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Efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana na descontaminação de alvéolos com lesão periapical imediatamente pós-exodontia / Effects of antimicrobial photodynamic therapy on the decontamination of alveoli with periapical lesion immediately post-exodontia

Vasconcelos, Ximena Trévia Prado de 26 February 2014 (has links)
VASCONCELOS, X. T. P. Efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana na descontaminação de alvéolos com lesão periapical imediatamente pós-exodontia. 2014. 66 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-23T13:44:16Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_xtpvasconcelos.pdf: 1121415 bytes, checksum: e79052a0497f5cd093e5b6397372dacb (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-23T13:44:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_xtpvasconcelos.pdf: 1121415 bytes, checksum: e79052a0497f5cd093e5b6397372dacb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-23T13:44:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_xtpvasconcelos.pdf: 1121415 bytes, checksum: e79052a0497f5cd093e5b6397372dacb (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / Advances in dentistry, with special attention to the use of immediate implants, have aroused interest in reviewing the aspects related to the subject, such as success and survival rate, treatment protocols for contaminated sites and microbiota found. The present work contains 2 chapters. In the first chapter a systematic review of scientific articles in the English language was performed using the terms immediate implant placement, fresh socket, dental implants, dated between 2003 and 2013, in the databases Bireme, Medline and The Cochrane Library. A total of 131 titles were found, of which 23 abstracts were selected and 6 articles fulfilled the inclusion criteria, which were: prospective randomized clinical trials, with a minimum sampling of 10 immediate implants on contaminated alveoli and a minimum of 12 months of follow-up. It was verified that the success rate of the immediate implants in contaminated sites is around 90 to 100% and the clinical protocol includes the debridement of the alveolus after exodontia and systemic antibiotic therapy pre and postoperative. The second chapter corresponds to a controlled clinical study, in which the effect of antimicrobial photodynamic therapy (TFA) mediated by 0.005% (AM) methylene blue associated with 90-second irradiation with low power laser, 40 mW, of 660 Nm, in the decontamination of periapical lesion dental alveoli after exodontia. We selected 16 patients with indication of extraction of 2 uniradicular elements. After the exodontia, blood samples were collected by inserting sterile absorbent paper cones into each well, which were stored in tubes containing Reduced Transport Fluid. One of the wells was filled with the AM solution and, after 5 minutes, irradiated (P + L +). The other well was filled with AM solution for 5 minutes without irradiation (P + L-). After the intervention, new blood collection was performed. Samples were diluted and seeded in triplicate in Petri dishes containing Blood Agar and enriched BHI. The plates with Blood Agar were incubated in aerobiose for 2 days and those with Brain Heart Infusion (BHI) in anaerobic for 7 days at 37 ° C. The colony-forming units were counted and the data were converted into base 10 logarithms, which were submitted to paired Student's t-test (α = 0.05). The results obtained showed a reduction in the CFU / mL count for aerobic (2.5 log) and anaerobic (1.5 log) bacteria in the P + L + groups, but with no statistically significant difference in relation to the P + L- ( P> 0.05). TFA showed a tendency to reduce contamination in alveoli with periapical lesion, just as AM showed to have an antimicrobial potential in these lesions, independently of laser irradiation. More studies are required with different concentrations of AM and different potencies and times of irradiation of the light source, in order to obtain greater effectiveness for a decontamination protocol alternative to the need for antibiotic therapy reported in the literature. / Os avanços da Odontologia, com especial atenção ao uso dos implantes imediatos, despertou o interesse em revisar os aspectos relacionados ao tema, como taxa de sucesso e sobrevivência, protocolos de tratamento para sítios contaminados e microbiota encontrada. O presente trabalho contém 2 capítulos. No primeiro capítulo foi realizada uma revisão sistemática de artigos científicos na língua inglesa, utilizando os termos immediate implant placement, fresh socket, dental implants, datados entre 2003 e 2013, nas bases de dados Bireme, Medline e The Cochrane