Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-09-17T11:57:51Z No. of bitstreams: 1 2008_EvandroLeaoRibeiro.pdf: 2413145 bytes, checksum: 7d2a463ffaf62a76798658db979ac610 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2009-10-16T14:57:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_EvandroLeaoRibeiro.pdf: 2413145 bytes, checksum: 7d2a463ffaf62a76798658db979ac610 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-10-16T14:57:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_EvandroLeaoRibeiro.pdf: 2413145 bytes, checksum: 7d2a463ffaf62a76798658db979ac610 (MD5) Previous issue date: 2008 / Um total de 160 amostras de secreção salivar foi coletado da mucosa jugal de indivíduos avaliados neste estudo de caso-controle e atendidos na Unidade Odontológica Infantil da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Goiás na cidade de Goiânia - GO, Brasil. Sessenta (60/160) (37,5%) amostras de Candida foram isoladas e identificadas como pertencentes apenas a espécie albicans. Destas, trinta e sete (37/40) (92,5%) leveduras foram provenientes da mucosa bucal de crianças com Síndrome de Down (grupo teste), catorze (14/80) (17,5%) de crianças sem síndrome (grupo controle) e nove (9/40) (22,5%) de pais e/ou responsáveis. As amostras de C. albicans bucais foram detectadas em crianças com uma faixa etária de zero a 11 anos e a maioria pertencia ao gênero masculino. A mãe apresentou-se como responsável pela curadoria dos filhos com uma média de idade de 39,4 anos. Todas as crianças e pais e/ou responsáveis, incluídos neste estudo, apresentavam mucosa bucal intacta e não faziam uso de nenhuma droga terapêutica. Análises das características fenotípicas das amostras de C. albicans bucais permitiram identificar nove morfotipos diferentes (3240, 3340, 5320, 5330, 5340, 5530, 5540, 7530 e 7540) no grupo teste e quatro morfotipos (2330, 5240, 5320 e 5330) e (5230, 5240, 5520 e 5530) nos grupos controle e pais e/ou responsáveis, respectivamente. Colônias fúngicas franjadas foram mais expressivas entre amostras de C. albicans oriundas da boca de crianças com irregularidade cromossômica. A formação de tubos germinativos, em soro fetal bovino, ocorreu em menor espaço de tempo entre os isolados de C. albicans bucais de crianças sindrômicas. Todas as amostras de C. albicans, isoladas da boca das crianças e pais e/ou responsáveis, mostraram-se produtoras de aspartil proteinases e 95,0% (57/60) de fosfolipases, cabendo ao grupo teste os isolados de C. albicans mais produtivos. Maior diversidade de killertipos (111, 112, 121, 186 e 888) foram presenciados entre os cultivos de C. albicans bucais de crianças com Síndrome de Down. Todos os isolados de C. albicans, originados da boca de crianças com e sem Síndrome de Down e pais e/ou responsáveis, foram suscetíveis às drogas antifúngicas empregadas (anfotericina B, fluconazol, itraconazol e 5-fluorocitosina). Estudo estatístico empregando o teste qui-quadrado (X2) em relação ao número de amostras de C. albicans bucais decorrentes dos grupos teste, controle e pais e/ou responsáveis, quanto às variáveis: carreamento de leveduras bucais, intervalo de tempo necessário à formação de tubos germinativos e o índice de produtividade de exoenzimas demonstrou in vitro diferenças estatísticas significantes às características fenotípicas presenciadas nas amostras de C. albicans da boca pertencentes ao grupo de crianças com Síndrome de Down em relação aos demais grupos controle e pais e/ou responsáveis inclusos neste trabalho. Concentrações elevadas de IgA e IgM e normais de IgG séricas totais foram detectadas em crianças com Síndrome de Down basicamente na faixa etária de quatro a sete anos de idade. Variabilidade de 45,0 a 100,0% de similaridade genética presenciou-se entre os pares de C. albicans isoladas da boca simultaneamente de pais e/ou responsáveis e crianças com Síndrome de Down mediante emprego de RAPD usando os primers RSD10 e RSD12. In vitro C. albicans bucais de crianças com Síndrome de Down demonstraram ampla capacidade de colonização da boca de indivíduos com irregularidade cromossômica. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / A total of 160 samples of saliva secretion were collected of the jugal mucosa of appraised individuals in this case-control study and assisted at the Infantile Dental Unit of the School of Dentistry at the Universidade Federal de Goiás in the city of Goiânia - GO, Brazil. Sixty (60/160) (37.5%) Candida samples were just isolated and identified as belonging to the albicans species. Of these, thirty seven (37/40) (92.5%) yeasts were coming from the buccal mucosa ofchildren with Down’s syndrome (test group), fourteen (14/80) (17.5%) of children withoutsyndrome (control group) and nine (9/40) (22.5%) of parents and/or responsible. The buccal C. albicans samples were detected in children with an age group from zero to 11 years old and most belonged to the masculine gender. The mother came as responsible for the trusteeship of the children with an average of 39.4 years old. All the children and parents and/or responsible, included in this study, presented intact buccal mucosa and were not on any type of drug therapy. Analyses of the phenotypical characteristics of buccal C. albicans samples allowed to identify nine different