Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-12-17Bitstream added on 2014-06-13T20:10:11Z : No. of bitstreams: 1 zieri_r_me_sjrp.pdf: 2224009 bytes, checksum: f31e2003cdc028d7117086382535f9bd (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo analisa as características estruturais e ultra-estruturais dos testículos, bem como as características do sistema pigmentar extracutâneo e sua relação com as outras estruturas, nos anuros Physalaemus nattereri (Steindachner, 1963) e P. fuscomaculatus (Steindachner, 1964). Dez machos adultos de cada espécie foram coletados em Nova Itapirema, distrito de Nova Aliança - SP e processados para análises em microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão. Os testículos apresentaram numerosas células contendo pigmentos, aleatoriamente distribuídas na túnica albugínea e interstício, dando ao órgão uma coloração marrom escura. Essas células são estruturalmente semelhantes a melanócitos, e se caracterizam pela enorme quantidade de pigmentos melânicos no interior de corpúsculos elétron-densos contendo melanina, os melanossomos. Durante a espermiogênese ocorre condensação da cromatina e alongamento nuclear, além da perda de material citoplasmático. As células de Sertoli apresentam em seu citoplasma grande quantidade de microtúbulos e grânulos de glicogênio. O espermatozóide é fusiforme, contém uma capa acrossômica e perfuratorium na região anterior do núcleo e a peça intermediária contém uma bainha citoplasmática com mitocôndrias. O flagelo apresenta o axonema, fibra justaxonemal e membrana ondulante, e bastão axial ausente. Esta organização é semelhante à encontrada em outros anfíbios como P. biligonigerus, P. gracilis e P. fuscomaculatus. / This paper was analyses the structural and ultra-structural characteristics of the testis, and the extracutaneous pigmentary system characteristics and the relationship with other structures, in the anurans Physalaemus nattereri (Steindachner, 1963) and P. fuscomaculatus (Steindachner, 1964). Ten males adults of each species were collected in Nova Itapirema, district of Nova Aliança - SP and processed for analyses in light and transmission electron microscopy. The testis presented numerous pigment-containing cells, randomly distributed in the albuginea tunic and interstitium, giving the organ a dark brown coloration. The intense pigmentation observed in the testis is due to great amount of cellular types containing granules of brown coloration and long citoplasmic processes, characterized by the synthesis and accumulation of great amount of melanin pigment inside of melanosomes. Spermiogenesis in the anuran P. nattereri involves chromatin condensation and nuclear elongation, with visible cytoplasmic eliminations. In this stage it can also be seen inside Sertoli cell citoplasm, surrounding each spermatid, a great amount of microtubules and glycogen. The anterior region of the nucleous presented an acrossome and perfuratorium. A mitochondrial sleeve is found around the proximal portion of the tail. The tail presents an axonema with a 9+2 axoneme pattern, a justaxonemal fiber, undulating membrane and absence of axial rod. This organization is similar to that found in other amphibians such as P. biligonigerus, P. gracilis and P. fuscomaculatus.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-02-24Bitstream added on 2014-06-13T20:29:23Z : No. of bitstreams: 1 santos_lrs_me_sjrp.pdf: 2514640 bytes, checksum: 8920d8cebd5e6c418cf59dcb095bf86b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Poli(etilenoglicol) (PEG) é um polímero neutro hidrossolúvel, e brometo de dioctadecildimetilamônio (DODAB) e diododecildimetilamônio (DDAB) são surfactantes catiônicos dialquilados, C18 e C12, respectivamente, derivados da amônia quaternária, formadores de vesículas. As suas propriedades físicas, em solução aquosa, são bem conhecidas. No entanto, as propriedades de misturas desse polímero com esses surfactantes não o são. Investigamos a interação de PEG com DODAB e DDAB em solução aquosa, numa faixa de concentração total dos componentes até 1% em peso, e construímos diagramas de fases, com especial destaque para a fase vesicular. Utilizamos PEG com massa molecular entre 200 Da e 2 MDa e os diagramas de fases foram construídos a 25oC, isto é, acima da temperatura de transição gel-líquido cristal (Tm) de DDAB (Tm = 16oC) e abaixo da Tm de DODAB (Tm = 45oC). DODAB e DDAB têm a característica comum de formar vesículas unilamelares em baixas concentrações do surfactante e vesículas multilamelares em concentrações mais elevadas; em regiões intermediárias, vesículas uni e multilamelares coexistem em equilíbrio na solução. A fronteira entre essas regiões de vesículas