Introdução: A biocompatibilidade é uma propriedade importante e necessária a um cimento endodôntico. O objetivo do presente estudo foi fazer uma análise microscópica das reações do tecido ósseo do fêmur de ratos da linhagem Wistar frente ao cimento MTA Fillapex, comparando-as ao cimento AH Plus e ao grupo controle (cavidade vazia), nos períodos de 7, 30 e 90 dias. Materiais e Métodos: Foram utilizados 18 animais, divididos em 3 grupos, de acordo com o período experimental (n=6). Três cavidades foram preparadas no fêmur da pata traseira direita de cada animal, sendo que uma foi preenchida com AH Plus, a outra com MTA Fillapex e a última permaneceu vazia (controle negativo). Decorridos os períodos experimentais, os ratos foram mortos e as patas removidas, dissecadas e preparadas para análise histológica. Os cortes foram analisados em microscópico óptico. O infiltrado inflamatório e as zonas de calcificação foram avaliados de forma dicotômica (presente ou ausente). A formação de barreira óssea foi classificada como ausente, parcial ou completa. Testes estatísticos não-paramétricos foram utilizados para a comparação dos dados (p<0,05). Resultados: As comparações entre os períodos experimentais mostraram que aos 7 dias todos os grupos apresentaram menor formação de barreira óssea e que o MTA Fillapex apresentou mais áreas de calcificação em relação aos demais períodos. Nos grupos do AH Plus e do MTA Fillapex, o infiltrado inflamatório reduziu significativamente aos 90 dias. As comparações entre os grupos mostraram mais áreas de calcificação no grupo do AH Plus aos 30 e 90 dias. O grupo controle apresentou menos infiltrado inflamatório aos 30 dias. Não houve diferença significativa entre os grupos na formação de barreira óssea. Conclusões: O cimento endodôntico MTA Fillapex apresentou comportamento biológico satisfatório em contato direto com tecido ósseo de rato. As características do reparo foram semelhantes às do cimento AH Plus, porém o MTA Fillapex não induziu a formação de áreas de calcificação na medula óssea. / Introduction: Biocompatibility is an important property required for a endodontic sealer. This study aimed to analyze bone tissue reactions to MTA Fillapex compared to an epoxy resin-based material in the femur of Wistar rats. Methods: Bone tissue reactions were evaluated in 18 animals after 7, 30 and 90 days (n=6 per period). Three surgical cavities were prepared on femur and filled with 0.1 mL of AH Plus, MTA Fillapex or no sealer (negative control). By the end of each experimental period, six animals were randomly euthanized, the femur was dissected and the surgical cavities separated. The samples were histologically processed and analyzed by light microscope. Inflammatory infiltrate and the calcification zones were evaluated dichotomously; hard tissue barrier was classified as absent, partial or full. Results: Comparison among periods showed that at 7 days all groups presented less hard tissue barrier and MTA Fillapex showed more calcification zones than in other periods. The inflammatory infiltrate significantly reduced at 90 days in AH Plus and MTA Fillapex groups. Comparisons among the groups presented more calcification zones for AH Plus than for the other groups at 30 and 90 days. Control group showed less inflammatory infiltrate at 30 days. There were no singificant diferences to hard tissue barrier among the groups. Data were analyzed by non-parameric tests. Significance level was preset in 0.05. Conclusions: MTA Fillapex presented satisfactory biological behaviour when in direct contact with rat bone tissue. The repair characteristics were similar to those produced by AH Plus, but MTA Fillapex doesn’t induce mineralization in the bone marrow.

