Com o objetivo de estudar a morfologia e a ultra-estrutura do intestino delgado de bezerros durante o processo de aquisição de imunidade passiva, foram coletadas amostras de tecido de 15 animais machos em três idades: ao nascer sem que houvesse a ingestão de colostro; três horas após a ingestão da primeira refeição de colostro e aos três dias de idade. Observou-se a presença de células vacuoladas do duodeno ao íleo no animal recém-nascido, que apresentaram material absorvido após a ingestão de colostro. Foi detectada a reação de fosfatase ácida nas células absortivas do jejuno distal e íleo de bezerros recém-nascidos, antes e após a ingestão de colostro. Na região proximal, foram verificadas mudanças nas características morfológicas aos três dias de idade, com o início da detecção de reação da fosfatase ácida em lisossomos. A morfologia aos três dias de idade pode representar um diferente estágio de maturação das células epiteliais do intestino delgado de bezerros. / The morphology and the ultra-structure of the small intestine during the passive immunity acquisition were investigated on intestinal tissues of fifteen male dairy calves aged: unsuckled neonatal, three hours after colostrum ingestion and three days old. Vacuolate cells from duodenum to ileum were observed in newborn calves, which shown material absorved after colostrum ingestion. The phosphatase acid reaction was detected in the vacuoles in distal jejunum and ileum of suckled and unsuckled newborn calves. Changes at the morphological characteristics and the initiation of phosphatase acid reaction in lysosomes were observed in calves aged three days old. The three days old calves small intestine morphology can represent a different phase of epithelium cells maturation of calves small intestine.

Foram utilizadas 24 ovelhas da raça Santa Inês para coleta de tecido adiposo, sendo 16 lactantes e 8 secas. Oito ovelhas lactantes foram tratadas in vivo com bST (160 mg, em duas doses em intervalo de 14 dias) iniciando a injeção subcutânea de hormônio no 13 o dia de lactação, sendo que os animais restantes receberam somente vitamina E. Outros 8 animais encontravam-se em período seco, para que fosse verificada também a diferença das taxas lipolíticas em diferentes estados fisiológicos. Foi verificada a hipótese de que ocorra uma atuação da ST através de mudança na resposta do sistema antilipolítico da proteína Gi ligada a receptores da adenosina. O tratamento com ST exógena aumentou o ganho de peso das ovelhas lactantes (P<0,05) e também o peso dos cordeiros oriundos do grupo tratado ao final do período experimental, no entanto, não foi verificado aumento na produção de leite. As concentrações de AGNE diminuíram no decorrer da lactação para os dois grupos de ovelhas lactantes, chegando no 36 º dia de lactação a concentrações similares ao do grupo de ovelhas secas. A concentração de IGF-I sérico das ovelhas aumentou após tratamento com bST, sendo 8 dias após a segunda dose do hormônio (36 dias de lactação) superior à concentração observada para ovelhas secas. A lactação não teve influência na lipólise basal entre os diferentes estados fisiológicos. Houve um aumento significativo (P<0,01) da taxa lipolítica do tecido adiposo quando estimulada por b adrenérgico (ISO) para animais em quaisquer dos estados fisiológicos. Todavia, a taxa estimulada por ISO foi significativamente (P<0,01) mais elevada no tecido das ovelhas tratadas com bST. Na presença de ADA, ocorreu um aumento da taxa em relação à basal, mas não ultrapassou àquela estimulada por isoproterenol. O estímulo lipolítico pela eliminação de adenosina no meio através da ADA apresentou-se significativamente (P<0,01) mais elevado para ovelhas lactantes, sendo este efeito amenizado pelo tratamento com bST. O uso do análogo da adenosina PIA quando colocado no meio de cultura do tecido que foi tratado in vivo com bST teve seu efeito diminuído. Os resultados indicam um aumento da taxa lipolítica em resposta a agonista b-adrenérgico no tecido adiposo do omento de ovelhas lactantes tratadas com bST in vivo, bem como confirmam a hipótese de diminuição da ação inibitória da adenosina na cascata lipolítica naquele tecido. / Bovine somatotropin (bST) treatment in vivo alters adipose tissue metabolism by enhancing lipolytic response to adrenergic agonists. We examined the impact of bST and lactation on basal and stimulated lipolytic