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An?lise de cDNAs identificados em bibliotecas substrativas de cDNA para flora??o de variedades de cana-de-a??car cultivadas no Rio Grande do Norte(RN): fator de transi??o NAC, Calmodulina e FosfatidiltransferaseSouza, Valeska Daliane Souto de 18 October 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-10-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The flowering is a physiological process that it is vital for plants. This physiological
process has been well studied in the plant model Arabidopsis, but in sugarcane this
process is not well known. The transition of the shoot apical meristem from
vegetative to flowering is a critical factor for plant development. At Brazil northeastern
region, the transition to flowering in sugarcane has an important effect as it may
reduce up to 60% its production. This is a consequence of the sugar translocation
from stalks to the shoot apical meristem which is necessary during the flowering
process. Therefore, the aim of this work was to explore and analyze cDNAs
previously identified using subtractive cDNA libraries. The results showed that these
cDNAs showed differential expression profile in varieties of sugarcane (early x late
flowering). The in silico analysis suggested that these cDNAs had homology to
calmodulin, NAC transcription factor and phosphatidylinositol, a SEC14, which were
described in the literature as having a role in the process of floral development. To
better understand the role of the cDNA homologous to calmodulin, tobacco plants
were transformed with overexpression cassettes in sense and antissense orientation.
Plants overexpressing the cassette in sense orientation did not flowered, while plants
overexpressing the cassette in the antissense orientation produced flowers. The data
obtained in this study suggested the possible role from CAM sequence, SEC14 and
NAC in the induction/floral development pathway in sugarcane, this is the first study
in order to analyze these genes in the sugarcane flowering process. / A flora??o ? um processo fisiol?gico que demanda um alto gasto energ?tico, e ? vital
para a planta, pois ? dela que depende sua propaga??o gen?tica. Este processo
fisiol?gico tem sido bem estudado no modelo vegetal Arabidopsis, mas em cana-dea??car
n?o ? muito conhecido. A transi??o do meristema apical no processo de
flora??o ? um fator cr?tico no ciclo de desenvolvimento da planta. No nordeste
brasileiro, a transi??o para a flora??o na cana-de-a??car tem um efeito dram?tico,
pois pode reduzir em at? 60% a produ??o de a??car ou etanol. Isso porque, o
florescimento da cana resulta na isoporiza??o do colmo que ? caracterizado pela
transloca??o do a??car presente no colmo para os ?pices meristem?ticos com a
finalidade de suprir a necessidade energ?tica durante o processo de flora??o.
Portanto, o objetivo desse trabalho foi de prospectar e analisar cDNAs de cana-dea??car
que possam estar associados ? flora??o utilizando ferramentas de
bioinform?tica e de transgenia. Os resultados mostraram que os cDNAs em estudo
apontaram um perfil de express?o diferencial em variedades de cana-de-a??car. As
an?lises in silico sugeriram que os cDNAs estudados apresentam similaridade para
calmodulina, fator de transcri??o NAC e fosfatidilinositol, uma SEC14, as quais foram
descritas na literatura como tendo um papel no processo de desenvolvimento floral.
Para entender melhor o papel do cDNA hom?logo ? calmodulina, plantas de tabaco
foram transformadas com cassetes de superexpress?o nas orienta??es sense e
antisense contendo o promotor 35S. Plantas superexpressando o cassete na
orienta??o senso n?o floresceram, enquanto que plantas superexpressando o
cassete na orienta??o antissense apresentaram o desenvolvimento reprodutivo. Os
dados obtidos nesse trabalho apontam para o poss?vel papel de CAM, NAC e
SEC14 na via de indu??o/desenvolvimento floral em cana-de-a??car, sendo um dos
primeiros trabalhos a se estudar esses genes no processo de flora??o nesse
organismo
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Constru??o de bibliotecas de cDNAs subtra?dos a partir das sementes de Mamona submetidas ? estresse h?drico e an?lise in silico de transcritos potencialmente expressos sob condi??es de estresse: Metalotioneina, prote?na reprimida por auxina de 12.5 kDa e Glutelina tipo-A3Farias, Jo?o Gabriel de Medeiros 25 March 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-03-25 / Estresses ambientais abi?ticos s?o fatores que causam respostas ao n?vel molecular, fisiol?gico e morfol?gico em plantas, dependendo tamb?m de sua intensidade e dura??o. ? visto que algumas esp?cies apresentam toler?ncia a condi??es estressantes e ao mesmo tempo s?o fontes naturais de mat?ria prima para ind?stria. Nesse contexto encontra-se a mamona (Ricinus comunnis L.), principal fonte de ?leo de r?cino valorizado por suas aplica??es farmac?uticas e principalmente industriais, vem sendo usada como cultura em regi?es onde a disponibilidade de ?gua ? reduzida, usada como fonte de renda para agricultura da regi?o nordeste brasileira. Visto que pouco se sabe sobre as respostas moleculares que levam essa planta a tolerar regi?es secas e como as sementes, principais foco de interesse, respondem a essa escassez, nesse trabalho foram constru?das duas bibliotecas de cDNAs, onde a partir de uma abordagem subtrativa, continham RNAs diferencialmente expressos em sementes de plantas mamona submetidas ao estresse h?drico durante 5 dias (biblioteca L7), e a outra RNAs diferencialmente expressos em sementes controle (biblioteca L5). A biblioteca L7 apresentou a maior variedade de transcritos com um total de 182. A maior parte das fun??es estabelecidas pelo sistema Gene Ontology - GO, foram direcionadas aos ?Processos Metab?licos? (526), em segundo ?Respostas a est?mulos? (57), o terceiro termo mais abundante foram referentes a ?Desenvolvimento?(26). J? na biblioteca L5, foram encontrados 91 transcritos, com maior parte de suas fun??es referentes a ?Processos Metab?licos?(413), em segundo ?Respostas a est?mulos? (8) e em terceiro Regula??o (6). Alguns dos transcritos da biblioteca L7 foram escolhidos para an?lise por repetirem-se mais de 3x e n?o aparecerem na biblioteca L5, o que indica uma poss?vel regula??o positiva sobre estresse. As an?lises sobre Metalotione?na (4x), mostraram que a sequ?ncia de proteica apresentava os dom?nios conservados que a caracterizava como tipo II, onde s?o encontrados dois dom?nios funcionais ricos em ciste?na com posi??es altamente conservadas, desempenhando a fun??o de ligar-se a metais pesados, correlacionadas assim como a atividade de elimina??o EROs e defesa contra o estresse oxidativo, al?m de apresentar homologia com a sequ?ncia de Bruguiera gymnorhiza, uma planta de mangue adaptada a ambientes salinos. Analisamos tamb?m os transcritos da referente a prote?na AUXIN-REPRESSED 12.5 KDA (3x), apontada como sendo reprimida pelo horm?nio auxina e associada ao processo de dorm?ncia da semente, ? descrito em uma fam?lia g?nica onde v?rios membros pertencem as vias de resposta ao estresse. Por ?ltimo, analisamos a prote?na GLUTELIN TYPE-A 3 (5x), uma importante prote?na de armazenamento com car?ter hidrof?lico, possivelmente direcionada para o vac?olo. Em nosso trabalho foi poss?vel observar um aumento de transcritos em rela??o a subtra??o controle, possivelmente reflexo do aumento do metabolismo da semente, tanto para resposta defensiva ao estresse h?drico quanto para o amadurecimento r?pido da semente onde foram observados transcritos referentes a resposta oxidativa, controle hormonal, prote?nas de reserva e produ??o de ?leo.
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