Submitted by Rosina Valeria Lanzellotti Mattiussi Teixeira (rosina.teixeira@unisantos.br) on 2017-08-05T13:12:51Z No. of bitstreams: 1 Luciano Braga de Oliveira.pdf: 2158750 bytes, checksum: 781582f0d9ba1728d24ccfd5b4927041 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-05T13:12:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luciano Braga de Oliveira.pdf: 2158750 bytes, checksum: 781582f0d9ba1728d24ccfd5b4927041 (MD5) Previous issue date: 2017-03-29 / INTRODUCTION: The economic growth turned Brazil into one of the greatest agrochemicals consumers in the world. However, there were few studies that analyzed agricultural workers health exposure. OBJECTIVE: Evaluate the prevalence of cardiovascular symptoms on tomato rural workers (GE) exposed to agrochemicals in the Cuncas Valley, Barro ¿ CE. METHODS: A cross-sectional study questionnaire was applied to 50 tomato rural workers (GE), aged at least 18 years old, in their work place. A control group was selected from the not exposed population (GNE) paired by gender and age. It was used two questionnaires: a bio demographical, in order to analyze the schooling, income, marital status, residence type, medications and cardiovascular symptoms; and a protocol questionnaire about agrochemicals health effects to verify preparation steps, application, packaging destination, work clothes, use of Individual Protection Equipment (IPEs), perception and search for health services (hospitals or health basic units) in case of health alterations after agrochemicals application. It was applied a descriptive analysis, chi-square test, two proportion test and a logistic regression. The significant level was 5%. RESULTS: The exposed mean age was 41.42 (sd=10.50), and for the non-exposed group was 42.42 (sd=15.91). Ninety four percent was male, with some schooling. In the exposed group all tomato workers used agrochemicals, 66% not differ the toxicological products classification, only 22% read the packages. In relation to the agrochemicals, the same group, 94% used according to the recommended measures, 76% used daily, 98% used manual application and 78% avoid agrochemical overdose. Workers exposed to the agrochemicals presented more irritability (p<0.001), mental confusion (p=0.001), shortness of breath (p=0.003), sweating (p=0.008), dizziness (p=0.046), and headache (p=0.047). Rural workers exposed to agrochemicals had more chance to have a stomachache (RP=3.92, CI95%: 1.01 ¿ 15.22), chest pain (RP=5.33, CI95%: 1.68 ¿ 16.97), tachycardia (RP=4.48, CI95%: 1.34 ¿ 14.24), palpitation (RP=3.53, CI95%: 1.05 ¿ 11.86) and hypertension (RP=5.18, CI95%: 1.53 ¿ 17.99) when compared to the non-exposed group. In the exposed group the workers who did not give particular attention to clothes had more chance to developed hypertension (RP=5.70, CI95%: 1.01 ¿ 33.27) and cardiovascular disease (RP=5.40, CI95%: 1.01 ¿ 30.17). CONCLUSION: Exposure to agrochemicals affected the cardiovascular and gastric health system. / INTRODUÇÃO: O Brasil é um dos maiores consumidores de agrotóxico do mundo, devido ao crescimento econômico. No entanto, existem poucos estudos que avaliam os efeitos dos agrotóxicos nos trabalhadores rurais. OBJETIVO: Avaliar a prevalência dos sintomas cardiovasculares nos trabalhadores rurais da cultura do tomate expostos (GE) ao agrotóxico no vale de Cuncas, Barro ¿ CE. MÉTODO: Foi realizado um estudo de corte transversal através da aplicação de questionário no local de trabalho