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Efeito da fonte protéica durante o cultivo na qualidade e quantidade de embriões bovinos produzidos in vitroLeme, Ligiane de Oliveira 18 August 2008 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Thaíza da Silva Santos (thaiza28@hotmail.com) on 2010-02-27T05:31:25Z
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Previous issue date: 2008-08-18 / O sucesso da PIV está relacionado ao conhecimento das necessidades dos gametas e embriões em diferentes fases do desenvolvimento. É conhecido que embriões PIV são diferentes dos embriões in vivo em vários aspectos. As diferenças entre os dois modelos têm sido pesquisadas na tentativa de tornar os meios artificiais o mais próximo possível ao ambiente natural do embrião. Para tanto, a viabilidade desses embriões (in vivo ou in vitro, oriundos de distintos sistemas de produção) pode ser mensurada por ferramentas diversas, tais como a criotolerância, a análise do metabolismo, os níveis e a expressão de genes. A suplementação protéica dos meios de cultivo tem sido amplamente discutida, na busca pela utilização de meios definidos, onde há o conhecimento da sua composição, possibilitando a eliminação ou acréscimo de produtos benéficos ao embrião, sem que ocorra influência de fatores inerentes desconhecidos do meio – características normalmente atribuídas aos componentes séricos, os quais são mais comumente utilizados, em especial o Soro Fetal Bovino (SFB) e a Albumina Sérica Bovina (BSA). Neste estudo, os efeitos do SFB e da BSA-faf durante a PIV de embriões bovinos, foram investigados quanto à quantidade na produção de blastocistos e em termos de qualidade, quando submetidos à vitrificação e análise de expressão gênica. Foram maturados, fecundados e cultivados in vitro 2.171 ovócitos, oriundos de abatedouro. Em cada réplica, os CCOs foram distribuídos em três tratamentos (T1: suplementação com SFB; T2: suplementação com BSA; T3: suplementação inicial com BSA e final com SFB.). Quanto à taxa de clivagem (D2), não houve diferença entre os tratamentos; porém quanto às taxas de blastocisto, T1 foi superior aos T2 e T3 nos dias 6,5 a 8,5 de avaliação (P<0.001). Os embriões de todos os tratamentos que alcançaram estágio de BL e/ou BX (total de 507 embriões) nos dias 6,5 e 7,5 foram separados e, 50% deles, vitrificados pelo método da OPS, descongelados, retornando então ao CIV, e observados às 24, 48 e 72 horas pós-vitrificação; os outros 50% dos embriões permaneceram como grupo controle. Para esta análise, foram consideradas re-expansão e eclosão das estruturas analisadas como parâmetro de avaliação, mediante os fatores tratamento (T1 vs. T2 e T3), grupo (C vs. V), estágio embrionário (BL vs. BX) e tempo (D6,5 vs. D7,5). Em suma, os resultados para o teste de criotolerância foram: T1=T2>T3; C>V; BX>BL; D6,5>D7,5. Quatro pools com 9 blastocistos eclodidos do grupo controle em D8,5, de cada tratamento, foram formados para avaliação da expressão dos genes MnSOD, Bax, BCL-2, HSP-70, CIRP-b, ACAT-2 e ATP8A1. Para normalização dos dados, foram utilizados os genes constitutivos Actina e GAPDH. A expressão da maioria dos genes não foi significativamente diferente entre T1 e T2, exceto para o ACAT-2 – o qual se diferenciou devido à composição protéica do meio. A menor expressão significativa no T3, pode indicar uma condição sub-ótima deste meio à PIV de embriões. A suplementação com SFB produziu mais embriões e com qualidade semelhante a aqueles produzidos em suplementação de BSA-faf. É possível, portanto, concluir que os componentes séricos presentes no soro não afetaram os parâmetros analisados neste estudo. Possíveis efeitos no desenvolvimento embrionário avançado e fetal, bem como a variação entre as partidas de soro, devem ser analisados em outros experimentos.
_________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The embryo IVP success is related to the knowledge of main requirements from gametes and embryos in different stages of development. It is well known that IVP embryos are quite different of those counterparts in vivo in many aspects. Dissimilarity between both has been studied in tempting to turn artificially mediums mostly similar to embryo natural environment. For that, viability of these embryos (in vivo or in vitro, from diverses systems of production) may be measured by a variety of tools, such as cryotolerance, metabolism analysis, genes levels and expression. Protein medium supplementation in cultive has been largely discussed as well, aiming the substitution for defined components, where there is comprehension of its composition, eliminating or adding benefic products to the embryo in this way, without existing unknown factors in it – characteristics usually attributed to serum components, whose most used are Bovine Calf Serum (FCS) and Bovine Serum Albumin (BSA). In this study, the effects of FCS being substituted total or partially by BSA-faf during bovine embryos IVP, were investigated to quantity (blastocysts rate) and quality, when submitted to vitrification and gene expression analysis. Two thousand one hundred seventy one (2.171) oocytes obtained from abattoir ovary were matured, fertilized and cultured in vitro. In each replicate, CCOs were distributed in three treatments: (T1: supplementation with FCS on IVM and IVC; T2: supplementation with BSA on IVM and IVC; T3: supplementation with BSA on IVM and at the beginning of IVC and FCS, at the end of IVC). For cleavage rates (D2), there were no difference among treatments; therefore for blastocysts rates, T1 was superior to T2 and T3 on days 6.5 to 8.5 of development evaluation (P<0.001). Embryos from all treatments which have reached BL and/or BX stage (507 embryos, in total) were separated and, 50% of them, vitrified by OPS method, post-thawed, returning then to IVC, and observed at 24, 48 and 72 hours post-vitrification; other 50% remaining embryos were preserved as control group. For these analysis, were considered structures re-expansion and hatching rates as a parameter to evaluate factors as treatment (T1 vs. T2 and T3), groups (C vs. V), embryo development stage (BL vs. BX) and time (D6.5 vs. D7.5). At a glance, results for cryotolerance test related to these parameters were: T1=T2>T3; C>V; BX>BL; D6.5>D7.5. Four pools with 9 hatched blastocysts from Control group on D8.5, from each treatment, were formed to evaluate the expression of genes MnSOD, Bax, BCL-2, HSP-70, CIRP-b, ACAT-2 and ATP8A1. To standardize data, the constitutive genes, Actina and GAPDH, were taken. The majority genes expressions were not significantly different between T1 and T2, except for ACAT-2 – who might be due to the medium protein source composition. The smaller and significant expression on T3, should indicate a suboptimal condition of this medium to embryo IVP. The supplementation with FCS produced more embryos with similar quality to those originated from BSA-faf supplementation. It is possible therefore, to conclude that serum components do not affected the parameters analyzed here, in this working environment. Possible effects in late embryo and fetal development, as well as variation among serum batches, should be verified in other experiments.