morphotypes (3240, 3340, 5320, 5330, 5340, 5530, 5540, 7530 and 7540) in the test group and four morphotypes (2330, 5240, 5320 and 5330) and (5230, 5240, 5520 and 5530) in the control and parents and/or responsible groups, respectively. Fungal colonies with fringes were more expressed among C. albicans samples originating of the mouth of children with chromosomal irregularity. The formation of germ tubes, in bovine fetal serum, happened in smaller space of time among the buccal C albicans isolates of children with syndrome. All C. albicans samples isolated of the mouth of children and parents and/or responsible were shown producing of aspartil proteinases and 95.0% (57/60) of phospholipases, fitting to the test group the C. albicans isolates more productive. Larger diversity of killer types (111, 112, 121, 186 and 888) was witnessed among the buccal C. albicans cultives of children with Down’s syndrome. All the C. albicans isolates, originated of the mouth of children with and without Down’s syndrome and parents and/or responsible, were susceptible to the antifungal drugs used (amphotericin B, fluconazole, itraconazole and 5-fluorcitosine). Statistician study using the qui-square test (X2) in relation to the number of buccal C. albicans samples resulting from the test, control and parents and/or responsible groups, as the variables: buccal yeasts carriage, interval of necessary time to the formation of germ tubes and the exoenzymes productivity index demonstrated in vitro significant statistical differences to the phenotypical characteristics witnessed in the C. albicans samples from mouth belonging to the children with Down’s syndrome group in relation to the other control and parents and/or responsible groups included in this work. High concentrations of IgA and IgM and normal total of IgG in the serum of the blood were detected in children with Down’s syndrome basically in the age group from four to seven years old. Variability from 45.0 to 100.0 of genetic similarity was witnessed among the pairs of C. albicans isolated of the mouth simultaneously of parents and/or responsible and children with Down’s syndrome by employment of RAPD using the primers RSD10 and RSD 12. In vitro buccal C. albicans of children with Down’s syndrome demonstrated wide capacity of colonization of the mouth of individuals with chromosomal irregularity.

Orientador: Eunice Terezinha Giampaolo / Banca: Ana Cláudia Pavarina / Banca: Renata Cristina Silveira Rodrigues Ferracioli / Resumo: As características superficiais dos materiais utilizados em próteses podem influenciar na retenção de microrganismos. Além disso, a higienização das próteses também pode interferir na superfície e consequentemente na proliferação de microrganismos. Dessa forma, o presente estudo avaliou o efeito da higienização mecânica com escova/sabão de coco e escova/dentifrício e duas soluções de limpeza química (perborato de sódio a 3,78% e clorexidina a 2%) bem como suas interações, na rugosidade superficial, dureza e quantificação de Candida albicans do reembasador rígido Tokuyama Rebase Fast II em diferentes intervalos de tempo. Foram confeccionados 150 corpos-de-prova, a partir de uma matriz metálica (40X10X2mm), os quais foram divididos aleatoriamente em 10 grupos experimentais (n=15), de acordo com a interação das soluções de escovação e imersão: controle - C; água-água - A; água-perborato - APb; águaclorexidina - ACh; sabão-água - SA; sabão-perborato - SPb; sabão-clorexidina - SCh; dentifrício-água - DA; dentifrício-perborato - DPb e dentifrício-clorexidina - DCh. Os testes de escovação foram realizados em uma máquina de ensaios (30 ciclos diários) e as imersões foram realizadas por 10 minutos ao dia. As análises de rugosidade superficial (Ra) e de dureza Knopp foram realizadas inicialmente, após 7, 15, 30, 90, 180, 270 e 365 dias. A quantificação microbiológica foi realizada após todo o período de análise da rugosidade e da dureza em todos os grupos experimentais. Os dados obtidos foram analisados por análise de variância, seguida pelo teste de Tukey, ao nível de significância de 5%, para rugosidade e dureza. Para a quantificação de C. albicans foi realizada análise de variância de 2 fatores. Os resultados indicaram a rugosidade superficial não foi alterada (p>0,05) para os grupos C, APb, SCh e DA em todo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The surface characteristics of intraoral hard surfaces can influence plaque retention. Furthermore, denture cleansers can interfere on surface and increase microorganism proliferation. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of mechanical cleansing (toothbrush/coconut soap and toothbrush/dentifrice), two chemical solutions (sodium perborate 3,78% and chlorhexidine 2%) and its interactions on the surface roughness, hardness and Candida albicans quantification of the reline resin Tokuyama Rebase Fast II in different time intervals. One hundred fifty specimens were made using a stainless steel mold (40X10X2mm) and divided into 10 groups (n=15): control - C; water-water - A; water-perborate - APb; water-chlorhexidine - ACh; soap-water - SA; soapperborate - SPb; soap-chlorhexidine - SCh; dentifrice-water - DA; dentifriceperborate - DPb e dentifrice-chlorhexidine - DCh. The toothbrush test was performed in a toothbrush abrasion machine using 30 strokes per day and the immersions were made for 10 minutes per day. Surface roughness (Ra) and Knoop hardness of the specimens were evaluated initial - baseline, and after 7, 15, 30, 90, 180, 270 and 365 days. Candida albicans quantification was performed after all surface roughness and hardness mensuration period. The results were analyzed by analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey's test for surface roughness and hardness. For C. albicans quantification, the data was analyzed y analysis of variance (ANOVA). The analyses were conducted at 95% confidence level. The results showed that the surface roughness of groups C, APb, SCh e DA were not affected for all evaluation periods. Treaments of groups A, ACh, SPb, DPb e SA promoted increase on mean roughness values until 30 days, compared to other periods. Lower roughness values were obtained to DCh and DPb compared to ACh, A, SA, APb or SCh for ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Banca: Sandra Helena Penha de Oliveira / Banca: Cínthia Pereira Machado Tabchoury / Banca: Nuno Gonçalo Pereira Mira / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana/antibiofilme e a viabilidade celular de nanopartículas de prata (NPsAg) obtidas por uma síntese 'green' associadas ou não ao β-glicerofosfato de cálcio (GPCa) contra Streptococcus mutans e espécies de Candida (cepas de referência e isolados clínicos orais incluindo cepas resistentes ao fluconazol). O efeito destes nanocompostos em combinação com o tirosol (TIR), fluconazol (FLC), nistatina (NIT) e anfotericina B (AnB) também foi avaliado. Além disso, nós avaliamos comparativamente as alterações do transcriptoma de células de C. glabrata CBS138 após exposição às NPsAg e ao Íon prata (Ag+). Inicialmente, as NPsAg foram sintetizadas por meio da redução do nitrato de prata com extratos de diferentes partes (casca, folha e semente) de uma romã (Punica granatum L.) associadas ou não ao GPCa. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) e as Concentrações Fungicida/Bactericida Mínima (CFM e CBM) dos nanocompostos (NPsAg e NPsAg-GPCa) associados ou não ao TIR contra S. mutans e C. albicans foram determinadas pelo método de microdiluição. E, a ação das NPsAg combinadas com FLC, NIT e AnB também foi avaliada em condição planctônica contra isolados clínicos orais de espécies de Candida. O efeito dos nanocompostos associados ou não ao TIR sobre a viabilidade celular de fibroblastos da linhagem L929 e a produção de citocinas foi avaliado através dos ensaios de MTT e ELISA, respectivamente. O número de hifas foi quantificado em biofi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the antimicrobial/antibiofilm activities and the cell viability of silver nanoparticles (AgNPs) obtained by a 'green' synthesis associated or not to β-calcium glycerophosphate (CaGP) against Streptococcus mutans and Candida species (reference strains and oral clinical isolates including azole-resistant strains). The effect of these nanocompounds in combination with tyrosol (TYR), fluconazole (FLC), nystatin (NYT) and amphotericin B (AmB) also was evaluated. Furthermore, we evaluated, comparatively, the transcriptome alterations of cells of C. glabrata CBS138 after exposition to AgNPs and to silver ion (Ag+). Initially, AgNPs were synthesized by reducing silver nitrate with extracts of different parts (peel, leaves and seeds) of a pomegranate (Punica granatum L.) associated or not to CaGP. Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Fungicidal/Bactericidal Concentrations (MFC and MBC) of the nanocomposites (AgNPs and AgNPs-CaGP) associated or not to TYR against S. mutans and C. albicans were determined by the microdilution method. And, the action of the AgNPs combined with FLC, NYT and AmB also was evaluated in planktonic condition against oral clinical isolates of Candida species. The effect of the nanocomposites associated or not to TYR on cell viability of fibroblasts (L929) and cytokines production was evaluated through MTT and ELISA assays, respectively. The number of cells undergoing filamentation was quantified in C. albicans... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Fabiano Malheiro (fabianomalheiro22@hotmail.com) on 2017-06-01T15:06:07Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Aplicação de Terapia Fotodinâmica (PDT) usando luz LED azul sobre culturas de candida albicans in vitro.pdf: 903559 bytes, checksum: d57e4b195e3104bd65820ee04210e36d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-01T15:06:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Aplicação de Terapia Fotodinâmica (PDT) usando luz LED azul sobre culturas de candida albicans in vitro.pdf: 903559 bytes, checksum: d57e4b195e3104bd65820ee04210e36d (MD5) Previous issue date: 2014-08-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O fungo Candida albicans é frequentemente encontrado como componente da microbiota da cavidade oral, sendo agente etiológico da candidíase eritematosa crônica (estomatite por dentadura). Condição esta, uma infecção oportunista, de caráter crônico que acomete grande parte dos usuários de próteses. O tratamento tradicional com antifúngicos, muitas vezes é duradouro, colaborando para o