com todos os trabalhadores da cultura de tomate (50 trabalhadores), como critério de inclusão temos maiores de 18 anos idade. E um grupo controle a partir população não exposta (GNE) pareado por sexo e idade. Foram utilizados dois questionários: um biodemográfico cujas questões quanto ao sexo, idade, grau de escolaridade, renda familiar, situação conjugal, tipo de residência, medicamento e sintomas cardiovasculares. E outro questionário do protocolo sobre o efeito do agrotóxico na saúde, como os modos de preparo, aplicação e a destinação das embalagens, uso dos EPIs, percepção e busca aos serviços de saúde ¿ postos de saúde e/ou hospitais ¿ por alguma alteração após aplicação do agrotóxico. Foi realizada a análise descritiva, testes de Qui-quadrado e/ou exato de Fisher, de comparação entre duas porcentagens, e a regressão logística. O nível de significância foi de 5%. RESULTADOS: A população estudada tem uma idade média de 41,42 anos (DP ±10,50) para os expostos e 42,42 anos (DP ±15,91) para os não expostos. 94,0% é do sexo masculino, e com algum tipo de escolaridade. No grupo expostos todos utilizam o agrotóxico, 66,0% não diferenciam a classificação toxicológica dos produtos, 22,0% leem as embalagens. Possuem conhecimentos de manejo pois 94,0% sempre usa a quantidade recomendada, com uso diário em 76,0% do universo e 78,0% evitam a superdosagem e de aplicação manual para 98,0%. Em relação aos efeitos dos agrotóxicos apresentam maior irritabilidade (p=0,000), confusão mental (p=0,001), sudorese (p=0,008), tontura (p=0,046) e cefaleia (p=0,047). Os trabalhadores expostos ao agrotóxico apresentaram maior chance para dor no estômago (RP = 3,92, IC95%: 1,01 - 15,22), dor torácica (RP = 5,33; IC95%: 1,68-16,97), taquicardia (RP = 4,48, IC95% 1,34 - 14,24), palpitações (RP = 3,53, IC95%: 1,05 - 11,86) e hipertensão (RP = 5,18, IC95%: 1,53 - 17,99), quando comparado ao grupo não exposto. No grupo exposto que não deu atenção especial as roupas, os trabalhadores apresentaram mais chance de desenvolver hipertensão (RP = 5,70, IC95%: 1,01 - 33,27) e doença cardiovascular (RP = 5,40, IC95%: 1,01 - 30,17). CONCLUSÃO: A exposição aos agroquímicos afetou o sistema de saúde gástrico e cardiovascular.

nÃo hà / A exposiÃÃo aos agrotÃxicos representa um risco em potencial para a saÃde humana. AlÃm das intoxicaÃÃes, estes compostos podem interagir com o DNA, causando doenÃas degenerativas e cÃncer. A avaliaÃÃo de riscos aos agrotÃxicos foi realizada em 97 agricultores dos municÃpios de Picos, Piripiri, Barras e Josà de Freitas, tendo como grupo nÃo exposto 55 trabalhadores administrativos da capital, Teresina, como uma proposta de continuidade dos estudos anteriormente realizados nos municÃpios: Baixa Grande do Ribeiro, Ribeiro GonÃalves e UruÃuÃ, regiÃo sul do PiauÃ. O objetivo desta pesquisa foi avaliar os possÃveis efeitos tÃxicos e genotÃxicos/mutagÃnicos da exposiÃÃo ocupacional Ãs misturas complexas de agrotÃxicos, com o uso de biomarcadores hematolÃgicos, enzimÃticos e genotÃxicos/mutagÃnicos. Aplicou-se um questionÃrio recomendado pela International Comission for Protection Against Environmental Mutagens and Carcinogens-ICPEMC, e coletou-se material biolÃgico, para as anÃlises hematolÃgicas, bioquÃmicas, genotÃxicas e mutagÃnicas. A populaÃÃo exposta aos agrotÃxicos apresentou uma mÃdia de idade de 40,37 anos e tempo de trabalho de 19,32 anos, com carga horÃria de 41,38 h/semanas e apenas 50,5% usam EPIs, e 33% sÃo fumantes; 