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CHARACTERIZATION OF TOXICITY DETERMINANTS IN BACILLUS THURINGIENSIS MOSQUITOCIDAL DELTA-ENDOTOXINS

Abdullah, Mohd Amir F. 20 December 2002 (has links)
No description available.
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Transformation of the entomophilic Bacillus finitimus Heimpel and Angus by the DNA from the entomophilic Bacillus thuringiensis Berliner /

Reeves, Eldon Lee January 1967 (has links)
No description available.
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Bacillus thuringiensis strain M15, a novel autoagglutinable, non-serotypeable strain -cloning and characterization of a novel cry31A-type crystal protein gene, cry31Aa2, and two new insertion sequences, IS231M and -N

Jung, Yong-Chul January 2001 (has links)
Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.
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Analise do efeito da radiação de microondas sobre Anagasta Kuhniella Zeller (1879) (Lepidoptera: Pyralidae) e seus dois agentes de controle biologico, Bracon hebertor (Say, 1836) (Hymenoptera: Braconidae) e Bacillus thuringiensis var. kurstaki (H:3a3b)

Fagundes, Giovanna Garcia 03 July 1998 (has links)
Orientador: Mohamed Habib / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-09-11T20:53:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fagundes_GiovannaGarcia_M.pdf: 3683842 bytes, checksum: bb3e2515d24b20fec15523274d67540b (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O conceito de Manejo Integrado de Pragas (MIP) busca a utilização consciente de métodos de controle ambientalmente seguros e economicamente viáveis. Neste contexto, é de extrema importância o conhecimento das interações entre os agentes de controle a serem empregados, para garantir maior eficiência na implantação de tais programas. Tanto as microondas (300 a 300.000 MHz), como o Bacillus thuringiensis varo kurstaki e o ectoparasitóide Bracon hebetor (Say, 1836) vêm sendo estudados isoladamente como promissores agentes de controle de pragas em produtos armazenados. Este trabalho teve por objetivo analisar as respostas e relações do parasitóide Bracon hebetor, do seu hospedeiro natural, o piralídeo Anagasta kühniella Zeller (1879) e do entomopatógeno, B. thuringiensis varo kurstaki (Sorotipo H­3a:3b) à radiação de Microondas (2.450 MHz). o material entomológico foi coletado em moinho de farinha em Campinas, SP, e utilizado para dar início a criações laboratoriais . As condições adotadas neste trabalho foram de 25 ::!: 2 o C, 60 ::!: 10 % de umidade relativa (UR) e 12 horas de fotoperíodo. Para os biensaios de avaliação da sensibilidade de Bacillus thuringiensis varo Iwrstaki a microondas foram utilizadas amostras do produto Dipel (Abbot @), contendo o complexo esporo - cristal desta bactéria, 16.000 UII mg de virulência, formulação em pó molhável. Todos os bioensaios, envolvendo a utilização de radiação, foram realizados sob a potência máxima de um forno microondas Panasonic NN 7954 8H I K, operando na freqüência de 2.450 MHz. Tanto o piralídeo, como como o parasitóide, apresentaram uma relação positiva entre o aumento do tempo de exposição e a mortalidade, independentemente do estágio de vida avaliado. No caso de esporos de B. thur;ng;ens;s irradiados, esta relação foi visualizada no bioensaio realizado na concentração de 0,2%, a qual é próxima à CLso das larvas de terceiro estádio. Quanto à sensibilidade das diferentes fases de desenvolvimento de Anagasta kühn;ella à microondas observou-se a existência de um gradiente de sensibilidade entre os estágios de desenvolvimento do piralídeo : larvas de último estádio (TELso = 15,63 s) > larvas de terceiro estádio (TELso = 19,34 s) > adultos (TELso = 22,61 s) > ovos (TELso = 121,67 s), provavelmente decorrente de diferenças físico- químicas. Encontrou-se diferenças significativas quanto ao impacto de microondas nos diferentes estágios de desenvolvimento dos ovos de Anagasta kühn;ella (1 e 4 dias de idade) quando usado tempos de exposição subletais (10 e 30 segundos). Os ovos de 4 dias demonstraram ser mais sensíveis à radiação que os de 1 dia de idade. Já no caso das exposições letais (45, 60 e 90 segundos) não houve indício de diferenças nas duas etapas de desenvolvimento embrionário. As larvas que eclodiram dos ovos tratados com radiação não portavam nenhum tipo de alteração morfológica. Quanto à interferência do meio no impacto causado em larvas de último estádio por exposição à radiação não se constatou diferença significativa entre as larvas expostas diretamente (TELso = 15,63 s) e em meio de farinha de trigo integral (TELso = 16,28 s). A sintomatologia apresentada após o tratamento com radiação variou em função do tempo de exposição. Observou-se desde letargia, desfunção do sistema locomotor até dessecamento, escurecimento do tegumento e morte. A análise da influência da radiação na capacidade reprodutiva e na longevidade de adultos do piralídeo sobreviventes à exposição indicou que as microondas provocam alterações negativas em ambos os casos. Entretanto, a radiação não influiu na viabilidade dos ovos colocados pelas fêmeas tratadas. Os adultos de Bracon hebetor demonstraram um nível de tolerância à radiação de microondas bem maior (TELso = 106,57 s) que as larvas (TELso = 15,63 s) e adultos (TELso = 22,61 s) do seu piralídeo hospedeiro, Anagasta kühniella, enquanto as larvas do braconídeo (TELso = 20,31 s) aparentemente apresentam o mesmo nível de sensibilidade do píralídeo praga. A exposição do produto à base de Bacillus thuringiensis varo kurstaki à radiação de microondas, nas concentrações letais (2,6%) e sub-Ietais (0,02%) não influiu no seu potencial patogênico. Entretanto, na concentração próxima à letal mediana (CLso) observou-se que o aumento do tempo de exposição à radiação diminuiu a patogenicidade da bactéria. Sendo assim, a radiação de microondas apresentou-se como um método de controle bastante promissor para Anagasta kühniella criada em farinha de trigo integral. Pode ser empregado em ecossistemas de armazemagem deste produto em associação ao ectoparasitóide Bracon hebetor e ao Bacillus thuringiensis varo kurstaki / Abstract: The application of Integrated Pest Management (IPM) means the utilization of efficient control methods which are ecologically safe and economicaly viable. Therefore, it is extremaly important to gather more information about the possible interactions between the different control agents, aimimg to optimize such a method. Microwaves (300 a 300.000 MHz), as well as Bacillus thuringiensis and the ectoparasitoid Bracon hebetor (Say, 1836) are being studied individually by some institutions, as promissing control agents of some stored product pests. The present work was developed to study and evaluate the relations among the parasite Bracon hebetor, his natural host, Anagasta kühniella Zeller (1879), the entomopathogen Bacillus thuringiensis' varo kurstaki (H- 3a:3b) and microwaves radiation. The mother culture of the pyralid and braconid species were initiated from live material collected from flour mills in Campinas municipality, state of São Paulo. The cultures were maintained and experiments were realized under controlled laboratory condítions of 25 :t 2° C, 60 :t 10 % R.H. and 12 hours of photoperiod. To evaluate the tolerance of B. thuringiensis to microwave radiation samples of the commercial product Dipel (Abbot) were utilized. This product contains 16,000 IUI mg and formulated as a wettable powder. The radiation treatments were undertaken utilizing the maximum potency of a domestic Panasonic microwave oven (NN 7954 BH/K, 2450 MHz). The mortality rate among the different developmental stages of the two insect species was observed to be positively related with the radiation exposure time. Among the Anagasta kühniella developmental stages, while the last instar larvae showed to be more sensitive to radiation (median letal exposure time, LET 50 = 15,63 s), the egg stage showed to be more resistant (LETso= 121,67 s). The third instar larvae, as well the adult stage, revealed a moderate sensitivity (LETso= 19,34 s and 22,61 s, respectively). Within the egg stage of Anagasta kühniella the full grow embryo showed to be more sensitive than newly deposited eggs. The impact of the direct exposition to microwaves on the full grow Anagasta kühniella larvae (LET so= 15,63 s) did not differ when compared with those larvae imbeded in their natural diet, whole wheat flour (LETso = 16,28 s). The sequence and intensity of the external symptoms, showed to be directly related to the duration time in which larvae of Anagasta kühniella were exposed to the microwave radiation. Letargy and locomotion desfunctions were the initial alterations. Dehydration and body wall darkening , reaching dark brown, were observed before death. The radiation also showed to be harmful to the adult stage of the same pyralidae species, reducing longevity as well as reproductive capacity. Bracon hebetor adults showed to be more resistant to radiation (LETso ::: 106,57 s) when compared to Anagasta kühniella adults (LETso = 22,61 s) and larvae (LET50 = 15,63 s). Samples of Bacillus thuringiensis var kurstaki were exposed to different times of microwaves radiation (2450 MHz) and were ofered to third instar larvae of Anagasta kühniella in three different concentrations (0.02 %, 0.2% and 2.6%). This electromagnetic wave did not present any interference in the patogenicity of the entomopathogen in the extrem concentrations (0.02 and 2.6%). However, in the 0.2% concentration, next to LCso of the larvae, the patogenicity of Bacillus thuringiensis was altered by the time of exposure to the radiation. Finally, radiation by microwaves could be considered as a promissing method, efficient and compatible with biological control ones, to participate in IPM programs of the Mediterranean Flour Moth, Anagasta kühniella / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Ciências Biológicas
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Obtenção de bioinseticida a partir de Bacillus thuringiensis var. israelensis e aplicação de bioensaios em culicídeos

