Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ROSANA CORREA DA SILVA.pdf: 1155135 bytes, checksum: a1c142c1de3c5263b64fc25cab61f452 (MD5) Previous issue date: 2012-03-28 / Papillary carcinomas are the most common tumors of the thyroid, corresponding to 80% of all tumors that affect the gland. In such tumors, a common mutation at the BRAF gene has been detected, comprising a nucleotide transversion, T1799A, at the exon 15 of gene. This mutation has been identified in about 50 % of the thyroid papillary carcinomas (TPC). Clinical and experimental studies have demonstrated important associations between BRAF mutations and different TPC clinical factors related to tumor progression, invasion and recurrence. The objective of this study was to analise BRAF protein expression, by using immunohistochemistry, and V600E BRAF mutations in a group of patients with thyroid papillary carcinoma. BRAF protein expression and V600E BRAF mutations were compared to TPC clinical and pathological aspects. The study group comprised 116 TPC patients that were selected at the Pathology Department of Hospital Araujo Jorge, in Goiânia. BRAF immunohistochemical analysis employed a labeled polymer peroxidase method and primary BRAF monoclonal antibody (clone F-7), Santa Cruz Biotechnology Inc. BRAF V600E molecular analysis was carried by PCR (Polimerase Chain Reaction) associated to RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). Statistical analysis was performed by using univariate analysis (Chi-square test with Yates correction, and Fischer). Our results indicated that BRAF overexpression was detected in 54 TPC cases (46.0%), while BRAF V600E mutation was detected in 74 TPC cases (63.8%). Significant associations were detected between BRAF overexpression with distant metastasis (p=0.001) and tumor extrathyroidal extensions (p=0.0183). BRAF V600E mutations were significantly associated with lymph nodes methastasis (p=0.0385) and BRAF protein overexpression (p=0.0063). / Os carcinomas papilíferos são os tumores mais comuns da tireóide, sendo responsáveis por 80% de todos os cânceres da glândula. Nesses tumores, uma mutação comum no gene BRAF tem sido observada, compreendendo a transversão do nucleotídeo T1799A, localizado no exon 15, verificada em 50% dos carcinomas papilíferos de tireóide (CPT). Essa mutação acarreta a substituição do aminoácido valina na posição 600 da proteína, por ácido glutâmico, sendo assim designada V600E. Estudos experimentais e clínicos têm mostrado uma associação entre a mutação do gene BRAF e diferentes parâmetros clínicos de progressão, invasão e recorrência no CPT. O objetivo deste estudo foi detectar os níveis da proteína BRAF utilizando o método de imuno-histoquímica, e avaliar a mutação V600E do gene BRAF em um grupo de pacientes com carcinoma papilífero de tireóide. A detecção imuno-histoquímica da proteína BRAF e a mutação V600E do gene BRAF, foram comparadas em relação aos aspectos clínico-patológicos dos tumores. O grupo de estudo incluiu 116 pacientes com carcinoma papilífero de tireóide, selecionados no Setor de Anatomia Patológica do Hospital Araújo Jorge, em Goiânia-GO. A análise imuno-histoquímica utilizou o método da imunoperoxidase associada a polímeros e o anticorpo BRAF (clone F-7) Santa Cruz Biotechnology Inc. A análise molecular da mutação V600E do gene BRAF foi realizada por meio de PCR (reação em cadeia da polimerase) e RFLP (polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição). As análises estatísticas incluiram o teste do Chi-quadrado com correção de Yates e o teste exato de Fisher. Nossos resultados mostraram que a hiperexpressão de BRAF foi detectada em 54 casos (46%) e a mutação V600E do gene BRAF em 74 casos (63,8%). Dentre as associações investigadas, resultados significativos foram observados entre a hiperexpressão da proteína BRAF e extensão extra-tireoideana do tumor (p=0,0183). A presença da mutação V600E do gene BRAF foi associada as metástases linfonodais (p=0,0385) e à hiperexpressão da proteína BRAF (p=0,0063).

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JULIANA SAYURI SUGITA INUMARU.pdf: 977119 bytes, checksum: dd9451c21f0c8b8df529c718c8cf5860 (MD5) Previous issue date: 2012-08-24 / Melanoma comprises about 4% of skin cancers, however, more than 95% of stage IV melanoma patients will die within five years and most patients will succumb in a year. The most commonly mutated gene in melanoma is BRAF V600E mutation, described in 40-70% of cutaneous melanomas. This mutation results in the substitution of valine for glutamic acid in codon 600, resulting in the active form of the protein. The objective of this study was to investigate the frequency of BRAF V600E mutation in patients diagnosed with melanoma in Goiânia, as well as the possible associations between this mutation and clinical-pathological aspects of the cases analyzed. Seventy seven cases of melanoma from the Pathology Departament of Araújo Jorge Hospital, in Goiânia, Goiás were analized. Molecular analysis was performed by PCR and RFLP. Descriptive and comparative statistical analysis with Chi-square test were used in this study. The results demonstrated the presence of V600E mutation in 54 (70,1%) patients with cutaneous melanoma and no statistically significant association was found between the presence of mutation with other prognostics parameters such as age, gender, sun exposure, anatomic location, presence of metastasis, histological subtypes and histological parameters (Breslow thickness, presence of ulceration, signs of regression, lymphocytic infiltration and presence of satellites). Our results suggest that BRAF V600E mutation is a common event in melanomas and represents an important molecular target for therapeutic approaches in the treatment of this neoplasia. / O melanoma representa 4% das neoplasias malignas da pele, no entanto, mais de 95% dos pacientes com melanoma estágio IV irão morrer em cinco anos e a grande parte dos pacientes irá sucumbir em um ano. O gene mutado mais comumente no melanoma é o BRAF e a mutação V600E é descrita em 40 a 70% dos melanomas cutâneos. Tal mutação resulta na substituição da valina por ácido glutâmico no códon 600, resultando na forma ativa desta proteína. O objetivo desse estudo consistiu em investigar a frequência da mutação V600E do gene BRAF, em pacientes diagnosticados com melanoma em Goiânia, bem como as possíveis associações, entre tal mutação e os aspectos clinico-patológicos dos casos analisados. Para isso foram analisados 77 casos de melanoma do Setor de Anatomia Patológica do Hospital Araújo Jorge, em Goiânia, Goiás. A análise molecular foi realizada por PCR e RFLP. Análise estatística descritiva e comparativa com o teste Chi-quadrado foi usado neste estudo. A mutação V600E do gene BRAF foi encontrada em 54 (70,1%) pacientes portadores de melanoma cutâneo e nenhuma associação estatisticamente significativa foi detectada entre a presença de mutação com outros parâmetros prognósticos como idade, gênero, exposição solar, localização anatômica, presença de metástases, subtipo histológico e parâmetros histológicos (índice de Breslow, presença de ulceração, sinais de regressão, infiltração linfocitária e presença de satélites). Nossos resultados permitem concluir que a mutação V600E de BRAF é um evento comum nos melanomas e que representa um alvo molecular importante para as abordagens alvo dirigidas no tratamento desta neoplasia.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANTONIO PAULO MACHADO GONTIJO.pdf: 1678535 bytes, checksum: 665466b4708c9e9ac445d3ca0ae06ef5 (MD5) Previous issue date: 2012-08-29 / Thyroid cancer is the commonest endocrine malignancy, with a rising incidence all over the world. This increasing incidence is almost exclusively due to the papillary thyroid cancer (PTC) and 30% to 50% of these tumors are papillary thyroid microcarcinomas (PTMC). The many score systems for risk stratification of these patients in low and high risk have been revealed to be unsatisfactory, leading to the search of a molecular marker wich could integrate a more reliable stratification system. BRAF V600E mutation is a frequent genetic event in the papillary thyroid carcinomas, that reflects its potential as a molecular marker in the PTMC. The aim of the present study was to evaluate the prevalence of such mutation in 80 paraffin embedded PTMC samples from the Pathology Department of the Hospital Araújo Jorge of Goiânia, Goiás, Brasil, obtained from patients operated between 1999 and 2006. Molecular analysis of the BRAF V600E mutation has been achieved by PCR and RFLP techniques. Statistical analysis included Chi-squared test with Yates s correction and Fisher s exact test. From the 80 cases of PTMC analysed, 73 (91.2%) were females, 47 patients (58.7%) were less than 45 years old and 33 (41.3%) were ≥ 45 years old. Lymph node metastasis were observed in 28 patients (35.0%) and extrathyroidal extension occurred in 19 cases (23.7%). Mutation BRAF V600E was observed in 50 cases (62.5%). There was no statistically significant association between clinicalpathologic parameters and the presence of the BRAFV600E. Our results showed that the BRAFV600E is a common genetic alteration in the PTMC, and it may represent an early event in the carcinogenesis of the thyroid gland. However, implications of this mutation in the prognostic of the PTMC were not observed. / O câncer de tireoide é a neoplasia maligna endócrina mais comum, com incidência crescente em todo o mundo. Esse crescimento é quase que exclusivamente às custas do carcinoma papilar da tireóide (CPT) e, atualmente, 30-50% desses tumores são microcarcinomas papilares de tireóide (MCPT). Os diversos sistemas de estratificação para classificação desses pacientes em baixo e alto risco têm se revelado insatisfatórios, levando à procura de um marcador molecular que possa compor uma estratificação mais efetiva. A mutação V600E do gene BRAF constitui um evento genético frequente dos carcinomas papilares da tireóide, refletindo seu potencial como marcador tumoral nos MCPT. O objetivo do presente estudo foi avaliar a prevalência dessa mutação em 80 espécimes de MCPT, oriundas do Serviço de Patologia do Hospital Araújo Jorge de Goiânia, de pacientes operados entre 1999 a 2006. A análise molecular da mutação V600E do gene BRAF foi realizada por meio das técnicas de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) e Polimorfismo de Comprimento de Fragmento de Restrição (RFLP). As análises estatísticas incluíram o teste do Qui-quadrado com correção de Yates e o teste exato de Fisher. Dentre os 80 casos de MCPT analisados, 73 (91,2%) eram do sexo feminino; 47 pacientes (58,7%) tinham idades abaixo de 45 anos e 33 (41,3%) tinham idades ≥ 45 anos. Metástases linfonodais foram observadas em 28 pacientes (35%) e 19 tumores (23,7%) apresentaram extensão extratiroidiana. A mutação V600E do gene BRAF foi observada em 50 casos (62,5%). Dentre os parâmetros clínicos e histopatológicos investigados no grupo de pacientes deste estudo, nenhuma associação estatisticamente significativa foi detectada em relação à presença da mutação V600E do gene BRAF. Nossos resultados demonstraram que a mutação V600E do gene BRAF é uma alteração genética comum nos MCPT, podendo representar um evento precoce na carcinogênese da glândula tireóide. Entretanto, implicações desta mutação no prognóstico dos microcarcinomas papilíferos de tiróide não foram observadas.