59,8% consomem Ãlcool; 34% utilizam medicamentos prescritos; 54,6% foram vacinados nos Ãltimos 6 meses; 68% nÃo consomem vegetais, e 96,9% comem carne. Os agricultores utilizam 13 diferentes tipos de ingredientes ativos, sendo 53,5% de herbicidas. Quanto aos parÃmetros hematolÃgicos apenas 39% apresentaram leucopenia e 10% diminuiÃÃo na sÃrie vermelha. Quanto as variÃveis bioquÃmicas: ureia, proteÃnas totais e fraÃÃes, Gama GT nÃo ocorreram alteraÃÃes significantes, entretanto nas dosagens de creatinina, TGO, TGP e fosfatase alcalina, houve significÃncia (p< 0,05) em relaÃÃo ao grupo controle. Foi observado para a butilcolinesterase inibiÃÃo no percentual de cerca de 4%, dado nÃo significante. Foi evidenciada genotoxicidade nos agricultores expostos pelo significante (p < 0,001) aumento do Ãndice de Dano (45,85 vs 12,51) e FrequÃncia de Dano (29,41 vs 9,98), em mucosa bucal, e em linfÃcitos com Ãndice de Dano (33,27 vs 10,12) e FrequÃncia de Dano (21,44 vs 9,38), avaliados pelo teste do cometa. A avaliaÃÃo mutagÃnica pelo aumento do nÃmero (4,95  2,81 vs 0,72  1,20) e frequÃncia (0,24  0,14 vs 0,03  0,06) de MN em mucosa bucal foi estatisticamente significante (p< 0,001) nos expostos em relaÃÃo aos nÃo expostos. A mutagenicidade em linfÃcitos avaliados com o teste de MicronÃcleo (MN) com bloqueio de citocinese foi significante (p< 0,01) nos agricultores expostos (9,38 Â1,05), em relaÃÃo ao nÃo exposto (5,50  0,84). Aumento significante (p<0,001) do percentual de aberraÃÃes cromossÃmicas dos expostos em relaÃÃo aos nÃo expostos 3,24  0,44 vs. 0,40  0,07) foram observados, com significÃncia (p<0,001) para os tipos de AC: cromossomos dicÃntricos, anÃis, tricÃntricos, anel acÃntrico, deleÃÃo terminal, deleÃÃo intersticial. Indicativo significante (p<0,001) para apoptose foi encontrado em cÃlulas de mucosa bucal e em linfÃcito, com bloqueio de citocinese. CorrelaÃÃes positivas significantes (p<0,01; p<0,05) de danos ao DNA, em cÃlulas de mucosa bucal foram evidenciadas para idade, tabagismo, etilismo e tempo de trabalho, no entanto, essas correlaÃÃes nÃo foram observadas para a os micronÃcleos. Em cÃlulas de mucosa bucal a apoptose e cÃlulas binucleadas foram significantemente (p<0,01) correlacionadas com a idade do trabalhador. Em relaÃÃo aos MN em linfÃcitos, percentual de AC e apoptose foram observadas correlaÃÃes positivas com o etilismo (p<0,01). MN em linfÃcitos foi correlacionado de maneira significativa (p<0,05) com o baixo consumo de micronutrientes e com o uso de EPI. Os parÃmetros de genotoxicidade e de mutagenicidade foram indicativos de instabilidade genÃtica, que podem sugerir riscos de neoplasias. Assim, se faz necessÃrio o biomonitoramento desses agricultores, como uma estratÃgia de vigilÃncia em saÃde, com prevenÃÃo e promoÃÃo da saÃde ocupacional no Estado do PiauÃ. / Exposure to pesticides represents a potential risk to human health. In addition to poisoning, these compounds may interact with DNA, causing degenerative diseases, including cancer. The risk assessment for pesticides was conducted in the municipalities of Picos, Piripiri, Barras and Josà de Freitas with farm workers (exposed group) and 55 administrative officers from Teresina (Capital) as unexposed group. It was as a proposal for the continuation of studies previously performed in other cities of Piauà (Baixa Grande do Ribeiro, Ribeiro GonÃalves and UruÃuÃ). The purpose of this study was to evaluate the toxicity and genotoxicity/mutagenicity