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Análise crítica do método de produção "in vitro" e tranferência de embriões bovinos a partir de oócitos captados "in vivo" e maturados em meio comercial e meios patenteadosSilva, Lair Gabriel da Rosa e January 2013 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-11-29T14:31:37Z
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2013_LairGabrieldaRosaeSilva.pdf: 2573372 bytes, checksum: f687a55bdeccb609ae152ae658fd76f3 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-12-05T13:23:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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2013_LairGabrieldaRosaeSilva.pdf: 2573372 bytes, checksum: f687a55bdeccb609ae152ae658fd76f3 (MD5) / A técnica de produção in vitro de embriões (PIVE) refere-se a uma série de procedimentos in vitro, maturação (MIV), fertilização (FIV) e cultura do zigoto (CIV), necessárias para produzir embriões a partir de oócitos imaturos. Para avaliar a viabilidade e a competência do embrião é evidente que a transferência deste para fêmea receptora (TE) e a análise do neonato é o que vai definir a real efetividade dos processos de PIVE. O nosso objetivo é a montagem e padronização das técnicas de PIVE e TE, validação das técnicas in vitro pela produção de embriões provenientes de oócitos captados por aspiração folicular e maturados em meio TCM-199; e oócitos de matadouro maturados em meios testes de α-MEM e controle comercial. Em busca de melhores condições de cultura e de um sistema in vitro que fosse menos variável e, ao mesmo tempo, que simulasse a maturação do oócito observada no animal in vivo, desenvolvemos vários sistemas de cultura para a MIV, nos quais meios definidos foram formulados, testados e alguns patenteados. Os meios foram: α-MEMC, α-MEMB e α–MEMO. O primeiro meio, mais complexo, utiliza hormônios e agentes oxidantes, o segundo meio, não contém hormônios e o terceiro é composto pelo diluente. Ao serem comparados com o meio controle TCM-199, inibiram a maturação nuclear, produziram menor grau de poliespermia (α-MEMC), produziram a mesma porcentagem de embriões. FSH de suíno foi usado nos meios α-MEMB e α–MEMO e não houve diferenças na porcentagem de embriões produzidos calculados com base no número de oócitos. Estes experimentos foram realizados com ovários provenientes de abatedouros. In vivo foram coletados 600 oócitos de doadoras mestiças girolandas, maturados no meio controle TCM-199, sendo os embriões transferidos para as fêmeas receptoras aneloradas, previamente escolhidas, e preparadas por protocolo hormonal para a sincronização do cio e avaliadas com ultrassom para receber o embrião de FIV. Os demais embriões formados nos meios testes foram congelados para estudos futuros de expressão de gens de competência e viabilidade e epigenética. Após a TE as fêmeas receptoras foram monitoradas e avaliadas 30 e 90 dias após PIVE para verificar a taxa de gestação; sendo confirmada a prenhez, as fêmeas receptoras foram separadas para acompanhamento da gestação até o momento do parto. As taxas de prenhez foram de 40%, as de nascimentos 25% e de neonatos saudáveis 20%, valores iguais ou maiores dos relatados na literatura. De maneira importante, a metodologia apresentada neste trabalho é a parte prática realizada in vivo, que envolve a captação de oócitos por aspiração folicular, a preparação da receptora, a transferencia dos embriões de PIVE, a avaliação da prenhez e do neonato; representam uma alternativa viável para serem utilizadas em experimentos futuros e para a aplicação comercial. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The technique of production in vitro embryos (PIVE) refers to a series of procedures in vitro maturation (IVM), fertilization (IVF) and zygote culture (MIC) needed to produce embryos from Immature oocytes. To assess the viability and competence of the embryo is evident that this transfer to recipient female (TE) and the analysis of the neonate is what will define the actual process effectiveness PIVE. Our goal is the assembly and standardization of techniques and PIVE TE, and validation techniques in vitro by the production of embryos from oocytes by ovum and matured in TCM-199; slaughterhouse and oocytes matured in means tests of α-MEM and commercial control. In search of a better culture and a system in vitro that was less variable and at the same time, to simulate oocyte maturation observed in animal in vivo, developed several systems for IVM culture, in which defined media were formulated, tested and patented some. The means were: MEMC-α, α-MEMB and α-MEM. The first half, more complex, uses oxidizing agents hormones and the second half contains no hormones and the third consists of the diluent. To be compared with the control medium TCM-199, inhibited nuclear maturation, produced a low degree of polyspermy (α-MEMC), produced the same percentage of embryos. FSH pig was used in the media and MEMB α-α-MEM and there were no differences in the percentage of embryos produced calculated based on the number of oocytes. These experiments were performed with ovaries from slaughterhouses. In vivo 600 oocytes were collected from crossbred donors Girolanda, matured in control medium TCM-199, and the embryos transferred (ET) for females receiving graded Nelore, previously chosen and prepared by hormonal protocol for synchronization of estrus and evaluated with receiving ultrasound to IVF embryos. The remaining embryos formed in means tests were frozen for future studies of expression of genes of competence and viability and epigenetics. After receiving TE females were monitored and evaluated 30 and 90 days after PIVE to verify pregnancy rate, pregnancy is confirmed, the recipient females were separated for the monitoring of pregnancy until delivery. Pregnancy rates were 40%, the 25% of births and 20% of healthy neonates, equal or higher values reported in the literature. Importantly, the methodology presented in this paper is the practical performed in vivo, which involves the collection of oocytes by ovum, the preparation of the recipient, the transfer of embryos PIVE, assessment of pregnancy and the newborn, represent a viable alternative for use in future experiments and for commercial application.