Library. Foram encontrados 131 títulos, dos quais 23 resumos foram selecionados e 6 artigos preencheram os critérios de inclusão, que foram: estudos clínicos randomizados prospectivos, com amostragem mínima de 10 implantes imediatos sobre alvéolos contaminados e mínimo de 12 meses de acompanhamento. Foi verificado que a taxa de sucesso dos implantes imediatos em sítios contaminados fica em torno de 90 a 100% e o protocolo clínico inclui o debridamento do alvéolo após exodontia e antibioticoterapia sistêmica pré e pós operatória. O segundo capítulo corresponde a um estudo clínico controlado, em que foi avaliado o efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFA) mediada por azul de metileno 0,005% (AM) associado à irradiação por 90 segundos com laser de baixa potência, 40 mW, de 660 nm, na descontaminação de alvéolos dentários com lesão periapical, após exodontia. Foram selecionados 16 pacientes com indicação de extração de 2 elementos unirradiculares. Após a exodontia, foram coletadas amostras de sangue, inserindo-se cones de papel absorvente estéreis em cada alvéolo, que foram armazenados em tubos contendo Reduced Transport Fluid. Um dos alvéolos foi preenchido com a solução AM e, após 5 minutos, irradiado (P+L+). O outro alvéolo foi preenchido com solução AM por 5 minutos, sem irradiação (P+L-). Após a intervenção, nova coleta de sangue foi realizada. As amostras foram diluídas e semeadas em triplicata em placas de Petri contendo Ágar Sangue e BHI enriquecido. As placas com Ágar Sangue foram incubadas em aerobiose por 2 dias e as com Brain Heart Infusion (BHI) em anaerobiose por 7 dias, a 37°C. Realizou-se a contagem das unidades formadoras de colônias e a conversão dos dados em logaritmos de base 10, que foram submetidos ao teste t de Student pareado (α=0,05). Os resultados obtidos mostraram, nos grupos P+L+, redução na contagem de UFC/mL para bactérias aeróbias (2,5 log) e anaeróbias (1,5 log), porém sem diferença estatisticamente significante em relação aos grupos P+L- (p>0,05). A TFA mostrou uma tendência em reduzir a contaminação em alvéolos com lesão periapical, assim como o AM demonstrou ter um potencial antimicrobiano nestas lesões, independentemente da irradiação com laser. Mais estudos são necessários com diferentes concentrações de AM e diferentes potências e tempos de irradiação da fonte de luz, a fim de se obter maior eficácia para um protocolo de descontaminação alternativo à necessidade de antibioticoterapia relatada na literatura.
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Melaninas quimicamente modificadas

Costa, Thiago Guimarães January 2015 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-01T04:09:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 333866.pdf: 5692100 bytes, checksum: efff527b4aa730fbc990bdab2a4fd67a (MD5) Previous issue date: 2015 / Melaninas são bio-oligômeros de ocorrência natural que podem ser encontradas na pele, no cabelo, nos olhos, no cérebro e também em alguns animais marinhos. Entretanto, a extração das melaninas naturais nem sempre é viável devido ao custo elevado dos reagentes utilizados e normalmente obtém-se um baixo rendimento no processo. Neste contexto, destacam-se as melaninas sintéticas, que podem ser produzidas em laboratório com um custo mais baixo e considerável rendimento.Um dos precursores das melaninas sintéticas é o L-3,4-dihidroxifenilalanina conhecido como L-DOPA que livre em condições reacionais produz a eumelanina, responsável pela coloração escura e em presença de cisteína produz a feomelanina, que dá origem a coloração mais clara, esses precursores se agregam entre 3 a 9 unidades indol para formar a estrutura oligomérica da melanina.Neste contexto, este trabalho tem por objetivo descrever a preparação, purificação e caracterização de melaninas quimicamente modificadas pelos aminoácidos serina, treonina e cisteína (feomelaninas), a fim de se obter os compostos ser-DOPA, thr-DOPA e cys-DOPA respectivamente e seus complexos de Cu(II) e Zn(II), bem como descrever as interações com o corante catiônico azul de metileno avaliando suas toxicidades e atividades antioxidantes.A caracterização espectroscópica das melaninas modificadas mostrou a presença de três grupamentos majoritários: ácido carboxílico, quinona-imina e catecol. Estudos em solução por titulação potenciométrica mostraram a presença do grupamento tiol na melanina cys-DOPA, e todas as melaninas apresentaram baixa toxicidade em células NIH-3T3 com uma relevante atividade antioxidante tendo destaque para a ser-DOPA que apresentou um EC50 para o ensaio de DPPH de 1,02 µg mL-1, valor esse próximo dos padrões utilizados.Os estudos de interação com os íons Cu(II) e Zn(II) revelaram que a formação dos complexos é altamente