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Fixação biológica de nitrogênio e nutrição nitrogenada em cana planta inoculadas com bactérias diazotróficas

LIMA, Danúbia Ramos Moreira de 29 February 2016 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-20T13:23:56Z No. of bitstreams: 1 Danubia Ramos Moreira de Lima.pdf: 1715855 bytes, checksum: 1868fd8d6fa7cd8052c609ded713f57c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-20T13:23:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Danubia Ramos Moreira de Lima.pdf: 1715855 bytes, checksum: 1868fd8d6fa7cd8052c609ded713f57c (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The sugarcane (Saccharum spp.) Is a widespread culture in tropical and subtropical regions, with Brazil as the world's leading producer. Given the expansion and continuous agricultural growth of the culture of sugarcane in the country, productive development should occur in parallel with agricultural techniques aimed at economic viability and to minimize the degradability of the environment. In this context, the biological nitrogen fixation (BNF) emerges as a usage option in production systems, supplying all or part of nitrogen nutrition of sugarcane. Thus the aim of this study was to evaluate the inoculation of bacterias diazotrophic in sugarcane plants. The experiment was conducted at the Experimental Station of Cane Sugar Carpina, PE, the Federal Rural University of Pernambuco. Para tal, foi conduzido um experimento em campo, cultivado em um ARGISSOLO VERMELHO AMARELO distrocoeso. For this, an experiment was conducted in the field, cultivated in a Alfissol distrocoeso. The test consists in the cultivation of sugarcane, varieties RB 92579 and RB 867515, inoculated with three bacterial genera (Pantoea sp., Stenotrophomonas sp., Burkholderia sp.) Were inoculated separately composing a treatment each and one with the mixture the three bacterial genera, and two witnesses, one with N another without the N. To evaluate the experiment was performed soil collection on the implementation of the experiment, before fertilization, and 120, 240 and 360 days after planting (DAP) to determine the N content, with subsequent use in the balance of N. As well as, growth analysis was performed (diameter, plant height, number of leaves), dry matter determination, estimation of nitrogenase activity. The evaluation of the natural abundance of the isotope 15N, so with the chlorophyll, biochemical and N content to 120, 240 and 360 DAP. Agricultural productivity, industrial productivity, total recoverable sugars and shoot dry weight were measured at the end of the trial period. The variable, content and N content, growth, photosynthetic pigments, proteins and amino acids, as well as the N content and C, ratio C / N of the soil to be analyzed generally, it is observed behavior that resemble, because there were significant differences, most of the time the inoculated treatments did not differ from witnesses, not making clear the character responsive to bacterial inoculation. Unlike occurred with the activity of the activity that treatment BK, MB and PT had higher AN that TN. The BNF was not detected in the technique of natural abundance of 15N isotope. Unlike happened with the results for the BNF contribution determined by estimated the total balance of nitrogen in the soil system / plant, in which, despite no significant difference in the balance of N it was observed that different inoculated treatments were responsive to the varieties , RB92579 and RB867515. It was also observed that the inoculation of bacteria caused increased TCH and ATR compared to treatment in nitrogen varieties RB92579 and RB867515. According to the results, it can be said that the inoculation of nitrogen fixing bacteria in sugarcane plants of varieties, RB867515 and RB92579, promoted the development of culture. / A cana-de-açúcar (Saccharum spp.) é uma cultura amplamente distribuída nas regiões tropicais e subtropicais, tendo o Brasil como principal produtor mundial. Diante da ampliação e contínuo crescimento agrícola da cultura da cana-de-açúcar no país, o desenvolvimento produtivo deve ocorrer em paralelo com técnicas agrícolas que visem à viabilidade econômica e que minimizem a degradabilidade do meio ambiente. Neste contexto, a fixação biológica de nitrogênio (FBN) desponta como uma opção de uso nos sistemas produtivos, suprindo total ou parcialmente a nutrição nitrogenada da cana-de-açúcar. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a inoculação de bactérias diazotróficas em plantas de cana-de-açúcar. O experimento foi conduzido na Estação Experimental de Cana-de-Açúcar do Carpina, PE, da Universidade Federal Rural de Pernambuco. Para tal, foi conduzido um experimento em campo, cultivado em um ARGISSOLO VERMELHO AMARELO distrocoeso. O ensaio consistiu no cultivo da cana-de-açúcar, variedades RB 92579 e RB 867515, inoculada com três gêneros bacterianos (Pantoea sp., Stenotrophomonas sp., Burkholderia sp.) que foram inoculados separadamente compondo um tratamento cada e outro com a mistura dos três gêneros bacterianos, além de duas testemunha, uma com N outra sem o N. Para avaliação do experimento foi realizada coleta de solo no dia da implantação do experimento, antes da adubação, e aos 120, 240 e 360 dias após o plantio (DAP) para determinação do teor de N, com posterior uso no balanço de N. Bem como, foi realizada análise de crescimento (diâmetro, altura da planta, número de folhas), determinação da matéria seca, estimativa da atividade da nitrogenase. A avaliação da abundância natural do isótopo 15N, assim com na análise de clorofila, bioquímica e teor de N aos 120, 240 e 360 DAP. Produtividade agrícola, a produtividade industrial, açúcares totais recuperáveis e a massa seca da parte aérea foram mensurados no final do período experimental. As variáveis, teor e conteúdo de N, crescimento, pigmentos fotossintéticos e compostos bioquímicos, bem como o teor de N e de C, relação C/N do solo, ao serem analisadas de forma generalizada, observa-se comportamento que se assemelham, pois havendo ou não diferença significativa, na maioria das vezes os tratamentos inoculados não diferiram das testemunhas, não deixando claro o caráter responsivo para a inoculação bacteriana. Diferentemente ococrreu com a atividade da atividade da que o tratamento BK, MB e PT apresentaram maior AN que a TN. A FBN não foi detectada na técnica de abundância natural do isótopo 15N. Diferentemente ocorreu com os resultados referentes à contribuição da FBN determinada através da estimada pelo balanço total de nitrogênio no sistema solo/planta, no qual, apesar da não diferença significativa, no balanço do N foi observado que os diferentes tratamentos inoculados foram responsivos para as variedades, RB92579 e RB867515. Também foi observado que a inoculação de bactérias promoveu aumento da TCH e no ATR em relação ao Tratamento Nitrogenado nas variedades RB92579 e RB867515. De acordo com as considerações acerca do resultado, pode-se afirmar que a inoculação de bactérias fixadoras de nitrogênio em plantas de cana-de-açúcar das variedades, RB867515 e RB92579, promoveu o desenvolvimento da cultura.
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Inoculação de sementes de feijão e milho com bactérias promotoras de crescimento vegetal

FARIAS, Andreza Raquel Barbosa de 06 February 2015 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-03-23T14:36:37Z No. of bitstreams: 1 Adreza Raquel Barbosa de Farias.pdf: 949303 bytes, checksum: a58b3adee8b0704b78053fd203888afb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T14:36:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Adreza Raquel Barbosa de Farias.pdf: 949303 bytes, checksum: a58b3adee8b0704b78053fd203888afb (MD5) Previous issue date: 2015-02-06 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The inoculation of bacteria that promote plant growth can improve the development of plants, regardless of their origin isolation, acting by different mechanisms, such as nitrogen fixation, phytohormones production, inorganic phosphate solubilization, production of quorum sensing molecule and still the phytoremediation. Corn (Zea mays L.) is one of the most cultivated grasses in the world and is considered one of the oldest and studied cultures. The beans (Phaseolus vulgaris L.) is consumed on every continent and has an important role in the Brazilian food, and is one of the agricultural products of greater economic and social importance in Brazil. Based on the foregoing, the objective of this work was to evaluate the performance of different bacterial genera, previously characterized with plant growth promoting characteristics, the seed germination in the laboratory, the emergency and development in the greenhouse. To this 10 bacterial strains of Bacillus sp, Stenotrophomonas sp.. Rhizobium sp., Pantoea sp. and Pseudomonas sp. were inoculated in corn and bean seeds and germination evaluated in germitest paper, following recommendations of the Rules for Seed Analysis. Moreover, inoculation with bacteria treatment of 4 plus a control (no inoculum bacterino) and an additional control (NPK) was carried out on corn seeds and analyzed in the