Les récepteurs cannabinoïdes (RCB) sont des récepteurs membranaires qui font partie de la famille des récepteurs couplés aux protéines G. Plusieurs preuves expérimentales appuient l'idée que les cannabinoïdes seraient impliqués dans les voies de signalisation régulant la prolifération, la survie des cellules cancéreuses, l'angiogenèse ainsi que l'invasion tumorale. L'objectif de l'étude était de mesurer l'expression des RCB1 et RCB2 dans les tumeurs mammaires; et leur association avec les facteurs pronostiques connus du cancer du sein; et d'évaluer la survie globale, la survie sans récidive et la survie sans événement. Cette étude a été réalisée dans une cohorte de 522 femmes provenant de la banque de tissu du Centre des maladies du sein (CMS) diagnostiquées d'un cancer du sein invasif non métastatique et ayant eu une mastectomie entre le 1er décembre 2010 et le 30 avril 2012 au CMS à l'hôpital Saint-Sacrement à Québec, au Canada. L'expression des RCB a été mesurée par immunohistochimie. Des corrélations de Spearman ajustées ont été estimées et des modèles de risques proportionnels de Cox multivariés ont été utilisés pour estimer la survie. Cette étude a permis d'évaluer l'expression des RCB dans le tissu cancéreux mammaire. Plus l'expression du RCB1 était élevée, plus l'atteinte ganglionnaire était sévère (r[indice s]=0,11; p=0,0155) et plus le statut du récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain (HER2) avait tendance à être positif (r[indice s]=0,17; p=0,0002). Plus l'expression nucléaire du RCB2 était élevée, plus le statut des récepteurs de l'œstrogène (r[indice s]=0,17; p=0,0002) et à la progestérone (r[indice s]=0,12; p=0,0084) avait tendance à être positif, mais le grade tumoral était moins élevé (r[indice s]=-0,17; p=0,0002). Une expression cytoplasmique élevée du RCB2 était associée à 13% des récidives locorégionales et distance (HR=1,13 [0,97-1,33]), mais cette association n'était pas statistiquement significative. Ces analyses ont probablement manqué de puissance statistique. Les résultats suggèrent que l'expression des RCB pourrait être un marqueur pronostique pour le cancer du sein. / Cannabinoids receptors (CBR) are part of the membrane receptor G protein-coupled receptor family. Experimental evidence supports the idea that cannabinoids, the active components of cannabis and their derivatives are involved in signalling pathways regulating proliferation, cancer cell survival, angiogenesis as well as tumour invasion. In the present project, the objective was to measure the expression of CB1R and CB2R in breast cancer tissue. We then assessed the association between breast cancer prognostic factors and the expression of CBR. In addition, we evaluated the expression of CBR and overall survival, recurrence-free survival and event-free survival. This study was carried out in a cohort of 522 women diagnosed with invasive breast cancer and who had a mastectomy between December 1, 2010, and April 30, 2012, at the Centre des maladies du sein (CMS) at Saint-Sacrement Hospital in the City of Québec, in Canada. Clinical and pathological characteristics were retrieved from the CMS database for all women and CBR expression was measured by immunohistochemistry. Adjusted partial Spearman correlations with prognostic factors were estimated and multivariate proportional hazard Cox models were used. This study allowed to evaluate the expression of CBR in breast cancer tissue. High CB1R expression revealed more severe lymph node involvement (r[subscript s]=0.11; p=0.0155) and the human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) tended to be positive (r[subscript s]=0.17; p=0.0002). High nuclear CB2R expression showed that estrogen (r[subscript s]=0.17; p=0.0002) and progesterone receptors (r[subscript s]=0.12; p=0.0084) tended to be positive but showed a lower tumour grade (r[subscript s]=-0.17; p=0.0002). High cytoplasmic expression of CBR2 was associated, with 13% higher locoregional and distant recurrences (HR=1.13 [0.97-1.33]), but this association did not reach statistical significance. These analyses might have been underpowered to detect associations. These results indicate that CBR expression might be a prognostic marker for breast cancer.