dependente do pH, em que na faixa ácida para a ser-DOPA e thr-DOPA ocorre a formação das espécies [M(QI)+] e [M(Ac)+], com o aumento do pH detectou-se a espécie [M(Cat)] e [M(QI)2], e em valores de pH acima de 8 as espécies [M(Cat)22-] e [M(QI)(Cat)-] foram detectadas. Já com a melanina cys-DOPA ocorre a formação das espécies [M(Tiol)+], [M(QI)+] e [M(QI)(Tiol)], com o aumento do pH foi evidenciado as espécies [M(Cat)] e [M(Cat)(Tiol)-], sendo esta última não detectada para Cu(II), e em valores de pH acima de 7 as espécies [M(QI)2] e [M(Cat)22-] foram observadas.Todos os complexos obtidos apresentaram uma baixa toxicidade em células HUVEC, e também uma relevante atividade antioxidante com destaque para o complexo cys-DOPA-Zn(II) com valor de 25,24 µg mL-1 para o ensaio de DPPH.As interações com o corante azul de metileno foram caracterizadas por métodos espectroscópicos, e os resultados obtidos revelaram que a adsorção do azul de metileno pelas melaninas é dependente do pH da solução. A maior adsorção ocorreu em pH 7 e 6 para a ser-DOPA e cys-DOPA respectivamente e a melanina thr-DOPA apresentou baixos valores de adsorção em toda faixa de pH. O modelo cinético que apresentou a melhor correlação entre os dados experimentais foi o de pseudo-segunda ordem para todos os sistemas estudados e os dados de equilíbrio de adsorção foram melhor correlacionados pela isoterma de Langmuir em sua forma linear apresentando qm de 162,07 e 109,89 mg g-1 para as melaninas cys-DOPA e ser-DOPA respectivamente.<br> / Abstract : Melanins are bio-oligomers occurring naturaly. They can be found in skin, hair, eyes, brain, and also in some marine animals, however, the extraction of natural melanins is not always feasible due to the high cost of the reagents used and the low yield in the process. In this context, synthetic melanins can be a praticle solution, which can be produced in the laboratory with a low cost and a high considerable yield.One of the synthetic melanins precursor is L-3,4-dihydroxyphenylalanine, known as L-DOPA that when free in reaction conditions produces eumelanin, responsible for the dark coloring, and in the presence of cysteine produces pheomelanin, which leads to a lighter color pigment, these products are aggregated in 3 to 9 indol units to form the oligomeric structure of melanin.In this context, this work aims to describe the preparation, purification and characterization of melanins chemically modified by the amino acids serine, threonine and cysteine (pheomelanins) resulting in compounds ser-DOPA, thr-DOPA and cys-DOPA respectively, and their complexes with Cu(II) and Zn(II) metal ions, evaluating their antioxidant activities and toxicities; as well as interactions with the cationic dye methylene blue.The spectroscopic characterization of the modified melanins showed the presence of three major groups: carboxylic acid, quinone-imine and catechol, and studies in solution by potentiometric titration showed the presence of thiol grouping cys-DOPA melanin, all melanins presented low toxicity in NIH-3T3 cells and a significant antioxidant activity with emphasis on ser-DOPA which showed an EC50 = 1.02 µg mL-1 for the DPPH assay, a value close to the standards used in this work.Interaction studies with Cu(II) and Zn(II) ions proved that the formation of complexes is highly pH dependent, where in the acidic range for ser-DOPA and thr-DOPA the species [M(QI)+] and [M(Ac)+] were formed, the increase of the pH leads to the formation of [M(Cat)] and [M(QI)2] species and pH above 8 the [M(Cat)22-] and [M(QI)(Cat)-] species were detected. On the other hand, in the cys-DOPA system at acidic pH the species [M(Tiol)+], [M(QI)+] and [M(QI)(Tiol)] were formed, with the increase of the pH the [M(Cat)] and [M(Cat)(Tiol)-] species were evidenced, the latter is undetected for Cu(II) system, and for pH above 7 the species [M(QI)2] e [M(Cat)22-] were observerd.All complexes showed low toxicity in HUVEC cells, and also showed a significant antioxidant activity, highlighting for the complex cys-DOPA-Zn(II) with a value of 25.24 µg mL-1 for the DPPH assay.The adsorption of methylene blue by melanins was characterized by spectroscopic methods, and the results showed that adsorption of methylene blue is dependent on the pH solution. The higher adsorption occurred in pH 7 and 6 for the ser-DOPA and cys-DOPA melanin respectively. Thr-DOPA showed low adsorption values independently of the pH. The kinetic model that showed the best correlation omong the experimental data was the pseudo-second order for all systems studied and the adsorption equilibrium data were best correlated with the linear Langmuir isotherm presenting qm values 162.07 and 109.89 mg g-1 for cys-DOPA melanin ser-DOPA respectively.
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Fotossensibilização de biofilmes formados em resinas para base de prótese – in vitro / Photosensitization of in vitro biofilms formed on denture base resin

Gomes, Carlos Eduardo de Albuquerque 16 March 2012 (has links)
GOMES, C. E. A. Fotossensibilização de biofilmes formados em resinas para base de prótese – in vitro. 2012. 45 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-05-16T12:46:08Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_ceagomes.pdf: 266670 bytes, checksum: c5aa068325778aa088920e4f9a4b6845 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-05-16T12:46:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_ceagomes.pdf: 266670 bytes, checksum: c5aa068325778aa088920e4f9a4b6845 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-16T12:46:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_ceagomes.pdf: 266670 bytes, checksum: c5aa068325778aa088920e4f9a4b6845 (MD5) Previous issue date: 2012-03-16 / This study evaluated the effect of PDT (Photodynamic Therapy) against Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans biofilms formed on the surface of acrylic resin specimens. Methods: The PDT consisted in the application of 0.05% methylene blue on the specimens, associated to irradiation with a light-emitting diode (LED) of 630nm and 150mW. The energy doses provided by the LED were set to 10 (a) and 30 (b) J/cm2. For each microorganism, the biofilm formation occurred during immersion of the specimens in a culture medium broth containing 106 colony-forming units (CFU)/ml for 48 hours at 37°C. But, at first, the specimens were sterilized in ethylene oxide gas and randomly divided into groups (n=5): experimental (PDT a,b), which were contaminated, stained and irradiated with the different doses of energy; control 1, only contaminated; control 2, contaminated, stained and not irradiated; control 3 (a,b), contaminated, not stained and irradiated; control 4, not contaminated, not stained and not irradiated. Afterward, the specimens were submitted to contact with culture medium agar for 10 minutes, in separated Petri plates, which were incubated for 48 hours at 37°C. The number of CFU was obtained, and the data were expressed according to scores (1=0; 2=1-10; 3=11-100; 4=101-1000; 5>1000) and analyzed by Kruskall Wallis and Dunn tests (α=0.05). Results: S. mutans was only sensitized by the dye; P. aeruginosa and C. albicans were also sensitized by the dye, but showed a CFU reduction to score 2 by PDTb; S. aureus and E. coli, presented an initial score of 3 and achieved a CFU reduction to score 2 by PDTb (p<0.05). Conclusion: PDT was effective in disinfection of acrylic resin specimens and the effectiveness varied according to the dose of energy of the LEDs. / A busca por métodos alternativos e simples de esterilização de dispositivos acrílicos, como próteses imediatas e guias cirúrgicas para implantes é de interesse clínico. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da terapia fotodinâmica (TFD) sobre S.mutans, S. aureus, E.coli, P. aeruginosa e C. albicans inoculados em corpos-de-prova de resina acrílica termopolimerizável previamente esterilizados. O fotossensibilizador utilizado foi o azul de metileno a 0,05%, associado a um diodo emissor de luz (LED) de 630nm. Para cada microorganismo, os corpos-de-prova foram divididos em grupos (n=5): controle positivo - não inoculado, não corado e não irradiado; controle negativo – inoculado, não corado e não irradiado; controle do fotossensibilizador – inoculado, corado e não irradiado; controle do Led (a e b) – inoculado, não corado e irradiado (10 e 30J/cm2); experimentais TFDa e TFDb, que foram inoculados, corados e irradiados a 10 e 30 J/cm2, respectivamente. Após os tratamentos, os espécimes foram submetidos à cultura de contato por 10 minutos em placas de Petri com BHI Ágar para bactérias e Àgar Sabouraud para leveduras, que depois foram incubadas por 48 horas a 37°C. O número de unidades formadoras de colônias (UFC) foi obtido, sendo os dados transformados em escores e submetidos aos testes estatísticos de Kruskal Wallis e Dunn (p=0,05). O S. mutans se mostrou sensível ao corante azul de metileno, apresentando redução em sua contagem nos grupos apenas corados. Para os espécimes inoculados com S. aureus, o grupo TFDb apresentou redução nos índices de crescimento bacteriano. Esta bactéria não foi sensível ao corante, nem à ação isolada da luz. O grupo TFDb da E. Coli apresentou redução na contagem de UFC. Para os espécimes inoculados com P.aeruginosa, a ação do azul de metileno isolada causou redução dos microorganismos, já a irradiação isolada não fez efeito, enquanto que a ação conjunta da terapia foi bastante eficaz. Para a C. albicans, houve sensibilidade apenas ao azul de metileno e à associação do azul de metileno com o LED vermelho a 30 J/cm2. Concluiu-se que a terapia fotodinâmica utilizando maiores dosagens de energia do LED, foi eficaz na diminuição dos microrganismos inoculados na superfície de resina acrílica.
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Efeitos da infusão de azul de metileno em equinos após a administração de lipopolissacarídeo

Borges, José Henrique Saraiva [UNESP] 03 July 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-03Bitstream added on 2014-06-13T20:22:00Z : No. of bitstreams: 1 borges_jhs_dr_jabo.pdf: 283985 bytes, checksum: b9c4395bd3d21e16f86c5a71e29c87e1 (MD5) / A endotoxemia é um distúrbio grave na clínica veterinária, sendo uma das principais causas de mortalidade em equinos.Trabalhos recentes relatam a eficácia do azul de metileno na prevenção dos danos impostos pelo óxido nítrico. Este estudo foi concebido com o fito de avaliar os efeitos do azul de metileno sobre as respostas clínica, celular e bioquímica, na endotoxemia experimental em equinos. Os animais foram divididos em três grupos. LPS+AM recebeu LPS e foi tratado com 3mg/kg de azul de metileno 60 minutos após a indução da endotoxemia; LPS+NaCl também recebeu LPS e foi tratado com 3mg/kg de azul de metileno 255 minutos após a indução da endotoxemia, e NaCl+AM que recebeu NaCl e foi tratado com azul de metileno 60 minutos após a infusão do NaCl. Foram realizados exames clínicos e laboratoriais durante 12 horas em quatro momentos. Observou-se aumento de temperatura, leucopenia e aumento no fibrinogênio nos animais pré-tratados com LPS, a partir do momento 90minutos. Não foi possível afirmar se houve efeito benéfico do azul de metileno sobre a resposta dos equinos frente à endotoxemia experimental. / Endotoxemy is a severe disturb in Veterinary Clinics and one of the most important causes of deaths in equine. Recent papers report the efficiency of methylene blue in preventing the damage caused by nitric oxide. The aim of this work was to study the effects of methylene blue in clinic, cellular and biochemistry responses in experimental endotoxemy of horses. The animals were divided in three groups. The group LPS+AM received LPS and was treated with 3mg/Kg of methylene blue 60 minutes after the induction of endotoxemy; LPS+NaCl also received LPS and was treated with 3mg/Kg of methylene blue 255 minutes after the induction of endotoxemy and NaCl+AM that received NaCl and was treated with methylene blue 60 minutes after NaCl infusion. Clinical and laboratorial exams were done in four moments during 12 hours. There was an increase in temperature levels, leucopenia and increase in fibrinogen in the animals treated with LPS, beginning within 90 minutes. It was not possible to affirm if there was any benefit in the use of methylene blue in inflammatory response of horses with induced endotoxemy.
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Desenvolvimento de um biossensor amperométrico de DNA para detecção do Papilomavírus humano

Manoella Leite dos Santos, Cinthya 31 January 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:49:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1527_1.pdf: 1835283 bytes, checksum: 1f1ad67f95038279850ea3b3eec8c441 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O câncer cervical tem sido uma patologia grave no Brasil e no mundo com cerca de 18.680 mulheres infectadas anualmente. O Papilomavírus Humano (HPV) tem sido biologicamente associado ao desenvolvimento de lesões cervicais, devido a sua capacidade de infectar células epiteliais, e progressão ao câncer do colo de útero. O diagnóstico tardio pode inviabilizar o tratamento e levar a óbito muitas mulheres. Este diagnóstico poderia ser antecipado pelo uso de biossensores de DNA, que são dispositivos analíticos que resultam da integração entre uma sonda seqüência específica e um sinal transdutor. Entre outras técnicas eletroquímicas, os biossensores amperométricos têm sido descritos como atrativos devido à sua simplicidade, baixos custos de instrumentação, possibilidade de realização em tempo real e geralmente alta sensibilidade. Neste trabalho, foi desenvolvido um genossensor para detecção de seqüências do vírus HPV usando azul de metileno (AM) como mediador químico. Os sinais biológicos captados foram transduzidos por Voltametria de Pulso Diferencial (VPD). Os eletrodos de trabalho e referência foram produzidos através de técnica de impressão sob uma superfície de polivinil álcool. Os mesmos foram constituídos de carbono e Ag\AgCl, respectivamente. O eletrodo de trabalho foi modificado com quitosana para a imobilização de pequenas seqüências de DNA para hibridização com uma seqüência alvo. A seqüência alvo usada para hibridização foi o gene E6 do HPV18, uma cadeia extensa com 500 pares de bases disponíveis para anelamento com seqüências de 20 bases. Análises de bioinformática foram realizados para verificar possíveis regiões de anelamento destas seqüências curtas ao genoma viral. Os resultados demonstraram um aumento no sinal do AM quando a hibridização ocorreu, evidenciado pelo aumento dos picos de corrente de VPD analisados graficamente. As diferenças entre os sinais emitidos a partir de um eletrodo contendo reações de hibridização e outro isento das mesmas, foi usada para detectar seqüências de DNA viral obtidas de amostras clínicas. Os resultados indicaram ser o método passível de aplicações em diagnósticos clínicos, e a técnica de impressão, um instrumento viável para a construção dos biossensores de DNA utilizando o azul de metileno como indicador de sinais de hibridização
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Utilidad del azul de metileno para el recuento de plaquetas en la cámara de Neubauer

Ramirez Ubillus, Gian Carlos January 2018 (has links)
Demuestra la utilidad del azul de metileno para el recuento de plaquetas en la cámara de Neubauer. De 59 recuentos plaquetarios fueron realizados en los laboratorios de Hematología y Emergencias del hospital Nacional Docente Madre Niño San Bartolomé mediante 4 metodologías; un recuento óptico de plaquetas PLTO, un recuento indirecto mediante lámina periférica RILP y dos recuentos directos mediante la cámara de Neubauer RDOP y RDMP. Se utilizó estadística descriptiva e inferencial para realizar comparaciones entre los grupos. Se observó diferencia significativa en la distribución de las 4 metodologías y al realizar un análisis posthoc se encontró similitud entre los métodos PLTO y RDMP. Los métodos RDOP, RDMP y RILP, mostraron una correlación positiva al ser comparados con el método PLTO. Adicionalmente, el Test de Bland-Altman demostró sobre todo, que el método RDMP presentó una alta concordancia con el método PLTO. Finalmente, se observó que solo el método RDMP presentó un desempeño de calidad aceptable. La conclusión es que el método RDMP, mostró mayor fiabilidad estadística, indicadores de desempeño aceptables, correlación positiva y concordancia con la metodología automatizada. / Tesis
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Terapia fotodinâmica mediada por diferentes intensidades contra Enterococcus faecalis e Cutibacterium acnes /

Sampaio, Laís Simões. January 2019 (has links)
Orientador: Carla Raquel Fontana Mendonça / Resumo: O presente estudo tem como objetivo avaliar a fototoxicidade do azul de metileno (AM), clorina-e6 (Ce-6) e curcumina (CUR) associados a irradiações com diferentes intensidades de luz para a terapia fotodinâmica (TFD) contra cepas de Enterococcus faecalis e Cutibacterium acnes, em suspensão e em biofilme. As fontes de luz utilizadas na TFD foram LEDs no comprimento de onda azul (450 nm) e vermelho (660 nm) de acordo com cada fotossensibilizador testado. Como resultado observamos que, em E. faecalis a TFDa mediada por AM e Ce6 foi mais eficiente quando exposta a intensidade de luz de 153 mW/cm², porém com a CUR os melhores resultados foram obtidos com a intensidade de luz de 103 mW/cm². Para C. acnes em suspensão, a Ce6 e a CUR submetidas às diferentes intensidades de luz, causaram reduções bacterianas similares. Em biofilme, a Ce6 associada a intensidade de 122 mW/cm² de luz foi mais eficiente, no entanto, a CUR não proporcionou morte de biofilmes de C. acnes independente das intensidades testadas. O AM, independente da fase, apresentou os melhores resultados com a intensidade de luz de 153 mW/cm². Considerando a quantificação de espécies reativas de oxigênio, a concentração de AM foi determinante na produção de EROs. Na concentração de 100 μg/mL de AM na dose de 120 J/cm2 radicais hidroxila foram mais evidentes em relação a quantidade de oxigênio singleto formado. Na concentração de 50 μg/mL, a intensidade de 61 mW/cm² gerou similarmente as espécies testadas, quanto que a int... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor
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Influência do Hidróxido de Cálcio e do EDTA na Marcação da Infiltração Marginal de Azul de Metileno em Obturações de Canais Radiculares.

Nunes, Eduardo 18 June 1999 (has links)
Com o objetivo de avaliar a influência do hidróxido de cálcio e do EDTA na marcação da infiltração marginal de corante azul de metileno a 2% em canais radiculares obturados pela técnica da condensação lateral, foram empregados 188 dentes incisivos centrais superiores humanos extraídos. Após serem instrumentados e impermeabilizados, foram divididos em 3 grupos de 60 elementos cada, sendo que outros 8 dentes foram utilizados como controle. Cada grupo foi dividido em 2 subgrupos, os quais, foram subdivididos em dois, totalizando 12 subgrupos com 15 elementos cada, dessa forma descritos: Grupo I – obturação imediata; em 30 dentes foi aplicado EDTA por 3 minutos antes da obturação; em 30 dentes a obturação foi feita sem a aplicação do EDTA; 30 dentes foram obturados com cimento de óxido de zinco e eugenol e 30 obturados com pasta de hidróxido de cálcio; Grupo II – aplicação de EDTA por 3 minutos e preenchimento de todos os canais com pasta de hidróxido de cálcio (curativo); em 30 dentes o EDTA foi reaplicado após a remoção do curativo, e nos outros 30 dentes não; 30 dentes foram obturados com cimento de óxido de zinco e eugenol e 30 obturados com pasta de hidróxido de cálcio; Grupo III – após a instrumentação, os canais foram preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio (curativo) sem a aplicação prévia do EDTA; após a remoção do curativo, em 30 dentes o EDTA foi aplicado e em outros 30 não; 30 dentes foram obturados com cimento de óxido de zinco e eugenol e outros 30 com pasta de hidróxido de cálcio. Posteriormente à imersão em azul de metileno a 2% por 72 horas, os dentes foram seccionados longitudinalmente e as infiltrações mensuradas com o emprego de um microscópio óptico munido de uma ocular micrometrada. Após serem empregados os testes estatísticos pertinentes, foram obtidas as seguintes conclusões: - em relação ao hidróxido de cálcio: como curativo e pasta obturadora, interfere estatisticamente na marcação da infiltração, diminuindo a sua magnitude; em relação ao EDTA: o seu emprego prévio ao curativo de hidróxido de cálcio, melhora o selamento das obturações com óxido de zinco e eugenol; o emprego antes e após o curativo, promove um aumento da infiltração em canais obturados com óxido de zinco e eugenol; em canais obturados com pasta de hidróxido de cálcio, o seu emprego não promove interferências estatisticamente significantes nos resultados. / With the objective of evaluate the influence of calcium hydroxide and EDTA in marginal infiltration of metilen blue 2% in root canals obturated by the laterally condensed technique, were used 188 central superior incisor human teeth. After they were instrumented and impatented, the 188 teeth were divided in 3 groups of 60 teeth each. Each group was divided in 2 subgroups and these were divided again in 2, resulting 12 subgroups with 15 teeth each, this way discribed: Group I: immediate obturation; in 30 teeth was applied EDTA for 3 minutes before obturation; and in the other 30 the obturation was done without application of EDTA. 30 teeth were obturated with zinc oxide and eugenol ciment and 30 were obturated with calcium hydroxide paste; Group II: application of EDTA for 3 minutes and all root canals were filled with calcium hydroxide paste (bandage). In 30 teeth the EDTA was applied again after removing the bandage, but this was not done in the other 30; 30 teeth were obturated with calcium hydroxide paste; Group III: the root canals were filled with calcium hydroxide paste (bandage), without a previous application of EDTA, after they were instrumented. After removing the bandage, the EDTA was applied in 30 teeth one more time but not the other 30; 30 teeth were obturated with zinc oxide and eugenol ciment and the other 30 with calcium hydroxide paste. After the immersion in metilen blue 2% for 72 hours, all the 180 teeth were longitudinally sectionalized and the infiltrations were measured using a stereomicroscope and a micrometric ocular. Statistics tests were done and according with those, the following conclusions were obtained: - calcium hydroxide: As a bandage and as an obturation paste, interferes in the infiltration; its use as a bandage, before obturation, with zinc oxide and eugenol ciment, improves the sealer quality of this last one; - EDTA: Its use before the calcium hydroxide bandage, improves obturation sealings with zinc oxide and eugenol ciment. It use after and before the bandage promotis an infiltration increasing in obturated root canals with zinc oxide and eugenol ciment; in root canals obturated with calcium hydroxide paste, the use of EDTA does not promote significative interferences in the result.
