Members of the GATA family of transcription factors are evolutionary conserved DNA-binding proteins that play critical roles in cell differentiation. They share a highly conserved zinc finger domain responsible for specific binding to a consensus (A/T)GATA(A/G) sequence. Three GATA factors, GATA-4, GATA-5, and GATA-6, are expressed in the heart and two of them, GATA-4 and GATA-6, are coexpressed in cardiomyocytes. Given the early embryonic lethality of GATA-4 and GATA-6 null mice, their exact role in cardiomyocytes was unclear. The objective of my doctoral work was to elucidate the role of GATA-4 and GATA-6 in postnatal cardiomyocytes and the molecular basis for their specificity. Since the identification of GATA-4 and GATA-6 target genes would help to elucidate their functions, we inhibited GATA-4 and GATA-6 protein production in postnatal cardiomyocytes and assessed its effect on cardiac gene expression. The results demonstrated that GATA-4 and GATA-6 are required for the maintenance of cardiac gene expression. Importantly, the work showed that GATA-4 and GATA-6 differentially regulate target genes and that this specificity is due, at least in part, to their differential DNA-binding affinity. In addition to differential DNA-binding affinity, we showed that GATA factors also acquire specificity by differential interaction with cofactors, such as MEF2 and Nkx2-5. Thus, GATA factor specificity is achieved at three levels: differential spatio-temporal expression, differential DNA-binding affinity, and differential interaction with cofactors. / The crucial role of GATA-4 and its cofactors in the regulation of contractile actin and myosin protein gene expression suggested that GATA-4 might regulate sarcomere formation. Indeed, we found that, similarly to RhoA GTPase, GATA-4 is essential for sarcomere formation in cardiomyocytes. Moreover, we showed that RhoA acts upstream of GATA-4 and potentiates GATA-4 transcriptional activity. These results suggest that RhoA regulates the expression of sarcomeric proteins and sarcomere formation by inducing the transcriptional activity of GATA-4. Collectively, the work described in this thesis provides important information on the role, regulation, and mechanisms of specificity of GATA transcription factors in cardiomyocytes and in other cells where they are expressed.

DNA-binding proteins such as IHF play a crucial role in bacterial survival. IHF is involved in many biological processes in E. coli and possibly in other bacteria. It was hypothesized that another protein, Nlp, belongs to a family of conserved DNA-binding proteins, and this protein was shown to be non-essential for cell viability, but highly conserved among the Enterobacteriaceae. As Nlp appears to play a role in gene regulation, we wished to identify all Nlp-regulated genes. nlp was cloned into pBAD18-Kan generating pMM5, where Nlp expression was under the control of arabinose. Strain LF20300 was transformed with pMM5 and then lysogenized with the lacZ transcriptional fusion reporter vector Mu dI to create a library of approximately 10,000 clones. This library was screened on plates containing either glucose/X-gal or arabinose/X-gal in order to identify genes whose expression was altered upon production of Nlp. Two clones, 90-6 and 205-15, were identified which displayed increased beta-galactosidase expression in the presence of Nlp. Further studies with these two clones have shown the insertion of a single Mu dI phage within clone 90-6 and a double insertion within clone 205-15. Cloning and sequencing of one of the Mu dI insertions of strain 205-15 has identified the yqhG gene as being one of the genes whose expression may be altered in the presence of Nlp.

One of the main questions of modern biology is how our cells interpret our genetic and epigenetic information. DNA methylation is a covalent modification of the genome that is essential for mammalian development and plays an important role in the control of gene expression, genomic imprinting and X-chromosome inactivation (Bird and Wolffe, 1999; Szyf et al., 2000). Furthermore, changes in DNA methylation and DNA methyltransferase 1 (DNMT1) activity have been widely documented in a number of human cancers (Szyf, 1998a; Szyf et al., 2000). / In Escherichia coli, timing and frequency of initiation of DNA replication are controlled by the levels of the bacterial methyltransferase and by the methylation status of its origin of replication (Boye and Lobner-Olesen, 1990; Campbell and Kleckner, 1990). In mammalian cells, however, the importance of methyltransferase activity and of DNA methylation in replication is only now starting to emerge (Araujo et al., 1998; Delgado et al., 1998; DePamphilis, 2000; Knox et al., 2000). / The work described in this thesis focuses mainly on understanding the functional relationship between changes in DNA methylation and DNMT1 activity on mammalian DNA replication. In higher eukaryotes, DNA replication initiates from multiple specific sites throughout the genome (Zannis-Hadjopoulos and Price, 1999). The first part of the thesis describes the identification and characterization of novel in vivo initiation sites of DNA replication within the human dnmt1 locus (Araujo et al., 1999). Subsequently, a study of the temporal relationship between DNA replication and the inheritance of the DNA methylation pattern is presented. We also demonstrate that mammalian origins of replication, similarly to promoters, are differentially methylated (Araujo et al., 1998). We then tested the hypothesis that DNMT1 is a necessary component of the replication machinery. The results presented indicate that inhibition of DNMT1 results in inhibition of DNA replication (Knox et al., 2000). Finally, results are presented, demonstrating that the amino terminal region of DNMT1 is responsible for recognizing hemimethylated CGs, DNMT1's enzymatic target. Taken together, the results presented in this thesis demonstrate that DNMT1 is necessary for proper DNA replication and that DNA methylation may modulate origin function.

