vezes, doze c?es provenientes de ?rea de estabilidade enzo?tica para T. equi com estreita conviv?ncia com cavalos desde a ocasi?o de seus nascimentos, utilizou-se para isto a MOI e RIFI, formando o grupo G4. Os resultados foram negativos em todas as observa??es. Conclui-se que a esp?cie T. equin?o se mostrou h?bil quanto ao estabelecimento e desenvolvimento em C. familiaris, e que esta esp?cie n?o est? envolvida na cadeia epizootiol?gica natural da T. equi, no Munic?pio de Serop?dica, Estado do Rio de Janeiro, Brasil.
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Estudos biol?gicos de Rhipicephalus sanguineus e intera??o Rickettsia rickettsii, R. sanguineus e c?es em condi??es laboratoriais. / Biological studies on Rhipicephalus sanguineus and interactions of Rickettsia rickettsii, R. sanguineus and dogs under laboratory conditions.

Piranda, Eliane Mattos 29 February 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008- Eliana Mattos Piranda.pdf: 1406016 bytes, checksum: c9a77c6cc1de7bc1adde1a6eb06a7a84 (MD5) Previous issue date: 2008-02-29 / Funda??o de Amparo a Pesquisa do Estado de S?o Paulo / The bacterium Rickettsia rickettsii is the etiological agent of an acute, severe human disease called Rocky Mountain Spotted Fever in the United States or Brazilian Spotted Fever in Brazil. The infection occurs through the tick bite. Reports of clinical illness on dogs due to this agent have been restricted to the United States. The brown dog tick or kennel tick, Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) is the most widespread tick species throughout the tropics and subtropics. Biological studies on ticks are very important to the tick-borne pathogens transmission knowledge. For this purpose, the present study evaluated experimental infection of dogs with a Itaia?u (Mogi das Cruzes/ S?o Paulo, Brasil) strain of R. rickettsii and some biological aspects of Rhipicephalus sanguineus. Initially, dogs were infected with R. rickettsii its susceptibility and the role of R. sanguineus as a vector was verified. In the second part the viability of adults ticks (R. sanguineus) on three different temperatures were tested. Ticks were maintained under the controlled conditions of 18 ? 1&#9702;C, 27 ? 1&#9702;C e 32 ? 1&#9702;C e 80 ? 5% (temperature ? humidity) for different times without feed. The dogs were susceptible to R. rickettsii infection. R. sanguineus was able to acquire the pathogen and to transmit R. rickettsii to guinea pigs. Based on the second part s results, R. sanguineus viability is affected by both, temperature and unfed time. / A bact?ria Rickettsia rickettsii ? o agente etiol?gico de uma doen?a aguda e severa em humanos denominada Rocky Mountain Spotted Fever nos Estados Unidos e Febre Maculosa Brasileira no Brasil. A infec??o se d? pela picada de carrapatos. Relatos da doen?a cl?nica nos c?es s?o restritos aos EUA. O carrapato marrom do c?o ou carrapato dos canis, Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806), ? a esp?cie de carrapato mais freq?ente nos tr?picos e subtr?picos. Estudos da biologia de carrapatos s?o de grande import?ncia para o entendimento da transmiss?o de biogentes. O objetivo do presente trabalho ? avaliar experimentalmente a infec??o nos c?es com R. rickettsii cepa Itaia?u (Mogi das Cruzes/ S?o Paulo, Brasil) e aspectos da biologia de Rhipicephalus sanguineus. Na primeira etapa, c?es foram infectados com R. rickettsii e avaliou-se a susceptibilidade dos animais a infec??o e o comportamento de R. sanguineus como vetor. No segundo experimento, adultos de R. sanguineus tiveram a viabilidade de infestar novos hospedeiros analisada. Os carrapatos foram mantidos a18 ? 1&#9702;C, 27 ? 1&#9702;C e 32 ? 1&#9702;C e 80 ? 5% UR por tr?s per?odos de jejum. Observou-se que os c?es s?o suscept?veis a infec??o por R. rickettsii cepa Itaia?u. Foi verificado que R. sanguineus se infectam com R. rickettsii e s?o capazes de transmitir o agente a cobaias. Baseado nos resultados do segundo experimento, concluem-se que R. sanguineus tem a viabilidade influenciada pela temperatura e tempo de jejum.
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Caracteriza??o dos oocistos de Tyzzeria parvula (K?tlan, 1933) Klimes, 1963 (Apicomplexa: Eimeriidae) do ganso dom?stico (Anser anser) no Brasil. / Characterization of Tyzzeria parvula (Kotlan, 1933) Klimes, 1963 oocysts (Apicomplexa: Eimeriidae) of the greylag goose (Anser anser Linnaeus, 1758) in Brazil.

Berto, Bruno Pereira 14 February 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T20:17:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008- Bruno Pereira Berto.pdf: 2687710 bytes, checksum: 59bb1034b221236a652de238a6f587e5 (MD5) Previous issue date: 2008-02-14 / The principal objective of this research was to describe an coccidium found in the feces of greylag goose Anser anser Linnaeus, 1758. Based on morphometric analysis of these sporulated oocysts, they were classified as Tyzzeria parvula (K?tlan, 1933) Klimes, 1963. This coccidium was described for the firt time in goose of Brazil at rural and urban areas from the State of Rio de Janeiro. The oocysts were sub-spherical to ellipsoidal, measuring 11.28 to 16.44 for 9.15 to 14.44&#956;m, with double-layer and without micropile, polar granule and sporocysts. The residuum was observed around the sporozoites or forming a granular mass. Eigth sporozoites were presents with one of the extremities rounded, and other one narrows and lightly curved. The sensitivity test in Cairina moschata and Anas platyrhynchos was done, however T. parvula did not develop infection. Through the comparison of the sporulated oocysts from goose of the rural and urban areas of the state of the Rio de Janeiro, it could be concluded that influences of the breeding systems and continuous natural infection degree in the greylag goose (A. anser) were responsible for pleomorphism of the dimensions of the T. parvula sporulated oocysts found in the feces of domestic goose of Brazil. / Este trabalho teve como objetivo principal descrever um cocc?dio encontrado nas fezes de gansos dom?sticos Anser anser Linnaeus, 1758, identificado com base na an?lise morfom?trica de seus oocistos esporulados como Tyzzeria parvula (K?tlan, 1933) Klimes, 1963. Este protozo?rio ? descrito pela primeira vez no Brasil em ?reas urbana e rural do estado do Rio de Janeiro. Os oocistos observados tinham apar?ncia sub-esf?rica a elips?ide, medindo cerca de 11,28 a 16,44 por 9,15 a 14,44&#956;m, com parede dupla e sem micr?pila, gr?nulo polar e esporocisto. O corpo residual foi observado ao redor dos esporozo?tas ou formando uma massa granular. Os esporozo?tas, em n?mero de oito, tinham uma das extremidades arredondada, e a outra estreita e levemente curva. O teste de susceptibilidade nos anat?deos Cairina moschata e Anas platyrhynchos foi realizado, entretanto T. parvula n?o desenvolveu infec??o. Atrav?s da compara??o dos oocistos provenientes dos gansos das regi?es rural e urbana do estado do Rio de Janeiro, p?de-se concluir que as influ?ncias dos sistemas de cria??o e o repetitivo grau de infec??o natural sobre os gansos dom?sticos A. anser foram respons?veis pelo pleomorfismo dos oocistos espEste trabalho teve como objetivo principal descrever um cocc?dio encontrado nas fezes de gansos dom?sticos Anser anser Linnaeus, 1758, identificado com base na an?lise morfom?trica de seus oocistos esporulados como Tyzzeria parvula (K?tlan, 1933) Klimes, 1963. Este protozo?rio ? descrito pela primeira vez no Brasil em ?reas urbana e rural do estado do Rio de Janeiro. Os oocistos observados tinham apar?ncia sub-esf?rica a elips?ide, medindo cerca de 11,28 a 16,44 por 9,15 a 14,44&#956;m, com parede dupla e sem micr?pila, gr?nulo polar e esporocisto. O corpo residual foi observado ao redor dos esporozo?tas ou formando uma massa granular. Os esporozo?tas, em n?mero de oito, tinham uma das extremidades arredondada, e a outra estreita e levemente curva. O teste de susceptibilidade nos anat?deos Cairina moschata e Anas platyrhynchos foi realizado, entretanto T. parvula n?o desenvolveu infec??o. Atrav?s da compara??o dos oocistos provenientes dos gansos das regi?es rural e urbana do estado do Rio de Janeiro, p?de-se concluir que as influ?ncias dos sistemas de cria??o e o repetitivo grau de infec??o natural sobre os gansos dom?sticos A. anser foram respons?veis pelo pleomorfismo dos oocistos esporulados de T. parvula encontrados nas fezes de gansos dom?sticos no Brasil. Palavras chave: Cocc?dio; Anat?deos; Coccidiose; Anseriformes.orulados de T. parvula encontrados nas fezes de gansos dom?sticos no Brasil.

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