Ernandes, Samara [UNESP] 14 June 2004 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-06-14Bitstream added on 2014-06-13T20:41:04Z : No. of bitstreams: 1 ernandes_e_dr_araiq.pdf: 1655685 bytes, checksum: 2507651f91c2bddaf96ba3bfc064bf83 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A bactéria Bacillus thuringiensis var. israelensis (Bti) gera certas toxinas com ação inseticida que podem ser usadas no controle de doenças transmissíveis através de culicídeos, especialmente o Aedes aegypti, vetor da dengue. Este bioinseticida tem sido produzido através de fermentação submersa e, no Brasil, esta produção tem sido realizada através de pequenos centros de investigação e, mais recentemente, por uma pequena empresa. Para a implementação de um programa de controle de vetores viável através de bioinseticidas, alguns estudos sobre meio de cultura são essenciais para unir eficiência e baixos custos. Assim, tem-se utilizado resíduos ou subprodutos agroindustriais como fontes de nutrientes em meio de cultura. Neste estudo, alguns resíduos e subprodutos tais como água de maceração de milho (“milhocina”), um subproduto do processamento industrial do milho, “manipueira”, um subproduto do processamento da farinha de mandioca e sangue bovino oriundo de abatedouros foram avaliados com o intuito de se verificar a eficiência em processo fermentativo para obtenção de bioinseticidas. O crescimento celular foi avaliado por densidade óptica a 620 nm, a produção de esporo por plaqueamento em ágar nutriente e a CL 50 (Concentração letal média), por bioensaios contra larvas de 4º instar de Ae. aegypti. Foi verificado, em estudos com “manipueira”, que quando este subproduto é utilizado em baixa concentração, há o mesmo ou um melhor efeito do que quando se utiliza em concentração alta. A esterilização parece ser necessária ao processo fermentativo, pois quando se comparam ambos os meios de “manipueira”, um submetido à esterilização e outro sem este processo, o primeiro produziu mais esporos e uma melhor eficiência em bioensaios. Da mesma forma, quando o sangue de bovinos é acrescentado ao meio de “manipueira”, há um aumento... / The bacterium Bacillus thuringiensis var. israelensis (Bti) generates certain toxins with pesticid action, which can be used on the control of transmissible diseases by culicides, specially Aedes aegypti, the dengue´s vector. This biopesticide has been produced by submerged fermentation and, in Brazil, this production has been made by very little research centers and, more recently, by a unique small enterprise. For the implementation of a viable vectors control program through bioinsecticides, some studies about culture media are essential in order to join efficiency and low costs. So, agroindustrial wastes or by-products have been utilized as nutrient source for the culture media production. In this study, some wastes and by-products like corn steep liquor (“milhocina”), a corn industrial processing byproduct, “manipueira”, a by-product from cassava flour processing and cattle blood proceeding from slaughterhouses were utilized as substrate in order to verify the efficiency on fermentative process to obtain bioinsecticides. Cellular growth was evaluated by optical density at 620 nm, spore production by pour plate count and LC50 by bioassays against 4th instar larvae. It was verified, in studies with “manipueira”, that a low concentration of this byproduct has the same or better effect compared with high concentrations. The sterilization was a requisite to the fermentative process because when compared both sterilized and no sterilized “manipueira” media, the first yielded more spores and better efficiency in bioassays. Likewise, when cattle blood is added to “manipueira” media, there is an increase on the spores number and effectiveness against Ae. aegypti larvae. It was compared a traditional nitrogen source, peptone, with “manipueira”, with and without salts and glucose, tested separately and joined. In both media, salts had an importance, but the glucose didn´t seem necessary.
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Host-range specificity of a Bacillus thuringiensis (Bt) toxin as analyzed by protein engineering /

Haider, Syed Tanveer, January 1999 (has links)
Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 1999. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 105-131).
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Mechanism of action of insecticidal crystal toxins from Bacillus thuringiensis biophysical and biochemical analyses of the insertion of Cry1A toxins into insect midgut membranes /

Nair, Manoj S., January 2008 (has links)
Thesis (Ph. D.)--Ohio State University, 2008. / Title from first page of PDF file. Includes vita. Includes bibliographical references (p. 118-127).
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The expression of Bt Cry1Ac in transformed cotton under abiotic stress

Martins, Celia Marilia. January 2006 (has links)
Thesis (M.Sc.(Plant Pathology))--University of Pretoria, 2006. / Includes bibliographical references. Available on the Internet via the World Wide Web.
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Avaliação da bioatividade de bactérias entomopatogênicas sobre o desenvovimento pós-embrionário de Musca domestica (Linnaeus, 1758) (Diptera: Muscidae), em condições de laboratório

Ferreira, Vítor dos Santos Baía January 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-03-28T12:45:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 vitor_ferreira_ioc_mest_2015.pdf: 1647160 bytes, checksum: 772b0b0b513c782442c3b14ee0949075 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-03-14 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Musca domestica é um díptero que apresenta sérios riscos à saúde pública e ambiental. Essa espécie transmite diversos patógenos, é causadora de miíases em humanos e animais além de causar prejuízos econômicos. O uso de inseticidas químicos causa danos ambientais e possui eficácia questionável em M. domestica. Inseticidas biológicos de origem bacteriana apresentam uma boa alternativa aos inseticidas químicos em relação aos impactos ambientais, as espécies Brevibacillus laterosporus, Bacillus thuringiensis e Lysinibacillus sphaericus demonstram ação inseticida em diversas ordens de insetos e podem apresentar atividade inseticida efetiva em M. domestica. Nove estirpes de bactérias foram testadas em M. domestica e destas três estirpes: BL102, BTI193A e BTK176 apresentaram valores de mortalidade maiores que 50% e por isso tiveram os efeitos subletais investigados. Em relação a massa das pupas, nenhuma das estirpes apresentou variação significativa na média da massa pupal, quando comparadas às médias dos controles puro e água O período de desenvolvimento também não se diferenciou de forma estatisticamente relevante dos dois controles em nenhum tratamento. As três estirpes testadas apresentaram mortalidade estatisticamente superior às mortalidades dos dois controles com LC50 nas concentrações de 12.40x108 UFC/mL para BTI193, 4.76x108 UFC/mL para BTK176 e 4.16x108 UFC/mL para BL102. As micrografias de transmissão demonstraram que todas as estirpes apresentam o perfil de danos celulares já descritos para essas espécies de bactérias entomopatogênicas, como elevada vacuolização do citoplasma, além de desorganização das organelas celulares, porém somente as estirpes de B. thuringiensis apresentaram deformação e interrupção das microvilosidades e conteúdo citoplasmático extravasado para o lúmen intestinal. Os resultados obtidos com de B. laterosporus e B. thuringiensis sugerem que essas estirpes são um agentes de controle biológico promissores para M. domestica Abstract: Musca domestica is a dipteran who presentes a serious risk to public and environmental