Duas provas de imunodiagnóstico foram padronizadas em Curitiba, Paraná, Brasil, 2000: imunofluorescência indireta (IFI) e reação imunoenzimática (ELISA), para pesquisa, em líquido cefalorraquiano, de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae de 39 indivíduos com neurocisticercose portadores de cistos vivos ou em degeneração, confirmado por tomografia axial computadorizada. Dois antígenos foram estudados: um homólogo (Cysticercus cellulosae) e outro heterólogo (Cysticercus longicollis). O rendimento de líquido vesicular de Cysticercus longicollis na produção dos antígenos de IFI e ELISA foi significativamente superior ao de Cysticercus cellulosae. Para Cysticercus cellulosae foram utilizados apenas escólices, membranas parasitárias e extrato salino total em função do pequeno rendimento de líquido vesicular. Para a técnica de IFI o número de partículas, por campo, no aumento de 400x ficou estabelecido em 20 a 30. A diluição do conjugado foi 1 :250. O teste de ELISA ficou assim padronizado: Concentração de antígeno: 1 µg/orifício; Diluição do líquido cefalorraquiano: 1/1; Diluição do conjugado: 1: 3000; ponto de corte - C. cellulosae DO. 0,210; ponto de corte - C. longicol/is DO. 0,306.Quando comparado ao padrão ouro e ao teste sorológico com antígeno homólogo, caracterizando o diagnóstico de certeza definitivo, a sensibilidade no teste de imunofluorescência indireta, foi de 90,6%, considerando o número total de amostras analisadas (39), variando de 90,5% para amostras de pacientes com cistos em atividade a 90,9% para amostras de pacientes com calcificações no encéfalo. Quando se trabalhou com o teste imunoenzimático a sensibilidade para o mesmo grupo de amostras foi de 90,9%, variando de 95,2% a 83,3%, respectivamente para amostras de pacientes com cistos em atividade e para amostras de pacientes com calcificações no encéfalo, igualmente com diagnóstico de certeza definitivo para neurocisticercose. O antígeno heterólogo pode ser utilizado como alternativa ao antígeno homólogo. O rendimento e o controle das variáveis ambientais na manutenção da cepa e os indicadores dos testes permitem a utilização deste componente biológico para produção de extratos antigênicos destinados a pesquisa de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae em líquido cefalorraquiano

Orientador : Luiz Candido de Souza Dias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T06:37:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mendes_CeliaRegina_M.pdf: 13576403 bytes, checksum: 658c5e02dcbbc042ddbd5c20657b5786 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O diagnóstico parasitológico deve ser realizado de maneira apropriada, com maior sensibilidade e especificidade para a detecção dos parasitos intestinais, uma vez que dele dependerá o tratamento específico. Foi desenvolvido um estudo comparativo para avaliar a concordância entre os métodos Kato-Katz e Coprotest® na detecção de helmintos em 332 indivíduos do município de Pedro de Toledo e entre os métodos de Coprotest®, Lutz, hematoxilina férrica e ELISA (antígenos nas fezes) para diagnóstico de protozoários em 86 pacientes com história de amebíase intestinal. Na comparação de Kato-Katz com Coprotest®, observou-se uma diferença significativa para Trichuris trichiura que foi de 16,2% no Kato-Katz e de 7,5% no Coprotest®. Devido a essa diferença comparou-se amostras positivas e negativas do método de Coprotest® com número de ovos por grama de fezes (opg) obtido pelo método de Kato-Katz. Quando o método de Coprotest® foi negativo, contou-se 65 opg pelo Kato-Katz e quando o Coprotest® foi positivo, esse número foi maior, 199 opg. O Coprotest® mostrou-se inferior ao Kato-Katz quando a intensidade de infecção foi baixa. Não houve diferença significativa para Entamoeba histolytical Entamoeba dispar entre os métodos Lutz, Coprotest®, hematoxilina férrica e ELISA, indicando ótima concordância entre os mesmos / Abstract: Parasitological diagnosis requires a high degree of sensitivity and specificity to detect intestinal parasites because the right treatment depends on this result. A comparative study was conducted on 332 individuaIsin the municipality of Pedro de Toledo, SP, Brazil, to assess the concordance between the Kato-Katz and Coprotest® techniques for helminths detection as well as the concordance regarding the Coprotest®, Lutz, iron hematoxylin and ELISA (antigens in the feces) techniques for protozoa diagnosis in 86 patients with a history of intestinal amebiasis. The comparison of Kato-Katz with Coprotest® in 332 samples demonstrated a significant difference in relation to Trichuris trichiura, 16.2% Kato-Katz and 7.5% Coprotest®. The positive and negative samples of the Coprotest® method were compared with the number of eggs per gram of feces (epg) obtained in the Kato-Katz method because ofthis difference. When the Coprotest® method was negative, the epg was 65 in the Kato-Katz method and when Coprotest® method was positive, the epg was higher (199). The Coprotest® method demonstrated that it was inferior to the Kato-Katz when the intensity of infection was low. No significant difference was observed