Thèse Médecine Paris, 1871 numéro 33.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2006. / Titre de l'écran-titre (visionné le 28 mars 2007). Bibliogr.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2008. / Bibliogr.: f. 89-101. Publié aussi en version électronique dans la Collection Mémoires et thèses électroniques.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2006. / Bibliogr.: f. 95-102. Publié aussi en version électronique.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2008. / Bibliogr. Publié aussi en version électronique dans la Collection Mémoires et thèses électroniques.

Thèses (M.Sc.)--Université de Sherbrooke (Canada), 2001. / Titre de l'écran-titre (visionné le 13 juillet 2006). Publ. aussi en version papier.

Le psoriasis est une dermatose chronique et inflammatoire à forte médiation immunitaire causant une importante perturbation du fonctionnement des cellules épithéliales de la peau. En particulier, les lymphocytes T jouent un rôle crucial dans la pathogenèse, en sécrétant diverses cytokines et chimiokines favorisant l'inflammation. Les acides gras polyinsaturés (AGPI) de types oméga-3 (n-3) et oméga-6 (n-6) sont essentiels au développement optimal d'une fonction barrière cutanée efficace. D'ailleurs, le métabolisme de ces AGPI s'avère être fortement débalancé dans le psoriasis, avec une prépondérance des métabolites inflammatoires dérivés des AGPI n-6. Malgré le fait que différentes études semblent démontrer des effets favorables des AGPI n-3 pour contrer certains symptômes de la maladie, les mécanismes d'action précis de ces molécules dans le psoriasis ne sont toujours pas convenablement détaillés. Il s'avère donc essentiel de mettre en lumière les réels impacts des AGPI n-3 dans le psoriasis afin d'augmenter la crédibilité de ce traitement et la potentielle découverte de cibles thérapeutiques intéressantes. Ainsi, dans cette thèse, plusieurs objectifs spécifiques ont été établis. Le premier objectif visait à évaluer le potentiel anti-psoriasique de l'acide docosahexaénoïque (DHA) dans notre modèle de substituts psoriasiques produit à partir de fibroblastes et de kératinocytes pathologiques. Les résultats de cette étude ont démontré que l'ajout de cet acide gras (AG) à longues chaînes menait à une diminution considérable de l'acanthose épidermique, caractéristique cruciale de la maladie. Cependant, l'absence de la composante immunitaire ne permettait pas de dépeindre totalement l'incidence complète des AGPI n-3 sur les altérations inflammatoires du psoriasis. Le second objectif de cette thèse a donc permis de mettre en évidence l'impact favorable de l'acide alpha-linolénique (ALA) sur les dérégulations psoriasiques qui sont médiées par les lymphocytes T. Les résultats issus de cette étude ont montré que l'ALA ralentissait l'infiltration des lymphocytes T dans les substituts psoriasiques ainsi que leur sécrétion de cytokines inflammatoires. Par ailleurs, les études des objectifs 1 et 2 ont dévoilé qu'autant la supplémentation des conditions de culture en DHA, que celle en ALA, convertissaient fortement ces AG respectifs en acide eicosapentaénoïque (EPA) dans les phospholipides épidermiques des substituts psoriasiques. Le troisième objectif de cette thèse visait donc à évaluer de manière plus approfondie les effets de l'EPA sur la polarisation des lymphocytes T dans un modèle de substituts psoriasiques immunocompétent. Cette étude a mis de l'avant la capacité de l'EPA à balancer la polarisation des lymphocytes T vers un profil caractéristique des lymphocytes T régulateurs, donc ultimement un profil anti-inflammatoire. Finalement, le dernier objectif spécifique consistait à étudier le portrait lipidique des substituts psoriasiques immunocompétents suite à la supplémentation des conditions de culture en EPA. Cette étude a permis de confirmer que l'EPA influençait la composition lipidique des phospholipides des substituts psoriasiques, ainsi que la production de médiateurs lipidiques, en réduisant la production de métabolites pro-inflammatoires dérivés des AGPI n-6. En conclusion, nos travaux confirment le potentiel thérapeutique des AGPI n-3 dans le traitement du psoriasis et apportent de nouvelles preuves fiables quant à l'importance du métabolisme des AGPI n-3 et n-6 dans la maladie. Les recherches présentées dans cette thèse font état de la capacité des AGPI n-3 à diminuer l'inflammation du psoriasis, laquelle est amplifiée par l'ajout de lymphocytes T. Ainsi, cette thèse ajoute à la crédibilité des AGPI n-3 pour traiter les patients atteints du psoriasis et démontre la pertinence de perpétuer les études dans ce domaine de recherche, d'autant plus que ce type de traitement alternatif pourrait grandement améliorer la qualité de vie et l'observance des patients. / Psoriasis is a chronic and inflammatory dermatosis with strong immune mediation, causing a significant disturbance of the functioning of skin epithelial cells. In particular, T cells play a crucial role in the pathogenesis, by secreting various inflammatory cytokines and chemokines. Omega-3 (n-3) and omega--6 (n-6) polyunsaturated fatty acids (PUFAs) are essential for the optimal development of an effective skin barrier function. Besides, their metabolism appears to be strongly unbalanced in psoriasis, with a preponderance of inflammatory metabolites derived from n-6 PUFAs. Even though some studies demonstrated the favorable effects of n-3 PUFAs in countering certain symptoms of the disease, the precise mechanisms of action of these molecules in psoriasis are still not properly established. It is therefore essential to shed light on the real impacts of n-3 PUFAs in psoriasis in order to increase the credibility of this treatment and the potential discovery of an interesting therapeutic target. During this thesis, several specific objectives have been established. The first objective was to assess the anti-psoriatic potential of docosahexaenoic acid (DHA) in our model of psoriatic skin substitutes produced with pathological fibroblasts and keratinocytes. The results of this study demonstrated that the addition of this long-chain fatty acid led to a considerable reduction in epidermal acanthosis, a crucial characteristic of the disease. However, the absence of the immune component did not fully depict the full impact of n-3 PUFAs on inflammatory alterations in psoriasis. The second objective of this thesis has therefore made it possible to highlight the positive impact of alpha-linolenic acid (ALA) on psoriatic dysregulations which are mediated by T cells. The results from this study have shown that ALA slowed the infiltration of T cells into psoriatic skin substitutes as well as their secretion of inflammatory cytokines. Furthermore, objectives 1 and 2 studies revealed that both DHA and ALA supplementation strongly converted these respective fatty acids into eicosapentaenoic acid (EPA) in the epidermal phospholipids of psoriatic substitutes. The third objective of this thesis therefore aimed to further evaluate the effects of EPA on T cell polarization in an immunocompetent psoriatic skin model. This study highlighted the ability of EPA to balance the polarization of T cells towards a characteristic profile of regulatory T cells, thus ultimately an anti-inflammatory profile. Finally, the last specific objective was to study the lipid portrait of the immunocompetent psoriatic skin substitutes following the supplementation of the culture conditions with EPA. This study confirmed that EPA influences the lipid composition of psoriatic skin substitute phospholipids as well as the production of lipid mediators, by reducing the production of pro-inflammatory metabolites derived from n-6 PUFAs. In conclusion, our work confirms the therapeutic potential of n-3 PUFAs in the treatment of psoriasis and provides new plausible evidence regarding the importance of the metabolism of n-3 and n-6 PUFAs in the disease. The research presented in this thesis reports the ability of n-3 PUFAs to decrease the inflammation of psoriasis, which is amplified by the addition of T cells. Thus, this thesis adds to the credibility of n-3 PUFAs for treating patients with psoriasis and demonstrates the relevance of perpetuating studies in this area of research, especially since this type of alternative treatment could greatly improve the quality of life, as well as patient compliance.