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Parâmetros genéticos para características de crescimento de fêmeas bovinas do nascimento à idade adultaPortes, Juliana Varchaki January 2016 (has links)
Orientador : Profª. Drª. Laila Talarico Dias / Co-orientadora : Profª. Drª. Joslaine N. S. G. Cyrillo / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Zootecnia. Defesa: Curitiba, 24/03/2016 / Inclui referências : f. 26-29;42-44;58-60;73-76;88-91 / Área de concentração : Meio ambiente / Resumo: Os programas de melhoramento de gado de corte no Brasil têm priorizado a seleção para características de crescimento por serem medidas de fácil obtenção e herdáveis porém, existem poucas informações após os dois anos de idade, o que dificulta a avaliação do tamanho adulto dos animais. O objetivo geral desta dissertação de mestrado foi estimar os parâmetros genéticos para características de crescimento do nascimento à idade adulta de vacas de corte. O Capítulo 1 apresentou a revisão bibliográfica sobre as diferentes metodologias para avaliação de características longitudinais, além de trabalhos já realizados com informações de crescimento de fêmeas bovinas. No Capítulo 2, intitulado "Estimativas de herdabilidade para pesos do nascimento aos 10 anos de idade em fêmeas bovinas", o objetivo foi estimar os coeficientes de herdabilidade do peso do nascimento aos 10 anos de idade de fêmeas das raças Caracu, Gir, Guzerá e Nelore. Para tanto, o modelo da análise contemplou os efeitos fixos do grupo de contemporâneos (rebanho e ano de nascimento), mês de nascimento e produto anterior (se a fêmea havia parido = 1 ou não = 0), as covariáveis linear e quadrática da idade da mãe e do animal, além dos efeitos aleatórios genético aditivo direto, materno e de ambiente permanente materno. As herdabilidades obtidas variaram entre 0,29 ± 0,06 e 0,49 ± 0,06 para o peso ao nascer, entre 0,12 ± 0,05 e 0,24 ± 0,09 para desmama, de 0,25 ± 0,07 a 0,37 ± 0,05 para o peso ao sobreano, e para pesos dos 2 aos 10 anos de idade variaram entre 0,25 ± 0,07 e 0,69 ± 0,11, para as diferentes raças. Concluiu-se que, devido às estimativas herdabilidade de moderada a alta, há possibilidade de progresso genético para as características de crescimento, podendo utilizá-las como critério de seleção para monitorar o peso desejado das vacas de corte. O Capítulo 3, "Estimativa de parâmetros genéticos para pesos de vacas Nelore por meio de modelos de regressão aleatória", teve como objetivo estimar funções de (co)variância utilizando modelos de regressões aleatórias para pesos de fêmeas Nelore de 1 a 8 anos de idade. Os modelos incluíram como fixos, o efeito de grupo de contemporâneos e estado fisiológico da vaca para prenhez (0 = vazia; 1= prenha) e lactação (0 = seca; 1 = lactante) e, a idade da vaca ao parto (efeito linear e quadrático) e polinômio ortogonal de Legendre da classe de idade do animal (regressão cúbica), como covariáveis, além dos efeitos aleatórios genético aditivo direto e o efeito de ambiente permanente de animal e materno. Polinômios de sexta a terceira ordem foram considerados para modelar o efeito genético aditivo direto e de ambiente permanente de animal e materno. O resíduo foi modelado considerando homogeneidade e heterogeneidade de variâncias. Realizou-se a comparação dos modelos pelos critérios de informação Bayesiano de Schwarz (BIC) e de Akaike (AIC). O modelo que considerou polinômios k = 3 para o efeito genético aditivo direto, k = 6 para ambiente permanente de animal e k = 1 para o efeito de ambiente permanente materno foi indicado como o melhor pelo critério BIC. As estimativas de herdabilidade do efeito genético direto e as correlações genéticas entre as pesagens obtidas por modelos de regressão aleatória foram de moderada a alta magnitude, sugerindo a possibilidade de ganho através de seleção, com isso pode-se adotar a característica para manutenção do tamanho adulto dos animais. O Capitulo 4, intitulado "Estimativa de parâmetros genéticos para altura de vacas Nelore por meio de modelos de regressão aleatória", objetivou estimar funções de (co)variância por meio de modelos de regressões aleatórias para altura de garupa de fêmeas Nelore de 1 a 8 anos de idade. O modelo da análise utilizou os mesmos efeitos considerados para peso, conforme apresentado anteriormente, com exceção do efeito fixo do estado fisiológico da fêmea. O modelo que considerou polinômios k = 4 para o efeito genético aditivo direto e k = 3 para ambiente permanente de animal foi o mais adequado para estimar as variâncias da curva de crescimento. As estimativas de herdabilidade do efeito genético direto e as correlações genéticas entre as mensurações obtidas por modelos de regressão aleatória foram de alta magnitude, indicando que a utilização da altura como critério de seleção pode ser adequado para manutenção do tamanho adulto dos animais. Por fim, o Capítulo 5, intitulado: "Estimativas de parâmetros genéticos para características de crescimento em rebanhos Seleção e Controle de vacas Nelore", teve por objetivo estudar as diferenças existentes entre os rebanhos Seleção (NeS) e Controle (NeC) em relação aos parâmetros genéticos para peso e altura de fêmeas Nelore, de 1 a 8 anos de idade. Os modelos utilizados para as análises foram os obtidos nos Capítulos 3 e 4, diferenciando-se apenas na construção do grupo de contemporâneos que excluiu o efeito de rebanho, formando assim dois bancos de dados (Seleção - NeS; Controle - NeC) para cada característica estudada. Observou-se que após 30 anos de seleção para peso sobreano, ainda há variabilidade genética para peso corporal e também para a altura de garupa. As estimativas de herdabilidade para peso e altura variaram de moderada a alta magnitude e sugerem a possibilidade de ganhos genéticos por meio de seleção. Concluiu-se que mesmo após 30 anos de seleção para peso ao sobreano, ainda há variabilidade genética para peso e altura indicando, dessa forma, a possibilidade de monitorar o tamanho adulto das vacas por meio de seleção direta. Palavras-chave: altura de garupa, curva de crescimento, dados longitudinais, gado de corte, herdabilidade, peso adulto. / Abstract: The beef cattle breeding programs in Brazil have prioritized the selection for growth traits to be measured easily obtainable and inheritable, but there is little information after two years old, making it difficult to evaluate the mature size of the animal. The general objective of this master's thesis was to estimate genetic parameters for characteristics of growth birth to maturity of beef cows. Chapter 1 presented a review of the different methodologies for evaluation of longitudinal characteristics, in addition to work already carried out with growth of information of cows. In Chapter 2, entitled "Estimates of heritability for birth weights at 10 years old in cows," the goal was to estimate the heritability coefficients of birth weight to 10 years old females of Caracu, Gir, Guzerá and Nelore. Therefore, the analysis model included the fixed effects of contemporary group (herd and year of birth), month of birth and previous product (if the female had calving = 1 or no = 0), the linear and quadratic covariates for age of mother and animal, in addition to the random effects direct additive genetic, and permanent environment animal and maternal. The heritability obtained ranged from 0.29 ± 0.06 and 0.49 ± 0.06 for birth weight, between 0.12 ± 0.05 and 0.24 ± 0.09 for weaning, 0.25 ± 0.07 to 0.37 ± 0.05 for yearling weight, and weights from 2 to 10 years of age ranged from 0.25 ± 0.07 and 0.69 ± 0.11 for the different breeds. It was concluded that due to the heritability estimates of moderate to high, there is the possibility of genetic progress for the growth characteristics and can use them as selection criteria to monitor the desired weight of beef cows. Chapter 3, "Estimation of genetic parameters for Nelore weights by random regression models", aimed to estimate functions of (co)variance using random regressions models for Nelore weights from 1 to 8 years old. The models included as fixed, the contemporary group effect and physiological state of the cow for pregnancy (0 = empty, 1 = pregnant) and lactation (0 = dry, 1 = in lactation) and the age at calving (linear effect and quadratic) and Legendre polynomials of animal age class (cubic regression) as covariates in addition to the random effects direct additive genetic and permanent environment animal and maternal. Sixth to third order polynomials were considered to model the direct additive genetic effect and permanent environment animal and maternal. The residue was modeled considering homogeneity and heterogeneity of variances. Was performed by comparison of the models Bayesian information criteria Schwarz (BIC) and Akaike (AIC). The model considered the polynomials k = 3 for the direct genetic effect, k = 6 for permanent environmental animal and k = 1 for the permanent environmental maternal effect was indicated as the best by BIC criteria. Heritability estimates of genetic direct effect and genetic correlations between weight measurements obtained by random regression models were moderate to high magnitude, suggesting the possibility of gain through selection, it can adopt the feature for maintenance of the mature size of the animals. The Chapter 4, entitled "Estimation of genetic parameters for height Nelore by random regression models", aimed to estimate functions of (co)variance using random regression models for hip height Nellore 1-8 years old. The model of analysis used the same effects considered for weight, as shown above, with the exception of the fixed effect of the physiological state of the female. The model considered the polynomial k = 4 for the direct genetic effect and k = 3 for animal permanent environment was the most appropriate to estimate the variances of the growth curve. Heritability estimates of direct genetic effects and genetic correlations between measurements obtained by random regression models were of high magnitude, indicating that the use of the height as a selection criterion may be suitable for maintenance of the mature size of the animal. Finally, Chapter 5, entitled "Estimates of genetic parameters for growth traits in Selection and Control Nelore cattle ", aimed to study the differences between the herds Selection (NeS) and Control (NeC) in relation to genetic parameters for weight and height of Nelore, from 1 to 8 years old. The models used for the analysis were obtained in Chapters 3 and 4, differing only in the construction of contemporary group that excluded the herd effect, thus forming two databases (Selection - NeS; Control - NeC) for each feature studied. It observed that even after selection for yearling weight, there is genetic variability for body weight and also to the hip height. The heritability estimates for weight and height ranged from moderate to high magnitude and suggest the possibility of genetic gains by selection. It was concluded that even after 30 years of selection for yearling weight, there is genetic variation for height and weight indicating, thus, the ability to monitor the mature size of cows through direct selection. Keywords: beef cattle, growth curve, heritability, hip height, longitudinal data, mature weight.
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Perfil da expressão de genes candidatos para aquisição da competência durante o crescimento ovocitário em bovinos / Expression profile of candidates genes for the acquisition of competence during oocyte growth in bovineBessa, Isabela Rebouças 27 May 2011 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2011. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2011-11-01T11:35:24Z
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2011_IsabelaReboucasBessa.pdf: 1322125 bytes, checksum: 4474d6fb57a2955d26b304bb4411576e (MD5) / Approved for entry into archive by Leila Fernandes (leilabiblio@yahoo.com.br) on 2011-12-13T11:20:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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2011_IsabelaReboucasBessa.pdf: 1322125 bytes, checksum: 4474d6fb57a2955d26b304bb4411576e (MD5) / O objetivo do presente estudo foi estudar o perfil da expressão de genes candidatos
para a aquisição da competência durante o crescimento ovocitário em bovinos utilizando
ovócitos de diferentes tamanhos provenientes de várias categorias de folículos. Os genes
candidatos foram selecionados por estarem possivelmente envolvidos com a aquisição da
competência (BMP15, OOSP1, H1FOO, H2A, H3A, H4, SLBP, DNMT1, DNMT3B, HAT, HDAC e SUV39H1). Para determinar o tamanho dos ovócitos a serem utilizados, foi realizado um pré- experimento, em que os folículos pré-antrais foram classificados orfologicamente, agrupados em diferentes categorias em primordial, primário, secundário inicial e secundário final. Após a classificação, os ovócitos de cada folículo foram individualmente isolados e medidos. Folículos pré-antrais e antrais foram isolados de ovários de vacas Nelore (Bos taurus indicus), por dissociação mecânica utilizando o Tissue Chopper. Para o isolamento dos ovócitos, os folículos foram expostos à colagenase tipo II (0,5 mg/ml) e
então submetidos a sucessivas pipetagens. Os ovócitos foram medidos através do programa
Motic images Plus 2.0 e classificados de acordo com seu diâmetro nas seguintes categorias: 1) ovócitos de folículos primordiais: diâmetro de até 20 μm; 2) ovócitos de folículos primários: 25 a 35 μm; 3) ovócitos de folículos secundários iniciais: 40 a 60 μm e 4) ovócitos de
folículos secundários finais; 65 a 85 μm. Para a obtenção dos ovócitos oriundos de folículos antrais incompetentes e competentes, foram utilizadas as medidas de 100 a 120 μm e acima de 128 μm respectivamente. O RNA total foi extraído de 4 pools de 25 ovócitos, de cada categoria de folículo, e os transcritos dos genes foram quantificados por qPCR. Os valores de expressão dos genes alvos foram normalizados pela expressão do gene constitutivo CYC A.
Os resultados foram analisados através do teste não paramétrico Kruskall Wallis, para comparar os tamanhos de folículos e ovócitos e avaliar o efeito do tamanho do ovócito na
quantidade de expressão gênica. O nível de significância considerado foi P<0,05. Os
resultados mostraram que os transcritos da H2A, H3, H4 e SUV39H1 não diferiram (P>0,05)
entre os grupos de ovócitos de folículos antrais e pré-antrais. A expressão da OOSP1, SLBP, BMP15, H1FOO, DNMT1, DNMT3B e HAT foram menores (P<0,05) em ovócitos préantrais
quando comparados com os de folículos antrais. A H3A foi o único gene em que foi
detectado a expressão de RNAm em ovócito de folículo primordial. De todos os genes
estudados, apenas a HDAC apresentou diferença significativa entre ovócitos de folículos antrais competentes e incompetentes. Os resultados sugerem que o acúmulo dos estoques dos genes analisados ocorre antes do estágio final da folículogênese e provavelmente não são
marcadores para a competência. A HDAC foi o único gene que pode estar relacionado à
competência do ovócito, pois mostrou uma diminuição (P<0,05) no nível de transcrito nos grupos de ovócitos competentes quando comparados com o grupo de antrais iniciais (1a 3mm). ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of this present study was investigate the expression profile of candidates genes for the acquisition of competence during oocyte growth in bovine using oocytes from different sizes obtained from several follicle categories. The candidate genes were selected to be possibly involved in competence (BMP15, OOSP1, H1FOO, H2A, H3A, H4, SLBP, DNMT1, DNMT3B, HAT, HDAC e SUV39H1). A pre-experiment was conducted to classify the follicles according to their categories in primordial, primary, small secondary and final secondary follicles. Then the oocytes were individually isolated and measured. Preantral and antral follicles were isolated from ovaries of Nelore (Bos taurus indicus) cows by mechanical dissociation using a Tissue Chopper. To isolate the oocytes, follicles were exposed to collagenase type II solution (0.5 mg/ml) and then submitted to successive pipetting. The oocytes were measured with Motic Images Plus 2.0 program and classified according to their diameter into the following categories: 1) oocytes from primordial follicle: diameter < 20 μm; 2) oocytes from primary follicles: 25 to 35 μm; 3) oocytes from small secondary follicles: 40 to 60 μm; 4) oocytes from final secondary follicles: 65 to 85 μm; 5) oocytes from early antral
follicles: 100 to 120 μm; and 6) oocytes from final antral follicles: > 128 μm. Total RNA was extracted from 4 pools of 25 oocytes from each category of follicles using Rneasy Plus® kit, subjected to reverse transcription reaction and genes quantified by qPCR. Target gene expression was normalized using CYC A. Data were analyzed using Kruskal-Wallis test for values which were not normally distributed. Level of significance was considered P<0.05. The results show that the transcripts of H2A, H3A, H4 e SUV39H1 did not differ significantly between groups, showing the same pattern from preantral to antral follicles. For OOSP1, SLBP, BMP-15, H1FOO, DNMT1, DNMT3B and HAT, the pattern of expression was lower in oocytes from preantral follicles when compared to antral follicles. The H3A was the only gene in which expression was detected in oocytes from primordial follicles. From all the studied genes, only HDAC differed significantly between incompetent and competent oocytes. These results suggest that the stocks of transcripts of the studied genes are accumulated before the final phase of folliculogenesis. The HDAC was the only gene in which expression could be related to oocyte competence since it showed a decrease (P<0.05) in transcript levels from final antral oocytes (competent) compared to small antral group.
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Eficiência bioeconômica de bovinos da raça nelore e f1 Nelore X Brahman, sob três regimes alimentares em confinamento / Bio-economy efficiency of nelore cattle and f1 nellore x brahman, treated with three diets under feedlotMandarino, Raphael Amazonas 05 January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2012. / Submitted by Gabriela Botelho (gabrielabotelho@bce.unb.br) on 2012-07-11T16:01:16Z
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2012_RaphaelAmazonasMandarino.pdf: 457216 bytes, checksum: de45d8ebe8ded89a7baa8a126d521370 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-07-13T12:16:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1
2012_RaphaelAmazonasMandarino.pdf: 457216 bytes, checksum: de45d8ebe8ded89a7baa8a126d521370 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-13T12:16:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1
2012_RaphaelAmazonasMandarino.pdf: 457216 bytes, checksum: de45d8ebe8ded89a7baa8a126d521370 (MD5) / O objetivo do trabalho foi mensurar o desempenho, consumo alimentar, a eficiência econômica e alimentar e as características quantitativas das carcaças de bovinos inteiros, com peso vivo inicial de 364 kg e idade média de 23 meses, pertencentes a dois grupos genéticos Nelore (NEL) e F1 Nelore x Brahman (NBR) sob três regimes alimentares em confinamento de alto concentrado. O experimento foi realizado em um delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2x3 com sete repetições. As dietas foram SIL (25:75 de volumoso:concentrado na MS), GRN (15% concentrado 85% milho inteiro), PEL (100% concentrado). O cruzamento NBR apresentou resultados semelhantes aos da raça NEL (P>0,05), com a exceção (P<0,05) da AOL e PVI. As dietas resultaram em desempenhos semelhantes quando às ingestões de alimento, rendimentos de carcaça e AOL (P>0,05), porém a dieta PEL obteve EF, GMD, PVF, GT e EG menores (P<0,05) quando comparada com as outras dietas. O cruzamento NBR teve resultados semelhantes ao NEL quanto à viabilidade econômica no confinamento demonstrando que este cruzamento é viável. Dentre as três dietas, a dieta PEL, apesar de não ser a dieta de maior custo em R$/kg, obteve o pior desempenho econômico. Todas as dietas apresentaram resultado positivo, ou seja, foram capazes de pagar os custos e remunerar o produtor. _________________________________________________________________________ ABSTRACT / The beef cattle in Brazil should seek and apply technologies that produce younger animals improving the meat quality and a lower production costs of a kilogram of meat. The use of diets of quality, high efficiency combined with the use of technology of crosses animals are plausible and easy to implement. The objective of this study was to measure the performance, feed intake, feed efficiency and economic and quantitative characteristics of the carcasses of bulls, with initial weight of 364 kg and average age of 23 months, composing two genetic groups of Nellore (NEL) and F1 Nellore x Brahman (NBR) treated with three diets of high concentrate under feedlot. The experiment was conducted in a completely randomized design in a 2x3 factorial with seven replicates. Diets were SIL (25:75 forage: concentrate in DM), GRN (15% concentrate 85% whole corn), PEL (100% concentrate). The crossing NBR showed similar results to breed NEL (P> 0.05), with the exception (P <0.05) ILW and REA. Diets resulted in similar performances of the food intake, carcass results and REA (P> 0.05), but the diet PEL obtained lower FE, ADG, FLW, TG and FT (P <0.05) compared with the other diets. The NBR animals had similar results to NEL in the economic viability of the feedlot showing that this intersection is feasible. Among the three diets, the PEL, although not the diet with the highest cost in US$ / kg, had the worst economic performance. All diets showed positive results, thus, they were able to pay the costs and pay the producer.
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Sincronização do estro e da ovulação após prévio uso de progesterona intravaginal e gonadotrofina coriônica equina em bovinos de corte visando à inseminação artificial em tempo fixo = Timing and ovulation estro after prior use of progesterone intravaginal and equine chorionic gonadotropin (eCG) in beef cattle aiming to fixed-time artificial insemination / Francisco Romano Gaievski ; orientador, Luiz H. Kozicki / Timing and ovulation estro after prior use of progesterone intravaginal and equine chorionic gonadotropin (eCG) in beef cattle aiming to fixed-time artificial inseminationGaievski, Francisco Romano January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2012 / Bibliografia: f.26-30 / A diversidade e grandiosidade da pecuária Brasileira revelam enormes contrastes e particularidades, seja nas tecnologias adotadas, nos rebanhos existentes, na topografia, na mão de obra e no clima, que ocorrem em um país com dimensões continentais. Dentre / The diversity and grandiosity of Brazilian?s livestock, reveals giants contrasts and particularities, at adopted technology, existing herds, topography, labor force and weather that occur in a country with continental dimensions. Among the production fact
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Sincronização do estro e da ovulação após prévio uso de progesterona intravaginal e gonadotrofina coriônica equina em bovinos de corte visando à inseminação artificial em tempo fixo = Timing and ovulation estro after prior use of progesterone intravaginal and equine chorionic gonadotropin (eCG) in beef cattle aiming to fixed-time artificial insemination / Francisco Romano Gaievski ; orientador, Luiz H. Kozicki / Timing and ovulation estro after prior use of progesterone intravaginal and equine chorionic gonadotropin (eCG) in beef cattle aiming to fixed-time artificial inseminationGaievski, Francisco Romano January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2012 / Bibliografia: f.26-30 / A diversidade e grandiosidade da pecuária Brasileira revelam enormes contrastes e particularidades, seja nas tecnologias adotadas, nos rebanhos existentes, na topografia, na mão de obra e no clima, que ocorrem em um país com dimensões continentais. Dentre / The diversity and grandiosity of Brazilian?s livestock, reveals giants contrasts and particularities, at adopted technology, existing herds, topography, labor force and weather that occur in a country with continental dimensions. Among the production fact
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Associação genética entre precocidade sexual e características de crescimento e terminação em animais NeloreShiotsuki, Luciana [UNESP] 27 February 2007 (has links) (PDF)
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shiotsuki_l_me_jabo.pdf: 181019 bytes, checksum: b8cf4d52845431dfc05b97a71fc3d5e0 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Os objetivos deste estudo foram verificar a possibilidade de utilização da prenhez de novilhas como critério de seleção e as possíveis associações genéticas entre esta característica e peso ao sobreano, altura na garupa e escores visuais, por meio da estimação de variâncias e covariâncias das características, de modo que possam ser utilizadas para predizer os valores genéticos dos animais e a resposta a seleção. Foram analisados 30.407, 7.226, 49.901, 46.919, 46.917, 46.909 dados para prenhez de novilhas (Pr16), altura na garupa (ALTG), peso ao sobreano (PES), conformação (C), precocidade de terminação )P) e musculatura (M), respectivamente. Também foram analisados 12.315, 4.526, 29.789 dados para Pr16, ALTG e PES, respectivamente, de animais com pai e mãe conhecidos. Os animais utilizados são provenientes do arquivo zootécnico da Agropecuária Jacarezinho Ltda, localizada mo município de Valparaíso, São Paulo. Foram realizadas analisadas bicaracaterísticas, sendo computadas duas cadeias independentes de 600.000 ciclos para Pr16, ALTG e PES e de 400.000 ciclos para Pr16, C, P e M. Foram retirados os 5.000 primeiros ciclos como período de descarte amostral. Distribuições flat foram assumidas para todos os componentes de (co) variâncias. Herdabilidade de 0,20 e correlação genética de 0,30 foram assumidas como valores iniciais para e entre as características. O critério de convergência foi de 10-12. Os resultados indicam que a prenhez aos 16 meses, pode ser utilizada como critério de seleção com possibilidades de ganho genético na precocidade sexual das novilhas. A seleção para peso ao sobreano não levará a mudanças genéticas na precocidade sexual em fêmeas... / The objectives of this study were verify the possibility of use pregnant heifer as selection criteria and the genetic associations between this trait with weight at yearling, hip height and visual scores. Variances and covariances between the traits were estimated in order to estimate the breeding values of the animals and the response to selection. It were analyzed 30,407, 7,226, 49,901, 46,919, 46,917, 46,909 records of pregnant heifers (Pr16), hip height (ALTG), yearling weight (PES), conformation (C), finished precocity (P), musculature (M), respectively, from animals with dam known. Also, it were analyzed 12,315, 4,526, 29,789 records for Pr16, ALTG and PES, respectively, from animals with sire and dam known. The animals utilized were belonging to Agropecuária Jacarezinho Ltda, located in Valparaíso council, São Paulo state. Two-trait analyses were accomplished, being computed two independent chains of 600,000 cycles for Pr16, ALTG e PES and of 400,000 cycles for Pr16, C, P and M. For analyses of posterior distribution of heritability coefficients, the first 5,000 cycles were deleted. Flat distributions were assumed for all the (co)variance components. Initial values for heritability and genetic correlation were 0.20 and 0.30, respectively. Convergence criteria was 10-12. Heritability for pregnancy at 16 months, suggest, that this trait could be utilized as selection criteria, and response to selection will be obtained for sexual precocity of the heifers. Selection for yearling weight won t carry genetic changes in the sexual precocity of the heifers. Selection for pregnancy at 16 months of age, in long term, will carry a decrease in the size of the animals. Selection for increase visual score of conformation, finished precocity and musculature, probably, will produce a low or no response in the pregnancy of the heifers at 16 months of age.
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Estudo genético quantitativo de características de crescimento e reprodutivas em bovinos da raça Brahman no BrasilFaria, Lydio Cosac de [UNESP] 19 December 2006 (has links) (PDF)
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faria_lc_me_jabo.pdf: 257159 bytes, checksum: 3c87635cd9af5a210d1d21bab116e55b (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente estudo teve por objetivos principais analisar a variabilidade genética e obter estimativas de parâmetros genéticos das características de crescimento e reprodutivas a partir de um conjunto de dados oriundos de uma população de bovinos da raça Brahman no Brasil. A variabilidade genética foi determinada pela probabilidade de origem do gene e os parâmetros genéticos foram estimados pelo método da máxima verossimilhança restrita, utilizando análises uni e bi - características. O número efetivo de fundadores decresceu 75%, enquanto o número de ancestrais e genomas remanescentes tiveram um crescimento de 23%, no período de 1998 a 2005. As estimativas das herdabilidades diretas para o peso ao nascer (PN) variaram de 0,28 a 0,41, para os pesos ajustados aos 120 dias (P120), 210 dias (P210), 365 dias (P365), 455 dias (P455) e 550 dias (P550), de 0,36 a 0,52, 0,36 a 0,46, 0,40 a 0,41, 0,33 a 0,35 e 0,28 a 0,36, respectivamente. As correlações genéticas entre PN e os demais pesos variaram de 0,51 a 0,79, entre P120 e os pesos subseqüentes de 0,78 a 0,93, entre P210 e os pesos subseqüentes, de 0,98 a 0,99, entre P365 com P445 e P550, foram 0,99 e 0,98, respectivamente, e entre P455 e P550, 0,98. As estimativas de herdabilidades diretas para as características reprodutivas variaram de 0,25 a 0,35 para período de gestação (PG), de 0,09 a 0,12 para o intervalo entre partos (IEP), para os perímetros escrotais ajustados aos 365 dias (PE365) e 455 (PE455) dias, de 0,36 a 0,37 e de 0,26 a 0,27. As correlações genéticas entre PN e PG, PG e PE365, PG e PE455, PE365 e IEP, PE455 e IEP, PE365 e PE455, foram, respectivamente 0,27, 0,02, -0,03, -0,01, -0,12 e 0,99. / The present study was conducted with two major objectives: the determinative of the genetic variability and the estimation of genetic parameters for growth and reproductive traits, in a brazilian Brahman cattle population. The data were provided by Brahman Breeding Program. The genetic variability was determined by parameters based on the gene's origin probability and genetic parameters were estimated by the restricted maximum likelihood method by single and two, trait analyses. The effective number of founders decreased 75% while the ancestral numbers and the remaining genomes increased 23% in a period of 1998 the 2005. The estimates of the heritability for birth weight (BW) varied from 0.28 to 0.41, for adjusted weight at 120 days (P120) from 0.36 to 0.52, 210 days (P210) from 0.36 to 0.46, 365 days (P365) from 0.40 to 0.41, 455 days (P455) from 0.33 to 0.35, and 550 days (P550) from 0.28 to 0.36. The genetic correlations among BW and the other weights varied from 0.51 to 0.79. The correlations of P210 with the other growth traits varied from 0.98 to 0.99. Similarly, considering the, remaining growth traits the estimated genetic correlations were close to one. The direct heritability estimates for the reproductive traits varied from 0.25 to 0.35 for gestation period (GP), from 0.09 to 0.12 to age for first calving (AFC), from 0.36 to 0.37 for scrotal circumference 365 days (SC365) and from 0.26 to 0.27 to scrotal circumference at 455 days (SC455) of age. The genetic correlations among BW and GP, GP and SC365, GP and SC455, SC365 and AFC, SC455 and AFC, SC365 and SC455, were, respectively, 0.27, 0.02, -0.03, -0.01, -0,12 and 0.99.
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Parâmetros genéticos para características produtivas, reprodutivas e escores visuais em bovinos da raça nelore / Genetic parameters for productive characteristics, reproductive and visual scores in nellore cattle.Lima, Paulo Ricardo Martins 12 December 2011 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Ciências Animais, 2011. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-05-24T14:51:10Z
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2011_PauloRicardoMartinsLima.pdf: 477209 bytes, checksum: 535c2fe8f3afc3d83e9b9e1f4fca595b (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-05-25T11:34:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1
2011_PauloRicardoMartinsLima.pdf: 477209 bytes, checksum: 535c2fe8f3afc3d83e9b9e1f4fca595b (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-25T11:34:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1
2011_PauloRicardoMartinsLima.pdf: 477209 bytes, checksum: 535c2fe8f3afc3d83e9b9e1f4fca595b (MD5) / O objetivo deste trabalho foi estimar as herdabihdades e correlações genéticas e fenotípicas entre as características visuais, os pesos corporais e circunferência escrotal de zebuínos participantes de Provas de Ganho em Peso a Pasto da Associação Brasileira de Criadores de Zebu - ABCZ. As informações utilizadas no trabalho foram obtidas entre os anos de 2004 e 2010 de 21.032 bovinos machos da raça Nelore. Ao final da prova, foram efetuadas as seguintes avaliações: peso ajustado aos 550 dias, ganho de peso, idades nas pesagens aferidas, circunferência escrotal e notas de escore visual EPMURAS (Estrutura; Precocidade. Musculatura, Umbigo. Raça, Aprumos e Características Sexuais). Para estimação das médias, herdabihdades, correlações genéticas e fenotípicas foram utilizados os programas SAS e MTDFREML. As herdabilidades obtidas foram de 0,26 a 0,50 para características de desenvolvimento e 0.19 a 0,36 para escores visuais. As correlações genéticas e fenotípicas entre os escores visuais foram de 0,80 a 0.98 e 0,65 a 074 respectivamente. Entre os escores e as características de desenvolvimento que variaram de 0.41 a 0.29 a 0.47 para as correlações genéticas e fenotípicas. respectivamente. Estes resultados indicaram que a seleção utilizando-se da ferramenta de escores visuais pode levar à obtenção de tipos morfológicos economicamente mais eficientes, evitando biótipos extremos, como indivíduos compactos ou tardios. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The objective of this study was to estimate the heritability as well as genetic and phenotypic correlations between the visual characteristics, body weights and scrotal circumference in zebus participants in the Weight Gam Test at Pasture carried out by Brazilian Association of Zebu Breeders - ABCZ. The information used in the study were obtained between the years 2004 and 2010 on 21.032 Nellore bulls. At the end of the test, the following assessments were carried out: weight adjusted to 550 days, weight gain on test, age, scrotal circumference and visual scores EPMURAS (Structure, Precocity, Muscle, Navel. Breed. Legs and Sexual characteristics). For data analysis and estimation of heritabilities. genetic and phenotypic correlations SAS and MTDFREML programs were used. Heritabilities gotten were from 0.26 to 0.50 for growth characteristics and from 0.19 to 0.36 for visual scores. Genetic and phenotypic correlations between the visual scores were from 0.80 to 0.9S and 0.65 to 0.74, respectively. Between the scores and growth characteristics that correlations ranged from 0.41 to 1 and 0.29 to 0.47. respectively. These results indicated that selection usmg the visual score tool can lead to more economically efficient morphological types, avoiding extreme biotopes, such as individuals compact or late maturing.
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