regarding Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar with the Lutz, Coprotest®, iron hematoxylin and ELISA methods while the Kappa was higher at 0.97 indicating an optimum concordance among the methods / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Luiz Candido de Souza Dias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:10:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_RosanaAparecidaTrevisan_M.pdf: 29716650 bytes, checksum: 98dd518aeb2565fc09166e5ef8722ea0 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O estudo foi realizado no município de Pedro de Toledo, situado no Vale do Rio Ribeira de Iguape, São Paulo. A população estudada foi escolhida de forma aleatória e depois caracterizada quanto à área de moradia, sexo e idade. Tive-se o interesse em estimar a soroprevalência para toxocaríase e esquistosomose mansoni e prevalência de parasitos intestinais. A toxocaríase é uma zoonose comum em cães e gatos e é causada por Toxocara canis. A prevalência para toxocaríase foi revelada pela técnica imunoenzimática de ELISA, com uso de antígeno proveniente de larvas de Toxocara canis contra anticorpos anti-Toxocara canis IgG. A coleta de sangue foi realizada em papel de filtro, pela técnica de puntura digital, sendo todas as amostras testadas em duplicata. A técnica utilizada para diagnóstico da infecção por Schistosoma mansoni foi a reação de imunofluorêscencia indireta IgM para a detecção de anti- Schistosoma mansoni. As amostras de fezes foram examinadas pelos métodos parasitológicos de Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ e Kato-Katz. A análise de dados indicou que a prevalência para Toxocara canis foi mais elevada (26,8%) em indivíduos mais jovens. Também estava mais associada em moradores da área urbana (50,7%). Quanto ao sexo dos examinados a toxocaríase mais prevalente nos homens (43,2%). Neste estudo, a prevalência sorológica para a esquistOssomosefoi de 19,3%. Nos exames de fezes foram registrados índices de 2,0% no Kato-Katz e 0,9% Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿. A média geométrica foi de 24 ovos por grama de fezes, indicando intensidade leve de infecção. Houve diferença acentuada entre as prevalências sorológica e parasitológica. A análise de dados encontrou que a prevalência geral para helmintos intestinais foi de 43,6% e de 44,3% respectivamente para as técnicas de Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ e Kato-Katz. Os helmintos mais prevalentes foram Ascaris lumbricoides (37,6%), Trichuris trichiura (17,3%) e ancilostomatídeos (10,4%). As helmintíases foram mais freqüentes na zona rural. Neste estudo relatou-se diferença significativa no diagnóstico da infecção causada por Trichuris trichiura pelos métodos de Kato-Katz 17,3% e 7,8 no Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿. Devido a essa diferença, compararam-se amostras positivas e negativas do método Coprotes 'MARCA REGISTRADA¿ com o número de ovos por grama de fezes (opg) obtido pelo Kato-Katz. Quando o Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ era negativo foi verificado que a intensidade de infecção foi leve. Quanto aos protozoários intestinais o índice registrado foi de 26,1%, segundo técnica de Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿. Porém quando consideradas apenas as espécies patogênicas (Giardia intestinalis 10,4%, Blastocystis hominis 4,8% e Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar, 1,3%) a prevalência foi menor (14%). O protozoário intestinal mais prevalente foi a Entamoeba coli 12,6%. Desde 1980 é desenvolvido na região programa de controle para a infecção causada por Schistosoma mansoni, visto que a região ainda é considerada de baixa endemicidade. Apesar da não erradicação da infecção os coeficientes de prevalência tem se mostrado cada vez menores, embora exista um residual de transmissão senso confirmado pelo exame parasitológico. Neste estudo encontram-se altos índices para toxocaríase e parasitoses intestinais o que comprova a necessidade de medidas de controle e vigilância sanitária. Também seria importante alertar a população com medidas de prevenção contra as infecções / Abstract: This study was conducted in Pedro Toledo, Vale do Rio Ribeira de Iguape, State of Sao Paulo. The population sample was randomly chosen and then classified according to the residential area, sex and age. Our purpose was to estimate the seroprevalence of toxocariasis and schistosomiasis mansoni as well as the prevalence of intestinal parasites. Toxocariasis is a zoonosis caused by Toxocara canis and is commonly found in cats and dogs. The immunoenzymatic ELISA technique, which utilizes the antigen from the Toxocara canis larvae against anti-Toxocara canis IgG antibodies, was applied to obtain toxocariasis prevalence. Blood samples were collected on filter paper using the finger puncture technique and duplicate samples were tested. The indirect IgM immunofluorescence test technique for detection of anti- Schistosoma mansoni was utilized in the diagnosisof infections caused by Schistosoma mansoni The stool samples were examined by the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ and the Kato-Katz parasitological methods. Data analysis indicated that Toxocara canis prevalence was higher (26.8%) in young individuals and demonstrated a higher relationship with residents of urban areas (50.7%). Toxocariasis was also found to be more prevalent in males (43.2%). In our study, the serological tests revealed that the prevalence of schistosomiasis was 19.3%. The stool examination results registered 2.0% for the Kato-Katz test and 0.9% for the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿. The geometric mean was 24 eggs per gram of fecal matter, indicating a slight infection leveI. The difference between results of the serological and parasitological tests was very clear. Data analysis revealed that the general prevalence of intestinal helminthes using the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ and Kato-Katz tests was 43.6% and 44.3%, respectively. The most prevalent helminthes were: Ascaris lumbricoides (37.6%), Trichuris trichiura (17.3%) and ancylostomatidae (10.4%). Helminthiases were more common in the rural area. This study exposes a significant difference in diagnoses of infections caused by the Trichuris trichiura utilizing the Kato-Katz (17.3%) and the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ (7.8%) methods. Therefore, the positive and negative samples of the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ method were compared with number of eggs per gram (epg) of fecal matter obtained by the Kato-Katz. When the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ results were negative, the leveIof infectionwas found to be low. According to the Coprotest@ technique, the leveI of intestinal protozoa was 26.1%. However, when only the pathogenic species were considered (Giardia intestinalis 10.4%, Blastocystis hominis 4.8% and Entamoeba histolytica / Entamoeba dispar 1.3%) the prevalence was lower (14%). The most prevalent intestinal protozoa were Entamoeba coli 12.6%. The control program, initiated in this area in 1980, of infections caused by Schistosoma mansoni, has been continued as this area is still considered as a region of low endemicity. Although the infection has not been eradicated, prevalence coeflicients have been steadily decreasing, despite the fact that residual transmission has been confirmed by parasitological exams. Our study revealed high parasitic infection rates that prove the need for control measures and sanitary surveillance,as well as the importance of warning the population and implementingpreventive actions against these infections / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador : Clarice Weis Arns / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T23:39:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arita_GoncalaMariaMartins_D.pdf: 10876562 bytes, checksum: 249660946a1462f3d72549cb5ff24775 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A são avaliadas pelo teste de Habel, considerando o índice 2=104,0 IDL 50 para aprovação oficial das partidas. O objetivo do presente estudo é comparar os testes NIH ("National Institute of Health") e o ELISA indireto com o teste de Habel e produzir experimentalmente a vacina de referência nacional (VRN), para uso no NIH. Foram testadas 210 partidas de vacinas, paralelamente pelos testes de Habel e NIH. O teste de Habel aprovou 82,38% de partidas, enquanto o NIH, segundo os limites de 0,9; 0,97; 0,98; 1,0 e 1,1 aprovou, respectivamente, 77,62%; 75,71%; 75,23%; 73,81% e 71,90%. O valor discriminante encontrado para o NIH foi acima de 0,98, sugerindo o uso oficial de 1,0 DI. O teste ELISA indireto foi aplicado a soros de camundongos imunizados com 70 partidas de vacinas, com diferentes índices no Habel. Os pontos de corte, a sensibilidade (S), a especificidade (E), os valores preditivos de resultados positivo (VPRP) e negativo (VPRN) e a razão entre o soro controle positivo e soro de camundongos não vacinados foram determinados, sendo então, recomendado o uso da diluição 1/400, que apresentou ponto de corte de 0,225; 8=97%; E=1O0%; VPRP=1O0% e VPRN=78%, nesse método. A vacina de referência nacional (VRN) foi produzida experimentalmente em células BHK-21, C 13, infectadas com o vírus Pasteur (PV). As suspensões virais (5!! BHK) apresentaram títulos 1O7,66DL 50/rnL em camundongos lactentes e 107,17 DL 50/rnL em camundongos adultos jovens e 3,10 _glrnL de glicoproteína total. O material foi dividido em duas amostras (A e B) e inativado, respectivamente, pela bromo etilienoimina binária (BEI) e pela _-propiolactona (BPL). Para ambos os inativantes houve decréscimo rápido da infectividade e o conteúdo de glicoproteína (cG) total apresentou lenta redução da degradação viral. As amostras A (BEI-12 horas) e B (BPL-6 horas) apresentaram cG insolúvel de 1,92 µg/rnL e 2,02 _glmL, respectivamente e apresentaram resultados satisfatórios nos testes de inativação viral, toxicidade e esterilidade. Para o teste de potência A e B foram sub-divididas em AI e BI (5x concentradas) e A2 e B2 (l10x concentradas), que apresentaram bom desempenho nos testes de controle de qualidade e foram capazes de estimular a resposta imune em camundongos, manifestada pela quantificação de anticorpos IgG e pela proteção ao desafio viral, sugerindo que a metodologia de produção foi adequada à obtenção de uma VRN, compatível com a Vacina de Referência Regional do INPP AZ, podendo ser ampliada para atender à demanda nacional, no NlH.eficiência das vacinas anti-rábicas inativadas comerciais de uso animal, no Brasil, comparative study between quality control tests of antirabies inactiv ated v accines for animal use and experimental production of the national reference v accine for nm / Abstract: The efficiency of anti-rabies inactivated vaccines that are commercialized for animal use, in Brazil, is evaluated by the Habel test, considering =1 04,o/DL 50 for official approval of the lots. The goals of the present study is to compare the NIH ("National Institute of Health") and the indirect ELISA tests to the Habel test and produce the National Reference Vaccine (VRN) experimentally, to be used in the NIH. Two hundred and ten 10ts of vaccine have been tested by the NIH test parallel to the Habel testo The NIH test, following the limits 0,9UI; 0,97UI; 0,98UI; 1,OUI and 1,1 UI approved, respectively, 77,62%; 75,71%; 75,23%; 73,81%; 71,90%, while the Habel test approved 82,38% ofthe 10ts. The cut offvalue determined for the NIH was more than 0,98 DI so 1,0 UI is recomended as the official cut-offvalue. The indirect ELISA was applied in seras of mice immunized with 70 lots of vaccines with varied results in the Habel. The cut off values, the sensibility (8), the specificity (E), the predictable values for positive (VPRP) and negative (VPRN) results and the ratio between positive standard sera and no vaccinated mice sera were determined, so it was decided to adopt in this method the dilution of 1/400 that presents cut-off value of 0,225; 8=97%; E=1O0%; VPRP=100% and VPRN=78%. The National Reference Vaccine (VRN) was produced in BHK cells, C 13, with the Pasteur vírus (PV). The viral suspensions (5!!! BHK) had been titres of 107,66DL 50/rnL in lactents mice and 107,17 DL 50/rnL in young adult mice and 3,10 _g/rnL of total rabies glycoproteins (G). The final volume was divided into samples A and B, tOOt were inactivated, respectively, by binary ethyleneimine (BEI) and by p- propiolactone (BPL). For both inactivants there was a fast decrease ofthe infectivity and a slow decrease ofviral degradation in G contento Sample A (BEI-12 hours) and B (BPL-6 hours) presented insoluble G=1,92 µg/rnL and 2,02 µg/rnL, respectively, as the contents. Both presented satisfactory results in the viral inactivation, in toxicity and in sterility tests. For the potency test, samples A and B were sub-divided into AI and BI (5x concentrated) and into A2 and B2 (l0x concentrated), that presented good response in quality control tests and were capable of inducing immune response in mice, mesured through IgG quantification and protection against the viral challenge, suggesting that the production methodology was adequate to the VRN obtention, compatible to the Regional Reference Vaccine -INPPAZ-, able to be amplified to supply the national request, in the NIH / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Clarice Weis Arns / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T23:35:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monteiro_MariaCeliaGarciaBezzan_M.pdf: 3780766 bytes, checksum: 2e7830137747659681f5ac3581919f0c (MD5) Previous issue date: 2000 / Mestrado

Orientador: Jose Luiz Pereira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-02T07:52:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Piccoloto_FabianaMariaBertoniBonetti_D.pdf: 17393262 bytes, checksum: 9dbd255fd8182a3da633a37be65c07ba (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A Doença Celíaca (DC) é uma intolerância permanente ao glúten, manifestada em crianças e adultos, que agride e danifica as vilosidades do intestino delgado prejudicando a absorção dos alimentos. Suas conseqüências são diarréia, vômitos, emagrecimento acentuado, anemia, baixa estatura e desnutrição aguda, podendo levar o paciente à morte na ausência de um diagnóstico. Nos países europeus, a incidência da moléstia é de 1:300, enquanto no Brasil ainda não existem estatísticas. O tratamento da DC é basicamente dietético. As pessoas portadoras desta enfermidade devem excluir o glúten da dieta durante toda a vida. Não podem ingerir alimentos provenientes de trigo, centeio, cevada e aveia. Evitar o glúten da dieta requer exame minucioso dos rótulos das embalagens dos alimentos. Embora, a princípio, seguir dieta estritamente isenta de glúten possa parecer simples, na prática evidencia-se uma série de dificuldades na manutenção desta dieta, não somente por parte do paciente, mas também pela presença de glúten numa vasta quantidade de alimentos processados, sem que sua composição esteja especificada na rotulagem, possibilitando o encontro desta proteína em alimentos inesperados. Em vista disso, 177 produtos industrializados, disponíveis no mercado brasileiro, foram analisados quanto à presença de glúten. Destes 83 eram produtos de panificação, 34 bebidas, 24 condimentos, 22 embutidos e 14 desidratados. Utilizou-se para análise um ensaio