Présentement, l'industrie laitière est aux prises avec des problèmes de reproduction chez les vaches, dont la mortalité embryonnaire est l'un des plus importants. Le plus souvent, la perte de l'embryon survient durant la période de péri-implantation, car celui-ci ne parvient pas à inhiber suffisamment la sécrétion de prostaglandine F[indice inférieur 2 [alpha]] (PGF[indice inférieur 2[alpha]]) par les cellules épithéliales de l'utérus. Plusieurs études ont démontré que la survie embryonnaire chez la vache laitière peut être améliorée par un supplément alimentaire en graines de lin, lesquelles sont riches en acide alpha-linolénique (ALA), un oméga-3, et en lignanes. De plus, notre équipe de recherche a observé que le niveau de sécrétion des prostaglandines, ainsi que le niveau d'expression de plusieurs gènes utérins impliqués dans la survie embryonnaire (jour 17), sont modulés par un supplément alimentaire de graines de lin durant la période de péri-implantation embryonnaire. Il a été démontré que la graine de lin peut diminuer le ratio sanguin d'acides gras oméga-6/oméga-3 et qu'elle augmente la concentration circulante d'entérolactone (ENL), un métabolite de lignane qui agit comme phyto-oestrogène et comme antioxydant. Cependant, ces études in vivo ne permettent pas de distinguer si les effets de la graine de lin sur l'utérus sont dus aux acides gras, à l'ENL ou aux deux, ni de distinguer comment les différents types cellulaires de l'endomètre répondent à ces traitements. L'objectif de ce projet de recherche était de déterminer quels sont les effets directs de différents ratios oméga-6/oméga-3 et de l'ENL sur l'expression de différents gènes sélectionnés et sur la sécrétion de prostaglandines dans un modèle in vitro de culture de cellules endométriales primaires. Tout d'abord, 16 gènes ont été sélectionnés parmi ceux étant différentiellement exprimés dans l'utérus de vaches au jour 17 de la gestation, lesquelles avaient reçu ou non un supplément alimentaire de 10% graines de lin. Ces 16 gènes sont impliqués ou sont suspectés de jouer un rôle dans la survie embryonnaire et/ou la synthèse des prostaglandines. Tout d'abord, afin de mieux connaître le profil d'expression de ces gènes dans l'endomètre, la variation du niveau d'expression de ces gènes au cours du cycle oestral a été caractérisée in vivo par PCR quantitatif en temps réel (RT-qPCR). Par la suite, deux types cellulaires ont été isolés à partir d'utérus de vache; les cellules stromales et les cellules épithéliales. Ces cellules ont été traitées avec de la progestérone et de l'interféron-tau, de manière à mimer la présence d'un embryon en début de gestation. Ces cellules utérines ont été traitées avec 6 différents ratios d'acides gras oméga-6/oméga-3 (acide linoléique / acide alpha-linolénic), avec de l'ENL ou avec ces deux traitements (acides gras + ENL). Suite à ces traitements, les niveaux d'ARN messagers des 16 gènes sélectionnés ont été mesurés par RT-qPCR. La concentration de PGF[indice inférieur 2[alpha]], de prostaglandine E 2 (PGE[indice inférieur 2]) et le ratio PGE[indice inférieur 2]/PGF[indice inférieur 2[alpha]] ont été mesurés par « enzyme immun assay (EIA) ». Les résultats obtenus démontrent que la variation du ratio oméga-6/oméga-3 et/ou que l'ENL peuvent moduler l'abondance relative d'ARN messager de plusieurs gènes, mais de manière différente dépendamment du type cellulaire étudié. De plus, une diminution du ratio oméga-6/oméga-3 entraîne une diminution de la production de prostaglandines et une augmentation du ratio PGE[indice inférieur 2]/PGF[indice inférieur 2[alpha]] par les cellules épithéliales. La présence d'ENL dans le milieu de culture a permis de diminuer la sécrétion des prostaglandines étudiées de manière dose-dépendante dans les cellules stromales et épithéliales. De plus, nos résultats démontrent une interaction entre l'ENL et la présence d'acides gras au niveau de la réduction des sécrétions de prostaglandines. Pour les cellules stromales, nous observons une association entre la diminution de sécrétion des prostaglandines par l'ENL et la diminution de l'abondance d'ARN messagers de la prostaglandin E synthase (PTGES) et de l'Aldo-keto reductase family 1, member B1 (AKR1B1), deux gènes impliqués dans la synthèse des prostaglandines. Les résultats obtenus dans le cadre de cette étude démontrent que la variation des ratios d'oméga-6/oméga-3, ainsi que l'ENL agissent directement sur l'expression de certains gènes et sur la sécrétion des prostaglandines dans les cellules stromales et épithéliales de l'endomètre bovin. Cependant, les réponses cellulaires obtenues diffèrent en fonction du type cellulaire étudié.

Mémoire numérisé par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.