Depuis la légalisation des extraits de cannabis et du cannabis comestible en 2018 au Canada, plusieurs industries ont commencé la production de produits transformés contenant des cannabinoïdes, un marché en forte croissance générant d'importants revenus. Puisque la législation permettant la vente de produits dérivés du cannabis pour des fins alimentaires au Canada est très récente (2019), peu d'études ont été réalisées sur l'impact de la matrice alimentaire sur la stabilité et la bioaccessibilité de ces composés actifs. En effet, les travaux publiés se sont plutôt intéressés à l'incorporation du cannabis dans des matrices à usage pharmaceutique ou utilisant des ingrédients non comestibles. Ainsi, avec la demande grandissante de produits comestibles, il devient primordial d'approfondir les recherches afin d'offrir une gamme de produits sécuritaires et innovants pour les consommateurs. Dans le cadre de ce projet de maîtrise, une huile de cannabis a été nanoémulsifiée et séchée par atomisation afin d'obtenir une poudre hydrosoluble enrichie en cannabinoïdes. Trois émulsifiants différents (isolat de protéines de lactosérum et de soya et Tween 80) ont été utilisés en combinaison avec de la maltodextrine. Tout d'abord, l'étude des propriétés physicochimiques de la poudre générée a été réalisée. Par la suite, la stabilité et la bioaccessibilité des cannabinoïdes ont été évaluées. Bien que les isolats protéiques aient montré une meilleure efficacité d'encapsulation que le Tween 80, ce surfactant non-ionique a permis une meilleure bioaccessibilité des composés actifs. Ces résultats peuvent être en partie expliqués par la dénaturation et l'agrégation des protéines à l'interface de la nanoémulsion lors du séchage par atomisation. Par conséquent, l'évaluation de l'impact des divers émulsifiants a d'abord permis d'approfondir les connaissances au niveau de la nanoencapsulation par atomisation de composés lipophiles comme les cannabinoïdes. Ce projet a également permis de mettre en relief l'importance de la structuration de l'interface d'une nanoémulsion sur sa stabilité au séchage par atomisation et sur la bioaccessibilité des cannabinoïdes durant la digestion. Ces résultats permettront de développer des stratégies plus efficaces pour la formulation de produits à base de cannabis comestibles afin de mieux répondre au marché grandissant de produits transformés du cannabis. / Since the legalization of cannabis extracts and edible cannabis in 2018 in Canada, several industries have started producing processed products containing cannabinoids, a fast-growing market that generates significant revenue. Due to the recent opening of legislation allowing the sale of cannabis-derived products for food purposes in Canada (2019), few studies have been conducted on the impact of the food matrix on the stability and bioaccessibility of these active compounds. To date, existing work in the literature has focused more on the incorporation of cannabis into pharmaceutical formats using inedible ingredients. With the growing demand for edible products, it is essential to extend scientific knowledge to offer consumers a safe, innovative, and effective product. As part of this master's project, cannabis oil was homogenized to form a nanoemulsion and spray-dried to obtain a water-soluble powder enriched with encapsulated cannabinoids. Three emulsifiers (whey protein isolate, soy protein isolate, and Tween 80) were used in combination with maltodextrin to assess their impact on various aspects. At first, the study of the physicochemical properties of the powder obtained was carried out. Secondly, the stability and bioaccessibility of the cannabinoids were evaluated. Although the protein isolates showed better encapsulation efficiency, the non-ionic surfactant allows better bioaccessibility of the active compounds. The denaturation and aggregation of proteins can partly explain these results of the changes observed at the interface of the nanoemulsion during spray drying. The results obtained showed the importance of choosing the proper emulsifier for the encapsulation by atomization of lipophilic compounds such as cannabinoids. This project has highlighted the importance of structuring a nanoemulsion's interface on its stability to spray drying and the bioaccessibility of cannabinoids during digestion. These results will allow the development of more effective strategies for formulating edible cannabis products to better respond to the growing market for processed cannabis products.

Les récepteurs cannabinoïdes (RCB) sont des récepteurs membranaires qui font partie de la famille des récepteurs couplés aux protéines G. Plusieurs preuves expérimentales appuient l'idée que les cannabinoïdes seraient impliqués dans les voies de signalisation régulant la prolifération, la survie des cellules cancéreuses, l'angiogenèse ainsi que l'invasion tumorale. L'objectif de l'étude était de mesurer l'expression des RCB1 et RCB2 dans les tumeurs mammaires; et leur association avec les facteurs pronostiques connus du cancer du sein; et d'évaluer la survie globale, la survie sans récidive et la survie sans événement. Cette étude a été réalisée dans une cohorte de 522 femmes provenant de la banque de tissu du Centre des maladies du sein (CMS) diagnostiquées d'un cancer du sein invasif non métastatique et ayant eu une mastectomie entre le 1er décembre 2010 et le 30 avril 2012 au CMS à l'hôpital Saint-Sacrement à Québec, au Canada. L'expression des RCB a été mesurée par immunohistochimie. Des corrélations de Spearman ajustées ont été estimées et des modèles de risques proportionnels de Cox multivariés ont été utilisés pour estimer la survie. Cette étude a permis d'évaluer l'expression des RCB dans le tissu cancéreux mammaire. Plus l'expression du RCB1 était élevée, plus l'atteinte ganglionnaire était sévère (r[indice s]=0,11; p=0,0155) et plus le statut du récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain (HER2) avait tendance à être positif (r[indice s]=0,17; p=0,0002). Plus l'expression nucléaire du RCB2 était élevée, plus le statut des récepteurs de l'œstrogène (r[indice s]=0,17; p=0,0002) et à la progestérone (r[indice s]=0,12; p=0,0084) avait tendance à être positif, mais le grade tumoral était moins élevé (r[indice s]=-0,17; p=0,0002). Une expression cytoplasmique élevée du RCB2 était associée à 13% des récidives locorégionales et distance (HR=1,13 [0,97-1,33]), mais cette association n'était pas statistiquement significative. Ces analyses ont probablement manqué de puissance statistique. Les résultats suggèrent que l'expression des RCB pourrait être un marqueur pronostique pour le cancer du sein. / Cannabinoids receptors (CBR) are part of the membrane receptor G protein-coupled receptor family. Experimental evidence supports the idea that cannabinoids, the active components of cannabis and their derivatives are involved in signalling pathways regulating proliferation, cancer cell survival, angiogenesis as well as tumour invasion. In the present project, the objective was to measure the expression of CB1R and CB2R in breast cancer tissue. We then assessed the association between breast cancer prognostic factors and the expression of CBR. In addition, we evaluated the expression of CBR and overall survival, recurrence-free survival and event-free survival. This study was carried out in a cohort of 522 women diagnosed with invasive breast cancer and who had a mastectomy between December 1, 2010, and April 30, 2012, at the Centre des maladies du sein (CMS) at Saint-Sacrement Hospital in the City of Québec, in Canada. Clinical and pathological characteristics were retrieved from the CMS database for all women and CBR expression was measured by immunohistochemistry. Adjusted partial Spearman correlations with prognostic factors were estimated and multivariate proportional hazard Cox models were used. This study allowed to evaluate the expression of CBR in breast cancer tissue. High CB1R expression revealed more severe lymph node involvement (r[subscript s]=0.11; p=0.0155) and the human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) tended to be positive (r[subscript s]=0.17; p=0.0002). High nuclear CB2R expression showed that estrogen (r[subscript s]=0.17; p=0.0002) and progesterone receptors (r[subscript s]=0.12; p=0.0084) tended to be positive but showed a lower tumour grade (r[subscript s]=-0.17; p=0.0002). High cytoplasmic expression of CBR2 was associated, with 13% higher locoregional and distant recurrences (HR=1.13 [0.97-1.33]), but this association did not reach statistical significance. These analyses might have been underpowered to detect associations. These results indicate that CBR expression might be a prognostic marker for breast cancer.

Étant donné que l'utilisation des cannabinoïdes dans un but thérapeutique est en pleine expansion, notre laboratoire a voulu vérifier, à l'aide de deux études cliniques fondamentales chez des sujets sains, le potentiel analgésique d'un cannabinoïde synthétique, le nabilone, lors de différents tests de douleur. Ces tests incluent l'utilisation d'une thermode (plaque chauffante) utilisée sur la peau à des températures supérieures au seuil de la douleur ainsi que l'utilisation du test du réflexe RIII vu par électromyogramme (EMG) et potentiels évoqués vus par électroencéphalogrammes (EEG) réalisé à l'aide de stimulations électriques du nerf sural. L'effet analgésique du nabilone était vérifié à l'aide de ces mesures électrophysiologiques de même que par l'utilisation de méthodes psychophysiques de mesure de perception de la douleur des participants utilisant une échelle analogue visuelle de la douleur allant de 0 à 100. Le potentiel synergistique du nabilone suite à l'activation d'un mécanisme de contrôle de la douleur appelé contrôle inhibiteur diffus nociceptif (CIDN) a aussi été vérifié. Ces tests furent effectués en double aveugle avec un placébo et des doses de 0 mg, 0,5 mg et 1 mg de nabilone. Malgré une tendance positive, nous n'avons pas réussi à voir un effet analgésique concret du nabilone 0 mg, 0,5 mg et 1 mg plus fort que l'effet placébo aussi bien dans les tests de thermode que de RIII. Le nabilone n'a pas su non plus, sur la population totale, créer d'effet synergistique avec l'effet du CIDN. Par contre, suite à des analyses statistiques plus poussées, nous avons pu voir que le nabilone avait, chez les femmes, un effet antihyperalgésique suite à l'activation du CIDN. Des effets très différents ont pu aussi être vus entre la réponse des femmes et des hommes suite au test du RIII quant à son effet spinal et supraspinal.

Titre de l'écran-titre (visionné le 19 octobre 2023) / Les produits de Cannabis sativa L. comestibles tels que les teintures alcooliques et les huiles contenant des cannabinoïdes sont en vogue. Ces extractions liquides sont souvent fabriquées avec des inflorescences de cannabis à partir d'éthanol et d'huile alimentaire, car les cannabinoïdes sont solubles dans ces solvants. Cependant, l'utilisation d'inflorescences pour fabriquer ces produits n'est pas idéale en matière de valeur ajoutée. Ce mémoire propose donc des méthodes d'extraction des cannabinoïdes valorisant les sous-produits de l'industrie du cannabis. Les sous-produits consistent en un mélange d'effeuillures, de feuilles, de tiges et de branches de cannabis. L'objectif principal de ce mémoire est de développer des procédés d'extraction de cannabinoïdes des sous-produits du cannabis par macération à température ambiante dans l'alcool et par macération à chaud dans l'huile végétale. Le premier objectif spécifique est de déterminer s'il est possible d'atteindre une concentration seuil définie de 6 mg/mL en cannabinoïdes totaux dans les teintures alcooliques et les huiles de cannabis obtenues respectivement par la macération à température ambiante des sous-produits du cannabis dans l'éthanol 70% et par la macération à chaud des sous-produits dans l'huile végétale. Le deuxième objectif spécifique de cette étude tente de démontrer quelle méthode d'extraction entre celle à base d'éthanol 70% et celle à base d'huile végétale possède le meilleur pouvoir d'extraction des cannabinoïdes. Pour atteindre les objectifs, les cannabinoïdes présents dans les sous-produits à valoriser sont caractérisés ainsi que les cannabinoïdes extraits à l'aide de l'éthanol et de l'huile végétale. Leur caractérisation est effectuée par HPLC et les résultats sont analysés statistiquement. D'après les résultats, la moyenne du marqueur des cannabinoïdes totaux avec le facteur de conversion (Total CANNAB) est de 0,97 mg/mL ± 0,13 pour la teinture de cannabis et de 1,57 mg/mL ± 0,21 pour l'huile de cannabis et ces moyennes sont significativement différentes et inférieures à la concentration seuil définie de 6 mg/mL à α = 5%. Cela signifie qu'il est possible de développer des procédés d'extraction de cannabinoïdes des sous-produits du cannabis par macération à température ambiante dans l'alcool et par macération à chaud dans l'huile végétale. Cependant, il n'est pas possible d'atteindre une concentration seuil définie de 6 mg/mL en cannabinoïdes totaux dans les teintures et les huiles de cannabis étudiées. Également, les résultats révèlent qu'il y a une différence significative à α = 5% entre la moyenne de Total CANNAB de la teinture et de l'huile. Ainsi, dans ce projet de recherche, la méthode d'extraction à partir d'huile végétale possède un meilleur pouvoir d'extraction des cannabinoïdes comparativement à celle à base d'éthanol 70%.