effects of occupational exposure to complex mixtures of pesticides by using hematologic, enzymatic and genotoxic/mutagenic biomarkers. Initially, a questionnaire recommended by the International Commission for Protection Against Environmental Mutagens and Carcinogens-ICPEMC was applied, then biological material was collected for the hematological, biochemical, genotoxic and mutagenic analysis.The population exposed to pesticides (n = 97) had a mean age of 40.37 years and a mean working time of 19.32 years, with a schedule of 41.38 hours per week. 50.5% of the farmers use personal protective equipment (PPE). About their lifestyle, 33% were smokers; 59.8% consume alcohol; 34% use prescription drugs; 54.6% were vaccinated in the last 6 months; 68% do not consume vegetables, and 96.9% eat meat. They use 13 different types of active ingredients, 53.5% are herbicides. As for hematological parameters of the 97 workers exposed, only 39% presented leucopenia, and only 10% presented low red blood cell count. The biochemical variables: urea, total proteins and fractions, Gamma GT, there were no significant changes. However, the dosages of creatinine, AST, ALT and alkaline phosphatase, showed significant changes (p <0.05) compared to the control group. It was also observed that butilcolinesterase inhibition was a non-significant data. Genotoxicity was observed on the exposed farmers (p <0.001), as seen in the damage index (45.85 vs 12.51) and the damage frequency (29.41 vs. 9.98) in exfoliated cells. We found a high damage index (33.27 vs. 10.12) and frequency of damage (21.44 vs. 9.38) in the lymphocytes of the exposed farmers, when assessed by the comet test. The mutagenic evaluation by the increase of micronuclei (MN) in oral mucosa was also statistically significant (p <0.001) in the exposed farmers (4.95  2.81) compared to those not exposed (0.72  1.20), as well as the increase in the frequency of MN (0.24  0.14 vs. 0.03  0.06). Similarly, mutagenicity in the lymphocytes evaluated by the MN test with cytokinesis block was observed (p <0.01) in the farmers (p <0.001) when compared to the unexposed group (9.38  1.05 vs. 5.50  0.84). Significant increase (p <0.001) in the percentage of chromosomal aberrations (CA) in exposed workers compared to the unexposed (3.24  0.44. vs. 0.40  0.07) were observed, with significance (p <0.001) for the types of AC: dicentric chromosomes, rings, tricentrics, acentric ring, terminal deletion and interstitial deletion. Significant evidence (p <0.001) for apoptosis was found in oral mucosa cells and lymphocytes, with cytokinesis blocking. Positive correlations (p <0.01, p <0.05) of DNA damage in oral mucosa cells were found for age, smoking, drinking and working time. However, these correlations were not observed for the micronuclei. In oral mucosa cells, apoptosis and binucleated cells were significantly (p <0.01) correlated with the age of the worker. Regarding the MN in lymphocytes, the percentage of AC and apoptosis, positive correlations with the alcohol consumption (p <0.01) was observed. MN in lymphocytes was also significantly correlated (p <0.05) with the low intake of micronutrients and the use of PPE. The parameters of genotoxicity and mutagenicity were indicative of genetic instability, which may suggest the risk of cancer. Thus, the biomonitoring of these farmers is necessary as a strategy for health surveillance, prevention and promotion of occupational health in the state of Piaui.

[pt] O presente trabalho envolve a implementação e validação de metodologia analítica para determinação de resíduos de agrotóxicos em amostras de alimentos provenientes do Estado do Rio de Janeiro, cujos resultados servirão para um aumento de informações de um banco de dados sobre os mesmos, bem como para o aprimoramento do sistema nacional de saúde e promoção da saúde da população. Foram analisados os agrotóxicos das classes nitrogenados e piretróides. As amostras foram coletadas no CEASA da cidade do Rio de Janeiro, uma vez que este é o principal centro distribuidor de frutas e hortaliças da cidade. As culturas escolhidas para análise foram maçã, manga, morango, pepino e tomate de mesa. Após a otimização das condições cromatográficas, metodologia de extração e validação da metodologia pelos parâmetros de curva analítica e linearidade, seletividade (efeito matriz), repetibilidade, recuperação, homocedasticidade e limite de detecção do método, as amostras foram coletadas e analisadas no período de novembro de 2016 a fevereiro de 2017. A análise foi baseada no método QuEChERS e quantificação por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas tandem, no modo de Monitoramento de Múltiplas Reações. Obteve-se um método de curta duração, inferior a vinte minutos, capaz de quantificar 41 agrotóxicos com dois monitoramentos precursor-produto para cada um dos analitos, apresentando as seguintes vantagens: rápido, econômico, fácil, efetivo, robusto e seguro. O LDM variou de 1,34 a 10,22 ng g(-1). A concentração de agrotóxicos das amostras esteve abaixo desses valores para a maioria (78 porcento dos casos) dos 41 agrotóxicos analisados. Para as culturas de tomate e pepino, os agrotóxicos quantificados estiveram próximos aos seus respectivos limites de detecção. Para a manga, observaram-se alguns picos de maior concentração para o propargito e lambda-cialotrina. O primeiro de uso não autorizado pela ANVISA e o segundo, embora presente, abaixo do limite estabelecido por esta agência. As culturas de maçã e morango apresentaram a maior contaminação por agrotóxicos (38 e 44 porcento acima do LDM, respectivamente), muitos não autorizados pela ANVISA. Por ser um centro de grande distribuição de alimentos, a CEASA é suprida por diferentes fornecedores, sendo assim a variabilidade das fontes de alimentos coletados é muito grande e, portanto, a continuidade desta sistemática de avaliação torna-se necessária. / [en] The present work regards the implementation and validation of a method for analysis of pesticide residues in produce from the state of Rio de Janeiro for the improvement of the national health system. Pyrethroids and triazines class pesticides were analyzed for this research. The samples were collected at CEASA in the city of Rio de Janeiro, since it is the main fruit and vegetable distribution center in the city. The produce chosen for the analyses were apple, mango, strawberry, cucumber and tomato. After optimization of the chromatographic conditions, extraction methodology and evaluation of the parameters linearity, selectivity (matrix effect), repeatability, recovery, homocedasticity and limits of detection of the method, the samples were collected, from November 2016 to February 2017. The QuEChERS method was used for the extraction of pesticide residues and the PSA method was used for the purification of extracts, both in triplicates. The extracts were analyzed by gas chromatography with tandem mass spectrometry in Selected Reaction Monitoring mode (Multiple Reaction Monitoring). A short run method was achieved for the determination of 41 pesticides with two precursor-product for each analyte. The analitycal method showed several advantages - quick, cheap, easy, effective, rugged and safe. The detection limits were 1,34 ng/g and 10,22 ng/g. The majority of the pesticides analysed (78 per cent) were below this result. For tomato and cucumber, the only quantified compounds were close to their respective detection limits. For the analysis of mango pesticides, some peaks of higher concentration for propargite and lambda-cyhalothrin were observed. The first one is not authorized by ANVISA and the second, although present, was found below the limit established by this agency. The apple and strawberry crops showed the highest contamination by pesticides (38 and 444 per cent, respectively), many of which were not authorized by ANVISA. CEASA is a large food distribution center, so it is supplied by different distributers. The variability of the sources of food collected is very large. A more representative study on the quality of food would require a higher number of samples with a higher frequency of sampling.

[pt] O crescimento da população mundial junto de mudanças no estilo de vida resulta em uma crescente demanda por culturas de alimentos e energia. O Brasil tem aumentado cada vez mais a produção e o fornecimento destas culturas para outras partes do mundo. O Cerrado tornou-se o centro da indústria de soja do Brasil. A savana natural foi substituída pelo cultivo de monoculturas que estão associadas ao uso intensivo de fertilizantes e pesticidas sintéticos. Este estudo determina em que medida a aplicação de agroquímicos no cultivo de soja contribui para a poluição dos corpos hídricos no Cerrado. Como medida para quantificar este impacto, a pegada hídrica cinza (GWF) do cultivo da soja em uma fazenda típica no município de Correntina-BA foi calculada para 5 anos de cultivo. O poluente mais significativo para todos os anos foi o pesticida 2,4-D. O GWF do cultivo da soja para o estudo de caso no período variou de 7.661 a 13.587 m3 por hectare e 2.441 a 7.651 m3 por tonelada de soja. O valor médio do nível de poluição da água (WPL) associado com a produção desta cultura na bacia hidrográfica foi de 48,6 por cento com valores que variaram de 36 por cento a 83 por cento. Os valores de GWF e WPL calculados mostram uma grande variação entre os diferentes períodos. O GWF em 2013/2014 teve valores discrepantes sendo 43,6 por cento maior do que os valores em 2010/2011. A diferença é devida principalmente a uma maior aplicação do pesticida, de 0,80 kg/ha para 1,42 kg/ha. O WPL em 2013/2014 chegou a 83 por cento. Os resultados indicam que com a tendência de crescimento da agricultura de grande escala na região a poluição por agrotóxicos dissolvidos dos corpos hídricos se intensificará a tal ponto que é provável que viole em breve o padrão de qualidade de água local. / [en] The growing world population, coupled with changes in lifestyle, result in an increasing demand for food, feed and energy crops. Brazil is increasingly producing and supplying these crops for other parts of the world. The Cerrado has become the centre of Brazil s soybean industry. The natural savannah has been replaced by crop monocultures which are associated with intensive use of synthetic fertilizers and pesticides. This study determines to which extent the application of agrochemicals in the cultivation of soybean contributes to the pollution of local river basins in the Cerrado. As a measure to quantify this impact, the grey water footprint (GWF) of soybean cultivation in a typical farm in the municipality of Correntina-BA is calculated for 5 cropping years. The most significant pollutant for all years was the pesticide 2,4-D. The GWF of soybean cultivation for the case study in the period ranged from 7,661 to 13,587 m3 per hectare and 2,441 to 7,651 m3 per tonne of soybean. The average water pollution level (WPL) associated with the production of this crop at river basin level was 48.6 percent. The average water pollution level (WPL) associated with the production of this crop at river basin level was 48.6 percent with values ranging from 36 percent to 83 percent. The calculated GWFs and WPLs show a large variation among different cropping seasons. The GWF in 2013/2014 had discrepant values, being 43.6 percent higher than the value in 2010/2011. This difference is mainly due to a higher application of the pesticide, from 0.80 kg/ha to 1.42 kg/ha. The WPL in 2013/2014 reached 83 percent . The results indicate that following the local trend of further intensification of large scale agriculture, the pollution of local water bodies with dissolved agrochemicals will increase to the point that it is likely to soon violate the local water quality standards.

[pt] O destino e os efeitos de produtos farmacêuticos recentemente se tornou uma questão de interesse ambiental embora pouco seja conhecido sobre sua entrada no ambiente. As drogas colinérgicas e colinesterásicas apresentam-se como um alvo importante da pesquisa ambiental relacionado a sua entrada no ambiente e suas interações físico-químicas e biológicas. Os ensaios com uso de à sondas protéicas são empregados para identificar a formação de complexos na presença de grupos específicos ou indicam a concentração de ligantes presente no ambiente onde se encontra a proteína. O emprego da enzima acetilcolinesterase (AChE) em biosensores para deterninação de inibidores é frequente porém poucos trabalhos exploram a fluorescência intrínseca das enzimas no desenvolvimento de metodologias para detectar espécies químicas ligantes. O objetivo deste trabalho foi propor novas sondas fluorescentes e formas de bioreconhecimento para a determinação de neurotoxinas em diferentes amostras. A proposta foi a de identificar sondas eficientes, de fácil obtenção e