health. This species carries diseases, causes myiasis in humans and animals and may cause economic losses. The use of chemical insecticides, beyond causing environmental damage, have questionable efficacy in M. domestica. Biologic insecticides of bacterial origin presents a good choice over chemical insecticides regarding environmental impact. Brevibacillus laterosporus, Bacillus thuringiensis and Lysinibacillus sphaericus species show insecticide action in several insect orders and may presente insecticide effectiveness in M. domestica. Nine strains of bacteria were tested for mortality where three strains: BL102, BTI193 and BTK176 showed values above 50%. These strains were submitted to sub lethal effects experiments. In relation to pupal weight, none of the strains showed statistical variation when compared to pure and water controls Development time was statistically undifferentiated from both controls in every treatment tested. All the tested strains showed statistically higher mortality when compared to both controls, showing LC50 concentrations of 12.40x108 CFU/mL for BTI193, 4.76x108 CFU/mL for BTK176 and 4.16x108 CFU/mL for BL102. Transmission micrographs showed that every strain presented cell damage profile established for these species of entomopathogenic bacteria, such as the high level of cytoplasm vacuolization and disorganization of cell organelles, however, only B. thuringiensis strains showed microvilli deformation and disruption and cytoplasmic content extruded into intestinal lumen. All these observations suggest that tested B. laterosporus and B. thuringiensis strains are promising agents to the biological control of M. domestica / Musca domestica is a dipteran who presentes a serious risk to public and environmental health. This species carries diseases, causes myiasis in humans and animals and may cause economic losses. The use of chemical insecticides, beyond causing environmental damage, have questionable efficacy in M. domestica . Biologic insecticides of bacterial origin presents a good choice over chemical insecticides regarding environmental impact . Brevibacillus laterosporus , Bacillus thuringiensis and Ly sinibacillus sphaericus species show insecticide action in several insect orders and may presente insecticide effectiveness in M. domestica . Nine strains of bacteria were tested for mortality where three strains: BL102, BTI193 and BTK176 showed values above 50% . These strains were submitted to sub lethal effects experiments . In relation to pupal weight , none of the strains showed statis ti cal variation when compared to pure and water controls. Development time was statis ti cally undifferentiated from bot h cont rols in every treatment tested. All the tested strains showed statis ti cally higher mortality when compared to both controls, showing LC50 concentrations of 12.40 x 10 8 CFU /mL for BTI193, 4.76 x 10 8 CFU /mL for BTK176 and 4.16 x 10 8 CFU /mL for BL102. Transmission microg raphs s howed that every strain presented cell damage profile established for these species of entomopathogenic bacteria, such as the high level of cytoplasm vacuolization and dis organization of ce ll organelles, however, only B. thurin giensis strains showed microvilli deformation and disruption and cytoplasmic content extruded into intestinal lumen. All these observations suggest that tested B. laterosporus and B. thuringiensis strain s are promising agent s to the biological control of M. domestica
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Modelagem molecular das δ-endotoxinas do Bacillus thuringiensis

Lucena, Wagner Alexandre January 2012 (has links)
Bacillus thuringiensis (Bt) é uma bactéria Gram-positiva entomotóxica usada no controle de insetos-praga e vetores de doenças há mais de 60 anos. Desde a introdução das plantas cultivadas expressando genes de Bt, ficou demonstrado que cultivares-Bt constituem uma importante ferramenta no aumento da produtividade e diminuição no uso de pesticidas químicos. O sucesso do Bt advém da produção das δ-endotoxinas (Cry). Estas toxinas compartilham um mecanismo de ação semelhante, com pelo menos, alguns aspectos em comum. A atividade das Cry é baseada nas clivagens N e C-terminais, ligação a receptores (i.e. caderinas) e mudanças conformacionais. O objetivo deste trabalho foi estudar aspectos estruturais das δ-endotoxinas Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac, Cry3Aa, Cry8Ea1, Cry8Ka1, Cry8Ka5 e Cry1Ia12 usando ferramentas de modelagem molecular por homologia, dinâmica molecular (DM) e docking molecular. Oito toxinas Cry e duas caderinas (CAD) foram modeladas. Quatro toxinas (Cry1Aa, Cry1Ac, Cry3Aa e Cry8Ea1) foram usadas para construir 8 sistemas que foram submetidos a simulações de DM de 50 ns utilizando o pacote GROMACS e o campo de força GROMOS96 43a1. As Cry8Ka1, Cry8Ka5, Cry1Ia12 e suas 3 variantes foram comparadas a fim de estabelecer as relações entre as diferenças estruturais e as mudanças na toxicidade. As caderinas, Cry1Ab e Cry1Ac foram usadas nos cálculos de docking molecular. Os resíduos das Cry1A com RMSF alto são os mesmos identificados experimentalmente como sítios de reconhecimento/ligação aos receptores ou desempenham um papel na dinâmica de interação. Os dados mostraram que as flexibilidades global e local das Cry estudadas aumentaram nos sistemas sem a α-1 e isto pode estar relacionado com o mecanismo de ação. Este efeito se propaga por toda a superfície a não apenas na porção N-terminal, sugerindo o início de um processo de transição conformacional. Na Cry1Ac, a ausência da α-1 promove alterações estruturais na alça 2 (ligação a receptores GPI). Algumas mutações das Cry8Ka e Cry1Ia12 estão próximas dos sítios de ligação e podem estar contribuindo para as alterações nas toxicidades. Os mapas de interfaces resultantes dos dockings moleculares corresponderam aos dados experimentais. Neste trabalho foi possível observar novos aspectos do mecanismo de ação das toxinas Cry e suas interações com caderinas. / Bacillus thuringiensis (Bt) is a Gram-positive entomotoxic bacterium widely used to control crop pests and disease vectors. Since the introduction of transgenic plants expressing Bt genes, it has been demonstrated that Bt-crops constitute an important tool in the increase of productivity and in the decrease of the use of chemical pesticides. Its success comes from the production of the δ-endotoxins (Cry). These toxins share a molecular mechanism of similar action or, at least, some common aspects. Activity of Cry proteins is due to N- or C-terminal cleavages, binding to at least one membrane receptor (e.g. cadherins) and conformational changes. The aim of this work was to study structural aspects of Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac, Cry3Aa, Cry8Ea1, Cry8Ka1, Cry8Ka5 and Cry1Ia12 δ-endotoxins, using homology modeling, molecular dynamics (MD) and molecular docking. Eight Cry toxins and two cadherins (CAD) were modeled. Four toxins (Cry1Aa, Cry1Ac, Cry3Aa and Cry8Ea1) were used to construct eight systems (whole Cry toxins and α-1 removed proteins (Δα1)). Cry8Ka1, Cry8Ka5, Cry1Ia12 and their three variants were compared to analyze the contributions of each mutation. The cadherins and Cry1Ab and Cry1Ac were used on docking calculations. The Cry1A residues with high flexibility are the same identified as recognition/binding sites (apex of domain II and domain-II/IIIinterface) or to play a role on its dynamic. The data show that the global and local flexibilities of Cry toxins studied was increased by helix α-1withdrawal (Δα1) and it is closely related with the mode of action. This effect propagates on the surface and not only on the N-termini suggesting a complex process of conformational transition. Regarding Cry1Ac, the absence of helix α-1 triggers structural changes on loop2, which is related to binding GPI-receptors. Some Cry8Ka5 and Cry1Ia12 mutations are in the neighborhood of receptor-binding sites and this fact may imply alterations on binding affinity. It was possible to obtain a map of Cry/CAD interface by docking studies. Therefore, this work was able to obtain molecular level insights into the Cry activation mechanism and its interaction with CAD.

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