rates with isoproterenol (ISO; 10 -5 nM), adenosine deaminase (ADA; 0.75 U/mL), ISO plus ADA in short-term (2h) incubations of ovine adipose tissue. The anti-lipolytic effect of phenylisopropyladenosine (PIA; non-hydrolyzable adenosine analog) was evaluated at various concentrations (0.5, 1.5, 3, 100 nM). Sixteen lactating Santa Ines ewes were randomly assigned to two groups. They received two s.c. injections, with a 14 day interval, starting at d 13 postpartum with either bST (160 mg) or Vitamin E (control). Eight similar nonlactating ewes received vitamin E. Omental adipose tissue biopsies were taken on d 8 after the second bST or vitamin injection. The performance of weight and milk production were taken. The serum IGF-I was analyzed. The lipolytic rate was determined by NEFA release in serum and media as mEq of oleic acid.2h -1 g -1 tissue. Basal lipolytic rates did not change with lactation or with bST treatment in vivo (P>0,05). ISO stimulated lipolytic rate increased compared to basal and was higher for the adipose tissue from lactating ewes treated with bST (P<0,01).The lipolytic rate for adipose incubated with ADA was higher than basal for lactating ewes, with the greater response for the control. The ADA treated tissue from lactating ewes receiving bST showed intermediate lipolytic rates. Maximum lipolytic rate with ISO+ADA was also higher for lactating ewes treated with bST (P<0.01), and there was no difference between lactating and nonlactating ewes. The PIA effects were evaluated by the inhibition of ISO+ADA lipolysis, and adipose tissue from lactating ewes treated with bST showed a reduced response to PIA. The results demonstrate that in vivo somatotropin treatment increases maximal lipolytic rates stimulated by adrenergic agonist and decreases the antilipolytic effect of PIA in omental adipose tissue in ewes.

Os grandes avanços obtidos em quantidade de massa muscular nos animais domésticos foram alcançados por programas de melhoramento genético baseados na seleção de características fenotípicas observados na fase adulta do animal. No entanto, o número de precursores miogênicos e conseqüentemente, de fibras musculares, é determinado nos estádios embrionários do desenvolvimento. Este fato direcionou o programa miogênico como alvo de busca de potenciais transcritos candidatos que possam causar impacto sobre a deposição muscular em animais domésticos. Este trabalho objetivou identificar transcritos candidatos originais associados ao desenvolvimento e crescimento do tecido muscular esquelético em frangos (Gallus gallus). Um total de 4.534 transcritos (ESTs) identificados em trabalhos anteriores foram imobilizados em membrana de náilon (microarranjo) para permitir a investigação das diferenças no padrão de expressão entre genótipos e tecidos. O perfil transcricional do tecido muscular peitoral entre linhagens contrastantes para potencial de crescimento e deposição muscular da Embrapa Suíno Aves permitiu identificar 98 transcritos diferencialmente expressos, que foram validados por amplificação quantitativa de transcritos reversos (RT-PCRq), e localizados em regiões coincidentes às anteriormente mapeadas por QTLs. Estes transcritos são agora os candidatos preferenciais para a identificação de mutações e desenvolvimento de marcadores específicos que possam ser empregados em programas de melhoramento e seleção precoce ou indireta de aves. O mesmo microarranjo foi utilizado para caracterizar os transcritos desconhecidos pelo padrão de expressão entre cinco tecidos (cérebro, coração, fígado, músculo e pele). Esta abordagem permitiu identificar transcritos com padrão de expressão tecido-específico e tecido-preferencialmente expressos e caracterizar 24 transcritos desconhecidos como co-expressos aos transcritos músculo esquelético-específicos. Por fim, o orientador de axônio RGM-A (Repulsive guidance molecule A), identificado como músculo esquelético-específico, foi selecionado para ser funcionalmente analisado in vivo, para investigar uma possível função deste transcrito atípico no tecido muscular e comprovar a eficiência dos microarranjos em orientar a seleção de transcritos candidatos. O padrão de expressão de RGM-A em embriões de frango e os efeitos da super-expressão sobre Pax3 indicaram uma possível associação deste orientador de axônio com a formação da musculatura esquelética dos vertebrados superiores. Os transcritos candidatos indicados por análises de microarranjo deste trabalho serão úteis não apenas para que os programas de melhoramento sejam capazes de manter ou aumentar os índices de crescimento das aves, que atualmente buscam por informações adicionais para superar os limites impostos pelo próprio perfil genético alcançado em anos de seleção. Estes resultados também abriram novas perspectivas para a caracterização funcional in vivo de transcritos desconhecidos, tendo embriões de frango como modelo animal. / by animal breeding programs along the years based on the observation of adult phenotypic characters. But, the number of myogenic precursor cells and, consequently, the number of muscle fibers is determined during the embryonic stages of development. Therefore, the embryonic myogenic program is an ideal target for searching potential candidate-transcripts, that can influence skeletal muscle deposition in domestic animals. This work aimed to identify original candidate-transcripts associated with skeletal muscle development and growth in chicken embryos (Gallus gallus). A total of previously identified 4,534 transcripts (Expressed Sequence Tags) were transferred to a nylon membrane (microarray) to investigate differences in expression patterns among genotypes and tissues. The pectoral skeletal muscle transcriptional pattern between broiler and layer chicken lines allowed the identification of 98 differentially expressed transcripts, whose expression were validated by quantitative RT-PCR (Reverse-transcription Polymerase Chain Reaction), and were co-localized in coincident regions with previously mapped QTLs (Quantitative Trait Loci). These transcripts are now preferential candidates to further identify mutations, and/or to develop specific markers to be used in breeding programs for early or indirect selection of superior animals. The same microarray was used to characterize unknown transcripts by expression patterns among five tissues (brain, heart, liver, muscle and skin). This approach allowed to identify tissue-specific and/or preferentially-expressed transcripts, and to characterize 24 unknown transcripts as co-expressed with skeletal musclespecific ones. Finally, the axon guidance molecule RGM-A, identified as skeletal muscle-specific transcript by microarrays, was selected to be functionally analyzed in vivo, to investigate the function of this atypical transcript in the skeletal muscle and to demonstrate the approach efficiency to guide selection of candidate transcripts. The RGM-A expression pattern and the Pax3 phenotype after over-expression in chicken embryos indicated a possible association of this axon guidance with the skeletal muscle formation. The candidate transcripts identified by mycroarray analyses may be useful in animal breeding programs to increase the present gains in chicken growth rate, since additional information is urgently required to surpass current limits of selection gains. The results have also opened a new range of possibilities to promote the functional characterization in vivo of unknown transcripts, having chicken embryos as models.

Os grandes avanços obtidos em quantidade de massa muscular nos animais domésticos foram alcançados por programas de melhoramento genético baseados na seleção de características fenotípicas observados na fase adulta do animal. No entanto, o número de precursores miogênicos e conseqüentemente, de fibras musculares, é determinado nos estádios embrionários do desenvolvimento. Este fato direcionou o programa miogênico como alvo de busca de potenciais transcritos candidatos que possam causar impacto sobre a deposição muscular em animais domésticos. Este trabalho objetivou identificar transcritos candidatos originais associados ao desenvolvimento e crescimento do tecido muscular esquelético em frangos (Gallus gallus). Um total de 4.534 transcritos (ESTs) identificados em trabalhos anteriores foram imobilizados em membrana de náilon (microarranjo) para permitir a investigação das diferenças no padrão de expressão entre genótipos e tecidos. O perfil transcricional do tecido muscular peitoral entre linhagens contrastantes para potencial de crescimento e deposição muscular da Embrapa Suíno Aves permitiu identificar 98 transcritos diferencialmente expressos, que foram validados por amplificação quantitativa de transcritos reversos (RT-PCRq), e localizados em regiões coincidentes às anteriormente mapeadas por QTLs. Estes transcritos são agora os candidatos preferenciais para a identificação de mutações e desenvolvimento de marcadores específicos que possam ser empregados em programas de melhoramento e seleção precoce ou indireta de aves. O mesmo microarranjo foi utilizado para caracterizar os transcritos desconhecidos pelo padrão de expressão entre cinco tecidos (cérebro, coração, fígado, músculo e pele). Esta abordagem permitiu identificar transcritos com padrão de expressão tecido-específico e tecido-preferencialmente expressos e caracterizar 24 transcritos desconhecidos como co-expressos aos transcritos músculo esquelético-específicos. Por fim, o orientador de axônio RGM-A (Repulsive guidance molecule A), identificado como músculo esquelético-específico, foi selecionado para ser funcionalmente analisado in vivo, para investigar uma possível função deste transcrito atípico no tecido muscular e comprovar a eficiência dos microarranjos em orientar a seleção de transcritos candidatos. O padrão de expressão de RGM-A em embriões de frango e os efeitos da super-expressão sobre Pax3 indicaram uma possível associação deste orientador de axônio com a formação da musculatura esquelética dos vertebrados superiores. Os transcritos candidatos indicados por análises de microarranjo deste trabalho serão úteis não apenas para que os programas de melhoramento sejam capazes de manter ou aumentar os índices de crescimento das aves, que atualmente buscam por informações adicionais para superar os limites impostos pelo próprio perfil genético alcançado em anos de seleção. Estes resultados também abriram novas perspectivas para a caracterização funcional in vivo de transcritos desconhecidos, tendo embriões de frango como modelo animal. / by animal breeding programs along the years based on the observation of adult phenotypic characters. But, the number of myogenic precursor cells and, consequently, the number of muscle fibers is determined during the embryonic stages of development. Therefore, the embryonic myogenic program is an ideal target for searching potential candidate-transcripts, that can influence skeletal muscle deposition in domestic animals. This work aimed to identify original candidate-transcripts associated with skeletal muscle development and growth in chicken embryos (Gallus gallus). A total of previously identified 4,534 transcripts (Expressed Sequence Tags) were transferred to a nylon membrane (microarray) to investigate differences in expression patterns among genotypes and tissues. The pectoral skeletal muscle transcriptional pattern between broiler and layer chicken lines allowed the identification of 98 differentially expressed transcripts, whose expression were validated by quantitative RT-PCR (Reverse-transcription Polymerase Chain Reaction), and were co-localized in coincident regions with previously mapped QTLs (Quantitative Trait Loci). These transcripts are now preferential candidates to further identify mutations, and/or to develop specific markers to be used in breeding programs for early or indirect selection of superior animals. The same microarray was used to characterize unknown transcripts by expression patterns among five tissues (brain, heart, liver, muscle and skin). This approach allowed to identify tissue-specific and/or preferentially-expressed transcripts, and to characterize 24 unknown transcripts as co-expressed with skeletal musclespecific ones. Finally, the axon guidance molecule RGM-A, identified as skeletal muscle-specific transcript by microarrays, was selected to be functionally analyzed in vivo, to investigate the function of this atypical transcript in the skeletal muscle and to demonstrate the approach efficiency to guide selection of candidate transcripts. The RGM-A expression pattern and the Pax3 phenotype after over-expression in chicken embryos indicated a possible association of this axon guidance with the skeletal muscle formation. The candidate transcripts identified by mycroarray analyses may be useful in animal breeding programs to increase the present gains in chicken growth rate, since additional information is urgently required to surpass current limits of selection gains. The results have also opened a new range of possibilities to promote the functional characterization in vivo of unknown transcripts, having chicken embryos as models.

Com o objetivo de estudar a morfologia e a ultra-estrutura do intestino delgado de bezerros durante o processo de aquisição de imunidade passiva, foram coletadas amostras de tecido de 15 animais machos em três idades: ao nascer sem que houvesse a ingestão de colostro; três horas após a ingestão da primeira refeição de colostro e aos três dias de idade. Observou-se a presença de células vacuoladas do duodeno ao íleo no animal recém-nascido, que apresentaram material absorvido após a ingestão de colostro. Foi detectada a reação de fosfatase ácida nas células absortivas do jejuno distal e íleo de bezerros recém-nascidos, antes e após a ingestão de colostro. Na região proximal, foram verificadas mudanças nas características morfológicas aos três dias de idade, com o início da detecção de reação da fosfatase ácida em lisossomos. A morfologia aos três dias de idade pode representar um diferente estágio de maturação das células epiteliais do intestino delgado de bezerros. / The morphology and the ultra-structure of the small intestine during the passive immunity acquisition were investigated on intestinal tissues of fifteen male dairy calves aged: unsuckled neonatal, three hours after colostrum ingestion and three days old. Vacuolate cells from duodenum to ileum were observed in newborn calves, which shown material absorved after colostrum ingestion. The phosphatase acid reaction was detected in the vacuoles in distal jejunum and ileum of suckled and unsuckled newborn calves. Changes at the morphological characteristics and the initiation of phosphatase acid reaction in lysosomes were observed in calves aged three days old. The three days old calves small intestine morphology can represent a different phase of epithelium cells maturation of calves small intestine.

Foram utilizadas 24 ovelhas da raça Santa Inês para coleta de tecido adiposo, sendo 16 lactantes e 8 secas. Oito ovelhas lactantes foram tratadas in vivo com bST (160 mg, em duas doses em intervalo de 14 dias) iniciando a injeção subcutânea de hormônio no 13 o dia de lactação, sendo que os animais restantes receberam somente vitamina E. Outros 8 animais encontravam-se em período seco, para que fosse verificada também a diferença das taxas lipolíticas em diferentes estados fisiológicos. Foi verificada a hipótese de que ocorra uma atuação da ST através de mudança na resposta do sistema antilipolítico da proteína Gi ligada a receptores da adenosina. O tratamento com ST exógena aumentou o ganho de peso das ovelhas lactantes (P<0,05) e também o peso dos cordeiros oriundos do grupo tratado ao final do período experimental, no entanto, não foi verificado aumento na produção de leite. As concentrações de AGNE diminuíram no decorrer da lactação para os dois grupos de ovelhas lactantes, chegando no 36 º dia de lactação a concentrações similares ao do grupo de ovelhas secas. A concentração de IGF-I sérico das ovelhas aumentou após tratamento com bST, sendo 8 dias após a segunda dose do hormônio (36 dias de lactação) superior à concentração observada para ovelhas secas. A lactação não teve influência na lipólise basal entre os diferentes estados fisiológicos. Houve um aumento significativo (P<0,01) da taxa lipolítica do tecido adiposo quando estimulada por b adrenérgico (ISO) para animais em quaisquer dos estados fisiológicos. Todavia, a taxa estimulada por ISO foi significativamente (P<0,01) mais elevada no tecido das ovelhas tratadas com bST. Na presença de ADA, ocorreu um aumento da taxa em relação à basal, mas não ultrapassou àquela estimulada por isoproterenol. O estímulo lipolítico pela eliminação de adenosina no meio através da ADA apresentou-se significativamente (P<0,01) mais elevado para ovelhas lactantes, sendo este efeito amenizado pelo tratamento com bST. O uso do análogo da adenosina PIA quando colocado no meio de cultura do tecido que foi tratado in vivo com bST teve seu efeito diminuído. Os resultados indicam um aumento da taxa lipolítica em resposta a agonista b-adrenérgico no tecido adiposo do omento de ovelhas lactantes tratadas com bST in vivo, bem como confirmam a hipótese de diminuição da ação inibitória da adenosina na cascata lipolítica naquele tecido. / Bovine somatotropin (bST) treatment in vivo alters adipose tissue metabolism by enhancing lipolytic response to adrenergic agonists. We examined the impact of bST and lactation on basal and stimulated lipolytic rates with isoproterenol (ISO; 10 -5 nM), adenosine deaminase (ADA; 0.75 U/mL), ISO plus ADA in short-term (2h) incubations of ovine adipose tissue. The anti-lipolytic effect of phenylisopropyladenosine (PIA; non-hydrolyzable adenosine analog) was evaluated at various concentrations (0.5, 1.5, 3, 100 nM). Sixteen lactating Santa Ines ewes were randomly assigned to two groups. They received two s.c. injections, with a 14 day interval, starting at d 13 postpartum with either bST (160 mg) or Vitamin E (control). Eight similar nonlactating ewes received vitamin E. Omental adipose tissue biopsies were taken on d 8 after the second bST or vitamin injection. The performance of weight and milk production were taken. The serum IGF-I was analyzed. The lipolytic rate was determined by NEFA release in serum and media as mEq of oleic acid.2h -1 g -1 tissue. Basal lipolytic rates did not change with lactation or with bST treatment in vivo (P>0,05). ISO stimulated lipolytic rate increased compared to basal and was higher for the adipose tissue from lactating ewes treated with bST (P<0,01).The lipolytic rate for adipose incubated with ADA was higher than basal for lactating ewes, with the greater response for the control. The ADA treated tissue from lactating ewes receiving bST showed intermediate lipolytic rates. Maximum lipolytic rate with ISO+ADA was also higher for lactating ewes treated with bST (P<0.01), and there was no difference between lactating and nonlactating ewes. The PIA effects were evaluated by the inhibition of ISO+ADA lipolysis, and adipose tissue from lactating ewes treated with bST showed a reduced response to PIA. The results demonstrate that in vivo somatotropin treatment increases maximal lipolytic rates stimulated by adrenergic agonist and decreases the antilipolytic effect of PIA in omental adipose tissue in ewes.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:42:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

It was found that the measurements captured by confocal microscopy and scanning electron microscopy had a statistically significant difference for bovine tissue. There was not a statistically significant for porcine and poultry tissue. The intent of the study is to perform a comparative study to examine efficacy of two distinct technologies for a singular purpose: tissue surface roughness characterization. The two technologies compared are a confocal reflectance microscope and a scanning electron microscope. The comparison was made by comparing two surface roughness parameters [Ra and Rq] within ImageJ. The study examined three different animal species [porcine, bovine, and poultry] to highlight if different tissues presented alternative conclusions for the efficiency of either technology. Additional analysis was produced comparing two cutting methods [Kleen Kut versus conventional], as well as six different poultry processing technique combinations.

No description available.

Sublinhagens de camundongos AIRmax e AIRmin homozigotas para os alelos R ou S do gene Slc11a1 apresentam distinta capacidade regenerativa à perfuração de suas orelhas. Animais AIRmaxSS exibiram regeneração tecidual precoce em comparação aos animais AIRmaxRR, sugerindo que o alelo S favorece a regeneração nestes animais. Camundongos das sublinhagens AIRmin não apresentaram regeneração após perfuração de suas orelhas. Em resposta ao estímulo, animais AIRmaxSS exibiram inflamação local mais intensa e tardia do que animais AIRmaxRR, demonstrando elevados níveis de MPO e edema, e influxo celular predominantemente de neutrófilos. Ensaios de expressão gênica global demonstraram genes diferencialmente expressos entre as sublinhagens, evidenciando genes sobre-representados no tema biológico proliferação celular em ambas sublinhagens, enquanto somente nos animais AIRmaxSS ocorreu sobre-representação para resposta inflamatória nos genes ativados e para contração muscular nos genes reprimidos. Os resultados de microarray foram validados por qPCR. / Homozygous AIRmax and AIRmin sublines for Slc11a1 R and S alleles present distinct regenerative capacity to the ear hole. AIRmaxSS mice exhibited early tissue regeneration compared to AIRmaxRR animals, suggesting that the Slc11a1 S allele promotes regeneration in these animals. AIRmin sublines didnt show regeneration after ear punch. In response to the stimulus, AIRmaxSS animals exhibited more intense and later local inflammation than AIRmaxRR animals, presenting elevated levels of MPO, edema and cellular influx predominantly of neutrophils. Global gene expression analysis showed differentially-expressed genes between the sublines, in which over-represented biological theme is cell proliferation in both sublines. AIRmaxSS animals displayed over-representation of inflammatory response in up-regulated genes and of muscle contraction in down-regulated genes. Microarray results were validated by using quantitative PCR.