Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-10-27T12:44:53Z No. of bitstreams: 1 Joana Angelica Lyra Vogeley de Carvalho.pdf: 1376015 bytes, checksum: 83c8b8a2eb0e7f8feefee9e03ebf6461 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-27T12:44:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Joana Angelica Lyra Vogeley de Carvalho.pdf: 1376015 bytes, checksum: 83c8b8a2eb0e7f8feefee9e03ebf6461 (MD5) Previous issue date: 2016-03-31 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / This study focused on selecting wild shrimp Bacillus for a probiotics use in shrimp farming. Bacillus circulans and Bacillus subtilis were isolated from the Farfantepenaeus subtilis intestine and have showed antagonism against Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus, Vibrio vulnificus and Vibrio mimicus in in vitro tests. Afterwards, these bacteria inhibited Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802 (VP) in a wide pH and salinity range and produced lipase, amylase and protease in vitro showing that these Bacillus had the needed requirements for in vivo experiments. Thus, juveniles of Litopenaeus vannamei were grown according to the following diet: feed + B. subtilis (BS); feed + B. circulans (BC) and feed without bacteria (Control). Every 15 days samples were collected in order to quantify the bacteria and enzyme activity. After 45 days, the shrimp’s weight fed with BS and BC was significantly higher when compared to the control group. There was a significant increase in Bacillus spp. and a Vibrio spp. reduction in the intestine and hepatopancreas, especially after the 30th and 45th day mark. The trypsin, chymotrypsin, lipase and amylase also had significant increase in shrimp fed with BC and BS, especially after the 30th day mark. After 60 days, the immune system gene expression (proPO, LGBP and HEM) increased significantly in the shrimp fed with BS and BC. In addition to these experiments, the shrimp were infected (by injection) and challenged (water) against VP. The shrimp fed with BC diet had significantly higher survival rates after the injection and there were no differences after the challenge. The proPO expression did not differ between diets after infection or challenge. There was a Vibrio spp. reduction and a significant Bacillus spp. increase in the shrimps’ intestines which were fed with BC and BS diets after the challenge. The Bacillus spp. increase in shrimp fed with BC and BS diets suggest that there was colonization in the gastrointestinal tract during all the experimental period. This may have increased the enzyme activity improving digestion and weight gain, reduced the Vibrio spp. and increased the immune system gene expression, making the shrimp more resistant to infection (BC diet). Thus, B. circulans and B. subtilis have showed the potential for its application as probiotics in shrimp farming. / O objetivo desse estudo foi selecionar Bacillus de camarões selvagens para uso como probiótico na carcinicultura. Bacillus circulans e Bacillus subtilis foram isolados do intestino de Farfantepenaeus subtilis e demonstraram antagonismo contra Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus, Vibrio vulnificus e Vibrio mimicus em testes in vitro. Posteriormente, essas bactérias inibiram Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802 (VP) em uma ampla faixa de pH e salinidade e produziram lipase, amilase e protease in vitro, demonstrando que esses Bacillus possuíam características requeridas para experimentos in vivo. Então, juvenis de Litopenaeus vannamei foram cultivados com as dietas: ração + B. subtilis (BS); ração + B. circulans (BC) e ração sem bactérias (Controle). A cada 15 dias, amostras foram coletados para quantificação bacteriana e de atividade enzimática. Ao final de 45 dias, o peso dos camarões alimentados com BS e BC foi significativamente maior comparados ao grupo controle. Houve um significativo aumento de Bacillus spp. e redução de Vibrio spp. no intestino e hepatopâncreas, sobretudo após 30 e 45 dias. As atividades da tripsina, quimotripsina, lipase e amilase aumentaram significativamente nos camarões alimentados com BC e BS, principalmente após 30 dias. Após 60 dias, a expressão de genes do sistema imunológico (proPO, LGBP e HEM) aumentou significativamente nos camarões alimentados com BS e BC. Adicionalmente, os camarões foram infectados (injeção) e desafiados (água) com VP. A sobrevivência dos camarões alimentados com BC foi significativamente maior após infecção e não houve diferenças após desafio. A expressão da proPO não diferiu entre as dietas após infecção e desafio. Houve uma redução de Vibrio spp. e significativo aumento de Bacillus spp. no intestino dos camarões alimentados com BC e BS após desafio. Durante todo o período experimental, o aumento de Bacillus nos camarões alimentados com BC e BS sugere que houve colonização no trato digetório de B. circulans e B. subtilis. Isso pode ter incrementado a atividade enzimática, melhorando a digestão e ganho de peso, reduzido Vibrio spp. e aumentado a expressão de genes do sitema imunológico, tornando os camarões mais resistentes ao VP (dieta BC). Assim, B. circulans e B. subtilis apresentam potencial para utilização como probiótico na carcinicultura.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-09T12:13:39Z No. of bitstreams: 1 Carolina Notaro de Barros.pdf: 471792 bytes, checksum: 565309c707bb10b4d250687b7f4c6182 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T12:13:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carolina Notaro de Barros.pdf: 471792 bytes, checksum: 565309c707bb10b4d250687b7f4c6182 (MD5) Previous issue date: 2012-02-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The indiscriminate use of antimicrobial drugs in aquaculture may cause development of drug-resistant bacteria, which become more difficult to be controlled and eliminated. Probiotics may represent an alternative prophylactic disease control, replacing the use of antibiotics. In this respect, this study isolated, tested and identified potential probiotic bacteria from the gut of cobia, Rachycentron canadum, a potential candidate for marine aquaculture. 40 animals were captured, 10 from a private hatchery and 30 from an offshore culture system (PE, Brazil) between November 2010 and July 2011. Fishes from the hatchery had weight of 139.30 ± 31.52 g and length of 27.13 ± 1.46 cm, while those from offshore culture system weighed 456.77 ± 264.46 g and had length of 37.29 ± 6.05 cm. 45 bacterial were isolated and tested in vitro against five known pathogenic species, Aeromonas hydrophila (IOC/FDA 110-36), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 15442), Streptococcus agalactiae (ATCC 13813), Vibrio parahaemolyticus (ATCC 17802) and Vibrio vulnificus (ATCC 27562). Fifteen strains (33.33%) had antibacterial activity to at least one pathogen, while eight (17.77%) were inhibited all pathogens tested. There was significant difference (P<0.05) between percentage of potential probiotic obtained from different seasons, rainy and dry. Strains that presented the best results antagonism test in vitro were identified as Lactobacillus plantarum, Bacillus coagulans, Klebsiella spp., Bacillus circulans, Lactococcus lactis subsp. lactis and Bacillus firmus. The largest inhibition zone observed in the antagonism test was produced by B. circulans against V. vulnificus. Some potential probiotic species identified were characterized by others authors, but isolated from the intestine of other fish species. It is suggested in vivo antagonism tests are performed to prove the effectiveness of these bacteria as probiotic to cobia. / O uso indiscriminado de drogas antimicrobianas na aquicultura pode contribuir para o desenvolvimento de bactérias resistentes aos medicamentos, o que torna esses micro-organismos mais difíceis de serem controlados e eliminados. Probióticos podem representar uma alternativa profilática no controle de doenças, em substituição ao uso de antibióticos. Neste contexto, o estudo foi realizado com o objetivo de isolar, testar e identificar bactérias com potencial probiótico do beijupirá, Rachycentron canadum, potencial candidato para a piscicultura marinha. Foram coletados 40 animais, 10 na fase de berçário e 30 na fase de engorda em sistema offshore (PE, Brasil), no período de novembro de 2010 a julho de 2011. Os peixes coletados do berçário apresentaram peso de 139,30 ± 31,52 g e comprimento de 27,13 ± 1,46 cm, enquanto os animais provenientes do sistema offshore apresentaram peso de 456,77 ± 264,46 g e comprimento de 37,29 ± 6,05 cm. Foram obtidos 45 isolados bacterianos testados in vitro frente a cinco espécies patogênicas conhecidas, Aeromonas hydrophila (IOC/FDA 110-36), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 15442); Streptococcus agalactiae (ATCC 13813); Vibrio parahaemolyticus (ATCC 17802) e Vibrio vulnificus (ATCC 27562). Quinze isolados (33,33%) apresentaram atividade antibacteriana a pelo menos um patógeno e oito (17,77%) inibiram todos os patógenos testados. Houve diferença significativa (P<0,05) na proporção de isolados potenciais probióticos obtidos nas distintas épocas do ano, chuvosa e seca. Os isolados que apresentaram os melhores resultados no teste de antagonismo in vitro foram identificados como Lactobacillus plantarum, Bacillus coagulans, Klebsiella spp., Bacillus circulans, Lactococcus lactis subsp. lactis e Bacillus firmus. O maior halo de inibição observado no teste de antagonismo foi produzido por B. circulans frente ao V. vulnificus. Algumas espécies potenciais probióticas identificadas já foram caracterizadas por outros autores, porém isoladas de intestino de outras espécies de peixes. Sugere-se a realização de testes de antagonismo in vivo para que seja comprovada a efetividade das bactérias como probióticas para o beijupirá.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-23T14:03:29Z No. of bitstreams: 1 Juliana Maria Aderaldo Vidal.pdf: 784041 bytes, checksum: f927beb63f5c3c304d4098214b0dd629 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-23T14:03:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliana Maria Aderaldo Vidal.pdf: 784041 bytes, checksum: f927beb63f5c3c304d4098214b0dd629 (MD5) Previous issue date: 2015-07-27 / Bacteria with probiotic effect have been used in marine shrimp production like antibiotics substitution, contributing to the health of the host, by antagonistic action to pathogenic micro-organisms or by competition for space and nutrients, and improving appetite and lead the further growth of the animals. When isolated from the host itself is safe to use, being able to adhere and colonize the intestine. The objective was to isolate probiotic bacteria from intestine of juvenile Litopenaeus vannamei and evaluate the effects of probiotic administration in the performance of cultivated animals experimental challenged infection. Intestinal bacteria were from cultivated shrimp in oligohaline water and saltwalter in dry and rainy seasons, and confronted with Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus, Vibrio alginolyticus and Aeromonas hydrophila. Bacteria showed antimicrobial effect have been identified by molecular biology. Twenty-nine isolates showed antagonistic effect at least one of the tested pathogens. The species that most occurred was Bacillus cereus, the producing of the largest zones of inhibition to the V. alginolyticus and V. vulnificus. The bacterium Citrobacter freundii, from oligohaline water showed the best antimicrobial effect before the four pathogens. The probiotic Bacillus cereus was tested in diet for marine shrimp post-larvae against challenge with V. parahaemolyticus, and V. alginolyticus which evaluated the growth performance of animals, colonization capacity of the probiotic bacteria, pathogens count and histopathological lesions. The use of probiotic had no effect on animals survival, but not for treatments which was used probiotic had a lower weight gain. Animals fed dietary supplementation of probiotic had lower pathogens count those fed without the use. Histopathological lesions were observed in organs and tissues of animals. It can be concluded that it was possible to isolate bacteria having probiotic effect of marine shrimp intestine, wherein the strain Bacillus cereus demonstrated high capacity to colonize the host itself, causing a significant reduction of pathogens. / Bactérias com efeito probiótico contribuem para saúde de camarões marinhos em cultivo, em substituição aos antibióticos, exercendo ação antagonista à micro-organismos patogênicos ou por competição por espaço e nutrientes, além de melhorar o apetite levando a um maior crescimento dos animais. Quando isolados do próprio camarão seu uso é seguro, por serem capazes de aderir ou colonizar o intestino destes. Neste sentido, objetivou-se isolar bactérias probióticas do intestino de juvenis de Litopenaeus vannamei e avaliar os efeitos da sua administração sobre o desempenho dos animais cultivados frente infecção experimental. Foram isoladas bactérias do intestino de camarão cultivado em águas oligohalina e salgada, em períodos seco e chuvoso, e confrontadas com Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus, Vibrio alginolyticus e Aeromonas hydrophila, em testes in vitro. As bactérias que produziram efeito antimicrobiano foram identificadas através de biologia molecular.Vinte e nove isolados apresentaram efeito antagônico a pelo menos um dos patógenos testados. A espécie que mais ocorreu foi Bacillus cereus, produzindo os maiores halos de inibição frente ao V. alginolyticus e V. vulnificus. A bactéria Citrobacter freundii, proveniente de água oligohalina apresentou melhor efeito antimicrobiano, perante os quatro patógenos. O probiótico Bacillus cereus foi testado em ração para pós-larvas de L. vannamei, frente a desafio com V. parahaemolyticus, e V. alginolyticus quando avaliou-se o desempenho zootécnico dos animais, a capacidade de colonização das bactérias probióticas, contagem de patógenos e lesões histopatológicas. O uso do probiótico não influenciou nas taxas de sobrevivência dos animais, porém nos tratamentos em que não se utilizou probiótico houve menor ganho de peso. Os animais que receberam ração suplementada de probiótico, tiveram contagem de patógenos inferior aqueles alimentados sem o uso. Não foram observadas lesões histopatológicas nos órgãos e tecidos dos animais. Concluiu-se que é possível isolar bactérias com efeito probiótico do intestino do camarão marinho, sendo que a cepa de Bacillus cereus demonstrou maior capacidade de colonizar o próprio hospedeiro, diminuindo os patógenos.