não é muito bem definida e observamos, neste estudo, que o efeito de PEG na estrutura de agregados de DODAB e DDAB em água depende da massa molecular do polímero. Além disso, PEG favorece a formação de vesículas unilamelares em concentrações mais elevadas de DODAB e DDAB, quando predominam as vesículas multilamelares de DODAB puro (sem o polímero), possibilitando a formação de vesículas mistas de DODAB/PEG e DDAB/PEG em água e concentrações relativamente grandes desses surfactantes. Dentre os métodos experimentais empregados nesse estudo, destacamos, turbidimetria, fluorescência de estado estacionário, calorimetria diferencial... / Poly (ethyleneglycol) (PEG) is a water soluble neutral polymer, and dioctadecyldimethylammonium (DODAB) and diododecyldimethylammonium (DDAB) bromide are double chain cationic surfactants derived from the quaternary ammonium that have been widely investigated due to their high application potential in different areas of the science and technology. The physical properties of PEG, DODAB and DDAB in aqueous solution are well-known. However, the properties of mixtures of the polymer with those surfactants are not. We investigated the interaction of PEG with DODAB and DDAB in aqueous solution, within a range of total concentration of the components of 0-1 wt%, and the phase diagrams built up, with special interest for the vesicular phases. We used PEG with molecular mass between 200 Da and 2 MDa and the phase diagrams were built up at 25°C, that is, above the melting temperature (Tm) of DDAB (Tm = 16°C) and below Tm of DODAB (Tm = 45°C). DODAB and DDAB have the common characteristic of forming unilamellar vesicles at low surfactant concentrations and umultilamellar vesicles at higher concentrations; at intermediate concentrations, uni- and multilamellar vesicles coexist in solution. The borders of these different vesicle phases are not well defined. We observed in this Thesis that the effect of PEG on the structures of DODAB and DDAB aggregates in water depends on the molecular mass of the polymer. Besides, PEG stabilizes the unilamellar vesicles at high concentrations of DODAB, where the multilamellar vesicles are the dominant structures present in solution, thus allowing the formation of mixed DODAB/PEG and DDAB/PEG vesicles in water at relatively high concentrations of these surfactants. The experimental methods used in this investigation include turbidimetry, steady-state fluorescence, differential scanning calorimetry (DSC), isothermal titration... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-23Bitstream added on 2014-06-13T18:50:01Z : No. of bitstreams: 1 francobelussi_l_me_sjrp.pdf: 2526687 bytes, checksum: f8848ac8327a2c55f2bd6e149e411197 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os anfíbios compartilham com os demais vertebrados ectotérmicos a existência de um sistema pigmentar extracutâneo, constituído por células com o citoplasma repleto de melanina, em vários tecidos e órgãos. O papel funcional dessas células ainda não está definido, havendo várias hipóteses, dentre elas o papel na defesa contra patógenos. O objetivo do trabalho foi observar a resposta das células pigmentares viscerais presentes no fígado e testículos dos anuros frente ao processo inflamatório induzido experimentalmente por lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli. Para isso, foram realizadas análises morfológicas, estereológicas e histoquímicas; com o intuito de observar as respostas celulares envolvendo mudanças na forma e substâncias presentes desse tipo celular no fígado e testículos, além da descrição anatômica do sistema pigmentar extracutâneo desses animais após infecção. Foram utilizados 30 exemplares da espécie Eupemphix nattereri, os animais foram inoculados, com dose única de LPS de E. coli, sendo analisados 2 e 24 horas após a inoculação. Após esse período, os animais foram eutanasiados, a pigmentação visceral foi descrita, em 12 regiões pré-estabelecidas; sendo o fígado e testículos posteriormente retirados e submetidos ao processamento histológico para realização das análises. A pigmentação presente no fígado aumentou no grupo tratado após 24 horas, enquanto que nos testículos é observado aumento após 2 horas. As substâncias hemosiderina e lipofuscina não são verificadas nas gônadas, estando presentes apenas no fígado. Quanto à hemosiderina, não há variação significativa entre os tratamentos. Já a lipofuscina apresenta um aumento significativo nos animais tratados após 24 horas, estando ainda correlacionada positivamente com a quantidade... / Ectothermic vertebrates have a well-developed system of melanin-containing cells present on several organs (liver, spleen, lung, heart, thymus, and gonads) and tissues (meninges and connective tissues surrounding blood vessels), constituting an extracutaneous pigmentary system. The functional role of these pigmented cells in the visceral organs are not known, however there are several hypotheses, including a bactericide function. Our aim was to characterize the response of visceral pigmented cells in the liver of the anuran Eupemphix nattereri inoculated with lipopolysaccharide (LPS) of Escherichia coli. Morphological, estereological and histochemicals analyses were carried out in order to describe the cellular responses involving changes in the form and amount of pigmentary substances that occur in this cellular type in the liver and testes. We inoculated twenty animals with one dose of LPS of E. coli, and analyzed 2 and 24 hours after the inoculation for observation of pigmented cells. After this period, the animals were euthanized and the liver and the testes were submitted to the histological processing. The pigmentation increased in the liver of the treatment group after 24 hours, whereas the pigmentation on testes increased after 2 hours of inoculation. In the liver, haemosiderin and lipofuscin are located within melanomacrophages, along with melanin. Haemosiderin showed no variation between the treatments, but lipofuscin increased in the treatment group after 24 hours. The amount of haemosiderin was not correlated neither with melanin nor lipofuscina, but melanin and lipofuscin were significantly correlated in the animals analyzed 24 hours after LPS inoculation. Haemosiderin and lipofuscin were not observed on testes. Although the liver and testes in E. nattereri presented pigmented... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Célio Fernando Baptista Haddad / Banca: Rafael O. de Sá / Banca: Antonio Sebben / Resumo: O estudo comparativo da ontogenia fornece dados que podem servir tanto para elucidar alguns dos mecanismos de evolução, como para realizar reconstruções filogenética, principalmente porque permite a observação da diferenciação morfológica e temporal durante o desenvolvimento. O estudo das modificações do processo de ontogenia também fornece dados relativos aos processos de especiação. Neste sentido, os anfíbios podem ser considerados os melhores modelos para o estudo de ontogenia. Como eles têm embriões geralmente de vida livre, a aquisição da série de desenvolvimento necessário é relativamente fácil, quando comparado com qualquer outro animal vertebrado. Entre os anuros, por causa da diversidade de modos reprodutivos (que inclui desenvolvimento direto), os pipídeos oferecem uma rara oportunidade de investigar como o cuidado parental pode ter influenciado o desenvolvimento geral e, em particular, as rotas de desenvolvimento do esqueleto. Além disso, a família Pipidae também é um ramo que se diferenciou relativamente cedo na árvore de vida dos anfíbios anuros. Esta família apresenta uma combinação única de características plesiomórficas e exclusivamente derivadas, algumas das quais parecem representar adaptações a um estilo de vida aquático. O presente estudo descreve o desenvolvimento do crânio de Pipa arrabali e compara os dados disponíveis para outras espécies do grupo, incluindo outros Pipidae e Xenoanura. Para as análises morfológicas, foram utilizados 51 embriões em diferentes estágios de desenvolvimento. Para observar as estruturas esqueléticas os espécimes foram diafanizados e corados com uma técnica de dupla coloração para diferenciação de cartilagem e osso. O condrocrânio desta espécie é caracterizado pela redução ou ausência de várias estruturas, com uma concentração destas modificações nas regiões etmoidal e anterior. Quando comparado com outras espécies, parece óbvio / Abstract: The study of comparative ontogeny provides data that can serve both, to elucidate some of the mechanisms of evolution and phylogenetic reconstruction, mainly because it allows for the observation of morphological and temporal differentiation during development. The study of modifications of ontogenic process also permits that data relating to the process of speciation be observed. In this regard, frogs may be considered the best models for the study of ontogeny. As they generally have free living embryos, the acquisition of the necessary developmental series is relatively easy, when compared with many other vertebrates. Amongst frogs, because of the diversity of reproductive modes (which includes direct developers), pipids offer a rare opportunity to investigate how parental care may have influenced development in general and skeletal developmental pathways in particular. Besides, the family Pipidae is also a relatively early offshoot of the anuran tree of life, presenting a unique combination of plesiomorfic characteristics and exclusive derived characteristics, some of which seems to represent adaptations to an aquatic lifestyle. Here in, I describe the development of the cranium of Pipa arrabali and compare the data available to other species in the group, including other Pipidae and Xenoanura. For the morphological analyses, I used 51 embryos in different developmental stages. To observe the skeletal structures the specimens were cleared and double stained for cartilage and bone differentiation. The chondrocranium of this species is characterized by several reductions or absence of structures, with a concentration of these modifications in the ethmoidal and anterior regions. When compared to other species, it seems obvious that heterocrony is a pervasive mechanism for the ontogenetic modifications observed / Mestre

Orientador: Classius de Oliveira / Banca: Ana Maria de Lauro Castrucci / Banca: Sebastião Roberto Taboga / Resumo: Os anfíbios compartilham com os demais vertebrados ectotérmicos a existência de um sistema pigmentar extracutâneo, constituído por células com o citoplasma repleto de melanina, em vários tecidos e órgãos. O papel funcional dessas células ainda não está definido, havendo várias hipóteses, dentre elas o papel na defesa contra patógenos. O objetivo do trabalho foi observar a resposta das células pigmentares viscerais presentes no fígado e testículos dos anuros frente ao processo inflamatório induzido experimentalmente por lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli. Para isso, foram realizadas análises morfológicas, estereológicas e histoquímicas; com o intuito de observar as respostas celulares envolvendo mudanças na forma e substâncias presentes desse tipo celular no fígado e testículos, além da descrição anatômica do sistema pigmentar extracutâneo desses animais após infecção. Foram utilizados 30 exemplares da espécie Eupemphix nattereri, os animais foram inoculados, com dose única de LPS de E. coli, sendo analisados 2 e 24 horas após a inoculação. Após esse período, os animais foram eutanasiados, a pigmentação visceral foi descrita, em 12 regiões pré-estabelecidas; sendo o fígado e testículos posteriormente retirados e submetidos ao processamento histológico para realização das análises. A pigmentação presente no fígado aumentou no grupo tratado após 24 horas, enquanto que nos testículos é observado aumento após 2 horas. As substâncias hemosiderina e lipofuscina não são verificadas nas gônadas, estando presentes apenas no fígado. Quanto à hemosiderina, não há variação significativa entre os tratamentos. Já a lipofuscina apresenta um aumento significativo nos animais tratados após 24 horas, estando ainda correlacionada positivamente com a quantidade... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Ectothermic vertebrates have a well-developed system of melanin-containing cells present on several organs (liver, spleen, lung, heart, thymus, and gonads) and tissues (meninges and connective tissues surrounding blood vessels), constituting an extracutaneous pigmentary system. The functional role of these pigmented cells in the visceral organs are not known, however there are several hypotheses, including a bactericide function. Our aim was to characterize the response of visceral pigmented cells in the liver of the anuran Eupemphix nattereri inoculated with lipopolysaccharide (LPS) of Escherichia coli. Morphological, estereological and histochemicals analyses were carried out in order to describe the cellular responses involving changes in the form and amount of pigmentary substances that occur in this cellular type in the liver and testes. We inoculated twenty animals with one dose of LPS of E. coli, and analyzed 2 and 24 hours after the inoculation for observation of pigmented cells. After this period, the animals were euthanized and the liver and the testes were submitted to the histological processing. The pigmentation increased in the liver of the treatment group after 24 hours, whereas the pigmentation on testes increased after 2 hours of inoculation. In the liver, haemosiderin and lipofuscin are located within melanomacrophages, along with melanin. Haemosiderin showed no variation between the treatments, but lipofuscin increased in the treatment group after 24 hours. The amount of haemosiderin was not correlated neither with melanin nor lipofuscina, but melanin and lipofuscin were significantly correlated in the animals analyzed 24 hours after LPS inoculation. Haemosiderin and lipofuscin were not observed on testes. Although the liver and testes in E. nattereri presented pigmented... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre