Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-09-30Bitstream added on 2014-06-13T20:40:54Z : No. of bitstreams: 1 nunes_ph_dr_rcla.pdf: 1985171 bytes, checksum: 90822c17968e69a94d200d6492162814 (MD5) / O contato dos carrapatos com os hospedeiros e a liberação de antígenos por meio da saliva estimula o desenvolvimento de respostas imune por parte dos hospedeiros. Os objetivos deste trabalho foram os de analisar e comparar morfo-histoquimicamente as glândulas salivares de fêmeas de Amblyomma cajennense fixadas em hospedeiros naive e reinfestados, e os resultados revelaram que coelhos reinfestados por A. cajennense desenvolvem resistência contra os mesmos em apenas uma infestação e essa resistência provoca efeitos no ciclo de atividade e na degeneração das glândulas salivares. Fêmeas fixadas em coelhos resistentes apresentaram aumento do tempo necessário para atingir o completo ingurgitamento e fêmeas ingurgitadas apresentaram redução significativa do peso final. As glândulas salivares dessas fêmeas apresentaram alterações morfológicas, que foram mais evidentes naquelas submetidas à terceira infestação. A histologia e a histoquímica mostraram que os ácinos I não sofreram alterações em comparação com aqueles das fêmeas fixadas em coelhos naive. As células c dos ácinos II apresentaram sinais de degeneração precoce, o que resultou na diminuição da eficiência alimentar. No ácino III as células d estenderam o tempo de atividade, provavelmente relacionado ao aumento do tempo de permanência das fêmeas nos hospedeiros resistentes. / The contact with the ticks and hosts and the antigen releasing by saliva, stimulates the immune response development by the hosts. This study aims to analyze and compare morphohistochemically the salivary glands of Amblyomma cajennense females fixed on naive and reinfested hosts. The results show that re-infested rabbits by A. cajennense develop resistance against them in only one infestation and such resistance shows effects in the development and degeneration cycle of salivary glands. Females fixed on resistant rabbits showed an increase in the time required to complete the engorgement while the final weight of engorged females showed significant reduction. These female salivary glands showed morphological changes, which were more evident in females subjected to the third infestation. The acini I, no changes had been occurred compared with those of females fixed in naive rabbits. The acini II, the c cells showed early degeneration signs, which may result in feed efficiency reduction. In acini III, the d cells extended the activity time, which may be associated with the increase in the female fixation time which had been fed on resistant hosts.

Orientador: Rosemeire Cristina Linhari Rodrigues Pietro / Banca: Lourdes Campaner dos Santos / Banca: Nara Amélia de Rosa Farias / Banca: Maria Izabel Souza Camargo / Banca: Ary Fernandes Junior / Resumo: O carrapato Rhipicephalus sanguineus é a espécie de maior disseminação mundial e está comprovadamente envolvido na transmissão de agentes patogênicos. Estudos têm demonstrado aquisição de resistência a alguns dos princípios ativos usados em formulações comerciais de acaricidas. Neste trabalho, utilizando-se extrato etanólico 70% (PAEtOH70%) e óleo essencial (OE) de partes aéreas de Tagetes patula, avaliamos a ação carrapaticida in vitro contra os diversos estágios de desenvolvimento no ciclo de vida do ixodídeo R. sanguineus. Na concentração de 50,0 mg/mL, PAEtOH70% diminuiu a oviposição em 21,5%, eliminou 99,8% das larvas e destruiu 96,5% dos ovos. O OE a 4% inibiu a oviposição em 33,94%. Apesar da baixa taxa de mortalidade de fêmeas adultas ingurgitadas, análises microscópicas da estrutura dos ovários revelaram importantes alterações morfológicas na estrutura dos ovócitos II-V e células do pedicelo, interferindo diretamente na embriogênese normal, prejudicando ou inviabilizando a formação de larvas sadias. Para garantir o uso seguro em uma possível formulação, avaliamos a atividade citotóxica de PAEtOH70% e do OE frente a macrófagos murinos, obtendo-se IC50 de 210,9 µg/mL e IC50 de 0,04%, respectivamente. O extrato foi caracterizado fitoquimicamente por HPLC-EM, tendo sido identificados 12 favonóides O-glicosilados. O óleo foi caracterizado fitoquimicamente por CG-EM, revelando a presença de 55 compostos, sendo os principais o 4-vinil-guaiacol e o gama-terpineno. Quanto aos ensaios antimicrobianos, o extrato PAEtOH70% não inibiu o crescimento de B. bassiana e M. anisopliae (CIMs > 1250,0 µg/mL) e apresentou a melhor ação contra T. rubrum e T. rubrum (FOC) (312,5 e 468,75 µg/mL, respectivamente) / Abstract: The tick Rhipicephalus sanguineus is the species most worldwide spread and is proven to be involved in the transmission of pathogens. Studies have shown acquisition of resistance to some of the active ingredients used in commercial formulations of acaricides. In this study, using 70% ethanol extract (PAEtOH70%) and essential oil (EO) from aerial parts of Tagetes patula, we evaluated the in vitro acaricide action against various developmental stages in the life cycle of ixodid R. sanguineus. At the concentration of 50.0 mg/mL, PAEtOH70% decreased the oviposition by 21.5%, eliminated 99.8% of the larvae and destroyed 96.5% of the eggs. The OE 4% inhibited oviposition in 33.94%. Despite the low mortality rate of engorged adult females, microscopic analysis of the structure of the ovaries showed significant morphological changes in the structure of II-V oocytes and cells of pedicel, interfering directly in normal embryogenesis, impairing or invalidating the formation of healthy larvae. To ensure safe use in a possible formulation, we evaluated the cytotoxic activity of PAEtOH70% and OE against murine macrophages, yielding IC50 of 210.9 mg/mL and IC50 of 0.04%, respectively. The extract was phytochemically characterized by HPLC-MS and was identified 12 flavonoids O-glycosylated. The oil was phytochemically characterized by GC-MS, revealing the presence of 55 compounds, the main ones being the 4-vinyl guaiacol and gamma-terpinene. Regarding antimicrobial assays, the extract PAEtOH70% did not inhibit growth of B. bassiana and M. anisopliae (MICs > 1250.0 mg/mL) and showed the best activity against T. rubrum and T. rubrum (FOC) (312.5 and 468.75 mg/mL, respectively) / Doutor

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Agroecossistemas, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-02-07T03:11:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 343735.pdf: 2228428 bytes, checksum: fccc89713f2cea062687c0f072ecaf35 (MD5) Previous issue date: 2016 / O carrapato Rhipicephalus microplus está amplamente distribuído na América Latina e causa danos à saúde animal, prejuízos econômicos à pecuária bovina bem como danos ambientais. A imunovacinologia tem sido empregada como alternativa ao uso de produtos químicos em programas de controle integrado e obtido sucesso em países da América Latina. No entanto, pesquisas com antígenos que sejam capazes de controlar estirpes sobre as quais a ação da proteína Bm86 não obtenha eficácia, têm sido realizadas. O objetivo dessa revisão sistemática foi analisar diferenças entre antígenos, bem como fatores em ensaios de desafio, que possam ter sido determinantes para eficácia no controle do carrapato R. microplus, na América Latina. Foram analisados e incluídos apenas estudos que atenderam os critérios: (i) ensaios randomizados que estudaram antígenos candidatos para controle de estirpes de R. microplus da América Latina, e realizados nesta área, sendo teste desafio em animais de laboratório, com avaliação da eficácia do antígeno sobre, ao menos, dois parâmetros biológicos e realizados de 1994 a 2015; (ii) informação do grau de sangue e idade dos bovinos avaliados; e (iii) no mínimo três animais por grupo do experimento. Na estratégia de busca foram utilizadas três bases de dados eletrônicos: PubMed, Web of Science e CAB. Tanto a estratégia de busca quanto o método de análise se amparam na proposta do Cochrane Handbook for Systematic Reviews of Interventions, porém, para a discussão priorizou-se os critérios do guia do Centre for Reviews and Dissemination - CRD. A busca encontrou 3.883 referências, das quais foram selecionados 13 estudos. Os antígenos contidos nos ensaios/estudos incluídos são ocultos. Esses estudos, após a avaliação da qualidade metodológica, apresentaram moderado a alto risco de viés. Além do risco de viés, a variabilidade na forma de conduzir os ensaios, bem como ausência de réplicas amostrais levaram a apenas uma avaliação de efeito, a qual indicou se a prática de vacinação sobre o controle do carrapato é benéfica; tal hipótese foi confirmada pela meta-análise, pois a medida de efeito resumo, estimada por regressão (EVR), foi maior do que zero. A meta-análise detectou diferenças entre os estudos, porém não foi possível indicar o melhor antígeno, pois para isso, deveria haver mais réplicas de diferentes antígenos sobre uma mesma estirpe e de um mesmo antígeno sobre diferentes estirpes, sob conduções experimentais similares. Sob essa ótica, a revisão sistemática abriu caminhos para avaliações futuras com meta-análise, caso se invistam em maior padronização de ensaios e haja réplicas de estudos de antígenos vacinais sobre estirpes específicas. Nos três países, Brasil, Cuba e México, houve pelo menos um antígeno, de uma estirpe nativa, com eficácia acima de 60% (mediana) dentre os estudos da presente revisão, entre os anos de 2002 e 2015. Adicionalmente, não existem critérios padronizados para classificar antígenos altamente eficazes. Por isso foi possível apenas comparações de antígenos com potenciais pouco ou muito pouco específicos de antigenicidade, porém, apesar disso, elas permitiram, pelas evidências encontradas, selecionar os antígenos que se apresentaram, potencialmente, mais promissores, tais como: RmFER2 e RmAQP1, SBm7462, SUB-MSP1a, pPO, Bm95 e rBrRm-MP4.<br> / Abstract : The tick Rhipicephalus microplus is widely distributed in Latin America and causes veterinary, economic and environmental damage. The imunovacinologia has been used as an alternative to the use of chemicals in integrated control programs and been successful in countries of Latin America. However, research with antigens that are able to control the strains on which the action of protein Bm86 not get effectiveness have been performed. The purpose of this systematic review was to identify differences between antigens, as well as factors in testing challenge, which may have been decisive for the efficacy of the control R. microplus in Latin America. Were identified and included only studies that presented the criteria: (i) randomized trials that studied candidate antigens for control of strains of R. microplus in Latin America, and in this field, and challenge testing in laboratory animals, with evaluation of the efficacy of antigen on at least two biological parameters and performed from 1994 to 2015; (ii) race information and age of the evaluated cattle; and (iii) a minimum of three animals per experimental group. In strategy of busca, was selected three electronic databases: PubMed, Web of Science and CAB. Were included only articles in English, because were not found in Spanish or Portuguese. Both the search strategy and the analysis method were supported by proposed Cochrane Handbook for Systematic Reviews of Interventions, however, to discuss prioritized the criteria of CRD guide. The search was conducted from November to December 2015 and were selected 13 studies, of the total of 3,883 references found. All antigens contained in the tests / studies are concealed. These studies, after the evaluation of methodological quality, were classified as moderate to high risk of bias. In addition to the displayed bias risk, the variability in how to conduct the tests, and there was no sample replicates (studies), took just over an effect evaluation, which indicated if the practice of vaccination on tick control is beneficial; this hypothesis was confirmed by the meta-analysis as the summary measure of effect, estimated by regression (EVR) was greater than zero. For the meta-analysis were found differences between the studies, but it was not possible to indicate the best antigen for therefore, there should be more replicas of different antigens on the same strain and the same antigen on different strains under similar experimental conductions. Under this view, the systematic review paved the way for future evaluations with meta-analysis, if to invest in greater standardization of tests and replicas of studies on vaccine antigens on specific strains. In Brazil, Cuba and Mexico, there was at least one antigen, of native strain, effectively above 60% (median) among the studies of this review, between 2002 and 2015. Additionally, there are no standardized criteria to rank highly effective antigens. And so it was only possible antigens comparisons with potentially little or very little specific antigenicity, but nevertheless they allowed, the evidence found, select the antigens that showed potentially more promising, such as RmFER2 and RmAQP1, SBm7462, SUB-MSP1a, pPO, Bm95 and rBrRm-MP4.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-30Bitstream added on 2014-06-13T20:03:06Z : No. of bitstreams: 1 politi_fas_dr_arafcf.pdf: 1790424 bytes, checksum: 674d81bbf9bbed74ea04e20c4278b4af (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O carrapato Rhipicephalus sanguineus é a espécie de maior disseminação mundial e está comprovadamente envolvido na transmissão de agentes patogênicos. Estudos têm demonstrado aquisição de resistência a alguns dos princípios ativos usados em formulações comerciais de acaricidas. Neste trabalho, utilizando-se extrato etanólico 70% (PAEtOH70%) e óleo essencial (OE) de partes aéreas de Tagetes patula, avaliamos a ação carrapaticida in vitro contra os diversos estágios de desenvolvimento no ciclo de vida do ixodídeo R. sanguineus. Na concentração de 50,0 mg/mL, PAEtOH70% diminuiu a oviposição em 21,5%, eliminou 99,8% das larvas e destruiu 96,5% dos ovos. O OE a 4% inibiu a oviposição em 33,94%. Apesar da baixa taxa de mortalidade de fêmeas adultas ingurgitadas, análises microscópicas da estrutura dos ovários revelaram importantes alterações morfológicas na estrutura dos ovócitos II-V e células do pedicelo, interferindo diretamente na embriogênese normal, prejudicando ou inviabilizando a formação de larvas sadias. Para garantir o uso seguro em uma possível formulação, avaliamos a atividade citotóxica de PAEtOH70% e do OE frente a macrófagos murinos, obtendo-se IC50 de 210,9 µg/mL e IC50 de 0,04%, respectivamente. O extrato foi caracterizado fitoquimicamente por HPLC-EM, tendo sido identificados 12 favonóides O-glicosilados. O óleo foi caracterizado fitoquimicamente por CG-EM, revelando a presença de 55 compostos, sendo os principais o 4-vinil-guaiacol e o gama-terpineno. Quanto aos ensaios antimicrobianos, o extrato PAEtOH70% não inibiu o crescimento de B. bassiana e M. anisopliae (CIMs > 1250,0 µg/mL) e apresentou a melhor ação contra T. rubrum e T. rubrum (FOC) (312,5 e 468,75 µg/mL, respectivamente) / The tick Rhipicephalus sanguineus is the species most worldwide spread and is proven to be involved in the transmission of pathogens. Studies have shown acquisition of resistance to some of the active ingredients used in commercial formulations of acaricides. In this study, using 70% ethanol extract (PAEtOH70%) and essential oil (EO) from aerial parts of Tagetes patula, we evaluated the in vitro acaricide action against various developmental stages in the life cycle of ixodid R. sanguineus. At the concentration of 50.0 mg/mL, PAEtOH70% decreased the oviposition by 21.5%, eliminated 99.8% of the larvae and destroyed 96.5% of the eggs. The OE 4% inhibited oviposition in 33.94%. Despite the low mortality rate of engorged adult females, microscopic analysis of the structure of the ovaries showed significant morphological changes in the structure of II-V oocytes and cells of pedicel, interfering directly in normal embryogenesis, impairing or invalidating the formation of healthy larvae. To ensure safe use in a possible formulation, we evaluated the cytotoxic activity of PAEtOH70% and OE against murine macrophages, yielding IC50 of 210.9 mg/mL and IC50 of 0.04%, respectively. The extract was phytochemically characterized by HPLC-MS and was identified 12 flavonoids O-glycosylated. The oil was phytochemically characterized by GC-MS, revealing the presence of 55 compounds, the main ones being the 4-vinyl guaiacol and gamma-terpinene. Regarding antimicrobial assays, the extract PAEtOH70% did not inhibit growth of B. bassiana and M. anisopliae (MICs > 1250.0 mg/mL) and showed the best activity against T. rubrum and T. rubrum (FOC) (312.5 and 468.75 mg/mL, respectively)

Orientador: Gervásio Henrique Bechara / Banca: Eliana Reiko Matushima / Banca: Matias Pablo Juan Szabó / Resumo: Carrapatos são ectoparasitas responsáveis por danos diretos aos hospedeiros e pela transmissão de patógenos causadores de doenças de importância em Sanidade Animal e em Saúde Pública, tais como a babesiose, erliquiose, doença de Lyme (borreliose) e febre maculosa. O efeito deletério se dá, principalmente, no ponto de fixação no hospedeiro. A lesão produzida pelo carrapato no hospedeiro doméstico é caracterizada por hiperplasia da epiderme, formação de cone de cemento e cavidade alimentar, reação inflamatória na derme, com variações na intensidade e composição celular em função das espécies de carrapatos e hospedeiros envolvidas. O objetivo deste trabalho foi caracterizar, dos pontos de vista microscópico, morfométrico e ultraestrutural a lesão produzida por carrapatos ixodídeos na pele do tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla). Para tanto, foram utilizadas peles não parasitadas e parasitadas de tamanduás-bandeira (n=7), capturados no Pantanal da Nhecolândia e Parque Nacional de Emas, fixadas e processadas segundo técnicas de histologia, para microscopia de luz e morfometria por meio de sistema de análise de imagens computadorizado, e técnicas de microscopia de transmissão para análise ultraestrutural. A reação inflamatória foi de moderada intensidade, caracterizada por discreta exsudação de fluidos e células. Na epiderme, observou-se hiperplasia no ponto de fixação do carrapato e na derme um infiltrado de células inflamatórias, predominantemente do tipo mononuclear (macrófagos e linfócitos) e polimorfonuclear (eosinófilos e neutrófilos). / Abstract: Ticks are ectoparasites that damage host's skin and that transmit pathogens for a variety of diseases of Public and Animal Health, importance such as Lyme disease, Spotted fever, Babesiosis, and Erliquiosis. Tick feeding location in the skin is the main site of damage and pathogen transmission. The tick-bite lesion in domestic hosts is characterized by epidermal hyperplasia, presence of cement cone and feeding cavity. Inflammatory reaction develops in the dermis with differences in intensity and cellular component depending on the tick and host species involved in the tick-host relationship. The goal of this study was to characterize the microscopic, morphometric and ultrastructural features of the tick-bite lesion in the giant anteaterþs (Myrmecophaga tridactyla) skin. Parasitized and non parasitized skins were collected from giant anteaters (n=7), captured at the Emas National Park and Pantanal region, Brazil. Animals were anesthetised and biopsies were taken with a 6mm diameter punch. Skin samples were processed according to histological tecniques for light microscopy and morphometric studies, and according to transmission microscopy tecniques for ultraestrutural studies. The tick-induced inflammatory reaction was of moderate intensity, being characterized by fluid and cellular exudation. Presence of hyperplasia was seen at the tick-feeding site in the epidermis and an inflammatory cell infiltration, composed by mononuclear cells (macrophages and lymphocytes) and polimorfonuclear cells (eosinophils and neutrophils), was present in the dermis. / Mestre

Resumo: O contato dos carrapatos com os hospedeiros e a liberação de antígenos por meio da saliva estimula o desenvolvimento de respostas imune por parte dos hospedeiros. Os objetivos deste trabalho foram os de analisar e comparar morfo-histoquimicamente as glândulas salivares de fêmeas de Amblyomma cajennense fixadas em hospedeiros naive e reinfestados, e os resultados revelaram que coelhos reinfestados por A. cajennense desenvolvem resistência contra os mesmos em apenas uma infestação e essa resistência provoca efeitos no ciclo de atividade e na degeneração das glândulas salivares. Fêmeas fixadas em coelhos resistentes apresentaram aumento do tempo necessário para atingir o completo ingurgitamento e fêmeas ingurgitadas apresentaram redução significativa do peso final. As glândulas salivares dessas fêmeas apresentaram alterações morfológicas, que foram mais evidentes naquelas submetidas à terceira infestação. A histologia e a histoquímica mostraram que os ácinos I não sofreram alterações em comparação com aqueles das fêmeas fixadas em coelhos naive. As células c dos ácinos II apresentaram sinais de degeneração precoce, o que resultou na diminuição da eficiência alimentar. No ácino III as células d estenderam o tempo de atividade, provavelmente relacionado ao aumento do tempo de permanência das fêmeas nos hospedeiros resistentes. / Abstract: The contact with the ticks and hosts and the antigen releasing by saliva, stimulates the immune response development by the hosts. This study aims to analyze and compare morphohistochemically the salivary glands of Amblyomma cajennense females fixed on naive and reinfested hosts. The results show that re-infested rabbits by A. cajennense develop resistance against them in only one infestation and such resistance shows effects in the development and degeneration cycle of salivary glands. Females fixed on resistant rabbits showed an increase in the time required to complete the engorgement while the final weight of engorged females showed significant reduction. These female salivary glands showed morphological changes, which were more evident in females subjected to the third infestation. The acini I, no changes had been occurred compared with those of females fixed in naive rabbits. The acini II, the c cells showed early degeneration signs, which may result in feed efficiency reduction. In acini III, the d cells extended the activity time, which may be associated with the increase in the female fixation time which had been fed on resistant hosts. / Orientador: Maria Izabel Camargo Mathias / Coorientador: Gervásio Henrique Bechara / Banca: Marcelo Bahia Labruna / Banca: Itabajara da Silva Vaz Junior / Banca: Teresinha Tizu Sato Schumaker / Banca: Karim Christina Scopinho Furquim / Doutor

Resumo: As glândulas salivares de carrapatos fêmeas: em jejum, com dois e quatro dias de alimentação (em ingurgitamento), alimentadas (ingurgitadas), com três e sete dias pós-alimentação (pós-ingurgitamento); e de machos: em jejum, com dois, quatro e sete dias de infestação e com três e sete dias pós-remoção do hospedeiro, da espécie Rhipicephalus sanguineus, foram analisadas morfológica, histoquímica e citoquimicamente. Nas fêmeas elas são compostas pelos ácinos I (agranulares), II e III (granulares), e nos machos pelos ácinos I (agranulares), II, III e IV (granulares). Em ambos os sexos também foram observados ácinos Indeterminados, assim chamados devido ao processo degenerativo onde perderam suas características e não puderam ser identificados. Histologicamente os ácinos do tipo I sempre apresentaram uma célula central maior e várias periféricas menores, os do tipo II nas fêmeas apresentaram células "indiferenciadas", indefinidas 1 e 2, a, b e c1 a c6 e nos machos as "indiferenciadas", indefinidas 1 e 2, a, b e c1 a c8, tendo sido as "indiferenciadas", as indefinidas 1 e 2 e as c5 a c8 descritas pela primeira vez. As células aqui denominadas de indeterminadas foram observadas nos ácinos II em estágio de degeneração. Os ácinos do tipo III apresentaram as células d, e e f e os do tipo IV células g. Quanto ao estágio, durante todo o processo de alimentação, tanto nas fêmeas quanto nos machos, os ácinos I sofreram apenas alterações no tamanho. Nos ácinos II de fêmeas em jejum apenas as células "indiferenciadas", indefinidas 1 e 2 e a, c1 e c3 foram observadas; nos ácinos III os três tipos descritos estavam presentes. Nos machos em jejum os ácinos II e III tinham as mesmas características observadas nas fêmeas em jejum. Nos ácinos IV todas as células (g) estavam pouco ativas. Com o iniciar da alimentação, as glândulas passaram... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The salivary glands of the tick Rhipicephalus sanguineus were analyzed morphologically, histochemically and cytochemicallt at the following conditions: unfed, two and four-day fed, engorged females and females at day three and seven post-engorgement; and unfed males and males at day two, four and seven days post-attachment, and at day three and seven post-detachment from the rabbits. In females, these glands consist of types I (agranular), II and III (granular) acini and in males, of types I (agranular), II, III and IV (granular) acini. In both sexes, Indeterminate acini were also observed, which due to the degeneration process, have lost their characteristics and could not be identified. Histologically, type I acinus always exhibited a large central cell and several smaller peripheral ones. In females, type II acini are composed of "undifferentiated", undefined 1 and 2, a, b and c1-c6 ; and in males, "undifferentiated", undefined 1 and 2, a, b and c1-c8, with "undifferentiated", undefined 1 and 2, and c5-c8 being described here for the first time. The cells termed in this study as indeterminate were observed in degenerating type II acini. Type III acinus exhibited cells d, e and f, while type IV acini, cells g. Regarding the feeding stage, throughout the entire process, in females as well as males, type I acinus only underwent changes in size. In type II acinus of unfed females, only "undifferentiated", undefined 1 and 2 and a, c1, and c3 cells were observed, while in type III acinus, the three cell types described were present. In unfed males, type II and III acini exhibited the same characteristics observed in unfed females. In type IV acinus, all cells (g) were little active. With the start of feeding, glands began to secrete actively. In two-day fed females, all cell types were observed in type II acinus, except cells types "undifferentiated", undefined 1 and 2... (Complete abstract, click electronic access below) / Orientador: Maria Izabel Camargo-Mathias / Coorientador: Gervásio Henrique Bechara / Banca: Teresinha Tizu Sato Schumaker / Banca: Patricia Pasquali Parise Maltempi / Banca: Roberta Cornelio Ferreira Nocelli / Banca: Carlos Termignoni / Doutor

Orientador: Aricio Xavier Linhares / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:55:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soto_DoraAmparoEstrada_M.pdf: 3751679 bytes, checksum: df062ec568b3c51e5ce3b311e018e31e (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Hoje em dia são reconhecidas muitas espécies de riquétsias pertencentes ao Grupo da Febre Maculosa (GFM) e ao Grupo do Tifo (GT), mas os métodos atualmente disponíveis para a identificação de suas espécies têm limitações técnicas. Para detecção preliminar de riquétsias, a prova da hemolinfa é o método mais amplamente usado. A Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) tem sido usada para detectar a presença de riquétsias diretamente de amostras teciduais ou sangüíneas de indivíduos e de artrópodes infectados. No presente trabalho foi utilizada a análise pela PCR para detectar infecção riquétsial do GFM em carrapatos coletados em dois parques urbanos do Município de Campinas, SP e comparada com a prova da hemolinfa. Foram coletados adultos deAmblyomma cooperi em capivaras Hydrochaeris hydrochaeris no Lago do Café, analisados para possível infecção riquetsial pela prova da hemolinfa e posteriormente submetidos à análise pela PCR No Parque Hermógenes Leitão Filho e no Lago do Café foram coletadas, sobre vegetação, ninfas do gênero Amblyomma e adultos de A. cajennenese e A. cooperi, analisados pela PCR com quatro pares de iniciadores. Os resultados indicam a superioridade da PCR sob a prova da hemolinfa para detectar carrapatos infectados com riquétsias com maior sensibilidade, especificidade e facil execução, enquanto que a prova da hemolinfa produz falsos positivos e falsos negativos. Nenhuma amostra foi positiva para o GFM, o que poderia indicar problemas nos iniciadores utilizados e portanto a ocorrência de carrapatos infectados com riquétsias do GFM com PCR negativa para a região de 190 kDa. É necessário desenhar iniciadores a partir de carrapatos brasileiros naturalmente infectados e seqüenciar as amostras positivas, para um melhor entendimento da epidemiologia da Febre Maculosa no Município de Campinas. Palavras-chave: Amblyomma, Rickettsia, Febre Maculosa, PCR,Campinas / Abstract: Presently, several species of Spotted Fever Group (SFG) and Typhus Group rickettsiae are recognized, but the available methods to obtain a more specific identification present technical limitations. The hemolymph test is the method most widely used in preliminary detection of rickettsiae. The Polymerase Chain Reaction (PCR) procedure has been employed to detect rickettsiae direct1y from clinical specimens and infected arthropods. In the present work we apply the PCR method to detect SFG rickettsiae in ticks collected in two locations of the urban area in Campinas City, SP and we compare the results with those obtained via the hemolymph test. Adults of Amblyomma cooperi were collected from capybaras (Hydrochaeris hydrochaens) at "Lago do Café", and analyzed for possible infection with rickettsia using the hemolymph test. After that the collected ticks were processed and submitted to PCR analysis. Nymphs of Amblyomma sp. and adults of A. cajennenese and A. cooperi were collected from vegetation at "Lago do Café" and "Parque Hermógenes Leitão Filho". These