The beta3-adrenergic receptor (beta3-AR) represents a very attractive target for the development of anti-obesity drugs. Selective agonists have been developed based on the rodent beta3-AR and successfully used to treat obesity and Type 2 diabetes in these animals. In humans, however, these particular compounds appear to be less effective and not as specific for the beta3-AR as they are in rodents. An additional problem is the low level of expression of these receptors in human adipose, which may ultimately limit the clinical use of stronger more specific agonists. The objective of this research was to examine the regulation of the beta3-AR gene expression. In order to characterize functionally the cis-acting elements necessary for 3-AR proximal promoter activity, a series of luciferase reporter constructs containing various portions of the mouse 5'-flanking region of the gene, spanning from -1.4 kb to -0.126 kb relative to the translation start site (since there is no unique transcription start site), were generated and their transcriptional activity was evaluated by transient transfection experiments. We identified a 13 by element located between -0.208 kb to -0.196 kb that is essential for basal and constitutive proximal promoter activity. The beta3-AR mRNA has a rapid turnover and is readily expressed in the absence of apparent stimuli, in cells cultured in medium with charcoal-stripped serum. Out of several possible regulators we focused on glucocorticoids and thiazolidinediones, the former because it was a potentially important negative regulator, the latter because it could possibly stimulate the expression. In HIB-1B brown adipocytes, glucocorticoids appear to have two opposing effects on beta3-AR gene expression: they rapidly and directly inhibit transcription but also induce a rapidly turned-over protein that stimulates transcription of the gene. The level of beta3-AR expression in response to glucocorticoids may ultimately depend on the relative magnitu

The acquisition of cancer cell invasive properties is a critical early event in primary cancer progression to metastasis. Increasing experimental and clinical evidence supports that metastasis formation is initiated by the acquisition of cancer cell motile properties driven by extensive remodelling of the cell cytoskeleton and dynamic recycling of focal adhesion proteins (FA); the later link the extracellular matrix to the cell cytoskeleton and intracellular signaling. Cancer cell invasion has been associated with elevated expression/activation of several proteins, including members of Rab GTPases. These proteins are key regulators of membrane trafficking of proteins and membrane receptor recycling, including that of integrins. Elevated expression of Rab GTPases has been linked to increased cell migration and invasion. Previously, biochemical and proteomic studies from my host laboratory, using paired non-invasive and invasive breast cancer cells have revealed a rapid turnover of FA proteins in invasive compared to non-invasive cancer cells, as well as differential expression of several Rab GTPase members, including Rab5, Rab11 and Rab7. Thus, I tested the hypothesis that Rab GTPases may regulate FA protein turnover, in part via interaction with focal adhesion kinase (FAK), a central protein of master focal adhesion signalling. Immunofluorescence and immunoprecipitation assays reveal that Rab11 and FAK interact and colocalize at FA sites. Development of cell lines where Rabs are depleted using siRNA revealed an impact of Rab on cell migration; Rab inhibition inhibited cell migration. I propose that Rab GTPases, and in particular Rab11 may contribute to the regulation of FAK function in FA turnover and cell migration. / Le cancer invasif du sein reste une maladie extrêmement courante et une cause majeure de mortalité parmi les personnes atteintes du cancer. Un événement par lequel les cellules du cancer se propagent est initié par l'acquisition de propriétés mobiles conduites par le remodellement du cytosquelette cellulaire et par le roulement dynamique de protéines d'adhérence focale (FA); relient la matrice extracellulaire au cytosquelette cellulaire. Le cancer invasif du sein a été associé avec l'expression élevée de certaines proteines surnommées les Rab GTPases. Ils sont connus comme des regulateurs essentiels dans la circulation membraneuse y compris le recyclage des recepteurs incluant celles des integrins, protéines d'adhérence focale qui agissent en tant que mediateur pour l'adherence des cellules a la matrice extracellulaire. Leur expression élevée, a en fait, favorisé la migration et l'invasion des cellules, contribuable a la métastase du cancer. Auparavant, des études "proteomiques" sur des cellules non-invasives contre des cellules invasives du cancer du sein ont révélé un roulement rapide de protéines d'adhérence focales (FA) dans les cellules