surgimento de cepas resistentes desse fungo. Assim sendo, torna-se necessária uma alternativa de tratamento efetiva contra a candidíase oral e que não apresente efeitos colaterais. O objetivo desse estudo foi desenvolver um novo dispositivo a partir de um fotopolimerizador odontológico, baseado na tecnologia LED com emissão de luz azul. Além disso, verificar a ação da PDT com azul de metileno associada ao uso dessa fonte sobre culturas de Candida albicans. Após o crescimento e identificação das colônias foram selecionadas 04 cepas de Candida albicans e 01 cepa ATCC (62342) e realizadas diluições obedecendo-se a escala 0,5 de Macfarland (1x108 UFC). Desse inóculo, foram colocados 100 µl em cada poço de uma placa de microtitulação de 96 poços. As amostras das colônias de Candida albicans foram distribuídas em triplicata nas placas de cultura. No grupo testado foram colocados 90 µl de PBS, adicionado a 10 µl de azul de metileno. As placas foram incubadas durante 30 minutos e, após esse período, foi realizada a irradiação com LED azul. Para realizar a PDT a placa foi dividida em 6 setores de dimensões iguais. Cada setor foi irradiado durante 6 minutos na dosimetria de 122 J/cm2, potência de 260 mW e comprimento de onda de 455 nm em aplicação única, totalizando 36 minutos de aplicação em cada placa. Após esse desafio, foram realizadas diluições seriadas 1:10 em 4 alíquotas sucessivas. Dessa diluição foram semeados 25 µl em placas de Petri e incubadas a 37ºC por 48 horas. Após esse período foram feitas as contagens das colônias por dois examinadores previamente treinados e calibrados. Os resultados foram analisados estatisticamente usando ANOVA seguido por teste de Tukey com 5% de nível de significância e não mostraram diferença estatisticamente significante (p>0,05) entre os diferentes grupos e o grupo controle. Constatando-se que a PDT usando fonte de luz LED é uma alternativa viável, no entanto no presente estudo não foi possível constatar a ação dessa terapia. / The fungus Candida albicans is often found as the microflora of the oral cavity component, as the etiological agent of erythematous candidiasis (denture stomatitis), this condition is an opportunistic infection, a chronic condition that affects most users of prostheses. Traditional treatment with antifungals, often lasting, contributing to the manifestation of resistant strains of this fungus. Therefore, it is necessary effective alternative treatment for oral candidiasis and who does not produce side effects. The aim of this study was to develop a new device from a dental curing light, based on the LED technology with blue light emission. As well, check the action of PDT with methylene blue associated with the use of this source on cultures of Candida albicans. After the growth and identification of colonies were selected 04 strains of Candida albicans and 01strain ATCC (62342) and made dilutions obeying the scale of 0.5 Macfarland (1x108 CFU). In this inoculum, 100 mL were placed in each well of a 96-well microtiter plate wells. Samples of colonies of Candida albicans were triplicate distributed in culture plates. On the test group 90 µl of PBS, added to 10 µl of methylene blue were placed. The plates were incubated for 30 minutes and, thereafter, irradiation was performed with blue LED. To perform PDT the plate was divided into 6 sectors of equal dimensions. Each sector was irradiated for 6 minutes dosimetry of 122 J/cm² power of 260 mW and wavelength of 455 nm in a single application, totaling 36 minutes of application on each plate. After this challenge, serial dilutions 1:10 in 4 successive aliquots were performed. This dilution were seeded 25 µl in Petri dishes and incubated at 37 ° C for 48 hours. After this period the numbers of colonies were made by two previously trained and calibrated examiners. The results were statistically analyzed using ANOVA followed by Tukey test at 5% significance level and showed no statistically significant difference (p> 0.05) between the different groups and the control group. The authors verified that PDT using LED light source is a viable alternative, however in this study it was not possible to observe the action of this therapy.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-28Bitstream added on 2014-06-13T20:58:44Z : No. of bitstreams: 1 carmello_jc_me_arafo.pdf: 701741 bytes, checksum: 55eb9d8f5746ef34ede24573f0c2455a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve por objetivo avaliar a efetividade da terapia fotodinâmica (PDT) mediada pelo fotossensibilizador (FS) Photodithazine® (PDZ), associado à luz do tipo LED (660nm). Para tanto, foram utilizados 55 camundongos com aproximadamente 6 semanas de vida, os quais foram submetidos a indução de candidose no dorso da língua. Inicialmente os animais foram imunossuprimidos e no dia seguinte se realizou a inoculação de C. albicans na língua dos mesmos por meio de swabs embebidos na suspensão (107 Ufc/mL). Para a realização da terapia fotodinâmica o FS foi avaliado nas concentrações de 75, 100, 125 e 150mg/L. Tais grupos experimentais foram denominados de (P+L+ 75mg/L, P+L+ 100mg/L, P+L+ 125mg/L, P+L+ 150mg/L) associados a uma dose de luz de 37,5 J/cm2. Para a verificação apenas do efeito da PDZ, a mesma foi aplicada na língua dos animais, sem iluminação (grupos denominados de P+L- 75mg/L, P+L- 100mg/L, P+L- 125mg/L, P+L- 150mg/L). O efeito da luz foi avaliado por meio da iluminação das línguas com dose de luz de 37,5J/cm2, (grupo denominado de P-L+ 37,5J/cm2). Um grupo recebeu apenas inoculação por Candida (grupo P-L-, controle positivo), outro grupo não recebeu nenhum tratamento e nem inoculação fúngica (grupo CN – controle negativo). Após os experimentos realizou-se a recuperação de C. albicans das línguas dos animais por meio de swabs que foram esfregados sobre as mesmas durante 1 minuto. Esses swabs foram embebidos em tubos de ensaio com 1mL de solução salina, e diluições seriadas foram realizadas e colocadas em placas de petri com SDA. Após 48 horas de incubação a 37º C as células fúngicas foram quantificadas e o número de Ufc/mL foi determinado e analisado pelo teste ANOVA (P<.05). Os camundongos foram sacrificados e tiveram as línguas removidas cirurgicamente para realização da análise histológica. Os resultados demonstraram... / The aim of this investigation was to evaluate the effectiveness of photodynamic therapy (PDT) mediated by photossensitizer Photodithazine® (PDZ) associated with LED light (660nm) for the photoinactivation of C. albicans in a murine model of oral candidosis. Fifty-five 6-week-old female Swiss mice were immunossuppressed and in the next day small cotton pads were soaked in a C. albicans cell suspension (107CFU/mL) and swabbed in the oral cavity of mice. PDT was performed and the PS was applicated topically on the dorsum of the tongue of mice at concentrations 75, 100, 125 and 150mg/L (P+L+75, P+L+100, P+L+125 and P+L+150mg/L) associated with LED at a fluence of 37,5J/cm2. The effect of PS only was tested by application of PDZ for the same period of pre-irradiation time and irradiation at the same concentration as that for the P+L+ group, without the LED illumination (P+L-75, P+L-100, P+L-125 and P+L-150mg/L). To verify the effect of the light only, the group was exposed to the same LED dose mentioned previously (P-L+ 37,5J/cm2), 1 group). The positive control did not receive any PS or light (P-L-). The negative control group (CN) of animals was evaluated and mice did not receive any treatment. After treatment the dorsum of the tongue was swabbed for 1 minute with a cotton pad to recover C. albicans cells and the microbiological evaluation was performed. The yeast colony counts were quantified and the number of CFU/mL was determined and analyzed by ANOVA test (P<.05). Animals were killed 24 hours after treatment and the tongue of all mice were surgically removed for histological analysis. The results of this investigation demonstrated that PDT was effective in reducing C. albicans recovered from the tongue of mice at concentrations 100, 125 and 150mg/L of PS when compared with the animals from the positive control group (P-L-) (P<0.05). There was no difference between these concentrations... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2017-03-14T14:10:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-29. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-14T14:42:45Z : No. of bitstreams: 1 000874567_20180729.pdf: 739207 bytes, checksum: 096d06efa6c645b9cd46c526ab46691f (MD5) Bitstreams deleted on 2018-07-31T11:21:36Z: 000874567_20180729.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2018-07-31T11:22:29Z : No. of bitstreams: 1 000874567.pdf: 2611072 bytes, checksum: c96b34ee605e5658c74f4eafc173b3c1 (MD5) / O presente estudo avaliou a eficácia da terapia fotodinâmica (PDT) na inativação de Candida albicans em modelos murino de candidíase oral. Adicionalmente, este estudo avaliou se a PDT causa danos ao núcleo da célula fúngica. Dessa forma, foram conduzidos três estudos: 1. Avaliou a eficácia da cloro-alumínio-ftalocianina encapsulado em nanoemulsão catiônica (ClAlP NE) na inativação de Candida albicans presente em modelo murino de candidíase oral; 2. Avaliou a eficácia da PDT mediada pelo Photodithazine®(PDZ) como tratamento para candidíase oral induzida; 3. Avaliou o potencial da inativação fotodinâmica (PDT) mediado pelo fotossensibilizador (PS) Curcumina (CUR) associado ao LED azul em causar danos no DNA de C albicans. No estudo 1, 75 camundongos fêmeas com 6 semanas foram imunossuprimidos e inoculados com C. albicans para induzir candidíase oral. A PDT foi realizada sobre a língua pela aplicação dos fotossensibilizadores ClAlP NE ou ClAlP DMSO e luz LED (100 J/cm2 - 660 nm). Em seguida, a avaliação microbiológica foi realizada por meio da recuperação de C. albicans da língua dos animais. Diluições seriadas foram realizadas, as colônias viáveis foram quantificado e o número de UFC mL determinado. Os animais foram sacrificados 24 horas após a PDT e as línguas foram removidas cirurgicamente para análise histológica e para análise de expressão de citocinas pró e antiinflamatórias (IL-1, TNF-α e IL-6) por ensaio de RT-qPCR. Os dados foram analisados por One-Way ANOVA. A PDT mediada por ClAIP-NE reduziu 2,26 log10 da viabilidade celular de C. albicans em comparação ao grupo controle (p <0,05). A PDT mediada por ClAlP DMSO não apresentou atividade antifúngica. A análise histológica revelou que a PDT não promoveu efeitos adversos sobre o tecido língual dos animais. A terapia mediada por ambos os fotossensibilizadores induziu a expressão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / This study evaluated the efficacy of photodynamic therapy (PDT) in the inactivation of C. albicans in a murine models of oral candidosis. Additionally, this study evaluated the poetencial of PDT to promote DNA damage of fungal cell. For this purpose, three studies were conducted: 1. Evaluated the photodynamic effect of chloro-aluminum phthalocyanine encapsulated in cationic nanoemulsions (ClAlP NE) to inactivate Candida albicans in a murine model of oral candidiasis. 2. Evaluated the photoinactivation (PDT) of Candida albicans in a murine model of oral candidosis, mediated by Photodithazine® (PDZ). 3. Evaluated the potential of PDT mediated by Curcumin (CUR) associated with the blue LED in causing DNA damage of C. albicans. In the first study, 75 6-week-old female Swiss mice were immunosuppressed and inoculated with C. albicans to induce oral candidiasis. PDT was performed on the tongue by the application of the photosensitizers and LED light (100 J cm-² - 660 nm). Next, microbiological evaluation was carried out by recovering C. albicans from the tongue via colony forming units (CFU mL-1). Then, the animals were sacrificed and the tongues were surgically removed for histological analysis and analysis of inflammatory cytokines expression (IL-1, TNF-α and IL-6) by RT-qPCR. Data were analyzed by ANOVA test. ClAlP NE-mediated PDT was able to reduce C. albicans recovered from the tongue (2.26 log10) when compared with control (p<0.05). ClAlP DMSO-mediated PDT did not present antifungal activity. Histological analysis revealed that PDT did not promote adverse effects on the tongue tissue. PDT mediated by both photosensitizers induced the TNF-α expression when compared with control (P<0.05). ClAlP mediated by PDT induced the expression of inflammatory cytokines, TNF-α, irrespective of the drug system delivery used. In the second study, a new murine model of oral...(Complete abstract electronic access below)

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2003 / Inclui bibliografias / Este estudo teve por objetivo comparar a eficácia (por meio da observação de hifas e/ou pseudohifas) de dois métodos citológicos no diagnóstico de candidose bucal: a Citologia Esfoliativa em Base-Líquida (CEBL) e a Citologia Esfoliativa Convencional (CEC)

Orientador: Ana Cláudia Pavarina / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Gilberto Leite Braga Ubida / Banca: Lívia Nordi Dovigo / Banca: Marlise Inêz Klein Furlan / Resumo: O presente estudo avaliou a eficácia da terapia fotodinâmica (PDT) na inativação de Candida albicans em modelos murino de candidíase oral. Adicionalmente, este estudo avaliou se a PDT causa danos ao núcleo da célula fúngica. Dessa forma, foram conduzidos três estudos: 1. Avaliou a eficácia da cloro-alumínio-ftalocianina encapsulado em nanoemulsão catiônica (ClAlP NE) na inativação de Candida albicans presente em modelo murino de candidíase oral; 2. Avaliou a eficácia da PDT mediada pelo Photodithazine®(PDZ) como tratamento para candidíase oral induzida; 3. Avaliou o potencial da inativação fotodinâmica (PDT) mediado pelo fotossensibilizador (PS) Curcumina (CUR) associado ao LED azul em causar danos no DNA de C albicans. No estudo 1, 75 camundongos fêmeas com 6 semanas foram imunossuprimidos e inoculados com C. albicans para induzir candidíase oral. A PDT foi realizada sobre a língua pela aplicação dos fotossensibilizadores ClAlP NE ou ClAlP DMSO e luz LED (100 J/cm2 - 660 nm). Em seguida, a avaliação microbiológica foi realizada por meio da recuperação de C. albicans da língua dos animais. Diluições seriadas foram realizadas, as colônias viáveis foram quantificado e o número de UFC mL determinado. Os animais foram sacrificados 24 horas após a PDT e as línguas foram removidas cirurgicamente para análise histológica e para análise de expressão de citocinas pró e antiinflamatórias (IL-1, TNF-α e IL-6) por ensaio de RT-qPCR. Os dados foram analisados por One-Way ANOVA. A PDT mediada por ClAIP-NE reduziu 2,26 log10 da viabilidade celular de C. albicans em comparação ao grupo controle (p <0,05). A PDT mediada por ClAlP DMSO não apresentou atividade antifúngica. A análise histológica revelou que a PDT não promoveu efeitos adversos sobre o tecido língual dos animais. A terapia mediada por ambos os fotossensibilizadores induziu a expressão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated the efficacy of photodynamic therapy (PDT) in the inactivation of C. albicans in a murine models of oral candidosis. Additionally, this study evaluated the poetencial of PDT to promote DNA damage of fungal cell. For this purpose, three studies were conducted: 1. Evaluated the photodynamic effect of chloro-aluminum phthalocyanine encapsulated in cationic nanoemulsions (ClAlP NE) to inactivate Candida albicans in a murine model of oral candidiasis. 2. Evaluated the photoinactivation (PDT) of Candida albicans in a murine model of oral candidosis, mediated by Photodithazine® (PDZ). 