baixo custo para o desenvolvimento de métodos simples, sensíveis e seletivos. Para isso a detecção foi baseada na variação da fluorescência intrínseca das proteínas(por sua interação específica com os analitos) e na conjugação de fluoróforos extrínsecos específicos. Pode-se comprovar experimentalmente que a fração protéica obtida pode ser utilizada como sonda fluorescente na determinação dos analitos apresentados neste estudo. Nas determinações dos cinco analitos, os valores de LD e de LQ foram satisfatórios para a aplicação do método em amostras ambientais (solo) e clínicas (urina).As determinações de Gal apresentou desempenho satisfatório para atender diferentes tipos de amostras (LD = 1,3 x 10-9 mol L-1e LQ = 2,1 x 10-8 mol L-1).Os valores de LD e LQ para atropina (9,7 x 10-10 mol L-1 e 2,4 x 10-8 mol L-1, respectivamente) mostram-se adequados visto que outros sensores, como os eletroquimioluminescentes, apresentaram um valor de LQ de 1 × 10–7 mol L-1em amostras de urina. O método para os agrotóxicos metomil (LD = 9,5 x 10-10 mol L-1 e LQ = 2,2 x 10-8mol L-1); metamidofós (LD=1,5 x 10-9 mol L-1 e LQ=3,8 x 10-8 mol L-1) e metil paration (LD= 9,7 x 10-10 mol L-1 e LQ= 1,8 x 10-7 mol L-1) apresentarambom desempenho comparando-se à outros métodos descritos na literatura. A aplicação do método proposto em amostras de solo e urina (sem pré-tratamento) obtiveram recuperações a partir de 88 porcento (agrotóxicos em solo) e dos cinco analitos em urina. O método por fluorescência da sonda protéica não obteve diferença significativa do método analítico dos analitos por HPLC. A adaptação do método proposto à um sistema de biosensor com uso de uma sonda extrínseca (Tioflavina T) foi avaliado positivamente permitindo a imobilização da fração protéica em microplaca e o uso da Tioflavina T como sonda fluorescente da ligação AChE-inibidores. / [en] The fate and effects of pharmaceutical products has recently become a matter of environmental concern although little is known about its entry into the environment. Therefore, the cholinergic and cholinesterasicpresent a major target of environmental research related to his entry into the environment and their physico-chemical and biological interactions. Tests using the protein compounds as probes are employed where the optical properties of the complex protein-signal in the presence of analyte or specific groups indicating the concentration of ligand present in the environment. The use of acetylcholinesterase (AChE) activity in biosensors for inhibitors determination is common but few studies explore the intrinsic fluorescence of enzymes in the development of methods to detect chemical species ligands. The objective of this study was to propose new forms of fluorescent probes and bioaffinity for the determination of neurotoxins in different samples. The proposal was to identify probes efficient, easily accessible and low cost for the development of simple, sensitive and selective. For this the detection was based on the variation of the intrinsic fluorescence of proteins (by its specific interaction with the analytes) and the specific combination of extrinsic fluorophores. For the results presented in this plan can be affirmed that the protein fraction obtained can be used as a fluorescent probe in the determination of analytes of this study.Based on the five determinations of analyte, the values of LD and LQ are satisfactory for applying the method in environmental samples (ground) and clinical (urine). Measurements of Gal showed satisfactory performance to suit different types of samples (LD = 1.3 x 10-9mol L-1eLQ = 2.1 x 10-8mol L-1) values and LD LQ to atropine (9.7 x 10-10 mol L -1 and 2.4 x 10-8 mol L-1, respectively) appear to be suitable as other sensors, such as eletroquimioluminescentes showed a value of 1 LQ × 10-7 mol L-1 in urine samples. The method for pesticide methomyl (LD = 9.5 x 10-10 mol L-1 and LQ = 2.2 x 10-8mol L-1), methamidophos (LD = 1.5 x 10-9 mol L-1 and LQ = 3.8 x 10-8 mol L-1) and methyl parathion (LD = 9.7 x 10-10 mol L-1 and LQ = 1.8 x 10-7 mol L-1) comparing presents betterperformance to the other methods described in literature. The method proposed in soil samples and urine (no pretreatment) had recovered from 88% (ground pesticides) and five of analytes in urine. The t test comparison of means, applied to sets of determinations by fluorescence probe method and HPLC indicated the statistical equality in both recoveries. The adaptation of the proposed method a system of the biosensor with the use of an extrinsic probe (thioflavin T) has positively evaluated allowing immobilization of the protein in microplates and the use of thioflavin T as a fluorescent probe-connecting AChE inhibitors.