invasives, ainsi q'une expression différentielle de plusieurs membres de Rab GTPases, y compris Rab5, Rab11 et Rab7. Ainsi, nous testons l'hypothèse que Rab GTPase interagit avec la protein kinase d'adhérence focale (FAK), qui sert comme mediateur pour les voies de transduction des signaux aux sites d'adherence focale. Nous supposons aussi que les Rabs pourraient jouer un role important dans la regulations de la circulation de FA dans le cancer invasive du sein. Les experiences faites avec l'immunofluorecence et l'immunoprecipitation révèlent que Rab11 et FAK interagissent et colocalisent ensembles. Le développement de lignes de cellules où les Rabs ont été diminués en utilisent le siRNA démontre son effet sur la migration de cellules. Je propose que Rab11 est un élément decisif qui po

MicroRNAs (miRNAs) are small RNAs that play a pivotal role in post-transcriptional gene regulation. These regulatory RNAs associate with the Argonaute proteins to form the miRNA-induced silencing complexes (miRISCs). In metazoans, miRISCs typically target mRNAs by imperfectly binding to complementary sites in 3' untranslated regions (3'UTRs), thereby affecting the translation of the targets, and/or reducing their stability. Despite the significant roles miRNAs play in various biological processes, the mechanistic details of how they regulate gene expression remain unclear. Using a C. elegans embryonic in vitro system, we focus on the mechanism for miRNA mode of action, and the significance of the poly(A) tail in miRNA-mediated silencing during development. We show that our miRNA luciferase reporters underwent deadenylation starting at 20 minutes of incubation of the RNA with C. elegans extract, and this process is dependent on the Argonautes involved in the miRNA pathway, ALG-1 and ALG-2. We also detect the presence of an RNA decay intermediate within two hours of target RNA-extract incubation. The appearance of this intermediate is independent of the m7GTP cap, indicating a 3'->5' decay pathway occurring in coordination or independently of miRNA-mediated deadenylation. Furthermore, we present here our screen for endogenous targets of the maternal miR-35-42 family, a miRNA family abundantly expressed in the embryo and essential for embryogenesis, via deadenylation assays. From our screen, we identified the tolloid/BMP-1 family member, toh-1, as a deadenylated target of miR-35-42. The pro-apoptotic egl-1 was also identified as a target of miR-35-42, as well as the zygotically expressed miR-58. Our findings demonstrate that more than half of the predicted natural UTRs were deadenylated in a miRNA-dependent manner. We also show that a minimum spacing is required for miRISCs to efficiently silence their targets, and we illustrate that at least two separate miRISC-bin / Les microARNs (miARNs) sont des petits ARNs qui jouent un rôle important dans la régulation post-transcriptionnelle des gènes. Ces ARNs régulateurs s'associent à des protéines, nommées les Argonautes, afin de former un complexe de répression induit par les miARNs (miRISCs). Chez les métazoaires, les miRISCs ciblent l'expression des gènes par une hybridation imparfaite avec la région non-codante en 3' (3'UTR) de l'ARN messager (ARNm) ciblé, ce qui a pour effet d'affecter la traduction des ARNm, et/ou de réduire leur stabilité. Malgré le fait que les miARNs jouent plusieurs rôles significatifs dans divers processus biologiques, leur mécanisme de contrôle de régulation génique demeure incompris. En utilisant un système in vitro chez les embryons de C. elegans, on se concentre sur le mécanisme d'action des miARNs et sur l'importance de la queue de poly(A) dans la répression des ARNm par le biais de miARNs pendant le développement. Nos résultats démontrent que suite à l'incubation de l'ARN avec l'extrait de C. elegans, nos gènes rapporteurs de luciférase-miARN ont commencé à être déadénylés après 20 minutes. Ce procédé est dépendant des Argonautes ALG-1 et ALG-2. On a aussi détecté la présence d'un deuxième ARN intermédiaire plus court après deux heures d'incubation de l'ARNm ciblé avec l'extrait. L'apparition de cet intermédiaire est indépendante du cap m7GTP, indiquant une voie de dégradation 3'->5'. On présente également un essai de déadénylation pour examiner les ARNm endogènes ciblés par la famille des miARNs maternelles, miR-35-42. Cette famille de miARNs est exprimée abondamment dans l'embryon et est essentielle pour l'embryogenèse. On a identifié un membre de la famille tolloid/BMP-1, toh-1, comme un ARNm ciblé et déadénylé. Le pro-apoptotique egl-1 a aussi été identifié comme un ARNm ciblé de la famille miR-35-42 ainsi que de miR-58, un miARN exprimé zygotiquement. Nos résultats démontrent$