La douleur chronique touche environ un adulte sur cinq et a des impacts importants sur toutes les sphères de la vie des personnes qui en souffrent. À ce jour, on constate cependant que la prise en charge de la douleur chronique est sous-optimale au Canada. Parmi les modalités thérapeutiques disponibles, il a été démontré que les cannabinoïdes sont efficaces et sécuritaires pour certains syndromes de douleur chronique. Ces produits pharmacologiques comprennent la nabilone (comprimé), le nabiximols (vaporisateur) et la marihuana à des fins médicales (cannabis séché). À ce jour, la prévalence d’utilisation de ces produits demeure faible et il semble exister plusieurs barrières à cette utilisation. La présente étude transversale s'est donc penchée sur les pratiques et attitudes des médecins de la région administrative de l’Abitibi-Témiscamingue, Québec, et ce, tout particulièrement dans le contexte du traitement de la douleur chronique non cancéreuse (DCNC). Les objectifs spécifiques de cette étude étaient de : 1) Mesurer la prévalence de prescription de cannabinoïdes pour le traitement de la DCNC, 2) Décrire le degré de confort, les barrières et les besoins en matière de formation quant à la prescription de cannabinoïdes pour le traitement de la DCNC, et 3) Identifier les prédicteurs de la prescription de cannabinoïdes pour le traitement de la DCNC. Pour répondre à ces objectifs, un questionnaire postal a été envoyé aux 318 médecins pratiquant dans la région de l’Abitibi-Témiscamingue (taux de participation = 52 %). La prévalence de prescription de cannabinoïdes (tous types confondus) pour le traitement de la DCNC au cours de la dernière année était de 23 %, mais soulignons que ces produits ont été prescrits à peu de patients. Les données suggèrent qu’un meilleur degré de confort à prescrire des cannabinoïdes pour le traitement de la DCNC est le seul prédicteur de cette prescription. Plusieurs barrières telles que le manque de formation des professionnels de la santé et le manque de lignes directrices pour la prescription de cette classe médicamenteuse ont été exprimées. Les participants ont souligné un besoin de formation continue, notamment à propos des risques de l’utilisation des cannabinoïdes à long terme, de la DCNC et son traitement et de la synergie d’action entre les cannabinoïdes et les opioïdes. En somme, les résultats de cette étude permettront de mieux orienter les activités de formation continue des médecins de la région.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Les effets de la marijuana, un médicament utilisé par l’homme depuis des millénaires, sur le système visuel sont peu connus. Une meilleure connaissance de la distribution du système endocannabinoïde (eCB) de la rétine pourrait expliquer comment cette drogue affecte la vision. Cette étude vise à caractériser la distribution du récepteur cannabinoïde CB1 (CB1R) et de l’enzyme de dégradation FAAH (“fatty acid amide hydrolase”) des ligands du CB1R dans la rétine du singe Vert (Chlorocebus sabaeus). De plus, elle vise à déterminer quelles sous-populations cellulaires de la rétine expriment ces composantes. La plupart des études à ce jour ont été conduites surtout sur les rongeurs et peu de travaux ont été réalisés chez le singe. Notre étude vient donc combler cette carence. Par le biais de méthodes immunohistochimiques, nous avons investigué la localisation du CB1R et de l’enzyme FAAH à différentes excentricités rétiniennes, de la fovéa centralis vers la périphérie. Nos résultats, en accord avec notre hypothèse de travail, démontrent que CB1R et FAAH sont exprimés à travers toute la rétine mais avec, cependant, des différences notoires. Au niveau de la couche des photorécepteurs, CB1R est exprimé préférentiellement dans les cônes et ce patron d’expression suit la distribution des photorécepteurs centre-périphérie. De plus, CB1R se retrouve surtout dans les pédicules des cônes de la couche plexiforme externe. CB1R et FAAH sont abondants dans les cellules bipolaires tant au centre qu’en périphérie. Le soma et l’axone des cellules ganglionnaires expriment aussi CB1R et FAAH. Ces données suggèrent que le système eCB est présent à travers toute la rétine du primate et pourrait expliquer les perturbations visuelles entrainées par la marijuana, telles la photosensibilité et la vision des couleurs. / The effects of marijuana, a drug that has been used by men for millennia, on the visual system are poorly understood. A better understanding of the distribution of the endocannabinoid system in the retina will help us explain how this drug affects vision. This study aims at characterizing the distribution of the endocannabinoid receptor CB1 (CB1R) and the enzyme degrading CB1R ligands, fatty acid amide hydrolase (FAAH) throughout the Green monkey retina (Chlorocebus sabaeus). In addition, it seeks to determine which sub-population of neurons expresses CB1R and the degrading enzyme FAAH. Most data on the endocannabinoid system have been acquired in rodents and studies on monkeys are rather scarce. We attempted to fill this void by using immunohistochemical methods to locate CB1R and FAAH at various eccentricities of the monkey retina, from the center to the far periphery. Our results, in agreement with our hypothesis, demonstrate that CB1R and FAAH are expressed throughout the retina. At the level of the photoreceptors, CB1R is expressed preferentially in cones rather than in rods, and this expression pattern follows the photoreceptors distribution. In the outer plexiform layer, CB1R immunoreactivity is predominantly concentrated in the cone pedicles. Although foveal cones are the main expressers of both CB1R and FAAH, these are also found in rod bipolar cells. The ganglion cell axons strongly express the CB1 receptor and the enzyme FAAH. These data suggest that the presence of CB1R throughout the retina may be responsible for the visual effects commonly reported by cannabis users, such as the increase in photosensitivity and alterations in color discrimination.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Le travail réalisé dans le cadre de cette thèse vise à l'approfondissement des connaissances sur l'impact de l'environnement gestationnel sur le développement de la commande respiratoire chez le nouveau-né. La respiration est une activité rythmique et autonome. La maturation des réseaux neuronaux impliqués dans son contrôle commence au cours de la gestation et persiste pendant la période postnatale. Le contrôle respiratoire est donc particulièrement susceptible à des variations de l'environnement intra-utérin. Nous avons étudié l'effet de deux stress gestationnels chroniques distincts : l'exposition à des cannabinoïdes et l'exposition à une hypoxie prénatale. A l'aide de techniques intégrées telles que la pléthysmographie à corps entier, éléctrophysiologiques comme la préparation de tronc cérébrale isolé ou les tranches de bulbes et immunohisto- et neurochimiques, nous avons pu caractériser l'impact des stress prénataux étudiés sur la plasticité respiratoire développementale. Nous avons pu établir un rôle central de l'anandamide dans la modulation de la commande respiratoire, probablement via des mécanismes noradrénergiques. L'exposition prénatale au WIN 55,212-2 induit une hyperventilation basale chez la souris nouveau-née qui semble relever d'altérations périphériques. Elle induit également une accentuation de la réponse centrale à l'hypoxie aigue et affecte l'apparition d'irrégularités respiratoires telles que les apnées. Quant à l'hypoxie prénatale, elle induit une hyperventilation basale d'origine centrale ainsi qu'une augmentation de l'activité catécholaminergique du tronc cérébrale. / Breathing is an autonomic rhythmic activity. The maturation of the neuronal networks responsible for breathing control begins in early gestation and persists throughout the neonatal period. This renders breathing control particularly susceptible to early insults arising from the intra uterine environment. We have studied the effects of two such gestational stress factors, namely prenatal exposure to cannabinoids and to gestational hypoxia. We use a wide array of in vivo and in vitro techniques in order to characterise the effect of the adverse intra uterine environment on the development of respiratory control. These include integrated techniques such as whole body plethysmography, electrophysiological preparations (en bloc and brainstem slice recordings) as well as immunohisto- and neurochemical approaches. We show that the prenatal stress factors induce developmental respiratory plasticity. This translates as heightened basal ventilation, observed following prenatal exposure to both cannabinoids and hypoxia. Comparisons between in vivo and in vitro techniques reveal a peripheral origin for the alterations observed following prenatal exposure to cannabinoids, suggesting a perturbation of the initiation and/or integration of information from the peripheral carotid bodies. Following prenatal hypoxia, respiratory perturbations have a central origin and can thus be observed in reduced preparations such as brainstem slice recordings. Neurochemical and immunohistochemical assays also reveal alterations in the bioaminergic modulation of the respiratory rhythm generator, perhaps underpinning the observed effects on respiratory control.