imunoenzimático comercial baseado num anticorpo monoclonal para ro-gliadinas. Os resultados da análise mostraram que o glúten estava presente em 84% dos produtos. Dos 98 alimentos naturalmente isentos, apenas 19 não apresentaram a proteína em sua composição. A maioriadas amostras apresentou níveisde glúten inferiores a 0,016%. Quatro amostras tinham teores de glúten entre 0,016 e 0,046% e apenas uma amostra apresentou um teor entre 0,10 e 0,30%. Os resultados sugeriram que durante o processamento, produtos naturalmente isentos sofreram contaminação por glúten, inaceitável aos portadores da DC. Além disso, muitos alimentos ainda se encontram com rotulagem incompleta,não apresentando a advertência "contém glúten". / Abstract: Coeliac Disease (CD) is a permanent gluten intolerance that affects children and adults, and is characterized by damage to the villi in the small intestine causing nutrients malabsorption. Symptoms of CD can range from the classic features, such as diarrhea, growth failure, vomiting, weight loss, anemia, to an acute malnutrition which can takes the patient to death in the absence of the right diagnosis. The incidence of gluten intolerance has been reported to be 1:300 in European countries, while in Brazil there is no statistics. The treatment for CD is based on diet. People suffering from this disorder should eliminate gluten from their diet for the entire life. A gluten-free diet means avoiding ali products that contain wheat, rye, barley and oat. It would be recommended for patients to examine the food labels very carefully. Although the adherence to a gluten - free diet may seems simple, in fact there is a series of difficulties in the maintenance of this diet, not only from the patient perspective, but also due to the following reasons: gluten can be found in unexpected sources, composition of foods is not exactly known and the food labeling is quite often incomplete. In order to check what was mentioned above, 177 Brazilian products were analysed for determination of gluten. A commercial enzyme immuno assaywas used based on a monoclonal antibody to omega-gliadin to analyse 83 bakery products, 34 beverages, 24 sauces, 22 sausagesand 14 dehidrated soups. The results showed gluten presence in 84% of the examined products. In 19 out of 98 products claimed to be g/uten free by nature, gluten was not found. The majority of the samples had levels under 0.016% of gluten. Four samples had a gluten level between 0.016 and 0.046%, while just one sam plehadleveiof gluten between 0.10 and 0.30%. It is suggested that during the food processing, the naturally g/uten free products were contaminated with the toxic protein.Such contamination is unacceptable for the patients who suffer from CD.Besides this, a lot of products had incomplete labeling,not calling the consumer's attention for the presence of gluten. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador: Jose Murilo Robilotta Zeitune / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:54:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Parente_JoseMiguelLuz_M.pdf: 780772 bytes, checksum: e0c5b9ba3b5e0866ef4ebb5cdea5ead2 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O Helicobacter pylori (H. pylori) é uma bactéria com características de bacilo Gram negativo, de forma espiralada ou curvada, possuindo até cinco flagelos unipolares, e que desencadeia um processo inflamatório crônico ativo da mucosa gástrica, levando, como conseqüência, ao desenvolvimento de inúmeras doenças gastro-duodenais, principalmente a doença ulcerosa péptica, o carcinoma gástrico e o linfoma tipo MALT. Foi conduzido um estudo epidemiológico do tipo observacional de corte transversal com o objetivo de detectar a prevalência da infecção pelo H. pylori em crianças até 12 anos de idade, residentes em bairros de uma mesma área urbana da cidade de Teresina, contudo pertencentes a dois grupos populacionais distintos do ponto de vista de renda familiar e disponibilidade de infra-estrutura básica domiciliar, caracterizando dois grupos, um de baixa renda e precárias situações sócio-econômicas e de infra-estrutura sanitária, e outro de alta renda e boas condições sanitárias, denominados grupo I e grupo II, respectivamente. Nesta pesquisa, foram estudados os seguintes aspectos em relação à infecção ativa pelo H. pylori: a prevalência em função da faixa etária, a distribuição da prevalência de acordo com o gênero, a sua relação com renda familiar e com diferentes condições de disponibilidade de infra-estrutura sanitária. O universo populacional que participou do estudo foi formado por 303 crianças, sendo 169 do grupo I e 134 do grupo II. Em relação ao gênero, 163 eram do sexo masculino e 140 do sexo feminino. Como método diagnóstico, foi utilizado um teste não invasivo, que pesquisou a presença de um antígeno específico do H. pylori presente nas fezes dos indivíduos infectados, denominado HpSA, através da técnica de ELISA. Os resultados deste estudo indicaram que a prevalência global da infecção pelo H. pylori foi de 38,0%, tendo sido muito elevada no grupo I, qual seja, 55,0%, enquanto no grupo II foi muito baixa, atingindo apenas 16,4%. Os resultados obtidos isoladamente nos dois grupos foram semelhantes aos dados observados nos países subdesenvolvidos e industrializados, respectivamente, indicando que nesta população existiam condições que favoreceram a aquisição da infecção nas populações com baixa renda familiar e precárias condições higiênico-sanitárias. As demais análises da pesquisa também indicaram que a infecção ocorreu precocemente na infância, em ambos as populações, já nos primeiros anos de vida, havendo aumento progressivo com a idade, nos anos seguintes durante a infância. Em relação ao gênero, o resultado global do estudo demonstrou que a infecção pelo H. pylori ocorreu igualmente em ambos os sexos. Os fatores de risco associados à infecção pelo H. pylori, determinados neste estudo, foram baixa renda familiar e aqueles associados a precárias condições de infra-estrutura domiciliar, quais sejam, ausência de pavimentação da rua, moradias construídas precariamente, ausência ou precariedade de pisos nas residências, ausência ou deficiência de esgotamento sanitário e ausência de coleta do lixo domiciliar / Abstract: Helicobacter pylori (H. pylori) is a small curved and S-shaped Gram negative bacilli, with up to five sheathed flagelae arising from one end. The bacteria has been associated to some histological changes and gastroduodenal diseases, among which active chronic gastritis, duodenal ulcer, gastric adenocarcinoma and mucosa-associated lymphoid tissue (MALT) lymphoma. A cross-sectional study was conducted in the urban area of Teresina, a city situated in the Northeast of Brazil, the poorest region of the country. The aims of this study were to determine (a) the prevalence of active H. pylori infection in asymptomatic children, in 0.5¿12-year-olds, (b) the age-distribuition pattern during childhood, and (c) the relationships with factors such as SES (including family income, housing and sanitary conditions) and gender. Data collect was carried out in a community base, by sampling, at random, in a zone of the city inhabited by population groups with different SES and available sanitary infrastructure, though they have lived in adjacent areas. This zone includes concentrated areas of high and middle classes families along with powerty areas in shantytowns with mud wallet dwellings for the very low income families. The global population that participated in this study was constituted of 303 children, divided in two groups: group I, composed of 169 children from low income families, and group II composed of 134 from families with higher incomes and standards of living. Of the eligible study population, 163 (53,8%) were males and 140 (46,2%) females. The diagnostic method used in this study was a noninvasive enzyme linked imuneassay (ELISA) that detects H. pylori specific antigen (HpSA) in selected faeces samples, employing anti-HpSA policlonal antibody absorbed in microwells. Overall 303 stool samples analysed, 115 (38.0%) were HpSA positive. Low income population (group I) presented greater prevalence rates, equivalent to 55.0%, while in high income population (group II) the prevalence was only 16.4%. In both groups, it was very clear that H. pylori infection occurs early in childhood since a very young ages and increases gradually with age. It was found that the prevalence rates, in accordance with gender, was not considered statistically significant. This study has shown that low family income, precarious conditions of living, housing and sanitary infrastructure can play an important role in H. pylori infection acquisition. On the other hand, there was a clear relationship between low H. pylori prevalence with high standards of living. In fact, the low prevalence observed in high SES group, similar to the rates showed in developed countries, may be linked to improvements in hygiene pratices and standards of living / Mestrado / Medicina Interna / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Getulio da Rocha Nogueira Filho, Maria Cristina Foss de Freitas / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-14T01:50:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tunes_RobertaSantos_D.pdf: 3904894 bytes, checksum: 5bfa07e25946e02ccbf23c44e8160e08 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Este estudo objetiva verificar a influência sistêmica da periodontite crônica severa frente ao controle metabólico bem como do tratamento periodontal na resposta imunológica de indivíduos diabéticos tipo 2 através da análise da expressão gênica e protéica de citocinas por células mononucleares aderentes de sangue periférico. Foram selecionados 20 pacientes divididos em: grupo teste - 10 diabéticos tipo 2 com periodontite crônica severa e controle metabólico inadequado; grupo controle - 10 diabéticos tipo 2 sem periodontite e controle metabólico inadequado. Primeiramente, os pacientes foram hospitalizados por 8 dias para a obtenção de um controle metabólico adequado, permanecendo inalterada a condição periodontal nesta fase. Posteriormente, o grupo teste foi submetido à terapia mecânica em estágio único associada à antibioticoterapia sistêmica com amoxicilina e metronidazol. Amostras sanguíneas