Glycolysis is a key metabolic pathway that is fundamental to the ability of organisms to assimilate carbon sources. Transcriptional control is a significant mechanism of regulation of glycolysis, although the transcription factors controlling this process in eukaryotes are largely unknown outside the facultative anaerobe Saccharomyces cerevisiae. Since S. cerevisiae exhibits a uniquely fermentative lifestyle due to an evolutionarily-driven glucose repression circuit, carbohydrate regulation needs to be studied in aerobic species such the facultative aerobe Candida albicans. This human pathogen is known to rely on glycolysis for the progression of systemic infections. In this thesis I 1) validate constructs that can be used for location profiling in C. albicans, 2) demonstrate the conservation of protein-protein interactions between the SAGA chromatin remodeling complex and Gal4p even though Gal4p has altered its role within the Saccharomycotina subphylum, and 3) characterize two key glycolytic regulators in C. albicans, demonstrating their importance for fermentative growth and virulence. My findings further illustrate the plasticity of regulatory circuits and highlight differences in the regulation of carbohydrate metabolism between S. cerevisiae and aerobic eukaryotic cells. / La glycolyse est une voie métabolique fondamentale chez de nombreux organismes pour l'assimilation de carbones provenant de différentes sources. Bien que la régulation transcriptionelle représente le premier régulateur, et sûrement le principal, sa coordination est largement méconnue en dehors de la levure model Saccharomyces cerevisiae. Toutefois, cette levure anaérobique facultative a acquit au cours de son évolution des capacités fermentatrices uniques résultantes, et entraînées par, une diminution du glucose environnant. Contrastant avec S. cerevisiae, la régulation de la voie métabolique de carbohydrates est largement méconnue chez les organismes aérobic facultatif tel que Candida albicans. L'étude de la glycolyse chez ce pathogène opportuniste humain revête aussi un intérêt supplémentaire puisqu'il a été démontré que cette voie métabolique était requise lors des infections systémiques. Dans le présent mémoire, je 1) validerais l'utilisation d'outils permettant la localisation génomique chez C. albicans, 2) prouverais les interactions protéiques entre le complexe de remodelage de la chromatine SAGA et le facteur de transcription Gal4p et ce malgré le recablage fonctionnel de Gal4p chez les Saccharomycètes, et 3) définirais deux nouveaux régulateur de la glycolyse et démontrerais leurs importance dans la fermentation et la virulence de C. albicans. Finalement, l'ensemble de ces résultats illustrent les recablage transcriptionel et leurs importances évolutives tout en soulignant les différentes approches utilisées chez les eucaryotes pour réguler une voie métabolique aussi fondamental que la glycolyse. fr

As the key organ in the endocrine system, the pituitary has long been the subject of intense scientific questioning. From the characterization of pituitary hormones to the understanding of the mechanisms controlling their release, the study of the pituitary yielded great discoveries, some being awarded a Nobel prize. More recently, the transcriptional control of genes encoding pituitary hormones was the object of much attention. In that context, our laboratory described the function of Tpit and NeuroD1 in the control of POMC-expressing cell differentiation and POMC cell-specific transcription and regulatory mechanisms. These two important genes do not suffice however to explain every aspect of POMC cell differentiation. We thus undertook the systematic screening of the developing and adult pituitary transcriptome in a search for novel transcriptional regulators. Using state of the art bioinformatic tools, we observed the concerted variations of biologically relevant gene groups as the organ develops and matures. Using a candidate gene approach, we identified new transcription factors expressed in POMC lineages. We describe for the first time the expression of Etv1, an Ets-domain containing factor, in the pituitary. We showed that Etv1 expression is specific to POMC cells and that it is important for activation of Pomc transcription in collaboration with Tpit and Pitx1. Furthermore, we demonstrated the melanotroph-specific expression of Pax7 in the pituitary, establishing a clear distinction between the two Pomc-expressing lineages at the transcriptional level. Using Pax7 knock-out mice, we determined the impact of this transcription factor on the genetic program of Pomc cells. Pax7 plays a major role in activating melanotroph genes and repressing corticotroph genes. In summary, our bio-informatic analysis yielded extremely relevant data with regard to pituitary development, particularly through the elucidation of key critical roles for Etv1 and Pax7 in Pomc cell biology. / Organe clé du système endocrinien, l'hypophyse est depuis longtemps le centre d'un inépuisable intérêt scientifique. De la caractérisation des hormones qu'elle produit à la compréhension des mécanismes qui contrôlent leur libération, les intenses investigations dont elle a été l'objet ont par le passé fait l'objet d'un prix Nobel.Plus récemment dans ce domaine, l'attention s'est concentré sur l'étroit contrôle transcriptionnel auquel sont assujettis les gènes qui codent pour les hormones hypophysaires. Notre laboratoire a précédemment défini les rôles de Tpit et NeuroD1 dans la transcription du gène de la Pomc et dans la différenciation des cellules qui l'expriment. Ces deux régulateurs transcriptionnels n'expliquent cependant pas à eux seuls tous les mécanismes de la différentiation des cellules Pomc. Nous avons donc entrepris un crible systématique du transcriptome hypophysaire durant le développement et dans la glande adulte à la recherche de nouveaux régulateurs transcriptionnels. À l'aide d'outils bio-informatiques, nous avons observé à l'échelle génomique des variations concertées de groupes de gènes biologiquement pertinents pour le développement et la maturation de l'hypophyse. Une approche de type « gène candidat » nous a permis d'identifier de nouveaux facteurs de transcription propres aux cellules Pomc-positives. Tout d'abord, nous avons démontré pour la première fois l'expression de Etv1, un facteur à domaine Ets préférentiellement exprimé dans les cellules Pomc dans l'hypophyse. Etv1 s'est révélé être un important activateur transcriptionnel de Pomc en collaboration avec Tpit et Pitx1. Par ailleurs, nous avons démontré l'expression spécifique de Pax7 dans les cellules mélanotropes de l'hypophyse, établissant ainsi les bases transcriptionnelles de la différence entre les deux lignées qui expriment la Pomc. À l'aide de la souris inactivée pour Pax7, nous avons montré l'impact de ce facteur sur le programme génétique des cellules Pomc. Pax7 joue un rôle majeur à la fois dans l'activation des gènes mélanotropes et dans la répression des gènes corticotropes. En résumé, notre analyse bio-informatique s'est révélée riche en données extrêmement pertinentes pour la compréhension de la biologie hypophysaire, comme le montre la description du rôle de Etv1 et de Pax7 dans la biologie des cellules Pomc.

The von Hippel Lindau protein (pVHL) is a tumor suppressor that is known to play an important role in clear cell renal cell cancer (ccRCC) development. Many efforts towards understanding the role of pVHL in ccRCC have focused on characterizing its function in HIF degradation and extracellular matrix (ECM) remodeling. The purpose of the current study was to characterize the molecular mechanism by which pVHL regulates assembly of the ECM. To this end, we defined three objectives. First, we sought to determine if pVHL's role as a ubiquitin ligase was independent of its role as a regulator of ECM assembly. Second, in the hope of mimicking the defective ECM that is observed in pVHL null cells, we down-regulated type IV collagen in cells expressing wild type pVHL and then measured the ability of these cells to invade ECM in vitro. Lastly, we aimed to identify the specific binding site of pVHL on alpha 2 collagen type IV. Based on our results, we were able to conclude that pVHL's ubiquitin ligase function is independent of its function in ECM regulation. We also found that decreasing type IV collagen in 786-0 cells resulted in a decreased ability of these cells to invade the ECM. Lastly, we determined that pVHL binds to a 120kDa COL4A2 species. / La protéine von Hippel Lindau (pVHL) est un suppresseur de tumeur qui joue un role intégrale dans le développement de ccRCC. À date, plusieurs efforts ont été dirigés pour mieux comprendre ce role en tant que charactérizer sa function dans la dégradation de HIF et durant le processus de remodeler de la matrice extra-cellulaire (MEC). Le but de notre recherche était de charactérizer le méchanisme moléculaire par laquelle pVHL règle l'assemblée de la MEC. Pour attainder ce but, nous avons établis trois objectifs. Premièrement, nous avons voulu cerner si le role dont pVHL joue comme ubiquitine-ligase est indépendant de son role comme régleur de l'assemblée de la MEC. Deuxièmement, dans l'espoir de mimer la MEC défectueuse qui est observée avec les cellules qui n'expriment pas pVHL, nous avons diminué l'expression de collagène type IV dans les cellules dans lesquels pVHL est exprimé et nous avons mesuré la capacité de ces cellules à envahir une matrice artificielle. Finalement, nous avons visé à identifier le site d'intéraction spécifique de pVHL sur COL4A2. Nous étions capables de conclure que l'activité de ligase associée avec pVHL fonctionne indépendamment de sa fonction dans la régulation de la MEC. Nous avons aussi trouvé qu'en diminuant l'expression de collagène type IV dans les cellules 786-0, nous avons réussi à diminuer la capacité de ces cellules à envahir la MEC. Finalement, nous avons trouvé que pVHL intéragit avec un morceau de COL4A2 de 120kDa.

CDP/Cux/Cut proteins are expressed as a 200 kDa protein that show transient interaction with DNA and repress transcription. In G1/S of the cell cycle p200 CUX1 is cleaved to p110 CUX1 and activates transcription of DNA replication and cell cycle progression genes. Following completion of S-phase, CUX1 is phosphorylated by cyclin A/CDK1 resulting in inhibition of DNA binding. Constitutive over-expression of p110 CUX, as seen in may tumor and cancer cell lincs, shortens the time that cells spend in G1 phase. In one part of this study we investigated the post-translational regulation of CUX1 through mitosis and the subsequent G1 phase. Using SDS-PAGE, EMSA and mutational analysis we showed that CUX1 is hyper-phosphorylated on 10 or more serine residues in mitosis by cyclin B/CDK1 resulting in complete inhibition of DNA binding. Following cell division and formation of the nuclear membrane residual CUX1 molecules are de-phosphorylated and imported back into the nucleus. In another part of this study we investigated mechanism of how p110 CUX1 shortens the G1 phase of the cell cycle. Using a cell free replication assay we demonstrated that over-expression of p110 CUX1 reduces the time needed for pre-RC complex formation thus, shortening the G1 phase. We hypothesize that the effect of p110 CUX1 is mediated through global over-expression of genes encoding both the protein subunits that form the pre-RC complex and their activating kinases. / Les protéines CDP/Cux/Cut sont une famille de facteurs de transcription métazoaires qui contiennent un domaine du type "homeodomain" et 3 domaines "Cut repeats" et sont sujets à une régulation post-translationnelle dépendant du cycle cellulaire. L'isoforme de pleine longueur p200 CUX1 est déphosphorylé et coupé par une réaction protéolytique pour donner l'isoforme p110 durant la fin de la phase G1, menant à l'activation transcriptionnelle de gènes impliqués dans la progression du cycle cellulaire et la réplication de l'ADN. Après la phase S, CUX1 est phosphorylé par cyclin A/CDK1 pour la durée de la phase G2 afin de bloquer sa liaison à l'ADN et de réduire son activité transcriptionnelle. La surexpression de p110 CUX1, observée dans plusieurs tumeurs et lignées cellulaires cancéreuses, accélère la prolifération des cellules en réduisant la durée de la phase G1. Dans une partie de cette étude, nous avons investigué la régulation post-translationnelle de CUX1 durant la mitose et la phase G1 du cycle subséquent. Nous avons démontré que CUX1 est hyper-phosphorylé sur au moins 10 résidus sérine durant la mitose par cyclin B/CDK1, résultant en une inhibition complète de la liaison à l'ADN. Suivant la division et la formation d'une nouvelle membrane nucléaire, les molécules CUX1 restantes sont déphosphorylées et réintroduites dans le noyau. Dans une autre partie de cette étude, nous avons investigué le rôle de p110 CUX1 dans l'initiation de la réplication de l'ADN lors de la sortie de quiescence des cellules. Nous avons démontré que la surexpression de p110 CUX1 réduit le temps nécessaire à la formation du complex de pré-réplication et la réplication d'ADN qui s'en suit. Nous posons l'hypothèse que l'effet de p110 CUX1 est accompli par l'activation de l'ensemble des protéines qui composent le complex de pré-réplication et des kinases qui activent la réplication de l'ADN.