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Otimização da Terapia Fotodinâmica em micro-organismos sob inibição de bomba de efluxo /

Coletti, Tatiana Maria Starck Fogaça de Aguiar. January 2016 (has links)
Orientador: Carla Raquel Fontana Mendonça / Coorientador: Ana Marisa Fusco Almeida / Banca: Madalena Palomari Spolidorio / Banca: Juliana Cabrini Carmello / Banca: Eliane Trovatti / Banca: Cristiane Costa Quishida / Resumo: A necessidade de superar a resistência dos micro-organismos frente aos fármacos disponíveis, a fim de se chegar ao sucesso terapêutico leva a uma constante exploração de novas abordagens para este fim. Os sistemas de efluxo multidrogas tem sido um profundo obstáculo para uma terapêutica bem-sucedida utilizando-se antimicrobianos existentes hoje no mercado. A descoberta de bloqueadores desses sistemas complementa estudos envolvendo terapias nãoconvencionais, como a Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (Antimicrobial Photodynamic Therapy - aPDT). Este estudo teve como objetivo avaliar a aPDT mediada pelo azul de metileno (AM) associada com inibidores de bomba de efluxo em diferentes espécies microbianas. Para isso, foram utilizados como inibidor o verapamil, em biofilmes de Escherichia coli e Staphylococcus aureus, e verapamil e farnesol para Candida albicans. A determinação da combinação ideal de Inibidor/AM foi feita através do cruzamento de diferentes concentrações dos compostos, de tal forma que todas as combinações possíveis fossem avaliadas, nas concentrações previamente determinadas através da concentração inibitória mínima. O metabolismo celular para todas as condições experimentais foi avaliado por meio do ensaio de redução do XTT. As combinações onde foram verificadas a redução de 80% no metabolismo foram plaqueadas e a contagem de células (UFC/ml) determinada. Os resultados obtidos permitiram observar que para E. coli, foram necessárias uma dose maior de luz (44 J/cm2... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Conventional antimicrobials are mostly ineffective due to emerging antimicrobial resistance acquired by pathogenic micro-organisms. The need to overcome this resistance to reach therapeutic success has led to exploration of new approaches. Multidrug efflux systems have been a profound obstacle to achieve success in some specific cases with the available antibiotics today. The discovery of efflux pump inhibitors systems can act as an adjuvant to alternative therapies such as Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT). This study aimed to evaluate the association of aPDT mediated by methylene blue (MB), with efflux pump inhibitors in different microbial species. Verapamil was used as an inhibitor in biofilm of Escherichia coli and Staphylococcus aureus, and verapamil and farnesol were expected to block the pumps for Candida albicans. The determination of the optimal combination of Inhibitor/MB was carried out by crossing different concentrations of the compounds. Cell metabolism for all experimental conditions was assessed by XTT reduction assay. The combinations where 80% of metabolism reduction was observed, cells were plated and colony count units (cfu/ml) determined. The E. coliresults showed requirement of higher light dose (44 J/cm2 ) and a lower concentration of verapamil (215 μg/mL) to achieve reduction of 3.4 log10 (CFU/mL). Compared to S. aureus, a lower dose of light (22 J/cm2 ) was needed, and a higher concentration of verapamil (312 μg/mL), was necessary to obtain reduction of 3.65 log10 (CFU/ml). For C. albicans, verapamil presented lower reduction of biofilm viable cells compared to farnesol. Setting the same light dose (44 J/cm2 ), the combination verapamil/MB: 215/400 showed reduction of 2,82 log10 (CFU/mL) and farnesol/MB: 22/200 determined reduction of 3.82 log10 (CFU/mL). Briefly, aPDT mediated MB, associated with an efflux pump... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Estudo do comportamento de solos artificiais através de adsorção de azul de metileno / not available

Barroso, Suelly Helena de Araujo 15 May 1996 (has links)
O trabalho aqui apresentado é resultado de um programa experimental de montagem de solos artificiais. A pesquisa tem como objetivo principal gerar subsídios para uma futura classificação de solos baseada no ensaio de adsorção de azul de metileno, através da análise do comportamento de solos artificiais, resultante de misturas, em que se fazem variar as porcentagens de uma mesma fração grossa e de três tipos de frações finas, obtendo-se um total de 15 amostras de solos compostas em laboratório. Paralelamente, foram testadas as classificações usuais (HRB e USCS) e a MCT, verificando-se a qualidade da previsão das propriedades tecnológicas dos solos fornecida por essas classificações, em função do teor de concentração e do tipo de fração fina das misturas. Os resultados experimentais permitiram conhecer o comportamento de algumas propriedades de interesse à pavimentação, estabelecendo relações entre estas e a quantidade de azul de metileno consumida pelo solo. A partir dessas relações pode-se estimar como variam as propriedades tecnológicas dos solos para diferentes teores e tipos de fração fina. / This work results from an experimental program of artificial soils. The main objective of this research is to generate information for a future soil classification based on the methylene blue adsorption test, through analysis of the behaviour of artificial soils, which present variable percentages of a unique gross fraction and three types of fine fraction, resulting into a total of 15 laboratory-built soil samples. Besides, the usual classification systems (HRB and USCS) and the MCT classification system were tested, verifying the quality of prevision of properties furnished by those systems, as a function of the percentage of concentration and of the type of fine fraction of the mixtures. The experimental results allowed to know the behaviour of some properties of interest for paving, by establishing relations between these properties and the quantity of methylene blue consumed by the soil. Based on that relations it is possible to estimate how technological properties of soils vary for different percentages and types of fine fractions.

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