nymphs and adults were analyzed using the PCR procedure with 4 primer pairs. The results indicated a higher sensitivity and specificity of the PCR method when compared to the hemolymph test to detect rickettsiae-infected ticks as well as being easier to perform. Moreover, the hemolymph test produces false-positives and false-negatives. Due to the fact that no positive sample was found or the Spotted Fever specific region, it is possible that ticks infected with SFG rickettsiae produced PCR negative for the region of 190 kDa. Therefore, it is necessary to develop primers from naturally infected Brazilian ticks and to sequence the DNA of the rickettsiae found in the positive samples. This is a pre-requisite for a better understanding of the epidemiology of the Brazilian Spotted Fever in Campinas. Key words: Amblyomma, Rickettsia, Spotted Fever, PCR, Campinas / Mestrado / Mestre em Parasitologia

Orientador: Angelo Pires do Prado / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:33:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_SavinaSilvanaAparecidaLacerrade_M.pdf: 1185569 bytes, checksum: 6cf23304cb17e2abe8f752396cb2c862 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientador: Mary Anne Heide Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T19:12:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Normann_CarlosAugustoBorbaMeyer_M.pdf: 9722023 bytes, checksum: 700d6c5f88e51e4c23c9fa229302ed25 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O presente trabalho objetiva descrever a espermiogênese do carrapato do boi - (Boophilus microplus) (Canestrini, 1887), sob aspectos histológicos, histoquímicos, morfológicos e ultra-estruturais. A espermatogênese ocorre no testículo de carrapatos que iniciaram o repasto com sangue. As células da linhagem gamética encontram-se isoladas em cistos. A espermiogênese inicia­-se no organismo masculino, sendo concluída no aparelho reprodutor feminino, em fêmeas jovens. Espermatócitos encistados, após uma fase de crescimento, sofrem meiose e iniciam a diferenciação em espermátides redondas e, posteriormente, em alongadas. No organismo feminino dá-se a transformação das espermátides alongadas em espermatozóides. A espermiogênese envolve a fusão de uma série de vesículas, situadas logo abaixo da membrana plasmática -as cisternas sub-superficiais-, em uma única área limitada por membranas, a cavidade cistérnica. A formação da cavidade se dá a partir do deslocamento das cisternas para o pólo oposto ao que se encontra o núcleo. Esse processo é denominado polarização, sendo, portanto, originadas espermátides polarizadas. As cisternas, aparentemente, são formadas por túbulos do retículo endoplasmático; esses túbulos apresentam uma membrana notadamente elétron-densa. Apresentam conteúdo glico­protéico, demonstrando uma reação argirófila que aumenta gradualmente durante a diferenciação. No citoplasma de espermátides redondas e polarizadas, observam-se abundantes figuras de retículo endoplasmático rugoso, polissomos, complexos de Golgi, mitocôndrias, túbulos de retículo liso e, em espermátides com a cavidade cistérnica em formação, corpos multi­vesiculares. Também se observa a formação de uma vesícula fortemente PAS­positiva em posição supra-nuclear, a qual a literatura sugere tratar-se do acrossomo. As espermátides redondas passam por um alongamento, o qual é concomitante com a formação da cavidade cistérnica e com o deslocamento pôstero-Iateral do núcleo na célula. As espermátides alongadas, com a invaginação da cavidade, passam a dividir-se em três regiões cilíndricas concêr"1tricas. A primeira é o tubo externo, para onde se desloca o núcleo. A segunda é a cavidade, que apresenta uma matriz mais elétron-densa que o citoplasma da espermátide, de caráter glico-protéico. No terceiro compartimento, o cilindro interno, encontram-se muitas mitocôndrias; o cilindro interno constitui-se no centro de invaginação da espermátide em alongamento. Na membrana da cavidade cistérnica encontram-se projeções formadas durante a fusão das cisternas. Essas projeções são bastante complexas, sendo formadas por um eixo protéico fibroso, envolvido por membrana da cavidade. No organismo feminino, observa-se a eversão da espermátide. Nesse processo, observa-se a invaginação da membrana plasmática, formando o denominada canal acrossômico. Este canal encontra-se revestido por uma vesícula que se alonga, como uma cisterna, a qual é aparentemente derivada da vesícula supra-nuclear glicoprotéica presente em espermátides redondas polarizadas. Esta vesícula, a qual encontra-se abaixo da membrana plasmática da espermátide alongada, encontra-se abaixo da membrana do canal. Paralelo a este evento, ocorre a eversão da membrana da cavidade cistérnica, a qual passa a recobrir a superfície externa do espermatozóide. Observam-se as projeções da membrana da cavidade cistérnica recobrindo o espermatozóide, excetuando-se em dois pontos: a porção posterior, desprovida de projeções, e a extremidade anterior,.. na qual as projeções apresentam morfologia bastante diversa da visualizada no restante da célula. Estas projeções são ultra­estruturalmente mais simples, tendo um pedúnculo largo e bastante conspícuo. As projeções do espermatozóide aparentemente estão ligadas à geração de movimento, uma vez que estas estão ligadas a elementos do citoesqueleto. Observa-se que o citoplasma dos espermatozóides apresenta uma clara divisão em uma área central de filamentos mais espessos, tipo intermediários, e outra cortical, rica em microfilamentos. O núcleo dessas células encontra-se na porção posterior, lateralmente ao canal acrossômico. As mitocôndrias encontram-se dispersas no citoplasma das porções anterior e médio-anterior; nas áreas médio-posterior e posterior do espermatozóide, elas situam-se entre a região cortical e central do citoplasma. O movimento dos espermatozóides, observado in vivo, é de avanço por torção / Abstract: The objective of this study was to describe the spermatogenesis of the cattle tick (Boophilus microplus) (Canestrini, 1887), based on histological, histochemical, morphologic and ultrastructural infromation. Spermatogenesis occurs in the testis of ticks which begin their blood repast. The gametic cell lineage is isolated in cysts. Spermiogenesis begins in the male and is concluded in the reproductive ducts of young females. Encysted spermatocytes, after the growth phase, pass through meiosis and differentiate into round spermatids, then elongated spermatids. In the female organism, the elongated spermatids are transformed into spermatozoa. Spermatogenesis involves the fusion of vesicles situated just below the plasmic membrane, called the sub-surface cisternae, leading to the formation of the cisternal cavity. This cavity is formed by the concentration of cisternae in the pole opposite to the nuclear region. This process was called polarization and it originates the polarized spermatids. The cisternae apparently develope from a transformed endoplasmic reticulum; these tubules have very dense membranes. They have a glicoproteinaceous content, and give an argentophylic reaction, which gradually increases during differentiation. In the cytoplasm of round and polarized spermatids, abundant rough endoplasmic reticulum can be seen, and in spermatids engaged in forming their cisternal cavity, there are also many multivesicular bodies. Also, a strongly P.A.S. positive vesicle can be found positioned above the nucleus, which some authors consider to be the acrosome. The round spermatids pass through an elongation, concomitantly with the formation of the cisternal cavity and the latero-posterior positioning of the nucleus. Elongated spermatids are subdivided into three concentrical cilindrical regions by the invagination of the cisternal cavity. The first is the external tube, where the elongated nucleus is lodged. The second is the cisternal cavity which has a progressively dense matrix of glicoproteins. The third compartment, referred to as the internal cilinder, contains many mitochondria. This internal cilinder is the invagination center of the elongating spermatid. The membrane of the cisternal cavity forms innumerable projections, resulting from the fusion of the cisternae. These projections are quite complex, with a fibrous proteic axis, surrounded by the membrane cavity. In the female, the eversion of the spermatids is observed. During this process, the plasmic membrane invaginates,originating the acrosomal canal. This canal is covered by a flattened, elongated cistern-like vesicle, which is apparently derived from the supra-nuclear vesicle, which is rich in glicoproteins and first observed in polarized spermatids. This vesicle is in close contact with the plasmic membrane in elongated spermatids and maintans the same position in relation to this membrane when it lines the canal. At the same time, the eversion of the cisternal cavity occurs, turning this membrane inside out to cover the surface of the spermatozoon. Projections of the cisternal cavity membrane can be observed covering the entire spermatozoon with the exception of two regions: The posterior region which is smooth and the anterior extremity where the projections are very different from those seen on the rest of the spermatozoal surface. These projections are quite simple and rounded with a conspicuous peduncle. The projections appear to be associated with movement, since they are connected to cytoskeletal elements. The cytoplasm of spermatozoa have a clearly separated central region filled with thick filaments, similar to intermediate filaments and a cortical region rich in microfilaments. The nucleus of these cells is posterior and it follows the canal laterally. Mitochondria can be seen dispersed in the cytoplasm of the anterior and medial-anterior portion, while in the medial-posterior and posterior portion of the spermatozoon, they are alined separating the cortical and central regions of the cytoplasm. The motility of the spermatozoon, observed "in vivo", is advancement by torsion / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas