Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-05-26Bitstream added on 2014-06-13T20:15:33Z : No. of bitstreams: 1 matos_dc_me_arafcf.pdf: 757860 bytes, checksum: 63d655076a69ffcf61cab1e27565ce3c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O câncer é a segunda maior causa de morte em países industrializados, sendo superado somente para as doenças cardíacas. Os dois tipos de cânceres de maior incidência no homem são o de próstata e de pulmão, e entre as mulheres são de mama e de cólon do útero. Abrina, ricina e pulchelina são proteínas inativadoras de ribossomos do tipo II (RIPs), possuidoras de duas cadeias polipeptídicas, uma com atividade enzimática N-glicosidase e a outra lectínica. Neste trabalho, a resposta imune desencadeada pelas RIPs e a atividade anti-proliferativa contra células tumorais de mama (LM3) e de pulmão (LP07) foram avaliadas. Abrina, ricina e pulchelina mostraram-se muito tóxicas aos macrófagos (IC50 = 6,4 ± 1,53, 11,8 ± 1,66 e 19,3 ± 4,0, respectivamente), sendo a abrina a mais tóxica de todas, seguida pela ricina e esta pela pulchelina. As proteínas não estimularam a produção de NO e H2O2 em células do exsudato peritoneal, mas causaram leve inibição da produção de NO estimulada por LPS e uma forte inibição da produção de H2O2 estimulada pelo PMA. As proteínas testadas estimularam resposta do tipo Th1 e Th2, pois induziram a produção de IL-1β, TNF-α, IFN-γ, IL-12 e IL-10. As células LM3 (adenocarcinoma de mama murino) e LP07 (adenocarcinoma de pulmão murino) foram mais sensíveis ao potencial tóxico de abrina, ricina e pulchelina do que do Taxol após 24 e 48 horas de incubação. / Cancer is the second major cause of death in industrialized countries, second only to cardiac diseases. The two more incident cancer types in men are prostate and lung cancer, and in women are breast and colon cancer. Abrin, ricin and pulchellin are type II ribosome inactivating proteins (RIPs); they have two polypeptide chains, one with N-glycosidase activity, and the other lectinic. In this research, we evaluated the immune response induced by these RIPs and the anti-proliferative activity against tumoral cells of breast (LM3) and lung (LP07). Abrin, ricin and pulchellin showed citotoxicity to exsudate peritoneal cells (IC50 = 6.4 ± 1.53, 11.8 ± 1.66 e 19.3 ± 4.0, respectively). The abrin was the most toxic of all, followed by ricin and pulchellin. Abrin, ricin and pulchellin didn’t stimulate NO and H2O2 production in PEC, although they caused a low inhibition of LPS’ NO production stimulation, and a high inhibition of PMA’s H2O2 production stimulation. The proteins induced a Th1 and Th2 response; characterized by their ability to stimulated IL-1β, TNF-α, IFN-γ, IL-12 e IL-10 production. The LM3 cells (murine breast adenocarcinoma) and LP07 cells (murine lung adenocarcinoma) were more sensible to the proteins’ citotoxicity than Taxol’s citotoxicity after 24 and 48 hours of incubation.

Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Alexandrina Sartori / Banca: Ana Cristina de Oliveira Monteiro Moreira / Resumo: O câncer é a segunda maior causa de morte em países industrializados, sendo superado somente para as doenças cardíacas. Os dois tipos de cânceres de maior incidência no homem são o de próstata e de pulmão, e entre as mulheres são de mama e de cólon do útero. Abrina, ricina e pulchelina são proteínas inativadoras de ribossomos do tipo II (RIPs), possuidoras de duas cadeias polipeptídicas, uma com atividade enzimática N-glicosidase e a outra lectínica. Neste trabalho, a resposta imune desencadeada pelas RIPs e a atividade anti-proliferativa contra células tumorais de mama (LM3) e de pulmão (LP07) foram avaliadas. Abrina, ricina e pulchelina mostraram-se muito tóxicas aos macrófagos (IC50 = 6,4 ± 1,53, 11,8 ± 1,66 e 19,3 ± 4,0, respectivamente), sendo a abrina a mais tóxica de todas, seguida pela ricina e esta pela pulchelina. As proteínas não estimularam a produção de NO e H2O2 em células do exsudato peritoneal, mas causaram leve inibição da produção de NO estimulada por LPS e uma forte inibição da produção de H2O2 estimulada pelo PMA. As proteínas testadas estimularam resposta do tipo Th1 e Th2, pois induziram a produção de IL-1β, TNF-α, IFN-γ, IL-12 e IL-10. As células LM3 (adenocarcinoma de mama murino) e LP07 (adenocarcinoma de pulmão murino) foram mais sensíveis ao potencial tóxico de abrina, ricina e pulchelina do que do Taxol após 24 e 48 horas de incubação. / Abstract: Cancer is the second major cause of death in industrialized countries, second only to cardiac diseases. The two more incident cancer types in men are prostate and lung cancer, and in women are breast and colon cancer. Abrin, ricin and pulchellin are type II ribosome inactivating proteins (RIPs); they have two polypeptide chains, one with N-glycosidase activity, and the other lectinic. In this research, we evaluated the immune response induced by these RIPs and the anti-proliferative activity against tumoral cells of breast (LM3) and lung (LP07). Abrin, ricin and pulchellin showed citotoxicity to exsudate peritoneal cells (IC50 = 6.4 ± 1.53, 11.8 ± 1.66 e 19.3 ± 4.0, respectively). The abrin was the most toxic of all, followed by ricin and pulchellin. Abrin, ricin and pulchellin didn't stimulate NO and H2O2 production in PEC, although they caused a low inhibition of LPS' NO production stimulation, and a high inhibition of PMA's H2O2 production stimulation. The proteins induced a Th1 and Th2 response; characterized by their ability to stimulated IL-1β, TNF-α, IFN-γ, IL-12 e IL-10 production. The LM3 cells (murine breast adenocarcinoma) and LP07 cells (murine lung adenocarcinoma) were more sensible to the proteins' citotoxicity than Taxol's citotoxicity after 24 and 48 hours of incubation. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-14Bitstream added on 2014-06-13T18:41:52Z : No. of bitstreams: 1 gradella_dbt_dr_arafcf.pdf: 829637 bytes, checksum: 74edb2781966504a41ee8812b6fadbf0 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A expressão de antígenos ABH e Lewis tem sido associada com o desenvolvimento e prognóstico do câncer, diferenciação tumoral e metástase. Considerando que o carcinoma ductal invasivo (CADI) de mama apresenta múltiplas alterações, o objetivo deste estudo foi avaliar se o polimorfismo dos genes ABO, Lewis e Secretor, bem como a fenotipagem ABO podem estar associados ao câncer de mama e com parâmetros anatomoclínicos do tumor. Foram avaliadas 76 mulheres portadoras de CADI e 78 mulheres doadoras de sangue para a fenotipagem/genotipagem ABO e genotipagem Lewis e Secretor. Fenotipagem foi realizada por método de hemaglutinação, a genotipagem ABO por PCR seguida de restrição enzimática e a genotipagem dos grupos Lewis e Secretor por PCR alelo específico (PCR-AE). A genotipagem foi realizada considerando o polimorfismo dos genes em um único nucleotídeo, sendo que para o gene Lewis nas posições 59, 1067, 202 e 314, para o gene Secretor na posição 428 e para o gene ABO nas posições 261 (alelo O1), 526 (alelos O2 e B) e 703 (alelo B). Os genótipos Lewis foram classificados em Lewis positivo (tipo selvagem ou com duas/três mutações) e Lewis negativo (duas a quatro mutações). O genótipo secretor foi classificado em Secretor (selvagem ou com a mutação em heterozigose) e Não-secretor (homozigoto mutante). Nenhuma associação foi encontrada entre as pacientes com câncer de mama e o fenótipo (P=0,9323) e genótipo (P=0,9356) ABO. Mulheres com genótipo Lewis negativo foram associadas com CADI (P=0,0126), mas não foram associadas com os parâmetros anatomoclínicos (tamanho tumor, estadiamento TNM e metástase em linfonodos axilares). Genótipo Não-secretor foi associado com metástase em linfonodos axilares (P=0,0149). Em conclusão, os genótipos Lewis e Secretor podem ser úteis para predizer, respectivamente suscetibilidade e metástase em linfonodos axilares. / ABH and Lewis antigens expression have been associated with cancer development, prognosis, tumor differentiation and metastasis. Considering that invasive ductal breast carcinoma (IDC) present multiple molecular alterations, the aim of the present study was evaluated if the polymorphism of ABO, Lewis and secretor genes, as well as ABO phenotyping could be associated to breast cancer and anatomoclinical parameters of the tumor. In 76 women with IDC and 78 health women blood donors, ABO phenotyping/genotyping, Lewis and Secretor genotyping were evaluated. Phenotyping was performed by hemmaglutination method and genotyping by Polymerase Chain Reaction with Sequence-Specific Primers (PCR-SSP). ABO, Lewis and Secretor were classified by individual single nucleotide polymorphism (SNP) at sites 59, 1067, 202 and 314 of the Lewis gene, 428 of the Secretor gene and 261 (O1 allele), 526 (O2 and B allele) and 703 (B allele). Lewis genotype was classified in Lewis positive (wild-type or two/three SNPs) or Lewis negative (two to four different SNPs). The Secretor genotype was classified in Secretor (wild type or SNP in heterozygoses) and Non-secretor (SNP in homozygoses). No association was found between patients with breast cancer and ABO antigen expression (P=0.9323) and genotypes (P=0.9356). Lewis negative was associated with IDC (P=0.0126), but were not associated with anatomoclinical parameters (tumor size, TNM staging and axillary lymph nodes metastasis). Non-secretor genotype was associated with axilary lymph nodes metastasis (P=0.0149). In conclusion, the Lewis and Secretor genotyping could be useful to predict, respectively, of breast cancer susceptibility and axillary lymph nodes metastasis.

Orientador: Christiane Pienna Soares / Banca: Lilian Maria de Castilho / Banca: Luiz Carlos de Mattos / Banca: João Lauro Viana de Camargo / Banca: Haroldo Wilson Moreira / Resumo: A expressão de antígenos ABH e Lewis tem sido associada com o desenvolvimento e prognóstico do câncer, diferenciação tumoral e metástase. Considerando que o carcinoma ductal invasivo (CADI) de mama apresenta múltiplas alterações, o objetivo deste estudo foi avaliar se o polimorfismo dos genes ABO, Lewis e Secretor, bem como a fenotipagem ABO podem estar associados ao câncer de mama e com parâmetros anatomoclínicos do tumor. Foram avaliadas 76 mulheres portadoras de CADI e 78 mulheres doadoras de sangue para a fenotipagem/genotipagem ABO e genotipagem Lewis e Secretor. Fenotipagem foi realizada por método de hemaglutinação, a genotipagem ABO por PCR seguida de restrição enzimática e a genotipagem dos grupos Lewis e Secretor por PCR alelo específico (PCR-AE). A genotipagem foi realizada considerando o polimorfismo dos genes em um único nucleotídeo, sendo que para o gene Lewis nas posições 59, 1067, 202 e 314, para o gene Secretor na posição 428 e para o gene ABO nas posições 261 (alelo O1), 526 (alelos O2 e B) e 703 (alelo B). Os genótipos Lewis foram classificados em Lewis positivo (tipo selvagem ou com duas/três mutações) e Lewis negativo (duas a quatro mutações). O genótipo secretor foi classificado em Secretor (selvagem ou com a mutação em heterozigose) e Não-secretor (homozigoto mutante). Nenhuma associação foi encontrada entre as pacientes com câncer de mama e o fenótipo (P=0,9323) e genótipo (P=0,9356) ABO. Mulheres com genótipo Lewis negativo foram associadas com CADI (P=0,0126), mas não foram associadas com os parâmetros anatomoclínicos (tamanho tumor, estadiamento TNM e metástase em linfonodos axilares). Genótipo Não-secretor foi associado com metástase em linfonodos axilares (P=0,0149). Em conclusão, os genótipos Lewis e Secretor podem ser úteis para predizer, respectivamente suscetibilidade e metástase em linfonodos axilares. / Abstract: ABH and Lewis antigens expression have been associated with cancer development, prognosis, tumor differentiation and metastasis. Considering that invasive ductal breast carcinoma (IDC) present multiple molecular alterations, the aim of the present study was evaluated if the polymorphism of ABO, Lewis and secretor genes, as well as ABO phenotyping could be associated to breast cancer and anatomoclinical parameters of the tumor. In 76 women with IDC and 78 health women blood donors, ABO phenotyping/genotyping, Lewis and Secretor genotyping were evaluated. Phenotyping was performed by hemmaglutination method and genotyping by Polymerase Chain Reaction with Sequence-Specific Primers (PCR-SSP). ABO, Lewis and Secretor were classified by individual single nucleotide polymorphism (SNP) at sites 59, 1067, 202 and 314 of the Lewis gene, 428 of the Secretor gene and 261 (O1 allele), 526 (O2 and B allele) and 703 (B allele). Lewis genotype was classified in Lewis positive (wild-type or two/three SNPs) or Lewis negative (two to four different SNPs). The Secretor genotype was classified in Secretor (wild type or SNP in heterozygoses) and Non-secretor (SNP in homozygoses). No association was found between patients with breast cancer and ABO antigen expression (P=0.9323) and genotypes (P=0.9356). Lewis negative was associated with IDC (P=0.0126), but were not associated with anatomoclinical parameters (tumor size, TNM staging and axillary lymph nodes metastasis). Non-secretor genotype was associated with axilary lymph nodes metastasis (P=0.0149). In conclusion, the Lewis and Secretor genotyping could be useful to predict, respectively, of breast cancer susceptibility and axillary lymph nodes metastasis. / Doutor