greenhouse. The Bacillus sp., Pantoea sp., Rhizobium sp. and Stenotrophomonas sp. strains influenced the bean sproutingRegarding germination in maize, the bacteria Bacillus sp., Pantoea sp., Rhizobium sp. and Stenotrophomonas sp. influenced the germination, can be seen that the shoot fresh weight characteristics, dry weight of root and shoot, and shoot and root length were higher than the control when compared with the treatments of different bacterial inoculants. The experiment in greenhouse showed that UAGC863 strains (Bacillus sp.), UAGC62 (Pantoea sp.), UAGC738 (Rhizobium sp.) and UAGC982 (Stenotrophomonas sp.) promoted positives interaction, stimulating the development of corn. It was observed that when a comparison between strains dry weight of roots and shoots were stimulated by Bacillus sp., At 45 days of cultivation and by the compound treatment of the mixture of strains after 75 days of culture. When the comparison was made regarding the NPK was observed that all strains promoted increase in root dry weight than chemical control at 45 and 75 days of culture. Compared to the control (without inoculum) height, fresh weight and dry root were significant at 45 days of cultivation, and 75 days after treatment with the mixture of strains showed better results for fresh and dry root weight. These results show the potential of different bacterial genera presented in this work in promoting plant growth in corn and bean plants. / A inoculação de bactérias promotoras de crescimento vegetal pode melhorar o crescimento de plantas, independente de sua origem de isolamento, atuando por diferentes mecanismos, como fixação biológica de nitrogênio, produção de fitohormônios, solubilização do fosfato inorgânico, produção da molécula quorum sensing e ainda na fitorremediação. O milho (Zea mays L.) é uma das gramíneas mais cultivadas no mundo, sendo considerada uma das culturas mais antigas e estudadas. O feijão (Phaseolus vulgaris) é consumido em todos os continentes e apresenta papel importante na alimentação do brasileiro, e é um dos produtos agrícolas de maior importância econômico-social no Brasil. Partindo do exposto, objetivou-se com este trabalho avaliar a atuação de diferentes gêneros bacterianos, previamente identificados com características de promoção de crescimento vegetal, quanto à germinação de sementes de milho e feijão em laboratório, emergência e crescimento de milho em casa de vegetação. Para isso 10 linhagens de bactérias dos gêneros Bacillus sp., Stenotrophomonas sp. Rhizobium sp., Pantoea sp. e Pseudomonas sp. foram inoculadas em sementes de milho e feijão e a germinação avaliada em papel germitest, seguindo recomendações das Regras para Análises de Sementes. Além disso, a inoculação com os tratamento de 4 bactérias mais um controle (sem inóculo bacteriano) e um controle adicional (NPK) foi realizado em sementes de milho e analisados em casa de vegetação. As linhagens de Bacillus sp., Pantoea sp., Rhizobium sp. e Stenotrophomonas sp. influenciaram na germinação em feijão, sendo possível observar que a variável massa fresca de raízes apresentou diferença significativa. Em relação a germinação na cultura do milho, as bactérias Bacillus sp., Pantoea sp., Rhizobium sp. e Stenotrophomonas sp. influenciaram a germinação, sendo possível verificar que as características massa fresca de parte aérea, massa seca de raiz e parte aérea, e comprimento de raiz e parte aérea foram superiores ao controle quando comparado com os tratamentos dos diferentes inóculos bacterianos. O experimento em casa de vegetação demonstrou que as linhagens UAGC863 (Bacillus sp.), UAGC62 (Pantoea sp.), UAGC738 (Rhizobium sp.) e UAGC982 (Stenotrophomonas sp.) promoveram interação positva, estimulando o desenvolvimento do milho. Foi observado que quando feita comparação entre linhagens massa seca de raiz e parte aérea foram estimulados por Bacillus sp., aos 45 dias de cultivo e pelo tratamento composto da mistura de linhagens aos 75 dias de cultivo. Quando a comparação foi feita em relação ao NPK foi observado que todas as linhagens promoveram incremento na massa seca de raiz superior ao controle químico tanto aos 45 quanto aos 75 dias de cultivo. Na comparação em relação ao controle (sem inóculo) altura, massa fresca e seca de raiz foram significativos aos 45 dias de cultivo, e aos 75 dias o tratamento com a mistura das linhagens apresentou melhores resultados para massa fresca e seca da raiz. Tais resultados evidenciam a potencialidade dos diferentes gêneros bacterianos apresentados neste trabalho em promover crescimento vegetal em plantas de milho e feijão.
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Bactérias associadas a plantas de cana-de-açúcar : diversidade genética e promoção de crescimento vegetal

SANTOS, Isaneli Batista dos 10 February 2015 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-02-22T12:43:02Z No. of bitstreams: 1 Isaneli Batista dos Santos.pdf: 1740500 bytes, checksum: c87d0f7278d6b347b60c8ed063bfb279 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-22T12:43:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Isaneli Batista dos Santos.pdf: 1740500 bytes, checksum: c87d0f7278d6b347b60c8ed063bfb279 (MD5) Previous issue date: 2015-02-10 / The BPCV can stimulate the growth of the plant, reduce the occurrence of infections caused by plant pathogens and still reduce the effects of biotic or abiotic stresses in plants. Therefore, the goal of this work was to identify the direct mechanisms of plant growth promotion in maize and sorghum, and study the genetic diversity of bacteria associated with cane sugar plants and manioc. The selection of bacterial isolates of plant growth promoting mechanisms were performed using biological nitrogen fixation test (BNF) in the absence and presence of 2.5% NaCl; indole acetic acid synthesis (IIA) in the presence of different abiotic factors; expression of quorum sensing molecule (HLA) and exopolysaccharide (EPS). The genetic diversity study was conducted through the BOX- PCR and REP-PCR techniques; and the presence of isolates belonging to the genus Burkholderia by specific PCR. Positive bacteria for different promotion mechanisms were submitted to the fatty acids profile and partial sequencing of the 16S rRNA gene. Then, the BPCV inoculation was done in sorghum seeds (Sorgum vulgare var. Ipa 467-4-2) and corn (Zea mays var. St Joseph) to assess the performance of such bacteria on promoting plant, even under salt stress. The results showed that all bacteria were positive for IAA and BNF synthesis; 87.04% of the isolates tested positive for the production of quorum sensing (HLA), while 92.30% of bacterial strains belonging to the genus Burkholderia, the test was positive; 7.40% of the bacteria were negative for EPS production, no bacterial isolate showed little EPS production, 20,37% of the isolates had average production of EPS and 72,22% had high production of EPS. In relation to Burkholderia lineages, 38.46% of tested strains were negative to the test; UAGC131 strain had only minor production of halo 10 mm diameter (low output), which corresponds to 3.85% of relative frequency; 19.23% had average production of EPS and 38.46% had high production of EPS. The specific PCR revealed that the isolates, only UAGF01 and UAGF09, had the presence of band, and therefore belonging to the genus Burkholderia. The BOX-PCR revealed the presence of 41 groups (clusters) with high genetic variability among the evaluated bacterial isolates. The Jaccard similarity coefficient by REP-PCR, revealed the presence of 17 groups (cluters) with high genetic variability between strains evaluated, 30% similarity. The fatty acids profile of the study and the genetic identification from the partial sequencing of the 16S rRNA gene showed the presence of several bacterial genera of great importance in the promotion of studies of plant growth, as Burkholderia, Enterobacter, Pantoea and Klebisiella. The bacteria assessed promoted increase of at least one feature or through the IVG, or PC, or radicle, shoot and total, or total fresh and dry phytomass of seedlings of sorghum or maize, even under salt stress. These results showed that the bacteria have evaluated biotechnological potential for plant growth promotion in laboratory conditions, requiring therefore tests in greenhouse and field to confirm the potential of these bacteria. / As BPCV podem estimular o crescimento da planta, reduzir a ocorrência de infecções causadas por fitopatógenos, e ainda diminuir os efeitos de estresses bióticos ou abióticos sob as plantas. Logo, o objetivo geral deste trabalho foi identificar os mecanismos diretos de promoção de crescimento vegetal em milho (Zea mays L.) e em sorgo forrageiro (Sorghum vulgare), e estudar a diversidade genética de bactérias associadas a plantas de cana-de-açúcar e mandioca. A seleção de isolados bacterianos com mecanismos de promoção de crescimento vegetal foi realizada através dos testes de fixação biológica de nitrogênio (FBN) na ausência e presença de 2,5% de NaCl; síntese de ácido indol acético (AIA) sob a presença de diferentes fatores abióticos; expressão da molécula quorum sensing (ALH) e produção de exopolissacarídeos (EPS). O estudo da diversidade genética foi realizado através das técnicas de BOX-PCR e REP-PCR; e, a presença de isolados pertencentes ao gênero Burkholderia por meio de PCR específica. As bactérias positivas para os diversos mecanismos de promoção foram submetidas ao perfil de ácidos graxos e sequenciamento parcial do gene 16S rRNA. Em seguida, foi feita a inoculação de BPCV em sementes de sorgo forrageiro (Sorgum vulgare, var. Ipa 467-4-2) e milho (Zea mays, var. São José) para avaliar o desempenho de tais bactérias sobre a promoção vegetal, inclusive sob condições de estresse salino. Os resultados mostraram que todas as bactérias foram positivas para a FBN e síntese de AIA; 87,04% dos isolados foram positivos para a produção de quorum sensing (ALH), enquanto que 92,30% das linhagens bacterianas pertencentes ao gênero Burkholderia, foram positivas ao teste; 7,40% das bactérias foram negativas à produção de EPS, nenhum isolado bacteriano apresentou pouca produção, 20,37% dos isolados tiveram média e 72,22% tiveram alta produção. Em relação às linhagens Burkholderia, 38,46% das linhagens avaliadas foram negativas ao teste; apenas a linhagem UAGC131 obteve halo de produção menor que 10 mm de diâmetro (pouca produção), o que corresponde a 3,85% da frequência relativa; 19,23% tiveram média e 38,46% apresentaram alta produção de EPS. A PCR especifica revelou que dos isolados avaliados, apenas UAGF01 e UAGF09, tiveram a presença de banda, sendo, portanto, pertencentes ao gênero Burkholderia. A técnica de BOX-PCR evidenciou a presença de 41 grupos (clusters), com alta variabilidade genética entre os isolados bacterianos avaliados. O coeficiente de similaridade de Jaccard, através da técnica de REP-PCR, evidenciou a presença de 17 grupos (cluters), com alta variabilidade genética entre as linhagens avaliadas, a 30% de similaridade. O estudo do perfil de ácidos graxos e a identificação genética a partir do sequenciamento parcial do gene 16S rRNA, mostrou a presença de diversos gêneros bacterianos de grande importância nos estudos de promoção de crescimento vegetal, como Burkholderia, Enterobacter, Klebisiella e Pantoea. As bactérias avaliadas promoveram aumento de pelo menos uma característica seja por meio do IVG, ou PC, ou comprimento de radícula, parte aérea e total, ou fitomassa total fresca e seca das plântulas de sorgo ou milho, inclusive sob condições de estresse salino. Esses resultados mostraram que as bactérias avaliadas possuem potencial biotecnológico para promoção de crescimento vegetal em condições laboratoriais, necessitando, portanto, de testes em ambiente protegido e em campo para confirmar o potencial dessas bactérias.

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