3. Evaluated the potential of PDT mediated by Curcumin (CUR) associated with the blue LED in causing DNA damage of C. albicans. In the first study, 75 6-week-old female Swiss mice were immunosuppressed and inoculated with C. albicans to induce oral candidiasis. PDT was performed on the tongue by the application of the photosensitizers and LED light (100 J cm-² - 660 nm). Next, microbiological evaluation was carried out by recovering C. albicans from the tongue via colony forming units (CFU mL-1). Then, the animals were sacrificed and the tongues were surgically removed for histological analysis and analysis of inflammatory cytokines expression (IL-1, TNF-α and IL-6) by RT-qPCR. Data were analyzed by ANOVA test. ClAlP NE-mediated PDT was able to reduce C. albicans recovered from the tongue (2.26 log10) when compared with control (p<0.05). ClAlP DMSO-mediated PDT did not present antifungal activity. Histological analysis revealed that PDT did not promote adverse effects on the tongue tissue. PDT mediated by both photosensitizers induced the TNF-α expression when compared with control (P<0.05). ClAlP mediated by PDT induced the expression of inflammatory cytokines, TNF-α, irrespective of the drug system delivery used. In the second study, a new murine model of oral...(Complete abstract electronic access below) / Doutor

Orientador: Wander José da Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-21T22:03:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vasconcellos_AndreaAraujode_M.pdf: 2510768 bytes, checksum: 3dde887465d6f0762c3b4b6771c9dd5f (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Na cavidade oral, a colonização por Candida albicans em nichos com valores distintos de pH contribui para o desenvolvimento de candidose associada ao uso de prótese. O tratamento dessa infecção tem sido facilitado utilizando-se o fluconazol (FLZ). Entretanto, não está claro se o pH dos biofilmes de C. albicans interfere na susceptibilidade destes ao FLZ. Dessa forma, neste trabalho foi avaliada a influência do pH de biofilmes de C. albicans na susceptibilidade ao FLZ. Testes de susceptibilidade ao FLZ foram realizados em células planctônicas e em biofilmes em três condições de pH (4,0, 5,5 ou 7,0). Testes de concentração inibitória mínima, concentração fungicida mínima e tempo de morte celular foram realizados para avaliar a susceptibilidade ao FLZ de células planctônicas. Para a susceptibilidade de biofilmes, Candida albicans ATCC 90028 foi desenvolvida na superfície de discos de resina a base de poli (metilmetacrilato) por um período de 48 horas. Em seguida, 2,56 ?g/mL de FLZ foram adicionados aos grupos experimentais por 24 horas, e os biofilmes foram analisados quanto à quantificação celular, bioatividade, secreção de proteinases e fosfolipases e parâmetros estruturais, como bio-volume, espessura média e coeficiente de rugosidade. A quantificação celular foi determinada por diluição decimal seriada, e a bioatividade foi avaliada pelo ensaio de XTT. A secreção de enzimas foi determinada por métodos colorimétricos. Microscopia confocal de varredura a laser foi usada para avaliar bio-volume, espessura média e coeficiente de rugosidade dos biofilmes. Todos os dados foram analisados estatisticamente por meio de análise de variância com dois fatores, seguido do teste de Tukey (? = 0,05). Para as células planctônicas, aumento na susceptibilidade ao FLZ foi observado com o valor mais alto de pH. Biofilmes desenvolvidos em pH 5,5 mostraram menor susceptibilidade ao FLZ em relação à quantificação celular (p < 0,05). Células de C. albicans expostas ao FLZ apresentaram menor bioatividade (p < 0,001). Quanto à atividade enzimática, maior produção de proteinase foi observada em biofilmes desenvolvidos em pH 4,0 (p < 0,001), enquanto houve valores aumentados de fosfolipase nos biofilmes desenvolvidos em pH 4,0 e 7,0 (p < 0,05). Considerando os parâmetros estruturais, os biofilmes desenvolvidos em pH 5,5, sem exposição ao FLZ, mostraram maior bio-volume e espessura média (p < 0,05), enquanto os biofilmes expostos ao FLZ mostraram coeficiente maior de rugosidade (p < 0,001). Dentro das condições estudadas, conclui-se que o pH dos biofilmes de C. albicans modula a susceptibilidade destes ao FLZ / Abstract: In the oral cavity, a successful colonization by Candida albicans in sites with different pH values contributes to the development of Candida-associated denture stomatitis. The treatment of this infection has been facilitated using fluconazole (FLZ). However, it is not clear how the pH of C. albicans biofilms can interfere in the susceptibility of FLZ. Therefore, this study evaluated the influence of pH of C. albicans biofilms in the susceptibility to FLZ. Susceptibility tests to FLZ were performed in planktonic cells and biofilms under three different pH values (4.0, 5.5 or 7.0). Minimal inhibitory concentration, minimal fungicidal concentration and time kill tests were used to evaluate the susceptibility in planktonic cells. For biofilms susceptibility, Candida albicans ATCC 90028 was allowed to be developed on poly (methlymethacrylate) resin discs surfaces for a period of 48 hours. Then, 2.56 ?g/mL of FLZ was added to the experimental groups for 24 hours and biofilms were analyzed by cell quantification, bioactivity, secretion of proteinases and phospholipases and structural parameters of bio-volume, average thickness and roughness coefficient. Cell quantification was determined by serial dilution, and bioactivity was evaluated by XTT assay. Secretion of enzymes was determined by colorimetric methods. Confocal microscopy was used to evaluate the bio-volume, average thickness and roughness coefficient of biofilms. All data were statistically analyzed by two?way ANOVA, followed by Tukey test (? = 0.05). For planktonic cells, an increase in susceptibility to FLZ was observed at the highest pH value. Biofilms developed at pH 5.5 showed less susceptibility to FLZ with respect to cell quantification (p < 0.05). C. albicans cells exposed to FLZ showed lower bioactivity (p < 0.001). In relation to enzymatic activity, higher production of proteinase was observed in biofilms developed at pH 4.0 (p < 0.001), whereas there were increased levels of phospholipase in biofilms developed at pH 4.0 and 7.0 (p < 0.05). Considering the structural parameters, the biofilms developed at pH 5.5, without exposure to FLZ, showed higher bio-volume and average thickness (p < 0.05), while the biofilms exposed to FLZ showed higher roughness coefficient (p < 0.001). Within the conditions studied, it can be concluded that pH of Candida albicans biofilms modulates the susceptibility to FLZ / Mestrado / Protese Dental / Mestra em Clínica Odontológica

A candidose bucal acomete grande número de pessoas mundialmente, sendo associada a condições como imunossupressão, radioterapia, tabagismo, higiene bucal, idade, xerostomia e uso de próteses removíveis. Uma importante abordagem terapêutica para essas infecções consiste nos medicamentos antifúngicos, que podem apresentar efeitos colaterais e resultar na resistência dos patógenos. Nesse contexto, a terapia fotodinâmica (PDT) faz-se interessante como alternativa capaz de minimizar essas limitações. Protocolos de PDT poderão ser mais facilmente assimilados à prática clínica se empregarem materiais já aprovados para uso odontológico. Sendo assim, este estudo propõe avaliar o uso de PDT com eritrosina como fotossensibilizador, irradiada por um LED azul, usando-se um modelo animal. Quarenta camundongos tiveram candidose induzida sobre o dorso da língua por meio de imunossupressão e inoculação com Candida albicans. Após estabelecimento da lesão durante cinco dias, os animais receberam um dentre quatro tratamentos possíveis: aplicação da eritrosina 5% seguida de irradiação pelo LED (E+L+); aplicação de eritrosina, somente (E+L-); salina seguida pela irradiação (EL+); e somente salina (E-L-). A fim de distinguir possíveis efeitos colaterais, os mesmos tratamentos foram aplicados em 12 camundongos sem a indução de candidose. O número de unidades formadoras de colônia de C. albicans foi contado após o tratamento, e a mucosa foi submetida à análise histológica para determinar o grau de inflamação. Os dados dos grupos foram comparados por meio de ANOVA e teste de Kruskal-Wallis, (&alpha;=0,05). Não foram detectadas diferenças significativas entre os grupos testados quanto à contagem de colônias de C. albicans e o grau de inflamação. O infiltrado inflamatório foi classificado como discreto na maioria dos casos. Os animais com candidose bucal induzida e os saudáveis que foram submetidos aplicação de eritrosina 5% e irradiação pelo LED apresentaram infiltrado inflamatório mais acentuado e lesões mais evidentes na camada epitelial, sugerindo que este protocolo ocasionou danos aos tecidos orais. / Oral candidosis affects many people worldwide and is associated with conditions such as immunosuppression, radiation, smoking, oral hygiene, age, xerostomia and use of removable prostheses. An important therapeutic approach for these infections consists of antifungal drugs, which have side effects and can result in the resistance of pathogens. In this context, photodynamic therapy (PDT) is an interesting alternative able to overcome those limitations. PDT protocols can be more easily assimilated in clinical practice if they employ materials already approved for use in dentistry. Thus, this study evaluate the PDT with the use of erythrosine as a photosensitizer, irradiated by a blue LED light, using an animal model. Forty mice had candidosis induced on the tongue by the immunosuppression and inoculation with Candida albicans. After five days that the lesion is established, the animals received one of four possible treatments: application of 5% erythrosine and irradiation by the LED (E+L+); erythrosine application, only (E+L- ); saline followed by irradiation (E-L+); and only saline (E-L-). In order to distinguish potential side effects, the same treatments were applied in 12 mice without induced candidosis. Colony-forming units (CFU) of C. albicans were counted after treatment, and the mucosa was subjected to histological analysis to determine the degree of inflammation. The data of the groups were compared using ANOVA and Kruskal-Wallis test (&alpha;=0.05). No significant difference was detected among the groups tested for the number of CFU of C. albicans and the degree of inflammation. The inflammatory infiltrate was classified as mild in most cases. Animals with induced oral candidosis and the healthy ones exhibited more pronounced inflammatory infiltrate and lesions in the epithelial layer following PDT by 5% erythrosine and irradiation by the LED light. Such findings suggest that this protocol resulted in damage to oral tissues.