Introdução: A biocompatibilidade é uma propriedade importante e necessária a um cimento endodôntico. O objetivo do presente estudo foi fazer uma análise microscópica das reações do tecido ósseo do fêmur de ratos da linhagem Wistar frente ao cimento MTA Fillapex, comparando-as ao cimento AH Plus e ao grupo controle (cavidade vazia), nos períodos de 7, 30 e 90 dias. Materiais e Métodos: Foram utilizados 18 animais, divididos em 3 grupos, de acordo com o período experimental (n=6). Três cavidades foram preparadas no fêmur da pata traseira direita de cada animal, sendo que uma foi preenchida com AH Plus, a outra com MTA Fillapex e a última permaneceu vazia (controle negativo). Decorridos os períodos experimentais, os ratos foram mortos e as patas removidas, dissecadas e preparadas para análise histológica. Os cortes foram analisados em microscópico óptico. O infiltrado inflamatório e as zonas de calcificação foram avaliados de forma dicotômica (presente ou ausente). A formação de barreira óssea foi classificada como ausente, parcial ou completa. Testes estatísticos não-paramétricos foram utilizados para a comparação dos dados (p<0,05). Resultados: As comparações entre os períodos experimentais mostraram que aos 7 dias todos os grupos apresentaram menor formação de barreira óssea e que o MTA Fillapex apresentou mais áreas de calcificação em relação aos demais períodos. Nos grupos do AH Plus e do MTA Fillapex, o infiltrado inflamatório reduziu significativamente aos 90 dias. As comparações entre os grupos mostraram mais áreas de calcificação no grupo do AH Plus aos 30 e 90 dias. O grupo controle apresentou menos infiltrado inflamatório aos 30 dias. Não houve diferença significativa entre os grupos na formação de barreira óssea. Conclusões: O cimento endodôntico MTA Fillapex apresentou comportamento biológico satisfatório em contato direto com tecido ósseo de rato. As características do reparo foram semelhantes às do cimento AH Plus, porém o MTA Fillapex não induziu a formação de áreas de calcificação na medula óssea. / Introduction: Biocompatibility is an important property required for a endodontic sealer. This study aimed to analyze bone tissue reactions to MTA Fillapex compared to an epoxy resin-based material in the femur of Wistar rats. Methods: Bone tissue reactions were evaluated in 18 animals after 7, 30 and 90 days (n=6 per period). Three surgical cavities were prepared on femur and filled with 0.1 mL of AH Plus, MTA Fillapex or no sealer (negative control). By the end of each experimental period, six animals were randomly euthanized, the femur was dissected and the surgical cavities separated. The samples were histologically processed and analyzed by light microscope. Inflammatory infiltrate and the calcification zones were evaluated dichotomously; hard tissue barrier was classified as absent, partial or full. Results: Comparison among periods showed that at 7 days all groups presented less hard tissue barrier and MTA Fillapex showed more calcification zones than in other periods. The inflammatory infiltrate significantly reduced at 90 days in AH Plus and MTA Fillapex groups. Comparisons among the groups presented more calcification zones for AH Plus than for the other groups at 30 and 90 days. Control group showed less inflammatory infiltrate at 30 days. There were no singificant diferences to hard tissue barrier among the groups. Data were analyzed by non-parameric tests. Significance level was preset in 0.05. Conclusions: MTA Fillapex presented satisfactory biological behaviour when in direct contact with rat bone tissue. The repair characteristics were similar to those produced by AH Plus, but MTA Fillapex doesn’t induce mineralization in the bone marrow.

Introdução: A biocompatibilidade é uma propriedade importante e necessária a um cimento endodôntico. O objetivo do presente estudo foi fazer uma análise microscópica das reações do tecido ósseo do fêmur de ratos da linhagem Wistar frente ao cimento MTA Fillapex, comparando-as ao cimento AH Plus e ao grupo controle (cavidade vazia), nos períodos de 7, 30 e 90 dias. Materiais e Métodos: Foram utilizados 18 animais, divididos em 3 grupos, de acordo com o período experimental (n=6). Três cavidades foram preparadas no fêmur da pata traseira direita de cada animal, sendo que uma foi preenchida com AH Plus, a outra com MTA Fillapex e a última permaneceu vazia (controle negativo). Decorridos os períodos experimentais, os ratos foram mortos e as patas removidas, dissecadas e preparadas para análise histológica. Os cortes foram analisados em microscópico óptico. O infiltrado inflamatório e as zonas de calcificação foram avaliados de forma dicotômica (presente ou ausente). A formação de barreira óssea foi classificada como ausente, parcial ou completa. Testes estatísticos não-paramétricos foram utilizados para a comparação dos dados (p<0,05). Resultados: As comparações entre os períodos experimentais mostraram que aos 7 dias todos os grupos apresentaram menor formação de barreira óssea e que o MTA Fillapex apresentou mais áreas de calcificação em relação aos demais períodos. Nos grupos do AH Plus e do MTA Fillapex, o infiltrado inflamatório reduziu significativamente aos 90 dias. As comparações entre os grupos mostraram mais áreas de calcificação no grupo do AH Plus aos 30 e 90 dias. O grupo controle apresentou menos infiltrado inflamatório aos 30 dias. Não houve diferença significativa entre os grupos na formação de barreira óssea. Conclusões: O cimento endodôntico MTA Fillapex apresentou comportamento biológico satisfatório em contato direto com tecido ósseo de rato. As características do reparo foram semelhantes às do cimento AH Plus, porém o MTA Fillapex não induziu a formação de áreas de calcificação na medula óssea. / Introduction: Biocompatibility is an important property required for a endodontic sealer. This study aimed to analyze bone tissue reactions to MTA Fillapex compared to an epoxy resin-based material in the femur of Wistar rats. Methods: Bone tissue reactions were evaluated in 18 animals after 7, 30 and 90 days (n=6 per period). Three surgical cavities were prepared on femur and filled with 0.1 mL of AH Plus, MTA Fillapex or no sealer (negative control). By the end of each experimental period, six animals were randomly euthanized, the femur was dissected and the surgical cavities separated. The samples were histologically processed and analyzed by light microscope. Inflammatory infiltrate and the calcification zones were evaluated dichotomously; hard tissue barrier was classified as absent, partial or full. Results: Comparison among periods showed that at 7 days all groups presented less hard tissue barrier and MTA Fillapex showed more calcification zones than in other periods. The inflammatory infiltrate significantly reduced at 90 days in AH Plus and MTA Fillapex groups. Comparisons among the groups presented more calcification zones for AH Plus than for the other groups at 30 and 90 days. Control group showed less inflammatory infiltrate at 30 days. There were no singificant diferences to hard tissue barrier among the groups. Data were analyzed by non-parameric tests. Significance level was preset in 0.05. Conclusions: MTA Fillapex presented satisfactory biological behaviour when in direct contact with rat bone tissue. The repair characteristics were similar to those produced by AH Plus, but MTA Fillapex doesn’t induce mineralization in the bone marrow.

O presente estudo in vitro objetivou avaliar a longo prazo o potencial antimicrobiano residual e a citotoxicidade de soluções químicas de limpeza de prótese quando incorporadas à resina acrílica termopolimerizável após sucessivos ciclos de imersão noturna diária. Discos (10mm x 1mm) de resina acrílica termopolimerizável para base de prótese (Lucitone 550) foram submetidos a três ciclos diários de desinfecção (8h/cada) em hipoclorito de sódio a 1% (NaClO), digluconato de clorexidina a 2% (CLX) ou água destilada (controle) durante 91 (T91) ou 183 dias (T183), simulando o período de 9 meses ou 1,5 ano de imersão noturna diária realizada pelo paciente. Inicialmente, foi utilizado o método de concentração inibitória mínima em caldo para determinar o possível efeito residual (incorporação) das soluções à resina acrílica. Metade dos discos imersos em cada agente de limpeza em um dos tempos de imersão (n=5) foi inoculada (1x107cels/mL) com um dos patógenos associados à estomatite protética: Candida albicans (Ca) e Staphylococcus aureus (Sa). Os discos foram incubados a 37oC para análise em espectrofotômetro após 24h, 7 e 14 dias. Os valores de absorbância foram convertidos em porcentagens de inibição microbiana. Confirmada a ação antimicrobiana residual dos agentes de limpeza incorporados à resina acrílica, foi então analisada sua citotoxicidade in vitro sobre fibroblastos gengivais humanos (L929). Os efeitos citotóxicos foram avaliados por meio do ensaio colorimétrico MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio] para a determinação da viabilidade celular, após as células serem expostas por 24h às amostras de cada condição experimentais (n=18) previamente imersas em uma das soluções por um dos períodos avaliados (T91 ou T183). A citotoxicidade foi determinada com base na atividade mitocondrial em relação a corpos de prova não submetidos à imersão nas soluções testadas. Os resultados do ensaio do MTT foram analisados estatisticamente por ANOVA-1 fator seguida pelo teste post-hoc de Tukey HSD (a=0,05). Para os períodos T91 e T183, não houve inibição microbiana com a imersão em água (controle) em até 14 dias de incubação. A CLX inibiu progressivamente o crescimento microbiano ao longo dos 14 dias para ambos os períodos de imersão (Ca: 19 a 73,58%; Sa: 0 a 87,08%), sendo observada maior ação antimicrobiana em T183. O NaClO apresentou discreta inibição microbiana apenas no período de 14 dias tanto em T91 (Ca: 0%; Sa: 2,70%) quanto em T183 (Ca: 8,50%; Sa: 15,08%). De acordo com os resultados do teste de MTT, as soluções químicas de limpeza testadas apresentaram uma redução significativa da viabilidade celular quando comparado às células controles propagadas apenas em meio de cultura (p<0,002). A CLX resultou na menor viabilidade celular em ambos os períodos de imersão (p<0,018). As amostras de resina acrílica imersas em água ou NaClO em T91 e T183 apresentaram viabilidade celular estatisticamente similar às amostras não imersas (p>0,05). Pode-se concluir que a CLX incorporada à resina acrílica para base de prótese apresentou um efeito antimicrobiano residual em ambos os períodos de imersão noturna, o que não foi observado com o NaClO. Por outro lado, a CLX residual resultou em efeito intensamente citotóxico aos fibroblastos gengivais humanos quando comparada ao NaClO e à agua destilada, que se apresentaram discretamente citotóxicos. Esses resultados sugerem precaução na seleção de agentes de limpeza para prótese como meio de prevenção e tratamento adjunto da estomatite protética, pois mesmo em concentrações baixas, recomendadas para imersão noturna, podem apresentar algum grau de toxicidade às mucosas de suporte protético. / This in vitro study aimed to evaluate the long-term residual antimicrobial activity and cytotoxicity of chemical denture cleansers incorporated into a heat-polymerized acrylic resin after successive cycles of daily overnight soaking. Discs (10mm x 1mm) were prepared from heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550) and submitted to three daily immersion (8h/each) in 1% sodium hypochlorite (NaClO), chlorhexidine digluconate 2% (CHX) or distilled water (control) for 91 days (T91) or 183 days (T183), simulating the period of 9 months or 1.5 year of nocturnal immersion performed by the patient. Initially, the method of minimum inhibitory concentration in broth was used to determine the possible residual effect (incorporation) of the acrylic resin solution. Half of the disks immersed in each cleaning agent for one of the period immersion (n=5) was inoculated (1x107cells/mL) with pathogens associated with denture stomatitis: Candida albicans (Ca) or Staphylococcys aureus (Sa). The disks were incubated at 37oC for analysis in a spectrophotometer after 24h, 7 and 14 days. The absorbance values were expressed as percentages of microbial inhibition. Confirmed the residual antimicrobial action of cleaning agents incorporated into the acrylic resin, its cytotoxicity was analyzed in vitro on human gingival fibroblasts (L929). Cytotoxic effects were evaluated by the colorimetric assay MTT [3- (4,5- dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide] to determine cellular viability after the cells were exposed for 24h to the samples of each experimental condition (n=18) previously immersed in one of the solutions for the evaluation periods (T91 or T183). Cytotoxicity was determined based on mitochondrial activity compared to the specimens not subjected to immersion in the solutions. The MTT assay results were 1-way ANOVA followed by Tukey\'s HSD post-hoc test (a=0.05). For the periods T91 and T183, no microbial inhibition was observed with immersion in water (control) for up to 14 days of incubation. The CHX progressively inhibited microbial growth over the 14 days for both immersion times (Ca: 19 to 73.58%, Sa: 0 to 87.08%); with greater antimicrobial activity in T183. The NaClO showed a slight microbial inhibition only in the 14-day period in both T91 (Ca: 0%; Sa: 2.70%) and T183 (Ca: 8.50%; Sa: 15.08%). According to the results of the MTT assay, the chemical cleaning solutions tested showed a significant reduction in cell viability when compared to the control cells propagated in normal culture medium (p<0.002). The CHX resulted in the lowest cell viability in both immersion periods (p<0.018). The acrylic samples immersed in water or NaClO in T91 and T183 showed cell viability statistically similar to nonimmersed samples (p>0.05). CHX incorporated into the acrylic resin denture base had a residual antimicrobial effect on both immersion periods, which was not observed with NaClO. On the other hand, the residual CHX were severely cytotoxic to human gingival fibroblasts compared to NaClO and distilled water which were slightly cytotoxic. These results suggest caution in selecting denture cleaning agents as a method of prevention and adjunct treatment of denture stomatitis because even at low concentrations recommended for overnight immersion, they may exhibit some degree of toxicity to the denture bearing mucosa.

O presente estudo in vitro objetivou avaliar a longo prazo o potencial antimicrobiano residual e a citotoxicidade de soluções químicas de limpeza de prótese quando incorporadas à resina acrílica termopolimerizável após sucessivos ciclos de imersão noturna diária. Discos (10mm x 1mm) de resina acrílica termopolimerizável para base de prótese (Lucitone 550) foram submetidos a três ciclos diários de desinfecção (8h/cada) em hipoclorito de sódio a 1% (NaClO), digluconato de clorexidina a 2% (CLX) ou água destilada (controle) durante 91 (T91) ou 183 dias (T183), simulando o período de 9 meses ou 1,5 ano de imersão noturna diária realizada pelo paciente. Inicialmente, foi utilizado o método de concentração inibitória mínima em caldo para determinar o possível efeito residual (incorporação) das soluções à resina acrílica. Metade dos discos imersos em cada agente de limpeza em um dos tempos de imersão (n=5) foi inoculada (1x107cels/mL) com um dos patógenos associados à estomatite protética: Candida albicans (Ca) e Staphylococcus aureus (Sa). Os discos foram incubados a 37oC para análise em espectrofotômetro após 24h, 7 e 14 dias. Os valores de absorbância foram convertidos em porcentagens de inibição microbiana. Confirmada a ação antimicrobiana residual dos agentes de limpeza incorporados à resina acrílica, foi então analisada sua citotoxicidade in vitro sobre fibroblastos gengivais humanos (L929). Os efeitos citotóxicos foram avaliados por meio do ensaio colorimétrico MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio] para a determinação da viabilidade celular, após as células serem expostas por 24h às amostras de cada condição experimentais (n=18) previamente imersas em uma das soluções por um dos períodos avaliados (T91 ou T183). A citotoxicidade foi determinada com base na atividade mitocondrial em relação a corpos de prova não submetidos à imersão nas soluções testadas. Os resultados do ensaio do MTT foram analisados estatisticamente por ANOVA-1 fator seguida pelo teste post-hoc de Tukey HSD (a=0,05). Para os períodos T91 e T183, não houve inibição microbiana com a imersão em água (controle) em até 14 dias de incubação. A CLX inibiu progressivamente o crescimento microbiano ao longo dos 14 dias para ambos os períodos de imersão (Ca: 19 a 73,58%; Sa: 0 a 87,08%), sendo observada maior ação antimicrobiana em T183. O NaClO apresentou discreta inibição microbiana apenas no período de 14 dias tanto em T91 (Ca: 0%; Sa: 2,70%) quanto em T183 (Ca: 8,50%; Sa: 15,08%). De acordo com os resultados do teste de MTT, as soluções químicas de limpeza testadas apresentaram uma redução significativa da viabilidade celular quando comparado às células controles propagadas apenas em meio de cultura (p<0,002). A CLX resultou na menor viabilidade celular em ambos os períodos de imersão (p<0,018). As amostras de resina acrílica imersas em água ou NaClO em T91 e T183 apresentaram viabilidade celular estatisticamente similar às amostras não imersas (p>0,05). Pode-se concluir que a CLX incorporada à resina acrílica para base de prótese apresentou um efeito antimicrobiano residual em ambos os períodos de imersão noturna, o que não foi observado com o NaClO. Por outro lado, a CLX residual resultou em efeito intensamente citotóxico aos fibroblastos gengivais humanos quando comparada ao NaClO e à agua destilada, que se apresentaram discretamente citotóxicos. Esses resultados sugerem precaução na seleção de agentes de limpeza para prótese como meio de prevenção e tratamento adjunto da estomatite protética, pois mesmo em concentrações baixas, recomendadas para imersão noturna, podem apresentar algum grau de toxicidade às mucosas de suporte protético. / This in vitro study aimed to evaluate the long-term residual antimicrobial activity and cytotoxicity of chemical denture cleansers incorporated into a heat-polymerized acrylic resin after successive cycles of daily overnight soaking. Discs (10mm x 1mm) were prepared from heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550) and submitted to three daily immersion (8h/each) in 1% sodium hypochlorite (NaClO), chlorhexidine digluconate 2% (CHX) or distilled water (control) for 91 days (T91) or 183 days (T183), simulating the period of 9 months or 1.5 year of nocturnal immersion performed by the patient. Initially, the method of minimum inhibitory concentration in broth was used to determine the possible residual effect (incorporation) of the acrylic resin solution. Half of the disks immersed in each cleaning agent for one of the period immersion (n=5) was inoculated (1x107cells/mL) with pathogens associated with denture stomatitis: Candida albicans (Ca) or Staphylococcys aureus (Sa). The disks were incubated at 37oC for analysis in a spectrophotometer after 24h, 7 and 14 days. The absorbance values were expressed as percentages of microbial inhibition. Confirmed the residual antimicrobial action of cleaning agents incorporated into the acrylic resin, its cytotoxicity was analyzed in vitro on human gingival fibroblasts (L929). Cytotoxic effects were evaluated by the colorimetric assay MTT [3- (4,5- dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide] to determine cellular viability after the cells were exposed for 24h to the samples of each experimental condition (n=18) previously immersed in one of the solutions for the evaluation periods (T91 or T183). Cytotoxicity was determined based on mitochondrial activity compared to the specimens not subjected to immersion in the solutions. The MTT assay results were 1-way ANOVA followed by Tukey\'s HSD post-hoc test (a=0.05). For the periods T91 and T183, no microbial inhibition was observed with immersion in water (control) for up to 14 days of incubation. The CHX progressively inhibited microbial growth over the 14 days for both immersion times (Ca: 19 to 73.58%, Sa: 0 to 87.08%); with greater antimicrobial activity in T183. The NaClO showed a slight microbial inhibition only in the 14-day period in both T91 (Ca: 0%; Sa: 2.70%) and T183 (Ca: 8.50%; Sa: 15.08%). According to the results of the MTT assay, the chemical cleaning solutions tested showed a significant reduction in cell viability when compared to the control cells propagated in normal culture medium (p<0.002). The CHX resulted in the lowest cell viability in both immersion periods (p<0.018). The acrylic samples immersed in water or NaClO in T91 and T183 showed cell viability statistically similar to nonimmersed samples (p>0.05). CHX incorporated into the acrylic resin denture base had a residual antimicrobial effect on both immersion periods, which was not observed with NaClO. On the other hand, the residual CHX were severely cytotoxic to human gingival fibroblasts compared to NaClO and distilled water which were slightly cytotoxic. These results suggest caution in selecting denture cleaning agents as a method of prevention and adjunct treatment of denture stomatitis because even at low concentrations recommended for overnight immersion, they may exhibit some degree of toxicity to the denture bearing mucosa.

Indiana University-Purdue University Indianapolis (IUPUI) / Hydrogels prepared from photopolymerization have been widely used in many biomedical applications. Ultraviolet (200-400 nm) or visible (400-800 nm) light can interact with light-sensitive compounds called photoinitiators to form radical species that trigger photopolylmerization. Since UV light has potential to cause cell damage, visible light-mediated photopolymerization has attracted much attention. The conventional method to fabricate hydrogels under visible light exposure requires usage of co-initiator triethanolamine (TEA) at high concentration (∼200 mM), which reduces cell viability. Therefore, the first objective of this thesis was to develop a new method to form poly(ethylene glycol)-diacrylate (PEGDA) hydrogel without using TEA. Specifically, thiol-containing molecules (e.g. dithiothreitol or cysteine-containing peptides) were used to replace TEA as both co-initiator and crosslinker. Co-monomer 1-vinyl-2-pyrrolidinone (NVP) was used to accelerate gelation kinetics. The gelation rate could be tuned by changing the concentration of eosinY or NVP. Variation of thiol concentration affected degradation rate of hydrogels. Many bioactive motifs have been immobilized into hydrogels to enhance cell attachment and adhesion in previous studies. In this thesis, pendant peptide RGDS was incorporated via two methods with high incorporation efficiency. The stiffness of hydrogels decreased when incorporating RGDS. The second objective of this thesis was to fabricate hydrogels using poly(ethylene glycol)-tetra-acrylate (PEG4A) macromer instead of PEGDA via the same step-and-chain-growth mixed mode mechanism. Formation of hydrogels using PEGDA in this thesis required high concentration of macromer (∼10 wt.%). Since PEG4A had two more functional acrylate groups than PEGDA, hydrogels could be fabricated using lower concentration of PEG4A (∼4 wt.%). The effects of NVP concentration and thiol content on hydrogel properties were similar to those on PEGDA hydrogels. In addition, the functionality and chemistry of thiol could also affect hydrogel properties.