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Isolamento e caracterização de marcadores de DNA associados ao sexo e segmentos de DNA repetitivo em espécies do gênero Brycon (Characidae, Bryconinae)

Silva, Eder Marques da [UNESP] 29 April 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-29Bitstream added on 2014-06-13T19:53:55Z : No. of bitstreams: 1 silva_em_me_botib.pdf: 872118 bytes, checksum: f09b7402718a1296ef6e16914c27dded (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Bryconinae compreende um grupo de peixes com um grande número de espécies distribuídas em sistemas hidrográficos da América Central e da América do Sul. Análises cromossômicas baseadas em técnicas citogenéticas clássicas revelaram que todas as espécies estudadas até o momento apresentam cariótipos similares sem a presença de cromossomos sexuais heteromórficos. Visando ampliar os dados genéticos acerca das relações entre as espécies deste gênero e sobre a evolução cromossômica deste grupo, o objetivo do presente estudo foi isolar e caracterizar fragmentos de DNA associados a um determinado sexo e repetições de DNA satélite em Brycon cephalus e B. orbignyanus. Desta forma, uma análise de marcadores RAPD (“Random Amplified Polymorphic DNA”) e uma dinâmica de digestão enzimática de DNA total foram realizadas. Sessenta e seis primers decâmeros foram utilizados em PCR revelando um fragmento de RAPD, composto por 535 pb, presente em fêmeas de B. cephalus. Dados de hibridização em membrana (“dot-blot”) e de um marcador SCAR (“Sequence Characterized Amplified Region”) desenvolvido confirmaram a especificidade deste fragmento a fêmeas desta espécie e revelaram sua ausência em duas outras espécies do gênero - B. orbignyanus e B. lundii.Digestões enzimáticas de DNA de B. cephalus e B. orbignyanus não evidenciaram diferenças entre machos e fêmeas. Por outro lado, as digestões realizadas com EcoRV, EcoRI, NotI, XbaI e XhoI em B. cephalus levaram à identificação de fragmentos de aproximadamente 250-300 pb em ambos os sexos que provavelmente correspondem a repetições de DNA satélite, denominadas de SatBc1, SatBc2, SatBc3, SatBc4 e SatBc5, respectivamente. A enzima HindIII permitiu a visualização de duas bandas de restrição com cerca de 650 e 850 pb (denominadas de SatBo1 e SatBo2) em machos e fêmeas de B. orbignyanus... / Bryconinae stands for a fish group with several species that have been reported in South and Central America hydrographic systems. Chromosome analyses based on classical cytogenetic techniques have revealed that all species so far studied present similar karyotypes with no heteromorphic sex chromosomes. In order to improve genetic data on the species relationships and chromosome evolution, the purpose of the present study was to isolate and characterize sex-associated DNA fragments and satellite repeats in Brycon cephalus and B. orbignyanus. For this purpose, a random amplified polymorphic DNA (RAPD) assay and a genomic DNA restriction digestion analysis were performed. Sixty six decamer primers were used in PCR revealing a RAPD fragment, composed by 535 bp, present in females of B. cephalus. Data on dot-blot hybridization and on a designed SCAR (Sequence Characterized Amplified Region) marker confirmed its female-specificity in this species and revealed its absence in two other species of the genus - B. orbignyanus and B. lundii. Genomic DNA restriction digestions in B. cephalus and B. orbignyanus resulted in no differences between sexes of both species. However, EcoRV, EcoRI, NotI, XbaI and XhoI DNA digestions in B. cephalus led to the identification of fragments of approximately 250-300 bp in both sexes that probably correspond to satellite DNA repeats, denominated SatBc1, SatBc2, SatBc3, SatBc4 and SatBc5, respectively.The HindIII enzyme permitted the visualization of two restriction bands of around 650 and 850 bp (named as SatBo1 and SatBo2) in males and females of B. orbignyanus. Characterization of the SatBc1 fragment isolated from B. cephalus indicated that its monomeric unit is constituted by 255 bp and 52.9% AT rich. The obtained RAPD data can lead to the supposition that B. cephalus may present heteromorphic sex chromosomes that should be in an early phase... (Complete abstract click electronic access below)
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Metilação sexo-específica no DNA de espécies do gênero Drosophila : um fenômeno recorrente?

D'Ávila, Marícia Fantinel January 2007 (has links)
Nós realizamos este estudo a fim de contribuir para o entendimento da evolução de espécies do gênero Drosophila e o quanto fenômenos epigenéticos estão relacionados a isto. Analisando 14 espécies do subgênero Sophophora, as quais apresentam diferentes histórias evolutivas e exploram ambientes divergentes, investigamos a possibilidade de recorrência do fenômeno de metilação sexo-específica do rDNA como descrito previamente para a espécie D. willistoni. Utilizando as técnicas de seqüenciamento e PCR bissulfito, nós demonstramos que o gene 28S apresenta-se metilado nas espécies do subgrupo willistoni de Drosophila, bem como na espécie D. melanogaster, corroborando a hipótese de que, em insetos, as regiões internas dos genes são metiladas. Entretanto, não detectamos padrões de metilação sexo-específicos para o DNA ribossomal das espécies D. melanogaster e D. paulistorum. Através da técnica de MSRE combinada com Southern blot, verificamos que a metilação diferencial entre sexos do rDNA ocorre exclusivamente nas espécies do subgrupo willistoni, com exceção de D. paulistorum. Nossos resultados indicam que o fenômeno de metilação do DNA pode variar bastante, mesmo entre espécies proximamente relacionadas, como D. willistoni e D. paulistorum, por exemplo. Nós também sugerimos que fatores ambientais, operando diferencialmente nos territórios ocupados pelas diferentes espécies e o menor tempo evolutivo de surgimento dos fenômenos epigenéticos, podem contribuir para a formação do panorama aqui detectado. / The present study aimed to contribute to the comprehension of the role of epigenetic phenomena for the evolution of species of the Genus Drosophila.. We analyzed 14 species of the Sub Genus Sophophora, with different evolutionary histories and exploring very divergent environments, investigating the putative occurrence of the phenomenon of sex-specific methylation patterns of the rDNA, as described previously in Drosophila willistoni. Through the use of PCR bissulfite and sequencing, we demonstrated that the 28S gene is methylated in members of the willistoni subgroup of Drosophila, as in D. melanogaster, corroborating the hypothesis that the internal regions of the genes are methylated in insects. No sex-specific patterns of methylation, however, were detected in the ribosomal DNA of the species D. melanogaster and D. paulistorum. Using the methods of MSRE and Southern blot, we detected differential methylation of the rDNA between sexes exclusively in the species of the willistoni subgroup, excepting D. paulistorum. Our results indicate that the phenomenon of DNA methylation can varied considerably even so between species closely related, as D. willistoni and D. paulistorum, for example. We also suggested that different environmental factors operating in the territories occupied by the different species studied and the shorter evolutionary time of the raising of the epigenetic phenomena can contribute to the formation of the scenario detected.
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O efeito da suplementação com Manihot esculenta crantz sobre o desempenho animal e carga parasitária em ovinos em crescimento / Feed supplementation effect of Manihot esculenta crantz on animal performance and parasite load in growing sheep

Cano, Mario Andres Sierra January 2009 (has links)
O experimento foi realizado com o objetivo de estudar a atividade anti-helmíntica da planta integral de Manihot esculenta Crantz (Mandioca) e o efeito da sua utilização como suplemento na resposta animal medida em termos do desempenho, resposta imune e alguns parâmetros metabólicos. Os tratamentos aplicados consistiram em três práticas de manejo alimentar que incluíram oferta de dois tipos de dietas e o uso ou não de anti-helmíntico comercial. As dietas foram fornecidas a três grupos compostos por seis animais cada um, assim T1, feno + suplemento convencional com a utilização de anti-helmíntico comercial; T2, feno + suplemento alternativo (formulado a partir de folha, raiz de mandioca e minerais); e T3, feno + suplemento convencional sem a aplicação de anti-helmíntico comercial. O período experimental teve uma duração de 90 dias com uma amostra de 18 ovinos machos inteiros da raça Texel, seis animais por tratamento, com peso médio de 32 ± 1,96 kg, distribuídos aleatoriamente em 18 baias individuais com livre acesso á água. O ganho médio diário (GMD) foi analisado num delineamento completamente casualizado e os dados de consumo de feno, suplemento, ovos de helmintos por grama de fezes (OPG) e parâmetros sanguíneos foram analisados como medidas repetidas no tempo na mesma unidade experimental. O consumo de feno foi de 49.15, 44.97 e 55,28 g/UTM (P<.0001). O consumo de suplemento foi influenciado pelo período sendo que foi detectada interação significativa (P<.0001) com médias de consumo de 20.71, 46.34 e 55.67 g/UTM; o ganho médio diário (GMD) foi de 0.088, 0.053, 0.100 kg/dia (P=0,0669) para os tratamentos T1,T2 e T3 respectivamente. As avaliações parasitológicas evidenciaram um OPG significativamente diferente quando comparados os tratamentos T2 e T3 em relação ao T1 com medicação anti-helmíntica. A interação tratamento-período também influenciou a resposta a nível hematológico e bioquímico (P= 0,005) dos animais avaliados. Ambas as dietas avaliadas tiveram efeitos semelhantes sobre o OPG. Já em termos dos parâmetros sangüíneos a suplementação possibilitou que animais mesmo infectados não desenvolvessem a parasitose. O gênero mais susceptível à ação da mandioca foi a larva do gênero Ostertágia. Nas condições do presente experimento verificou-se que a atividade anti-helmíntica da suplementação com Manihot esculenta Crantz não se diferenciou dos efeitos da suplementação convencional sem medicação anti-helmíntica. / The experiment was conducted to study the antihelminth activity of Manihot esculenta Crantz (cassava) plant and the effect of its use as feed supplement on animal response measured in terms of performance, immune response and some metabolic parameters. The treatments consisted of three different feeding management approaches which consisted in two types of diets and the use or not of anthelmintic medication. The feeds were given to three groups of six sheep, as T1, hay + conventional supplement with anthelmintic medication; T2, hay + alternative supplement (formulated from leaves and roots of cassava and minerals); and T3, hay + conventional supplement without anthelmintic medication. The experimental period had duration of 90 days with a sample of 18 Texel male sheep, six per treatment, and average body weight of 32 ± 1.96 kg, randomized in 18 individual boxes with free access to water. The average daily gain (ADG) was analyzed thought completely randomizes design, while the results of hay and supplement intake, eggs per gram of feces (EPG) and blood parameters were analyzed with repeated measures in the same experimental unit. Intake of hay was 49.15, 44.97 and 55,28 g/UTM (P<.0001). The supplement intake was influenced through the time, since significant interaction was detected (P<.0001) with an intake means of 20.71, 46.34 and 55.67 g/UTM. The ADG was 0.088, 0.053, 0.100 kg/day (P=0,0669) for the treatments T1,T2 and T3, respectively. The parasitological evaluations showed a significant change on EPG when comparing T2 and T3 treatments with T1 treatment, with anthelmintic medication. The interaction between treatment and period also influenced the response at the hematologic and biochemistry level (P=0,005) in the studied animals. Both the diets had similar effects in relation of EPG. In terms of blood parameters the supplementation don´t let the animals infected to develop parasitism. Incidence of the larva Ostertágia circumcincta was lower in animals that consumed Manihot esculenta Crantz. At conditions of the present experiment, the anthelmintic activity of supplementation with Manihot esculenta, wasn´t different of the traditional supplementation effects without anthelmintic medication.
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Efeito da esquila e do nível de feno na dieta de cordeiros confinados no inverno / Effect of shearing and level of hay in the diet of lambs confined in winter

Zago, Daniele January 2013 (has links)
Considerando-se que a esquila afeta o consumo dos ovinos e que a inclusão de volumoso na dieta de terminação pode aumentar a viabilidade do confinamento, objetivou-se testar, na terminação de cordeiros, o efeito da esquila e sua relação com o consumo de volumoso. Foram utilizados 45 cordeiros machos, castrados, com 8 meses e peso inicial de 24 kg. O experimento aconteceu de 12 a 06/07/2011, em um delineamento experimental em blocos com parcelas subdivididas com três repetições, os animais esquilados representavam a sub parcela. Os cordeiros receberam três dietas, em todas elas foi ofertado à vontade uma ração comercial com tamanho máximo de partícula de 6mm, que diferenciaram-se pela oferta de feno de Tifton (Cynodon dactylon): 0, 50 e 100% do consumo voluntário. O consumo voluntário dos animais foi observado no período pré-experimental de 15 dias e foi de 4,3% PV de ração (MS) e 0,25% PV de feno (MS). Os cordeiros foram confinados em baias coletivas com 5 animais, 2 de cada baia foram esquilados. O efeito da esquila foi correlacionado com a temperatura do olho, região das costelas e virilha dos cordeiros, utilizando-se um termógrafo por infravermelho, e avaliado através do ganho médio diário (GMD), consumo de concentrado (CC), consumo de volumoso (CV), consumo total de MS (CTMS) e tempo de ruminação (TR). O abate foi no dia 8 de julho de 2011, ao alcançarem 30kg PV. Foram avaliadas características sensoriais, cor, área de olho de lombo, rendimento e peso das carcaças. Os tratamentos e a esquila não influenciaram o GMD. O CV nos animais esquilados foi 29,02 gMS/animal/dia, (P 0,05) maior do que nos não esquilados (18,34 gMS/animal/dia). Devido a isso o TR foi significativamente maior nos animais esquilados (4,63 h/animal/dia) do que nos não esquilados (3,63 h/animal/dia). A inclusão de feno e a esquila não afetaram o CTMS, o TR foi maior (P 0,05) no tratamento que recebeu maior quantidade de feno (4,83 h/animal/dia) e menor naquele em que ofertou-se apenas ração (3,48 h/animal/dia). O animais que receberam 0 ou 100% do consumo potencial de feno, e os esquilados, produziram carcaças mais pesadas (P<0,05). Os animais submetidos à dieta 50 produziram carne mais suculenta. A carne dos cordeiros não esquilados obtiveram maior teor de amarelo. O tamanho de partícula de 6mm parece ser suficiente para manter o funcionamento saudável do rúmen. A esquila e o nível de feno não tem efeito sobre o ganho de peso de cordeiros em terminação, mas podem alterar seu comportamento ingestivo e algumas características físicas e sensoriais da carne. / Considering that esquila affects consumption of sheep and that the inclusion of roughage termination may increase the feasibility of containment, this study aimed to test the effect of esquila and its relationship with the roughage intake in finish lambs. We used 45 castrated lambs with 8 months and initial live weight of 24 kg. The experiment was performed between May 12th 2011 and July 06th 2011, in a randomized complete block with split plots designer and with three replications, shorn animals represented the sub plot. Lambs were fed three diets in all they offered was at ease a commercial ration with maximum particle size of 6mm, which differentiated it self by offering Tifton hay (Cynodon dactylon): 0, 50 and 100% of voluntary intake. The voluntary intake of the animals was observed in the pre-trial period of 15 days and was 4.3% BW feed (DM) and 0.25% BW of hay (DM). Lambs were housed in collective pens with 5 animals per pen were two shorn. The effect of shearing was correlated with the temperature of the eye, the ribs and groin lambs, using an infrared thermographer, and evaluated by the average daily gain (ADG), concentrate intake (CI), forage intake (FI), total DM intake (TDMI) and rumination time (RT). The slaughter was on July 8, 2011, to reach 30 kg BW. We evaluated the sensory characteristics, color, loin eye area, yield and carcass weight. Treatments and shearing did not affect ADG. The FI shorn animals was 29.02 gDM/animal/day (P 0.05) higher than in unshorn (18.34 gDM/animal/day). Because of this RT was significantly higher in shorn animals (4.63 h/animal/day) than in unshorn (3.63 h/animal/day). The inclusion of hay and shearing not affect the TDMI, RT was higher (P 0.05) in treatments with higher amount of iron (4.83 h/animal/day) lower than that in feed offered only (3.48 h/animal/day). The animals that received either 0 or 100% of the potential consumption of hay, and shorn animals, heavier carcasses (P<0.05). The animals underwent 50 diet produced meat juicier. Meat from unshorn lambs had higher yellow content. The particle size of 6mm seems sufficient to maintain the healthy functioning of the rumen. The shearing and level of hay has no effect on weight gain of finishing lambs, but can change their ingestive behavior and some physical and sensory characteristics of the meat.
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Avaliação da eficácia de ovos hiperimunizados (igY) no controle de diarreia pós-desmame em leitões / Evaluation of the efficacy of eggs hiperimmunized (IGY) in control of diarrhoea in post-weaned piglets

Rosa, Daniele Pozzebon da January 2014 (has links)
A mudança na alimentação de leitões, no desmame, está associada a um período de estresse e jejum que resulta em depleção do trato gastrointestinal prejudicando a absorção de nutrientes e também oportunizando a multiplicação de bactérias patogênicas causadoras de diarreia. Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) é uma das principais causas de diarreia pós desmame em leitões e acarreta grandes perdas econômicas na fase de creche. Com a restrição gradual do uso de antibióticos pelo mercado, é necessário pesquisar aditivos alimentares que proporcionem proteção aos leitões e evitem quedas de desempenho. A imunização passiva, através do uso de gemas de galinhas hiperimunizadas (IgY) é uma alternativa atraente aos antibióticos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia de um produto comercial chamado GLOGIGEN® Jump Start, à base de gemas de ovos de galinhas hiperimunizadas (IgY), no controle à diarreia causada por Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) F4 e F18 em leitões recém-desmamados. Os animais foram desafiados com 1010UFC/leitão de E. coli F4 e F18 e ciclos de calor por três dias consecutivos a partir do primeiro dia de experimento. Com 22 dias de idade, 32 leitões recém-desmamados foram distribuídos em grupos. O grupo I, como controle negativo não foi desafiado com ETEC e recebeu colistina como antibiótico promotor de crescimento, óxido de zinco e sulfato de cobre. Os outros três grupos foram desafiados com ETEC tendo 0,2% de GLOBIGEN® na dieta (Grupo II), 4% de inclusão de PSS (Grupo III) e um controle positivo(Grupo VI). Avaliou-se o desempenho por 24 dias, escore e matéria seca fecal a partir do segundo dia de inoculação, por 10 dias consecutivos. Também foram recolhidas amostras de fezes durante os oito primeiros dias de experimento, no 15º e no 24º dias para determinar o número de células de ETEC excretadas, pela técnica de PCR quantitativo e para a detecção da presença das fímbrias F4 e F18 e das enterotoxinas STa, STb e LT pela reação de cadeia polimerase (PCR) multiplex. O Grupo II apresentou maior peso corporal e ganho de peso (p<0,05) do que o Grupo VI e não diferiu do Grupo I (p>0,05) e melhor eficiência alimentar do que o Grupo III (p<0,05). O uso do GLOBIGEN® resultou em fezes moles (escore ≤ 1) que os animais do Grupo III e IV (p<0,05) e reduziu a excreção de F4 e F18 (p<0,05) em relação ao Grupo VI. A presença das enterotoxinas foi menor no Grupo II provavelmente relacionada à menor excreção das ETEC. A associação F18/STa/STb e F4/LT foi observada. Os resultados deste estudo sugerem que o GLOBIGEN® age eficientemente no controle à diarreia podendo ser uma alternativa ao uso de antimicrobianos em leitões recém-desmamados. / The change in the piglets’ feeding, at weaning, is associated with a stress and fasting period that results in depletion of the gastrointestinal tract impairing the absorption of nutrients and also giving opportunity to the multiplication of pathogenic bacteria causing diarrhea. Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) is a major cause of diarrhoea in piglets after weaning and brings great economic losses in the nursery phase. With the gradual restriction of the use of antibiotics by the market, it is necessary to search for food additives that provide protection to piglets and avoid performance drops. Passive immunization through the use of egg yolks of hyperimmunized chickens (IgY) is an attractive alternative to antibiotics.The objective of this trial was to evaluate the effect of a commercial product based on egg-yolk from hens hyperimmunized (GLOBIGEN® Jump Star) to control diarrhoea caused by enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) F4 and F18 in weaned pigs. The animals were challenged with both 1010 CFU/piglet E. coli F4 and F18 and heat cycles for three consecutive days from the first day of the experiment. Thirty-two 22-d-old weaned piglets were divided into groups. Group I as a negative control was unchallenged and received colistin as growth promoter, zinc oxide and copper sulfate. The other three groups were challenged with ETEC were fed a diet with 0.2% GLOBIGEN ® (Group II), including 4% DPP (Group III) and a positive control (Group VI). For 24d evaluated the performance, score and faecal dry matter for 10 consecutive days from second day of the challenged. Fecal samples were also collected during the first eight days of the experiment, later in the 15th and 24th days to determine to determine the number of CFU of ETEC in excreted faeces by the technique of quantitative Polymerase Chain Reaction (PCR) and detecting the presence of fimbriae F4 and F18 and enterotoxin STa, STb and LT by PCR multiplex., Group II provided higher body weight and weight gain (p<0.05) compared with the Group IV, Group I did not differ (p>0.05) and feed efficiency higher than Group III (p<0.05). The use of GLOBIGEN® results soft feces (score ≤ 1) recovering in less time than animals of Groups III and IV (p<0.05) and excretion of F18 and F4 (p<0.05) was lower compared with the Group IV. The presence of toxins was lower in Group II, probably related to excretion reduced of fimbriae. The F18/STa/STb and F4/LT association was observed. The results of the study suggest that GLOBIGEN® acts effectively in control of diarrhoea and can be an alternative to the use of antimicrobials in weanling piglets.
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Revisão do status taxonômico de Amphisbaena prunicolor (Cope, 1885) e Amphisbaena albocingulata Boettger, 1885 (Amphisbaenia: Amphisbaenidae)

Maciel, Renata Perez January 2011 (has links)
Amphisbaena é o gênero de maior diversidade de Amphisbaenia, com 103 espécies reconhecidas e distribuídas pela América do Sul e Central. Uma revisão taxonômica das espécies encontradas no sul da América do Sul reconheceu um complexo, composto por oito espécies, comumente identificadas como A. darwini. A associação destas espécies não é clara, porém os exemplares compartilham algumas características morfológicas e apresentam certo grau de simpatria quanto à distribuição geográfica. Duas das espécies incluídas neste complexo são A. prunicolor e A. albocingulata, anteriormente reconhecidas como subespécies de A. prunicolor. A diagnose existente para as espécies até o presente momento não é funcional, o que dificulta a identificação inequívoca das mesmas. Considerando a carência de informações para identificação das espécies de Amphisbaena, desenvolvemos através da análise da morfologia externa e comparações detalhadas com A. darwini, A. heterozonata, A. munoai e A. trachura, espécies incluídas no complexo associado a A. darwini, a revisão do status taxonômico de A. albocingulata e A. prunicolor. Caracteres de escutelação cefálica e coloração foram identificados como melhor diagnóstico para A. albocingulata e A. prunicolor que os caracteres merísticos, usualmente utilizados para diagnose em Amphisbaena. No presente estudo também foi registrada a variação intra-especificas em A. munoai e o aumento da distribuição geográfica de A. darwini. Adicionalmente, apresentamos uma tabela comparativa baseada na compilação de dados de literatura dos representantes do gênero Amphisbaena com quatro poros pré-cloacais, que tem por objetivo auxiliar na identificação das espécies do grupo.
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Metilação sexo-específica no DNA de espécies do gênero Drosophila : um fenômeno recorrente?

D'Ávila, Marícia Fantinel January 2007 (has links)
Nós realizamos este estudo a fim de contribuir para o entendimento da evolução de espécies do gênero Drosophila e o quanto fenômenos epigenéticos estão relacionados a isto. Analisando 14 espécies do subgênero Sophophora, as quais apresentam diferentes histórias evolutivas e exploram ambientes divergentes, investigamos a possibilidade de recorrência do fenômeno de metilação sexo-específica do rDNA como descrito previamente para a espécie D. willistoni. Utilizando as técnicas de seqüenciamento e PCR bissulfito, nós demonstramos que o gene 28S apresenta-se metilado nas espécies do subgrupo willistoni de Drosophila, bem como na espécie D. melanogaster, corroborando a hipótese de que, em insetos, as regiões internas dos genes são metiladas. Entretanto, não detectamos padrões de metilação sexo-específicos para o DNA ribossomal das espécies D. melanogaster e D. paulistorum. Através da técnica de MSRE combinada com Southern blot, verificamos que a metilação diferencial entre sexos do rDNA ocorre exclusivamente nas espécies do subgrupo willistoni, com exceção de D. paulistorum. Nossos resultados indicam que o fenômeno de metilação do DNA pode variar bastante, mesmo entre espécies proximamente relacionadas, como D. willistoni e D. paulistorum, por exemplo. Nós também sugerimos que fatores ambientais, operando diferencialmente nos territórios ocupados pelas diferentes espécies e o menor tempo evolutivo de surgimento dos fenômenos epigenéticos, podem contribuir para a formação do panorama aqui detectado. / The present study aimed to contribute to the comprehension of the role of epigenetic phenomena for the evolution of species of the Genus Drosophila.. We analyzed 14 species of the Sub Genus Sophophora, with different evolutionary histories and exploring very divergent environments, investigating the putative occurrence of the phenomenon of sex-specific methylation patterns of the rDNA, as described previously in Drosophila willistoni. Through the use of PCR bissulfite and sequencing, we demonstrated that the 28S gene is methylated in members of the willistoni subgroup of Drosophila, as in D. melanogaster, corroborating the hypothesis that the internal regions of the genes are methylated in insects. No sex-specific patterns of methylation, however, were detected in the ribosomal DNA of the species D. melanogaster and D. paulistorum. Using the methods of MSRE and Southern blot, we detected differential methylation of the rDNA between sexes exclusively in the species of the willistoni subgroup, excepting D. paulistorum. Our results indicate that the phenomenon of DNA methylation can varied considerably even so between species closely related, as D. willistoni and D. paulistorum, for example. We also suggested that different environmental factors operating in the territories occupied by the different species studied and the shorter evolutionary time of the raising of the epigenetic phenomena can contribute to the formation of the scenario detected.
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O efeito da suplementação com Manihot esculenta crantz sobre o desempenho animal e carga parasitária em ovinos em crescimento / Feed supplementation effect of Manihot esculenta crantz on animal performance and parasite load in growing sheep

Cano, Mario Andres Sierra January 2009 (has links)
O experimento foi realizado com o objetivo de estudar a atividade anti-helmíntica da planta integral de Manihot esculenta Crantz (Mandioca) e o efeito da sua utilização como suplemento na resposta animal medida em termos do desempenho, resposta imune e alguns parâmetros metabólicos. Os tratamentos aplicados consistiram em três práticas de manejo alimentar que incluíram oferta de dois tipos de dietas e o uso ou não de anti-helmíntico comercial. As dietas foram fornecidas a três grupos compostos por seis animais cada um, assim T1, feno + suplemento convencional com a utilização de anti-helmíntico comercial; T2, feno + suplemento alternativo (formulado a partir de folha, raiz de mandioca e minerais); e T3, feno + suplemento convencional sem a aplicação de anti-helmíntico comercial. O período experimental teve uma duração de 90 dias com uma amostra de 18 ovinos machos inteiros da raça Texel, seis animais por tratamento, com peso médio de 32 ± 1,96 kg, distribuídos aleatoriamente em 18 baias individuais com livre acesso á água. O ganho médio diário (GMD) foi analisado num delineamento completamente casualizado e os dados de consumo de feno, suplemento, ovos de helmintos por grama de fezes (OPG) e parâmetros sanguíneos foram analisados como medidas repetidas no tempo na mesma unidade experimental. O consumo de feno foi de 49.15, 44.97 e 55,28 g/UTM (P<.0001). O consumo de suplemento foi influenciado pelo período sendo que foi detectada interação significativa (P<.0001) com médias de consumo de 20.71, 46.34 e 55.67 g/UTM; o ganho médio diário (GMD) foi de 0.088, 0.053, 0.100 kg/dia (P=0,0669) para os tratamentos T1,T2 e T3 respectivamente. As avaliações parasitológicas evidenciaram um OPG significativamente diferente quando comparados os tratamentos T2 e T3 em relação ao T1 com medicação anti-helmíntica. A interação tratamento-período também influenciou a resposta a nível hematológico e bioquímico (P= 0,005) dos animais avaliados. Ambas as dietas avaliadas tiveram efeitos semelhantes sobre o OPG. Já em termos dos parâmetros sangüíneos a suplementação possibilitou que animais mesmo infectados não desenvolvessem a parasitose. O gênero mais susceptível à ação da mandioca foi a larva do gênero Ostertágia. Nas condições do presente experimento verificou-se que a atividade anti-helmíntica da suplementação com Manihot esculenta Crantz não se diferenciou dos efeitos da suplementação convencional sem medicação anti-helmíntica. / The experiment was conducted to study the antihelminth activity of Manihot esculenta Crantz (cassava) plant and the effect of its use as feed supplement on animal response measured in terms of performance, immune response and some metabolic parameters. The treatments consisted of three different feeding management approaches which consisted in two types of diets and the use or not of anthelmintic medication. The feeds were given to three groups of six sheep, as T1, hay + conventional supplement with anthelmintic medication; T2, hay + alternative supplement (formulated from leaves and roots of cassava and minerals); and T3, hay + conventional supplement without anthelmintic medication. The experimental period had duration of 90 days with a sample of 18 Texel male sheep, six per treatment, and average body weight of 32 ± 1.96 kg, randomized in 18 individual boxes with free access to water. The average daily gain (ADG) was analyzed thought completely randomizes design, while the results of hay and supplement intake, eggs per gram of feces (EPG) and blood parameters were analyzed with repeated measures in the same experimental unit. Intake of hay was 49.15, 44.97 and 55,28 g/UTM (P<.0001). The supplement intake was influenced through the time, since significant interaction was detected (P<.0001) with an intake means of 20.71, 46.34 and 55.67 g/UTM. The ADG was 0.088, 0.053, 0.100 kg/day (P=0,0669) for the treatments T1,T2 and T3, respectively. The parasitological evaluations showed a significant change on EPG when comparing T2 and T3 treatments with T1 treatment, with anthelmintic medication. The interaction between treatment and period also influenced the response at the hematologic and biochemistry level (P=0,005) in the studied animals. Both the diets had similar effects in relation of EPG. In terms of blood parameters the supplementation don´t let the animals infected to develop parasitism. Incidence of the larva Ostertágia circumcincta was lower in animals that consumed Manihot esculenta Crantz. At conditions of the present experiment, the anthelmintic activity of supplementation with Manihot esculenta, wasn´t different of the traditional supplementation effects without anthelmintic medication.
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Avaliação da eficácia de ovos hiperimunizados (igY) no controle de diarreia pós-desmame em leitões / Evaluation of the efficacy of eggs hiperimmunized (IGY) in control of diarrhoea in post-weaned piglets

Rosa, Daniele Pozzebon da January 2014 (has links)
A mudança na alimentação de leitões, no desmame, está associada a um período de estresse e jejum que resulta em depleção do trato gastrointestinal prejudicando a absorção de nutrientes e também oportunizando a multiplicação de bactérias patogênicas causadoras de diarreia. Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) é uma das principais causas de diarreia pós desmame em leitões e acarreta grandes perdas econômicas na fase de creche. Com a restrição gradual do uso de antibióticos pelo mercado, é necessário pesquisar aditivos alimentares que proporcionem proteção aos leitões e evitem quedas de desempenho. A imunização passiva, através do uso de gemas de galinhas hiperimunizadas (IgY) é uma alternativa atraente aos antibióticos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia de um produto comercial chamado GLOGIGEN® Jump Start, à base de gemas de ovos de galinhas hiperimunizadas (IgY), no controle à diarreia causada por Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) F4 e F18 em leitões recém-desmamados. Os animais foram desafiados com 1010UFC/leitão de E. coli F4 e F18 e ciclos de calor por três dias consecutivos a partir do primeiro dia de experimento. Com 22 dias de idade, 32 leitões recém-desmamados foram distribuídos em grupos. O grupo I, como controle negativo não foi desafiado com ETEC e recebeu colistina como antibiótico promotor de crescimento, óxido de zinco e sulfato de cobre. Os outros três grupos foram desafiados com ETEC tendo 0,2% de GLOBIGEN® na dieta (Grupo II), 4% de inclusão de PSS (Grupo III) e um controle positivo(Grupo VI). Avaliou-se o desempenho por 24 dias, escore e matéria seca fecal a partir do segundo dia de inoculação, por 10 dias consecutivos. Também foram recolhidas amostras de fezes durante os oito primeiros dias de experimento, no 15º e no 24º dias para determinar o número de células de ETEC excretadas, pela técnica de PCR quantitativo e para a detecção da presença das fímbrias F4 e F18 e das enterotoxinas STa, STb e LT pela reação de cadeia polimerase (PCR) multiplex. O Grupo II apresentou maior peso corporal e ganho de peso (p<0,05) do que o Grupo VI e não diferiu do Grupo I (p>0,05) e melhor eficiência alimentar do que o Grupo III (p<0,05). O uso do GLOBIGEN® resultou em fezes moles (escore ≤ 1) que os animais do Grupo III e IV (p<0,05) e reduziu a excreção de F4 e F18 (p<0,05) em relação ao Grupo VI. A presença das enterotoxinas foi menor no Grupo II provavelmente relacionada à menor excreção das ETEC. A associação F18/STa/STb e F4/LT foi observada. Os resultados deste estudo sugerem que o GLOBIGEN® age eficientemente no controle à diarreia podendo ser uma alternativa ao uso de antimicrobianos em leitões recém-desmamados. / The change in the piglets’ feeding, at weaning, is associated with a stress and fasting period that results in depletion of the gastrointestinal tract impairing the absorption of nutrients and also giving opportunity to the multiplication of pathogenic bacteria causing diarrhea. Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) is a major cause of diarrhoea in piglets after weaning and brings great economic losses in the nursery phase. With the gradual restriction of the use of antibiotics by the market, it is necessary to search for food additives that provide protection to piglets and avoid performance drops. Passive immunization through the use of egg yolks of hyperimmunized chickens (IgY) is an attractive alternative to antibiotics.The objective of this trial was to evaluate the effect of a commercial product based on egg-yolk from hens hyperimmunized (GLOBIGEN® Jump Star) to control diarrhoea caused by enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) F4 and F18 in weaned pigs. The animals were challenged with both 1010 CFU/piglet E. coli F4 and F18 and heat cycles for three consecutive days from the first day of the experiment. Thirty-two 22-d-old weaned piglets were divided into groups. Group I as a negative control was unchallenged and received colistin as growth promoter, zinc oxide and copper sulfate. The other three groups were challenged with ETEC were fed a diet with 0.2% GLOBIGEN ® (Group II), including 4% DPP (Group III) and a positive control (Group VI). For 24d evaluated the performance, score and faecal dry matter for 10 consecutive days from second day of the challenged. Fecal samples were also collected during the first eight days of the experiment, later in the 15th and 24th days to determine to determine the number of CFU of ETEC in excreted faeces by the technique of quantitative Polymerase Chain Reaction (PCR) and detecting the presence of fimbriae F4 and F18 and enterotoxin STa, STb and LT by PCR multiplex., Group II provided higher body weight and weight gain (p<0.05) compared with the Group IV, Group I did not differ (p>0.05) and feed efficiency higher than Group III (p<0.05). The use of GLOBIGEN® results soft feces (score ≤ 1) recovering in less time than animals of Groups III and IV (p<0.05) and excretion of F18 and F4 (p<0.05) was lower compared with the Group IV. The presence of toxins was lower in Group II, probably related to excretion reduced of fimbriae. The F18/STa/STb and F4/LT association was observed. The results of the study suggest that GLOBIGEN® acts effectively in control of diarrhoea and can be an alternative to the use of antimicrobials in weanling piglets.
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Efeito da esquila e do nível de feno na dieta de cordeiros confinados no inverno / Effect of shearing and level of hay in the diet of lambs confined in winter

Zago, Daniele January 2013 (has links)
Considerando-se que a esquila afeta o consumo dos ovinos e que a inclusão de volumoso na dieta de terminação pode aumentar a viabilidade do confinamento, objetivou-se testar, na terminação de cordeiros, o efeito da esquila e sua relação com o consumo de volumoso. Foram utilizados 45 cordeiros machos, castrados, com 8 meses e peso inicial de 24 kg. O experimento aconteceu de 12 a 06/07/2011, em um delineamento experimental em blocos com parcelas subdivididas com três repetições, os animais esquilados representavam a sub parcela. Os cordeiros receberam três dietas, em todas elas foi ofertado à vontade uma ração comercial com tamanho máximo de partícula de 6mm, que diferenciaram-se pela oferta de feno de Tifton (Cynodon dactylon): 0, 50 e 100% do consumo voluntário. O consumo voluntário dos animais foi observado no período pré-experimental de 15 dias e foi de 4,3% PV de ração (MS) e 0,25% PV de feno (MS). Os cordeiros foram confinados em baias coletivas com 5 animais, 2 de cada baia foram esquilados. O efeito da esquila foi correlacionado com a temperatura do olho, região das costelas e virilha dos cordeiros, utilizando-se um termógrafo por infravermelho, e avaliado através do ganho médio diário (GMD), consumo de concentrado (CC), consumo de volumoso (CV), consumo total de MS (CTMS) e tempo de ruminação (TR). O abate foi no dia 8 de julho de 2011, ao alcançarem 30kg PV. Foram avaliadas características sensoriais, cor, área de olho de lombo, rendimento e peso das carcaças. Os tratamentos e a esquila não influenciaram o GMD. O CV nos animais esquilados foi 29,02 gMS/animal/dia, (P 0,05) maior do que nos não esquilados (18,34 gMS/animal/dia). Devido a isso o TR foi significativamente maior nos animais esquilados (4,63 h/animal/dia) do que nos não esquilados (3,63 h/animal/dia). A inclusão de feno e a esquila não afetaram o CTMS, o TR foi maior (P 0,05) no tratamento que recebeu maior quantidade de feno (4,83 h/animal/dia) e menor naquele em que ofertou-se apenas ração (3,48 h/animal/dia). O animais que receberam 0 ou 100% do consumo potencial de feno, e os esquilados, produziram carcaças mais pesadas (P<0,05). Os animais submetidos à dieta 50 produziram carne mais suculenta. A carne dos cordeiros não esquilados obtiveram maior teor de amarelo. O tamanho de partícula de 6mm parece ser suficiente para manter o funcionamento saudável do rúmen. A esquila e o nível de feno não tem efeito sobre o ganho de peso de cordeiros em terminação, mas podem alterar seu comportamento ingestivo e algumas características físicas e sensoriais da carne. / Considering that esquila affects consumption of sheep and that the inclusion of roughage termination may increase the feasibility of containment, this study aimed to test the effect of esquila and its relationship with the roughage intake in finish lambs. We used 45 castrated lambs with 8 months and initial live weight of 24 kg. The experiment was performed between May 12th 2011 and July 06th 2011, in a randomized complete block with split plots designer and with three replications, shorn animals represented the sub plot. Lambs were fed three diets in all they offered was at ease a commercial ration with maximum particle size of 6mm, which differentiated it self by offering Tifton hay (Cynodon dactylon): 0, 50 and 100% of voluntary intake. The voluntary intake of the animals was observed in the pre-trial period of 15 days and was 4.3% BW feed (DM) and 0.25% BW of hay (DM). Lambs were housed in collective pens with 5 animals per pen were two shorn. The effect of shearing was correlated with the temperature of the eye, the ribs and groin lambs, using an infrared thermographer, and evaluated by the average daily gain (ADG), concentrate intake (CI), forage intake (FI), total DM intake (TDMI) and rumination time (RT). The slaughter was on July 8, 2011, to reach 30 kg BW. We evaluated the sensory characteristics, color, loin eye area, yield and carcass weight. Treatments and shearing did not affect ADG. The FI shorn animals was 29.02 gDM/animal/day (P 0.05) higher than in unshorn (18.34 gDM/animal/day). Because of this RT was significantly higher in shorn animals (4.63 h/animal/day) than in unshorn (3.63 h/animal/day). The inclusion of hay and shearing not affect the TDMI, RT was higher (P 0.05) in treatments with higher amount of iron (4.83 h/animal/day) lower than that in feed offered only (3.48 h/animal/day). The animals that received either 0 or 100% of the potential consumption of hay, and shorn animals, heavier carcasses (P<0.05). The animals underwent 50 diet produced meat juicier. Meat from unshorn lambs had higher yellow content. The particle size of 6mm seems sufficient to maintain the healthy functioning of the rumen. The shearing and level of hay has no effect on weight gain of finishing lambs, but can change their ingestive behavior and some physical and sensory characteristics of the meat.

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