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Estudo da redução eletroquímica e desenvolvimento de métodos eletroanalíticos para a determinação de dicloroacetamidas com atividade antiamebíaca

Santos, André Luiz dos [UNESP] 10 August 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-08-10Bitstream added on 2014-06-13T20:46:02Z : No. of bitstreams: 1 santos_al_dr_araiq.pdf: 1649845 bytes, checksum: 0e7f40cc2525702d2d9c1d7f21fa3edd (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Neste trabalho estudou-se, sobre carbono vítreo, a redução eletroquímica do furoato de diloxanida (FD), do teclozan (TEC) e da etofamida (ET), os quais são os principais representantes dos fármacos amebicidas da classe das dicloroacetamidas. Em virtude da insolubilidade destes compostos em soluções aquosas, os estudos eletroquímicos foram realizados em acetonitrila contendo diferentes sais quaternários de amônio como eletrólito de suporte. Estes estudos foram realizados tanto para fins de elucidação dos processos eletródicos quanto para o desenvolvimento de metodologias eletroanalíticas para a quantificação destes fármacos em formulações farmacêuticas. A redução eletroquímica das dicloroacetamidas foi estudada pela técnica de voltametria cíclica e por eletrólises a potencial controlado, sendo os produtos eletrogerados isolados por meio de extração líquido-líquido e submetidos a análises por espectrometria de ressonância magnética nuclear de hidrogênio e por cromatografia em camada delgada. Os resultados obtidos mostraram que a redução eletroquímica de todas as dicloroacetamidas estudadas envolve a quebra redutiva de suas ligações C-Cl, sendo verificado que as eletrólises originaram uma complexa mistura de produtos. Este comportamento pode ser atribuído a várias reações químicas acopladas envolvendo intermediários eletrogerados. Verificou-se que a redução do FD e do TEC envolve a transferência de 4 elétrons, enquanto a redução eletroquímica da ET envolve 5 elétrons. Foi observado que a redução eletroquímica do TEC na presença de um doador de prótons conduz a sua completa descloração em etapas sucessivas. A primeira etapa reduz seus grupos CHCl2 a CH2Cl enquanto a segunda reduz os grupos CH2Cl a CH3. A redução eletroquímica da ET na ausência de um doador de prótons envolve dois processos eletródicos... / In this work, the electrochemical reduction of diloxanide furoate (DF), teclozan (TEC) and etofamide (ET) was studied on glassy carbon. These compounds are the most important dichloroacetamide derivatives employed in amoebiasis treatment. Due to the poor solubility of these drugs in aqueous solutions, the electrochemical studies were performed in acetonitrile containing different ammonium quaternary salts as supporting electrolyte. The electrochemical studies were performed aiming to elucidate the electrode processes and to develop electroanalytical methods for dichloroacetamides quantification in pharmaceutical formulations. The electrochemical reduction of the dichloroacetamides was studied by cyclic voltammetry and controlled-potential electrolyses. The electrogenerated products were isolated by liquid-liquid extraction and submitted to analyses by hydrogen nuclear magnetic resonance spectrometry and thin layer chromatography. It was observed that the electrochemical reduction of all studied dichloroacetamides involves the cleavage of their C-Cl bonds. In absence of a proton donor, all electrolyses have produced a very complex mixture as a consequence of several coupled chemical reactions involving electrogenerated intermediates. It was observed that DF and TEC reduction involves 4 electrons and ET reduction involves 5 electrons. The electrochemical reduction of TEC in presence of a proton donor leads to its complete dechlorination in successive steps. The first step promotes mainly the reduction of the groups CHCl2 to CH2Cl and the second one promotes the reduction of the groups CH2Cl to CH3. The ET electrochemical reduction in absence of a proton donor involves two electrode processes; the first reduces its nitro group to the respective radicalanion (R-NO2) and the second one is associated to the reductive cleavage of C-Cl bonds on ET molecule. In presence of a proton donor... (Complete abstract click electronic access below)
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Estudo comparativo de tecnicas parasitologicas e imunologica no diagnostico de parasitos intestinais

Mendes, Celia Regina 28 February 2002 (has links)
Orientador : Luiz Candido de Souza Dias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T06:37:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mendes_CeliaRegina_M.pdf: 13576403 bytes, checksum: 658c5e02dcbbc042ddbd5c20657b5786 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O diagnóstico parasitológico deve ser realizado de maneira apropriada, com maior sensibilidade e especificidade para a detecção dos parasitos intestinais, uma vez que dele dependerá o tratamento específico. Foi desenvolvido um estudo comparativo para avaliar a concordância entre os métodos Kato-Katz e Coprotest® na detecção de helmintos em 332 indivíduos do município de Pedro de Toledo e entre os métodos de Coprotest®, Lutz, hematoxilina férrica e ELISA (antígenos nas fezes) para diagnóstico de protozoários em 86 pacientes com história de amebíase intestinal. Na comparação de Kato-Katz com Coprotest®, observou-se uma diferença significativa para Trichuris trichiura que foi de 16,2% no Kato-Katz e de 7,5% no Coprotest®. Devido a essa diferença comparou-se amostras positivas e negativas do método de Coprotest® com número de ovos por grama de fezes (opg) obtido pelo método de Kato-Katz. Quando o método de Coprotest® foi negativo, contou-se 65 opg pelo Kato-Katz e quando o Coprotest® foi positivo, esse número foi maior, 199 opg. O Coprotest® mostrou-se inferior ao Kato-Katz quando a intensidade de infecção foi baixa. Não houve diferença significativa para Entamoeba histolytical Entamoeba dispar entre os métodos Lutz, Coprotest®, hematoxilina férrica e ELISA, indicando ótima concordância entre os mesmos / Abstract: Parasitological diagnosis requires a high degree of sensitivity and specificity to detect intestinal parasites because the right treatment depends on this result. A comparative study was conducted on 332 individuaIsin the municipality of Pedro de Toledo, SP, Brazil, to assess the concordance between the Kato-Katz and Coprotest® techniques for helminths detection as well as the concordance regarding the Coprotest®, Lutz, iron hematoxylin and ELISA (antigens in the feces) techniques for protozoa diagnosis in 86 patients with a history of intestinal amebiasis. The comparison of Kato-Katz with Coprotest® in 332 samples demonstrated a significant difference in relation to Trichuris trichiura, 16.2% Kato-Katz and 7.5% Coprotest®. The positive and negative samples of the Coprotest® method were compared with the number of eggs per gram of feces (epg) obtained in the Kato-Katz method because ofthis difference. When the Coprotest® method was negative, the epg was 65 in the Kato-Katz method and when Coprotest® method was positive, the epg was higher (199). The Coprotest® method demonstrated that it was inferior to the Kato-Katz when the intensity of infection was low. No significant difference was observed regarding Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar with the Lutz, Coprotest®, iron hematoxylin and ELISA methods while the Kappa was higher at 0.97 indicating an optimum concordance among the methods / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas
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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DA AMEBÍASE:Detecção e Diferenciação Simultânea da Entamoeba histolytica e Entamoeba dispar por Ensaio Imunoenzimático(ELISA) e Multiplex-PCR

Helena Lúcia Carneiro Santos 01 March 2005 (has links)
A amebíase é uma infecção causada pela Entamoeba histolytica. Entretanto, a diferenciação entre a E. histolytica e a Entamoeba dispar, espécies morfologicamente semelhantes, é fundamental para a conduta terapêutica, prevenção da doença invasiva e para a saúde pública. O propósito desde trabalho foi avaliar a Multiplex-PCR na detecção e diferenciação entre a E. histolytica e a E. dispar. Foi feita uma comparação entre os métodos de exame microscópico das fezes usando o conjunto diagnóstico Coprotest, a detecção de antígenos nas fezes usando um ensaio imunoenzimático comercial e o Multiplex-PCR padronizado no laboratório, para o diagnóstico da amebíase. A Multiplex-PCR foi padronizada usando amostras com parasitos obtidos de culturas padrões. Posteriormente, 127 amostras de fezes provenientes de duas comunidades do Estado do Rio de Janeiro, foram testadas e os resultados comparados. A análise de 127 amostras de fezes pelo exame parasitológico de fezes demonstrou que 27 (21%) amostras foram positivas para o complexo E. histolytica/E. dispar. Dessas amostras, 12 foram positivas pelo Multiplex-PCR, sendo que nove apresentaram o padrão de E. dispar (96 bp) e três o padrão E. histolytica (132 bp). Entre as amostras negativas detectadas pelo exame microscópico, três foram positivas para E. dispar e uma foi positiva para E. histolytica pelo Multiplex-PCR. Esse fato mostrou que a PCR foi mais eficiente do que o exame parasitológico realizado com uma amostra de fezes. Os resultados obtidos pelo ensaio de detecção de antígeno de E. histolytica foram concordantes com o do Multiplex-PCR. A análise estatística comparando os resultados do ELISA coproantígeno com o Multiplex-PCR, não pode ser feita devido ao baixo número de casos de E. histolytica. Os resultados acima indicam a necessidade do uso de métodos mais sensíveis para o diagnóstico da amebíase e a importância de se usar técnicas específicas na diferenciação entre E. histolytica e E. dispar. / Amebiasis is defined as an infection caused by Entamoeba histolytica. However, precise differentiation between E. histolytica and Entamoeba dispar, which are morphologically identical species, is essential for treatment decision, prevention of the invasive disease and public health. The purpose of the present study was to evaluate a Multiplex-PCR for detection and differentiation of E. histolytica from E. dispar. Microscopic examination of stools using the coprotest kit, detection of stool antigen using a commercial enzyme-linked immunosorbent assay kit and a home made Multiplex-PCR, were compared for the diagnosis of amebiasis infection. The Multiplex-PCR was standardized using stool samples with parasites obtained from standard cultures. Afterwards, 127 stool samples obtained from individuals living in two villages of the state of Rio de Janeiro were tested and the results were compared. Analysis of the 127 stools samples by microscopy examination demonstrated that only 27 (21%) samples were positive for E. histolytica /E. dispar complex. Among these stool samples, 12 were positive by Multiplex-PCR, with nine presenting the diagnostic fragment characteristic of E. dispar (96 bp) and three presenting diagnostic fragment of E. histolytica (132 bp). Among the negative samples detected by microscopic examination, three were positive for E. dispar and one was positive for E. histolytica by Multiplex-PCR. This denotes that Multiplex-PCR was more efficient than microscopic examination when single stool samples were analyzed. The results obtained by detection of E. histolytica antigen were in agreement with those obtained by the multiplex-PCR. Statistical analyses comparing coproantigen ELISA with Multiplex-PCR results were not done because of the low number of E. histolytica cases. The overall results indicate the need to use more sensitive methods for the diagnosis of amebiasis infection and the importance of using specific techniques for the differentiation between E. histolytica and E. dispar.

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