foram obtidas no primeiro e último dias de hospitalização, e 4 a 6 semanas após o tratamento periodontal para a análise imunológica. Para avaliação dos parâmetros laboratoriais relacionados ao controle metabólico, como HbA1c, foram obtidas amostras sanguíneas antes e após a hospitalização, e 3 a 6 semanas após o tratamento periodontal. Culturas de um total de 2,5x106 células/mL mononucleares aderentes, foram realizadas por 24h na presença e ausência de LPS (5µg/mL). As citocinas TNF- a, IL-1 ß, IL-8 e IL-6 foram detectadas nos sobrenadantes das culturas através do ELISA, enquanto que a sua expressão gênica foi verificada por PCR em tempo real. Enquanto o controle metabólico diminuiu a secreção de TNF- a (p=0,02), IL-1ß(p=0,03), IL-8 (p=0,04) e IL-6 (p=0,02) nos sobrenadantes das células estimuladas do grupo controle, os pacientes do grupo teste apresentaram níveis maiores destas citocinas após o controle metabólico quando comparados ao grupo controle (p<0,01 ou p=0,01). O controle metabólico bem como a infecção periodontal severa, apesar de não terem influenciado a expressão gênica das citocinas próinflamatórias pelas células estimuladas de ambos os grupos, aumentou a expressão gênica em 2 vezes da IL-8 (p=0,04) pelas células basais do grupo teste, evidenciando-se uma hipoexpressão, respectivamente, de 4, 3 e 11 vezes, da IL-1 ß, IL-8 e IL-6 (p<0,01 ou p=0,01) por estas células no grupo teste em relação ao grupo controle, antes do controle metabólico. Enquanto o tratamento periodontal promoveu uma diminuição da secreção de TNF-?(p=0,04) pelas células estimuladas do grupo teste, o mesmo não influenciou a expressão gênica das citocinas nestas condições. O controle metabólico associado ao tratamento periodontal promoveu um aumento da expressão gênica em 6 e 5 vezes, respectivamente da IL-1 a e IL-6 (p<0,01), pelas células basais do grupo teste. Enquanto, o controle metabólico promoveu reduções na HbA1c de 1% no grupo controle (p=0,04) e 1,1% no grupo teste (p=0,03), o tratamento periodontal promoveu uma redução adicional de 1,6% na HbA1c do grupo teste. Assim, demonstrou-se o papel modulador da periodontite crônica severa na resposta imunológica dos pacientes diabéticos tipo 2, mantendo a capacidade reativa próinflamatória das células mononucleares frente ao controle metabólico, e que o tratamento desta infecção local pode exercer efeitos sistêmicos, diminuindo o potencial próinflamatório das células mononucleares circulantes, contribuindo para a melhor sensibilidade insulínica e facilitando o controle metabólico destes indivíduos / Abstract: The purpose of this study was to evaluate the systemic influence of chronic severe periodontitis in relation to metabolic control and of periodontal therapy in the immune response of diabetic type 2 patients through the evaluation of cytokine protein and gene expression in human adherent peripheral blood mononuclear cells. Twenty patients were studied, distributed in 2 groups: test group - 10 type 2 diabetic patients with severe chronic periodontitis and inadequate metabolic control; control group - 10 type 2 diabetic patients without periodontitis and inadequate metabolic control. First, all participants were hospitalized for 8 to 10 days to obtain adequate metabolic control, without any periodontal condition alterations. Afterwards, the test group received one-stage non-surgical eriodontal therapy associated with Amoxicilin and Metronidazole. Blood samples were obtained on he first and last day of hospitalization, and 4 to 6 weeks after periodontal therapy for immunological analyses. For metabolic parameters analyses, like HbA1c, blood samples were obtained before and after hospitalization, and 3 to 6 weeks after periodontal therapy. Mononuclear cells were isolated by gradient density using Ficoll-Hypaque?. A total of 2.5 X 106 adherent cells/mL were cultivated during 24hs in the presence or absence of LPS. The cytokines TNF-a, IL-1ß, IL-8, IL-6 were quantified in cell culture supernatants using ELISA, while their gene expression was verified by Real Time PCR. It was demonstrated that metabolic control promoted a reduction of TNF- a (p=0,02), IL-1? (p=0,03), IL-8 (p=0,04) and IL-6 (p=0,02) levels in control group supernatants stimulated cells, while the test group showed increased levels of that cytokines compared to the control group after metabolic control (p<0,01 or p=0,01). The metabolic control as the presence of chronic severe periodontal infection, although did not affect the gene expression of that cytokines by stimulated cells from both groups, increased IL-8 gene expression 2 times (p=0,04) by test group unstimulated cells while it was verified a lower gene expression respectively of IL-1 ß, IL-8 and IL-6 (p<0,01 or p=0,01) by 4, 3, and 11 times related to the control group, before metabolic control. Moreover, periodontal therapy promoted a reduction of TNF- a (p=0,04) levels in test group supernatants stimulated cells, although did not affect the gene expression of the cytokines studied by these cells. There was observed combined effect of metabolic control and periodontal therapy on IL-1 ß and IL-6 (p<0,01) gene expression, that were increased by 6 and 5 times, respectively, by test group unstimulated cells. While metabolic control promoted reductions of 1% and 1,1% in HbA1c levels of control and test group respectively, periodontal therapy promoted an additional reduction of 1,6% in HbA1c levels of test group. Therefore, it was suggested that chronic severe periodontal infection can modulate the immunological response of type 2 diabetic patients, through the maintenance of the inflammatory reactive capacity of mononuclear cells even if in the presence of metabolic control, and that the local infection treatment can promote systemic effects, through decreasing the pro-inflammatory potential of mononuclear circulating cells, helping to restore insulin sensitivity, resulting in an improved glycemic control in those individuals / Doutorado / Periodontia / Doutor em Clínica Odontológica

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais. / Made available in DSpace on 2012-10-20T15:15:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 199501.pdf: 825850 bytes, checksum: 5e68a2469ed702e872014d8dc67d661b (MD5)

Orientador: Maria Heloisa Souza Lima Blotta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T06:51:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Corvino_ClaudiaTres_M.pdf: 633875 bytes, checksum: 46aff21f882b64dcbb4eefa73f93a232 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A interleucina 18 (IL-18) é uma citocina pró-inflamatória com importante participação tanto na resposta inata como adquirida. Concentrações elevadas de IL-18 são encontradas em várias doenças inflamatórias e infecciosas. A expressão aumentada de IL-18 pode contribuir para a resolução de processos infecciosos, mas também pode promover uma resposta inflamatória exagerada, prejudicial ao hospedeiro. O objetivo deste estudo foi determinar as concentrações séricas de IL-18 e outros mediadores inflamatórios (IL-12, sICAM-1, sTNFRI, sTNFRII, CXCL9, CXCL10), antes e após tratamento antifúngico, em pacientes com a forma juvenil (FJ) e adulta (FA) da paracoccidioidomicose (PCM), assim como em indivíduos normais saudáveis e relacionar com a atividade e gravidade da doença. Também foram avaliadas as concentrações de IgG total, subclasses de IgG e IgE anti-gp43 de P. brasiliensis. Todas as dosagens foram realizadas por método imunoenzimático (ELISA). Os níveis séricos basais de IL-18, IL-12, sICAM-1, sTNFRI, sTNFRII, CXCL9, CXCL10 estavam mais elevados em pacientes com PCM em relação ao grupo controle. Pacientes com a FJ apresentaram concentrações mais elevadas de IL-18 e sTNFRII em relação aqueles com a FA da PCM, enquanto estes mostraram maiores concentrações de sTNFRI em relação aos pacientes com a FJ. Houve correlação positiva entre as concentrações de IL-18 e sICAM-1 (r=0.62, p<0.0001), sTNFRI (r=0.61, p<0.0001), sTNFRII (r=0.64, p=0.002) e também em relação a gravidade da doença nos pacientes com a FJ. A terapia anti-fúngica resultou em significante diminuição das concentrações séricas de todos os mediadores inflamatórios analisados que, de maneira geral, atingiram os valores encontrados no grupo controle ao final de 2 anos de tratamento. A pesquisa de anticorpos mostrou níveis basais maiores de IgG4 e IgE nos pacientes com a FJ, enquanto que a IgG1 estava mais elevada naqueles com a FA. Em conjunto os resultados mostraram que uma forte resposta inflamatória marca a fase inicial da PCM humana e que mediadores como a IL-18 e o sTNFRII parecem contribuir em particular para uma forma mais grave da doença / Abstract: IL-18 is a pro-inflammatory cytokine of the IL-1 superfamily that exhibits broad functional effects in innate and acquired immune responses and which has been found in high levels in several chronic inflammatory and autoimmune diseases. Over-expression of IL-18 may promote early resolution of infection or could induce a detrimental exaggerated immune response. The aim of this study was to determine serum levels of IL-18 and other inflammatory mediators (IL-12, sICAM-1, sTNFRI, sTNFRII, CXCL9, CXCL10) at baseline and after antifungal therapy in serum from patients with juvenil (JF) and adult form (AF) of paracoccidioidomycosis (PCM) as well as in healthy controls (C), and to assess their possible relationships to the severity of disease. IL-18 and sTNFRII levels in patients with the JF of PCM were significantly higher than in the AF and controls. In relation to sICAM-1, no difference was observed between JF and AF but both presented higher levels than controls. sTNFRI levels were higher in patients with PCM than in controls, and significant higher concentrations were detected in AF patients as compared to JF ones. Moreover IL-12 and chemokines CXCL9 and CXCL10 were also higher in patients than in controls. In JF patients IL-18 levels significantly correlated with sICAM-1 (r=0.62, p<0.0001), sTNFRI (r=0.61, p<0.0001), sTNFRII (r=0.64, p=0.002), as well as with clinical severity. The results suggest the value of serum IL-18 and sTNFRs levels as a parameter of PCM severity and may support a possible role for them in the pathogenesis of the disease / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas