Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-27Bitstream added on 2014-06-13T19:00:01Z : No. of bitstreams: 1 tacioli_a_me_rcla.pdf: 1374651 bytes, checksum: 536f4ffe73953b46def8d0634b23ec5c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os anfíbios formam um grupo bem sucedido de vertebrados e, apesar da ampla distribuição e diversidade, estão sofrendo grande pressão ambiental que parece causar declínios populacionais e extinções de diversas espécies. Embora o número de estudos tenha aumentado, há ainda grandes lacunas no conhecimento, mesmo nos diversos estudos realizados sobre biologia reprodutiva de anuros. Este estudo teve como objetivos verificar, em dois ambientes aquáticos (açude e brejo) em uma área de compensação ambiental na Serra de Paranapiacaba (município de Ribeirão Grande, SP), quais espécies são registradas, assim como seus padrões anuais e diários de atividade, e a influência de fatores ambientais nestes padrões. Foram registradas neste estudo 30 espécies, pertencentes a seis famílias e totalizando 79% da anurofauna já registrada na área de estudo. Apresentaram atividade no açude 14 espécies, sendo outras 10 espécies registradas em suas adjacências, enquanto no brejo foram registradas 21 espécies. Apesar do número relativamente alto de espécies encontradas, aparentemente a degradação dos ambientes de floresta na área de estudo afetaram a composição de espécies, sendo registrado cerca de 20% menos espécies que em localidades próximas. Houve sazonalidade no registro das espécies, podendo ser definidos quatro padrões anuais de atividade. A riqueza e a abundância das espécies estiveram correlacionadas a alguns fatores ambientais, principalmente duração da noite, fator este correlacionado a temperatura do ar e chuvas; entretanto, cada espécie respondeu a diferentes fatores ambientais. Foram definidos seis padrões diários de atividade, tendo a maioria das espécies atividade de vocalização por toda a noite, sendo que o início da atividade parece estar relacionado à luminosidade, temperatura do ar e umidade... / The amphibians are a successful group of vertebrates and, although of their wide distribution and diversity, they are suffering great environmental pressure, which seems to cause population declines and extinction of various species. The number of studies has grown up, but there are gaps of knowledge, if when we consider the many studies about the reproductive biology of anurans. This study has as objectives to verify, in two aquatic environments (a pond and a swamp) at a environmental compensation site at Serra de Paranapiacaba (municipality of Ribeirão Grande, SP), which species are there, as their annual and daily activity patterns, and the influence of the environmental factors in these patterns. We registered 30 species, belonging to six families and comprising 79% of the anurofauna registered for the study area. 14 species were registered in activity at the pond and more 10 species were found at its vicinities, while 21 species were found at the swamp. Despite the relative high number of species found, aparently the degradation of the forest habitats at the study area affected the composition of species, being found about 20% less species than that found at nearby locations. There was seasonality on the species registration, being defined four annual patterns of activity. The richness and abundance of species were correlated to some environmental factors, mainly duration of the night, factor also related to air temperature and rain; moreover, each species responded to different environmental factors. Were found six patterns of daily activity, being the onset of the activity related to luminosity, air temperature and air relative humidity (to the sunset); the ending of the activity seems to be related only to the luminosity (to the sunrise). Some species show plasticity at the activity period and, apparently ... (Complete abstract click electronic access below)

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, Pós-graduação em Biologia Molecular, 2011. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2012-06-26T22:29:36Z No. of bitstreams: 1 2011_MarianaTorquatoQuezadodeMagalhaes.pdf: 6229263 bytes, checksum: c403806342d7a4f80df912ac72ff753c (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-06-27T14:26:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_MarianaTorquatoQuezadodeMagalhaes.pdf: 6229263 bytes, checksum: c403806342d7a4f80df912ac72ff753c (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-27T14:26:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_MarianaTorquatoQuezadodeMagalhaes.pdf: 6229263 bytes, checksum: c403806342d7a4f80df912ac72ff753c (MD5) / As toxinas de origem vegetal, animal e microbiana há muito despertam o interesse do homem. Assim, a busca por moléculas bioativas que permitam uma ampla biblioteca informativa surge como alternativa na busca de soluções de problemas agrícolas e farmacológicos. A pele dos anfíbios é uma rica fonte destas moléculas, as quais são produzidas pelas glândulas serosas holócrinas do tegumento, as quais estão localizadas nos grânulos do lúmem, e são liberadas sob a presença de estímulos apropriados. Suas funções são variadas, atuando tanto na regulação das funções fisiológicas da pele, como na defesa contra predadores e microrganismos. As moléculas mais estudas são os peptídeos antimicrobianos (PAM), os quais atuam diretamente na defesa química contra patógenos. Neste trabalho, foi estudada uma nova classe de PAM presentes na secreção cutânea do anuro Hypsiboas punctatus, as fenilseptinas (Phes). Estas são peptídeos antimicrobianos de 18 resíduos de aminoácido (FFFDTLKNLAGKVIGALT-NH2), com massa molecular M+H+=1954.2, as quais ocorrem naturalmente na forma de uma mistura racêmica (L-/D-Phes), e apresentam propriedades sensoriais. A enantiomerização do resíduo de aminoácido Phe2 e a amidação C-terminal foram estudadas e confirmadas por uma combinação de técnicas incluindo RP-UFLC, espectrometria de massa combinada com mobilidade iônica, experimentos de MS/MS de alta resolução, sequenciamento de cDNA, síntese de peptídeos em fase sólida e sequenciamento N-terminal por degradação de Edman. Os estudos detalhados das 20 estruturas de menor energia obtidas por experimentos de 1H RMN demonstram que os peptídeos assumem uma conformação de α-hélice dos resíduos 5-18 (RMSD 0.22 ± 0.09), e existe em D-Phes uma de mudança de 90° na orientação da porção N-terminal 1-3. Os peptídeos foram ativos contra bactérias gram-positivas e gram-negativas em ensaios de determinação da atividade antimicrobiana in vitro (e.x. S. aureus -65,5 e 32,7 μM, L-Phes e D-Phes, respectivamente). E, as mesmas moléculas foram testadas em camundongos às propriedades gustativas, em um sistema de animais KO para um canal iônico essencial para a transdução do sabor amargo e doce (Trpm5). Os camundongos WT rejeitaram os peptídeos (p < 0,05), enquanto que os camundongos KO foram indiferentes aos mesmos (p > 0,3). Provavelmente, as divergências estruturais são mais relacionadas com as diferenças observadas em relação às atividades antimicrobianas diferenciadas entre as duas moléculas, do que com as propriedades sensoriais. Fenilseptinas representam o primeiro relato de moléculas antimicrobianas, com propriedades sensoriais e enorme plasticidade estrutural. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Toxins from plant, animal and microorganism long light the interest of man. Thus, the search for bioactive molecules that allow a large databank appears as an alternative looking for solutions to agricultural problems and pharmacological. Amphibian skin secretions is a rich source of these molecules, which are produced by serous holocrine glands, which are located in the lumen of the granules and are released in the presence of appropriate stimuli. Their functions are diverse, acting both in the regulation of physiological functions of the skin, as in defense against predators and microorganisms. The molecules most studied are the naturally occurring antimicrobial peptides (AMP), which act directly on the chemical defense against pathogens. Here we report a new class of AMP present in the skin secretions of anuran Hypsiboas punctatus, the fenilseptina (Phes). These are antimicrobial peptides of 18 amino acid residues (FFFDTLKNLAGKVIGALT-NH2), with a molecular mass of M+H+ = 1954.2, that was purified as two naturally occurring D- and L-Phe analogs, with sensorial properties. The amino acid epimerazition and C-terminal amidation for both molecules (in short, D-Phes and L-Phes) were confirmed by a combination of techniques including reverse-phase UPLC, ion mobility mass spectrometry, high resolution MS/MS experiments, Edman degradation, cDNA sequencing and solid-phase peptide synthesis. RMSD analysis of the twenty best 1H NMR structures of each peptide revealed that the peptides assume an α-helical conformation of residues 5-18 (RMSD 0:22 ± 0.09), and there is D-Phes has a major 90° difference between the two backbones at the first four N-terminal residues and substantial orientation changes of the respective side chains. The peptides were active against gram-positive and gram-negative in vitro assays (S. aureus -65.5 and 32.7 mM, L-and D-Phes Phes, respectively). And the same molecules were tested in mice to evaluate the properties in a system of KO animals to a ion channel essential for transduction of bitter and sweet (Trpm5). The mice rejected the WT peptide (p < 0.05), while the KO mice were indifferent to them (p > 0.3). These structural divergences are most likely linked to the quantified differences in antimicrobial potencies determined for both molecules, but produced no detectable change in the gustatory aversive behavior. Perhaps the Phenylseptins are early examples of the amazing plasticity of small biomolecules yet to be understood.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Florestal, 2009. / Submitted by Raquel Viana (tempestade_b@hotmail.com) on 2010-03-30T15:19:32Z No. of bitstreams: 1 2009_GuilhermeFajardoRoldaoAlvares.pdf: 1896661 bytes, checksum: 365562910a5dca8402aedded3a1e1f63 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-05-07T17:17:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_GuilhermeFajardoRoldaoAlvares.pdf: 1896661 bytes, checksum: 365562910a5dca8402aedded3a1e1f63 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-07T17:17:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_GuilhermeFajardoRoldaoAlvares.pdf: 1896661 bytes, checksum: 365562910a5dca8402aedded3a1e1f63 (MD5) Previous issue date: 2009-02 / Os anfíbios estão entre os vertebrados terrestres que possuem a maior riqueza de espécies no mundo e maiores índices de declínios e extinções constatados. Dentre os anfíbios anuros a subfamília Phyllomedusinae se destaca por apresentar características únicas como coloração dorsal verde, pupilas na posição vertical e secreções cutâneas promissoras na indústria farmacológica. O gênero Phyllomedusa é composto por 32 espécies distribuídas em quatro grupos fenéticos, onde se destaca o grupo hypochondrialis por possuir maior número de espécies. O presente estudo apresenta informações inéditas sobre a vocalização e a biologia reprodutiva de algumas espécies do grupo hypochondrialis, incluindo a espécie criticamente ameaçada de extinção, análises estatísticas utilizando variáveis morfométricas dos adultos, vocalização e desova foram conduzidas para propor novos arranjos taxonômicos. Modelagem de ditribuição geográfica das espécies utilizando o algorítmo de Máquinas de Suporte Vetorial foi utilizado para prever a ocorrência das espécies e apontar áreas adequadas a ocorrência de novas populações e novas espécies no Brasil. O resultado das análises estatísticas mostram a existência de dois grupos ecologicamente e morfologicamente distintos dentro do grupo hypochondrilias, grupo megacephala e grupo hypochondrialis. Os modelos preditivos revelaram uma distribuiçãodo grupo megacephala associada às regiões serranas do planalto central brasilieiro e indicaram as áreas da Chapada dos Parecis e Chapada da Diamantina como potenciais regiões para à ocorrência de novas populações e até novas espécies de Phyllomedusa do grupo megacephala. Por fim, sugerimos a inclusão das espécies de phyllomedusa com padrão reticulado nos flancos na lista dos animais ameaçados na categoria de vulneráveis devido a restrita distribuição, rápida alteração dos ambientes naturais e por apresentar características comuns às espécies de anfíbios extintos ou com declínios na população. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Amphibians are among the terrestrial vertebrates with most species richness in the world and also with greatest numbers of extinctions and population declines. Within the amphibians the subfamily Phyllomedusinae stands out for its green dorsal coloration, vertical pupils and promising cutaneous secretion for pharmacological uses. The genus Phyllomedusa is composed by 32 species distributed in four phenetic groups, where hypochondrialis group is highlighted for possessing larger number of species. The present study presents unpublished data about vocalization and reproductive biology of some species from the hypochondrialis species group including a critically endanger species. Statistical analyses were conducted and a new taxonomic arrangement was proposed based on adult morphological measures, call and nest variables. Models of species potential geographical distribution were conducted using support vector machines and suitable regions for the occurrence of new populations and new species related to the group were pointed out in Brazil. The statistical results revealed the existence of two species groups morphologically and ecologically distinct within the hypochondrialis species group, megacephala and hypochondrialis group. Predictive models revealed that Phyllomedusa megacephala species group are associated to the Brazilian plateau and areas of Chapada dos Parecis and Chapada Diamantina were pointed out as potential regions for the occurrence of new populations and even new species of this group. Finally, we suggest that the Phyllomedusa species with reticulated patterns on flanks may need to be included on the red list under the category of vulnerable species for its restricted distribution, loss of habitat and also for its biological similarities with frogs with known population declines and extinctions.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, 2011. / Submitted by Shayane Marques Zica (marquacizh@uol.com.br) on 2011-06-30T17:10:00Z No. of bitstreams: 1 Andrea_Cruz_CarvalhoParcial_noPW.pdf: 1857896 bytes, checksum: cf340b7a56f876a3c4e447cb70f8df1f (MD5) / Approved for entry into archive by Guilherme Lourenço Machado(gui.admin@gmail.com) on 2011-07-06T12:59:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Andrea_Cruz_CarvalhoParcial_noPW.pdf: 1857896 bytes, checksum: cf340b7a56f876a3c4e447cb70f8df1f (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-06T12:59:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrea_Cruz_CarvalhoParcial_noPW.pdf: 1857896 bytes, checksum: cf340b7a56f876a3c4e447cb70f8df1f (MD5) / As secreções cutâneas dos anfíbios anuros são reconhecidamente uma rica fonte de substâncias bioativas. Um importante grupo dentre esses compostos são os peptídeos antimicrobianos (PAMs). Os PAMs são componentes do sistema imune inato, presentes na maioria dos seres vivos, que vêm despertando um interesse crescente, uma vez que apresentam atividade antimicrobiana contra um amplo espectro de microrganismos, sendo usualmente atóxicos para células de mamíferos. O presente trabalho teve como objetivo o isolamento, a identificação e a caracterização empregando espectrometria de massa tipo MALDI-TOF de PAMs presentes nas secreções cutâneas dos anuros Proceratophrys goyana, Physalaemus fuscumaculatus e Physalaemus centralis, comumente encontrados na fauna do Cerrado. Também foi objeto do presente a caracterização biológica de duas versões sintéticas do peptídeo ceratoxin-like previamente isolado e quimicamente caracterizado da rã Hypsiboas albopunctatus. As secreções cutâneas das espécies P. goyana, P. fuscumaculatus e P. centralis foram obtidas por estimulação elétrica, liofilizadas e armazenadas a - 20°C. Cada secreção bruta foi submetida a fracionamento por RP-HPLC usando coluna C18 (Shim-pack CLC-ODS, 6.0 x 150 mm) em sistema HPLC com emprego de gradiente linear de TFA 0,1% (v/v) em acetonitrila. A detecção foi monitorada a 216 nm e a eluição realizada com fluxo de 1 mL/min. As frações cromatográficas eluídas foram coletadas manualmente e secadas a vácuo. Diferenças significativas nos perfis cromatográficos de cada espécie foram observadas. Todas as frações cromatográficas obtidas foram avaliadas quanto à capacidade em inibir a proliferação de bactérias patogênicas S. aureus (ATCC 25923) e P. aeruginosa (ATCC 27853), bem como quanto à capacidade de lisar eritrócitos humanos. As frações ativas foram analisadas por espectrometria de massa tipo MALDI-TOF a fim de se avaliar seu grau de pureza e determinar as massas moleculares dos componentes presentes. Peptídeos antimicrobianos foram identificados nas três secreções cutâneas em estudo. As duas versões sintéticas do peptídeo ceratoxin-like contendo Leu ou Ile na porção C-terminal foram avaliados quanto ao seu potencial inibitório sobre o crescimento de sete linhagens de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. As duas versões do peptídeo ceratoxin-like de H. albopunctatus apresentaram atividade antibacteriana significativa com MICs que variaram de 2 a 8 μM. Como vários PAMs de amplo espectro de ação também apresentam citotoxicidade para células cancerígenas, tais peptídeos foram testados contra a linhagem celular de câncer cervical (HeLa) e fibroblastos normais (NIH3T3). Os resultados obtidos indicaram que as duas versões testadas exibem atividade citotóxica contras as linhagens celulares avaliadas. Estudos de bioprospecção relacionados com a caracterização química e biológica dos compostos presentes na secreção cutânea de anuros são de extrema relevância, podendo auxiliar no esclarecimento de questões taxonômicas, no desenvolvimento de novas drogas terapêuticas, além do entendimento da biologia dos anuros. O presente trabalho é parte de um esforço para aumentar o nosso conhecimento acerca da diversidade de peptídeos antimicrobianos presentes nas secreções cutâneas de anuros da fauna do Cerrado brasileiro. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Skin secretion of anurans are recognized as a rich source of several bioactive substances. An important group of such compounds are the antimicrobial peptides (AMPs). AMPs are components of the innate immune system present in the most living beings that have been awaken to an increasing interest, because they exhibit antimicrobial activity against a large array of microorganisms, being usually non-toxic for mammal cells. The aim of this study was the isolation, identification and characterization using MALDI-TOF mass spectrometry of AMPs from the cutaneous secretions of the anurans Proceratophrys goyana, Physalaemus fuscumaculatus and Physalaemus centralis, commonly found in the Brazilian Cerrado. It was also described the biological characterization of two synthetic versions of the ceratoxinlike peptide previously isolated and chemically characterized from the frog Hypsiboas albopunctatus. The skin secretions were obtained by electrical stimulation, freeze-dried and stored at -20ºC. Each crude secretion was fractioned by RP-HPLC on a C18 column (Shim-pack CLC-ODS, 6.0 x 150 mm) using a HPLC system and employing a linear gradient of TFA 0,1% (v/v) in acetonitrile. The detection was monitored at 216 nm and the elution was performed at 1 mL/min. The eluted chromatographic fractions were manually collected and dried in vacuum. Meaningful differences in the chromatographic profiles of each species were observed. All eluted chromatographic fractions were tested for their cellular proliferation inhibition of pathogenic bacteria S. aureus (ATCC 25923) and P. aeruginosa (ATCC 27853), as also for their ability to promote lysis of human erythrocytes. The bioactive fractions were analyzed by MALDI-TOF mass spectrometry in order to evaluate their homogeneity and to determine the molecular masses of the major components present in each fraction. Antimicrobial peptides were identified in the three secretions under analysis. The two synthetic versions of the ceratoxin-like peptide with Leu or Ile in the C-terminal region were evaluated for their inhibitory activity on the cellular proliferation of seven different Gram-positive and Gram-negative bacteria. The two versions of the ceratoxin-like peptide of H. albopunctatus exhibited strong antibacterial effects with MICs ranging from 2 to 8 M. As several AMPs of large spectrum of action are also toxic to cancer cells, these two peptides were also tested against cervix cancer cell lineage (HeLa) and fibroblasts (NIH3T3). The results indicated that the two peptides were cytotoxic for both tested cells (cancer and normal cells). Bioprospective studies related to the chemical and biological characterization of the compounds present in the skin secretions of anurans are extremely relevant, as they can help clarifying taxonomy issues, on the development of therapeutic drugs, and also on the understanding of amphibian biology. This work is part of an effort to increase our knowledge about the diversity of antimicrobial peptides present in the skin secretions of the anurans from the Brazilian Cerrado fauna.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2010. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-05-30T00:51:04Z No. of bitstreams: 1 2010_IrisdaCostaArantes.pdf: 70374072 bytes, checksum: 05c173e1edbcf8f768fa9c755dc5f166 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-05-30T00:52:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_IrisdaCostaArantes.pdf: 70374072 bytes, checksum: 05c173e1edbcf8f768fa9c755dc5f166 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-05-30T00:52:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_IrisdaCostaArantes.pdf: 70374072 bytes, checksum: 05c173e1edbcf8f768fa9c755dc5f166 (MD5) / O dimorfismo sexual no tamanho e forma corporal, o crescimento e a longevidade de Rhinella rubescens e R. schneideri foram investigados na Estação Ecológica de Águas Emendadas, Distrito Federal. Em ambas as espécies, os machos atingem menor tamanho corporal e possuem maior diâmetro do antebraço que as fêmeas. As fêmeas de R. schneideri possuem glândulas parotóides maiores e cabeças mais altas que os machos, enquanto que as fêmeas de R. rubescens possuem cabeças mais largas que os machos. As fêmeas de R. rubescens possuem maior taxa de crescimento e atingem a maturidade sexual antes dos machos (fêmeas: 105 dias; machos: 170 dias). Por outro lado, as fêmeas de R. schneideri apresentam menor taxa de crescimento e atingem a maturidade sexual depois dos machos (fêmeas: 450 dias; machos: 340 dias). Os indivíduos mais longevos de R. rubescens possuem uma idade estimada em 3,5 anos para fêmeas e 3 anos para machos; em R. schneideri, as estimativas foram de 4 anos para fêmeas e 5 anos para machos. Os machos de R. rubescens foram mais capturados entre os 6 meses e 1 ano de idade, alguns meses após a maturidade sexual, enquanto que os de R. schneideri o foram entre 1 e 1,5 anos, ao atingir a maturidade sexual. Os dados indicam que o dimorfismo sexual resulta de diferença-as nas trajetórias de crescimento antes e depois da maturidade sexual. As espécies são semelhantes morfologicamente e ecologicamente, e ainda apresentam o dimorfismo sexual semelhante; tais evidências refletem o conservatismo filogenético apresentado pelo gênero Rhinella. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Sexual dimorphism in size and body shape, growth and longevity for Rhinella rubescens and R. schneideri were investigated in the Estação Ecológica de Águas Emendadas, Distrito Federal. Adult males of both species have body size and forelimb diameter larger than females. Females of R. schneideri have larger parotoid glands and higher heads than males, whereas females of R. rubescens have wider heads than males. Females of R. rubescens have higher growth rates and reach sexual maturity earlier than males (females: 105 days, males: 170 days). Moreover, females of R. schneideri have lower growth rates and attain sexual maturity later than males (females: 450 days, males: 340 days). The oldest individuals of R. rubescens were 3 years-old for males and 3.5 years-old for females; for R. schneideri, the estimates were 5 years-old for males and 4 years-old for females. Males of R. rubescens are more frequently captured between 6 months and 1 year-old, some months after sexual maturity; and R. schneideri are captured between 1 to 1.5 years old, at the age of sexual maturity. The data indicate that sexual dimorphism results from different growth trajectories before and after sexual maturity. The species are similar in morphology, ecology and sexual dimorphism, and such evidence reflects the phylogenetic conservatism in the genus Rhinella.

Orientador: Classius de Oliveira / Banca: Rodrigo Zieri / Banca: Monica Jones Costa / Banca: Rafaela Maria Moresco / Banca: Vitor Hugo Mendonça do Prado / Resumo: A crescente demanda para produções agrícolas e o consequente uso de agrotóxicos nas lavouras, vem se tornando foco das atenções sobre o uso e as conseqüências destes contaminantes químicos ambientais. Utilizando-se de anuros coletados em ambientes agrícolas e em uma Unidade de Conservação, o Parque Nacional das Emas (PNE), ambos região Sudoeste do Estado de Goiás, investigou-se a influência de contaminantes de origem agrícola nos aspectos anatomorfológicos em larvas de anuros bem como as possíveis alterações genótoxicas destes compostos. Para isto, foram coletadas larvas de anuros de 21 espécies de área agrícola e nove da Unidade de Conservação, em diferentes ambientes. Foram realizadas análises de malformações no padrão morfológico (27 espécies), bem como análises de alterações eritrocitárias em três espécies. Os resultados demonstraram alta porcentagem de anormalidades em anuros provenientes de agroecossistemas, quando comparados aos de ambiente natural. Entretanto, as análises de alterações eritrocitárias nucleares nas larvas não mostram significância para a formação de micronúcleo em girinos entre os ambientes estudados. No entanto foi registrada uma maior frequência de células reniformes em girinos de ambiente antropizado. Portanto, nosso estudo aponta que girinos associados a ambientes agrícolas são mais suscetíveis a algum tipo de alteração morfológica, o que reforça a importância da preservação de áreas originais e ainda um olhar mais critico quanto ao uso de... / Abstract: The growing demand for agricultural production and the consequent use of agrochemicals in crops has become a focus of attention on the use and consequences of these environmental chemical contaminants. Using anurans collected in agricultural environments and in a Conservation Unit, the Emas National Park (PNE), both Southwest region of the State of Goiás, investigated the influence of contaminants of agricultural origin on the anatomorphological aspects in anuran larvae as well as the possible genotoxic changes of these compounds. For this, anuran larvae were collected from 21 species of agricultural area and nine from the Conservation Unit, in different environments. Analyzes of malformations in the morphological pattern (27 species) were carried out, as well as analyzes of erythrocyte alterations in three species. The results showed a high percentage of anurans abnormalities from agroecosystems when compared to those from the natural environment. However, the analyzes of nuclear erythrocyte alterations in the larvae do not show significance for the formation of micronucleus in tadpoles between the studied environments. However, a higher frequency of reniform cells was recorded in anthropic environment tadpoles. Therefore, our study indicates that tadpoles associated with agricultural environments are more susceptible to some type of morphological alteration, which reinforces the importance of the preservation of original areas and a more critical view regarding the use of ... / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2008. / Submitted by Ruthléa Nascimento (ruthlea@bce.unb.br) on 2008-10-24T16:28:18Z No. of bitstreams: 1 2008_AllanCrema.pdf: 4504369 bytes, checksum: 8d24077e0702cd320f24c9d27366a82c (MD5) / Approved for entry into archive by Georgia Fernandes(georgia@bce.unb.br) on 2009-03-04T14:28:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_AllanCrema.pdf: 4504369 bytes, checksum: 8d24077e0702cd320f24c9d27366a82c (MD5) / Made available in DSpace on 2009-03-04T14:28:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_AllanCrema.pdf: 4504369 bytes, checksum: 8d24077e0702cd320f24c9d27366a82c (MD5) / Este estudo averiguou a diferença na composição e riqueza de espécies de anfíbios anuros em matas de galeria, dentro e fora de duas unidades de conservação do Distrito Federal, Brasil. Foram registradas oito espécies ao longo de onze meses de amostragem. Este pequeno número de espécies parece constituir um padrão regional. A abundância e composição de espécies foram diferentes dentro e fora das unidades de conservação. Maior riqueza e diversidade foram encontradas no interior das UCs. Os resultados indicam que Aplastodiscus perviridis e Bokermannohyla pseudopseudis apresentam baixa tolerância à degradação dos ambientes naturais, representando bioindicadores de qualidade para as matas de galeria do DF. Os troncos caídos, a ocupação humana e as poças foram as variáveis ambientais mais importantes para explicar a variação na composição e abundância das espécies ao longo das matas de galeria. Hypsiboas goianus apresentou forte relação com a presença de ocupação humana e troncos caídos, sugerindo que se trata de uma espécie oportunista de ambientes degradados. A presença de poças e alagados representou um importante atributo para explicar a distribuição e abundância de Aplastodiscus perviridis. A repartição da variação total da taxocenose mostra que a estruturação espacial não é determinada apenas por variáveis do ambiente, sendo que cerca de 20,3% da variação foi explicada pelo componente puramente ambiental, enquanto o componente puramente espacial explicou aproximadamente 8,3% e o componente ambiental estruturado espacialmente cerca de 15,5%. A maior parcela da variação total da taxocenose não foi explicada pelas variáveis explanatórias (55,9%). _________________________________________________________________ ABSTRACT / This study investigated the difference in species richness and composition of anuran amphibians assemblage in riparian forests inside and outside of two conservation units of the Federal District, Brazil. Eight species were registered during eleven months of sampling. The few species inhabiting this ecosystem seem to constitute a regional pattern. Species richness and abundance differed inside and outside of the conservation units, with greater richness and diversity of species being found inside of the reserves. These results indicate that Aplastodiscus perviridis and Bokermannohyla pseudopseudis have low tolerance to habitat disturbance and thus can be used as bioindicators of habitat quality for the riparian forests of the Federal District. Fallen trunks, human occupation and flooded puddles are the most importatnt variables to explain the variation of species richness and abundance along the riparian forests. Hypsiboas goianus showed strong association with human occupation and fallen trunks suggesting that it may be an opportunist in degraded environments. The presence of flooded puddles represented an important attribute in explaing the distribution and abundance of Aplastodiscus perviridis. The partialling of total variation on species assemblage shows that the spacial structure is not determined only by the environment variables. About 20,3% of the total variation was explained by the pure environmental component, while the pure space component and the spatially structured environmental component explained 8,3% and 15,5% respectively. The majority amont of the total variation was not explained by any of the included variables (55,9%).

Orientador: Jorge Jim / Banca: Denise de Cerqueira Rossa Feres / Banca: Elieth Spirandelli Cruz / Resumo: Os objetivos deste trabalho foram analisar o status de conservação de Odontophrynus moratoi na região de Botucatu, mapear as áreas de ocorrência, incluindo os registros históricos, realizar um estudo ecológico das populações remanescentes e identificar as possíveis ameaças a estas populações. Odontophrynus moratoi tinha registro de ocorrência restrito ao Distrito de Rubião Jr., Botucatu, onde era registrada somente em duas localidades, desde sua descoberta em 1976, até 2003. Recentemente foi encontrada na região de Itirapina e de Brotas. Durante o estudo a espécie foi registrada em duas novas localidades, uma na região de Brotas e uma em Bauru. A espécie demonstrou ser altamente especialista na ocupação do habitat, por ter sido registrada somente em dois ambientes dentre os 129 amostrados, os quais compõem as 26 localidades estudadas e considerando que os mesmos são áreas de nascente de cerrado próximas de mata. A espécie não foi registrada em sua localidade-tipo, nem em sua segunda área de ocorrência na região de Botucatu e nem em outras nove localidades amostradas no município de Botucatu durante o estudo, demonstrando um possível desaparecimento da espécie da área onde foi primeiramente descoberta. As possíveis causas deste desaparecimento são alterações antrópicas que ocorreram em suas áreas de ocorrência, modificando os microambientes reprodutivos e de desenvolvimento larval da espécie. É de suma importância a preservação das localidades de ocorrência de O. moratoi e da área de entorno das mesmas / Abstract: The objectives of this work were to analyse the conservation status of Odontophrynus moratoi in Botucatu region, map the occurrence areas, including the historical registers, to carry out an ecological study of the leftover populations and to identify the possible threats to these populations. Odontophrynus moratoi had limited occurrence to Rubião Jr. District, Botucatu, where it was registered only in two localities, from his discovery in 1976 up to 2003. Recently it was found in Itirapina and Brotas region. During the study the species was registered in two new localities, one in Brotas region and one in Bauru. The species demonstrated to be highly an occupation specialist of this habitat, because the species was being registered only in two environments among the 129 sampled, which compose 26 studied localities and considering that same are areas of source of Cerrado near forest. The species was not registered in his locality-type, not even in his second area of occurrence in Botucatu region and not even in another nine localities sampled in Botucatu local municipality during the study, demonstrating a possible disappearance of the species of the area where it was firstly uncovered. The possible causes of this disappearance are anthropics alterations that occurred in his place areas, modifying the reproductive microenvironments and larval development of the species. It is of abridgement importance the preservation of the occurrence localities of O. moratoi and the area that involve the same / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Biologia, Programa de Pós-graduação, Departamento de Biologia Animal, 2014. / Submitted by Cristiane Mendes (mcristianem@gmail.com) on 2014-11-20T19:38:59Z No. of bitstreams: 1 2014_DiegoAlejandroFalico.pdf: 11887714 bytes, checksum: 2ee479f958a7bbf12e17ec4ccbb0f4e8 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2014-11-25T10:42:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_DiegoAlejandroFalico.pdf: 11887714 bytes, checksum: 2ee479f958a7bbf12e17ec4ccbb0f4e8 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-25T10:42:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_DiegoAlejandroFalico.pdf: 11887714 bytes, checksum: 2ee479f958a7bbf12e17ec4ccbb0f4e8 (MD5) / O estudo de novas fontes de compostos bioativos permitiu o desenvolvimento de muitos produtos biotecnológicos, incluindo drogas com importantes atividades biológicas, muitas das quais são usadas atualmente no tratamento de doenças relevantes, especialmente de natureza infecciosa. No presente trabalho, foi realizada uma varredura por peptídeos com atividade antifúngica a partir da secreção cutânea da rã brasileira Hypsiboas raniceps. Indivíduos adultos de H. raniceps foram coletados no estado de Goiás, Brasil. As secreções cutâneas foram obtidas por meio de estimulação elétrica moderada, congeladas, secas e fracionadas por HPLC empregando-se coluna de fase reversa C18. Todas as frações cromatográficas foram testadas quanto à capacidade de inibir a proliferação do fungo Candida albicans e as frações ativas foram analisadas por espectrometria de massas (MALDI-TOF MS). O perfil cromatográfico resultou em cerca de 30 frações, oito das quais promoveram redução na proliferação do fungo C. albicans acima de 25%. As frações com atividade antifúngica apresentaram componentes de massa molecular variando entre 1000 e 3000 Da. As frações 27 e 28 foram as mais ativas, mas a análise por MS revelou a presença de vários componentes nessas frações. A fração 28 foi selecionada e submetida a uma passo cromatográfico adicional, levando à obtenção do peptídeo bioativo presente nessa fração. O peptídeo HR 36 puro foi acumulado e testado contra o fungo C. albicans. Este novo peptídeo apresenta massa molecular igual a 3 kDa e é capaz de inibir a proliferação de C. albicans na concentração de 128 M em 50%. No presente estudo, foi constatada que a secreção cutânea de H. raniceps é uma fonte de peptídeos antifúngicos e um novo peptídeo antifúngico de 3 kDa foi obtido em alto grau de pureza de modo a permitir a sua caracterização biológica e química. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The study of new sources of bioactive compounds allowed the development of many biotechnological products, including drugs with important biological activities, many of which are used today for the treatment of relevant diseases, especially those of infectious nature. In the present study we performed a screening for peptides with antifungal activity from the skin secretion of the Brazilian frog Hypsiboas raniceps. Adult specimens of H. raniceps were collected in Goiás, Brazil. Skin secretions were obtained by mild electric stimulation, freeze-dried and fractionated by HPLC using a C18 reversed-phase column. All fractions were tested for inhibitory activity against the fungus Candida albicans, and the bioactive fractions were submitted to mass spectrometric analysis (MALDI-TOF MS). The typical chromatographic profile showed approximately 30 fractions, eight of which promoted reduction in yeast cell proliferation above 25%. The antifungal fractions showed molecular mass components ranging from 1000 to 3000 Da. Fractions 27 and 28 were the most active but the MS analysis revealed multiple components present in these fractions. Fraction 28 was selected and submitted to an additional chromatographic step in order to obtain the major bioactive peptide present in this sample. Peptide HR 36 was acumulated and tested against C. albicans. This new peptide has a molecular mass of 3 kDa and is able to inhibit the proliferation of C. albicans at 128 M in 50%. It was observed that H. raniceps skin secretion is a source of antifungal peptides and one new 3 kDa antifungal peptide was obtained in high-purity which will allow in its biological and chemical characterization.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós Graduação em Química, 2012. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2012-10-10T18:15:09Z No. of bitstreams: 1 2012_DiegoArantesTeixeiraPires_Parcial.pdf: 11467153 bytes, checksum: 7599b5807e66e5d7799f87d55d86d1fe (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-10-11T13:38:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_DiegoArantesTeixeiraPires_Parcial.pdf: 11467153 bytes, checksum: 7599b5807e66e5d7799f87d55d86d1fe (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-11T13:38:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_DiegoArantesTeixeiraPires_Parcial.pdf: 11467153 bytes, checksum: 7599b5807e66e5d7799f87d55d86d1fe (MD5) / A pele de anfíbios é um órgão onde pode ser encontrados diversos compostos biologicamente ativos, desde reguladores de funções fisiológicas até compostos que agem contra predadores e microrganismos. Peptídeos são biomoléculas que podem estar presentes nesse órgão e apresentar diversas atividades como antimicrobianos, antitrombóticos, antioxidantes e opioides ou mesmo se ligar a metais ou gases. Neste trabalho, foram estudados peptídeos encontrados nos anfíbios Hypsiboas punctatus e Phyllomedusa centralis com possíveis atividades antitrombóticas e afinidade por metais e gases, respectivamente. Estes peptídeos, juntamente com peptídeos análogos, foram quimicamente sintetizados em fase sólida, purificados por cromatografia líquida de alta eficiência e caracterizados por Espectrometria de Massa. As estruturas tridimensionais dos peptídeos foram determinadas por Ressonância Magnética Nuclear e os estudos de interação com metais e gases foram realizados por RMN e Espectrometria de Massa. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The skin of amphibians is an organ in which several compounds with biological activity can be found, such as regulators of physiological functions and compounds that act against predators and microorganisms. Peptides are biomolecules that may be present in this organ and provide various activities, for example antimicrobial, antithrombotic, antioxidant, and opioids or even bind to metals and gases. In this work, we studied peptides found in the amphibians Hypsiboas punctatus e Phyllomedusa centralis with potential antithrombotic activity and affinity for metal and gases, respectively. These peptides and analogs were chemically synthesized by solid phase, purified by high performance liquid chromatography and characterized by Mass Spectrometry. Their three-dimensional structures were determined by Nuclear Magnetic Resonance and the studies of interaction with metal and gases were performed by NMR and Mass Spectrometry.