La alta incidencia de las enfermedades infecciosas, la importancia de las enterobacterias como agentes causales más frecuentes y el surgimiento de cepas resistentes a los antibióticos son factores que concurren en uno de los mayores problemas de la medicina actual y del futuro: la multiresistencia. En esta Tesis se aborda el problema de las cepas de enterobacterias portadores de b-lactamasas de espectro extendido (BLEAs) y cefamicinasas, en el ámbito de la población atendida en el Hospital de la Santa Creu y Sant Pau de Barcelona.De 1997 a 1999 se han obtenido en el Hospital de la Santa Creu i Sant Pau, 13800 cepas de enterobacterias, entre las cuales se identificaron y caracterizaron las portadoras de BLEAs y cefamicinasas. Después de una primera selección, en función al patrón de resistencia por la técnica de disco difusión y la posterior caracterización fenotípica y genotípica de las b-lactamasas, fueron identificadas 35 cepas de Escherichia coli (0.45% de las cepas aisladas de esta especie bacteriana); 9 de Klebsiella pneumoniae (1.83%); 2 cepas de Salmonella enterica (0.11%); y una de Proteus mirabilis (0.11%) portadoras de las enzimas investigadas. Además del patrón de resistencia, la caracterización incluyó ensayos de sinergia, biotipado, punto isoeléctrico e identificación del gen respectivo mediante PCR. Las b-lactamasas de espectro extendido en E. coli han sido CTX-M-9 (27 cepas); SHV-2 (6 cepas); TEM-10 (1 cepa) y TEM-12 (1 cepa). CTX-M-9, actualmente predominante, ha aumentado su incidencia cinco veces (0.45%) respecto al trienio anterior (0.08% en 1994-1996). Por otra parte, se ha observado por primera vez en el ámbito de nuestro hospital, la presencia de cefamicinasas plasmídicas tipo CMY-2 en una cepa de cada una de las siguientes especies Klebsiella pneumoniae, Salmonella enterica y Proteus mirabilis. Respecto a las características de los pacientes y naturaleza de la infección, en el 73% de los casos la infección estaba localizada a nivel del tracto urinario y en el 61% de los casos, el paciente era mayor de 60 años; el 80% de los pacientes fue de sexo femenino y la enfermedad de base predominante fue la neoplasia sólida.Como dato relevante para efectos de vigilancia epidemiológica, se constata que la incidencia de b-lactamasas de espectro extendido y cefamicinasas plasmídicas en el ámbito de nuestro hospital aunque es pequeña ha aumentado tres veces (0.48%) respecto al trienio anterior (0.14%), no evidenciándose en ningún caso la presencia de brotes epidémicos intrahospitalarios. / Factors as high incidence of infectious diseases, the enterobacterias as infectious agent and the development of antibiotic frecuence of resistant strains, meets in one of the bigger problems of the actual medicine: the multiresistance. These Thesis deals about specific problem of carrier strains of extended spectrum b-lactamases (BLEAs) and cephamcynases, in the scope of the population attended in the Hospital de la Santa Creu i Sant Pau.In this hospital, from 1997 to 1999, 13,800 isolates of enterobacterias were obtained. In these, were identified and characterized the carrier of BLEAs and cephamycinases. After a first selection, using diffusion disk technique in function to its pattern resistance, and continuing with genotypic and phenotypic characterization of BLEA, were identified the following strains: 35 strains of E. coli (0.45% of the E. coli isolates); 9 Klebsiella pneumoniae (1.83%); 2 Salmonella enterica (0.11%); and one of Proteus mirabilis (0.11%). Characterization includes assays of sinergy, biotyping, pI and identification of the respective gene using PCR.In E. coli the BLEAs were CTX-M-9 (27 isolates), SHV-2 (6 isolates); TEM-10 (1 isolate); and TEM-12 (1 isolate). Actual predominance of CTX-M-9 has increased its incidence five fold (0.45%) in respect of the period 1994-1996 (0.08%). In our hospital, the presence of plasmidic cephamycinase CMY-2 in one isolated of the following species Klebsiella pneumoniae, Salmonella enterica and Proteus mirabilis, were by first time observed.In relation to the patients characteristics and the origin of infections, 73% of cases were localized in the urinary tract; while in 61% of the cases, the patients were older than 60, 80% were female and the predisposing base prevalent disease was solid neoplasia.As a relevant data, in order to the epidemiological alert, deserves mention that BLEAs incidences and plasmidic cephamycinases were increased three folded (0.48%) respect to past period (0.14%). There were no evidences in any case of the intrahospitalary epidemic outbreak.

La Tesi descriu la prevalença de les soques portadores de betalactamases d'espectre ampliat (BLEA), cefamicinases i carbapenemases, principals mecanismes de resistència als antibiòtics betalactàmics, no només en l'àmbit clínic [mostres clíniques i malalts atesos al Servei d'Urgències (portadors fecals)] sinó en altres ecosistemes com en els subsòls de granges d'animals (aus, porcs i conills), en aigües residuals humanes, en aliments, i en portadors fecals afectats per un brot alimentari. A més a més s'han caracteritzat aquests enzims per tal de determinar la freqüència de cadascun dels tipus de betalactamases presents: tipus TEM, SHV i CTX-M com a BLEA, CMY, DHA o ACC com a cefamicinases, o VIM, IMP i altres com a carbapenemases. La conclusió del treball mostra com aquests enzims es poden trobar en tots els ecosistemes avaluats i, per tant, com la selecció de soques portadores d'aquests no es dóna només en l'àmbit clínic sinó que roman en tot l'entorn humà. Per altra banda, arran d'aquest treball s'han descrit dues noves betalactamases, la CTX-M-14b, i la CTX-M-51, ambdues derivades de la CTX-M-9. El fet que les soques portadores d'aquests enzims s'hagin trobat en tots els àmbits és causa de greu preocupació. Cal, doncs, intentar evitar la selecció d'aquestes soques, així com esbrinar quin o quins són els mecanismes que han permès aquesta expansió. L'estudi epidemiològic dels mecanismes de resistència, és de gran interès, no només en l'àmbit clínic sinó també veterinari, perquè coneixent la prevalença i el tipus d'enzims implicats es pot actuar oportunament dissenyant polítiques d'antibiòtics correctes. / This thesis describes the prevalence of strains carrying extended spectrum betalactamase (ESBL), plasmid-mediated AmpC and carbapenemase. There are the main mechanism of betalactam resistance, not only in clinic environment [clinical samples and patients attending the emergency room (faecal carriers)] also in others environments such as the floor of animal farms (poultry, pig and rabbit), the urban sewage, food, and human faecal carriers in the context of food-borne disease outbreaks. We have characterized these enzymes to know the frequency of each type of betalactamase: TEM, SHV and CTX-M type as ESBL, CMY, DHA and ACC as plasmid-mediated AmpC, or VIM, IMP and others as carbapenemase. The work's conclusion show's that these enzymes can be found in all environments evaluated. Then the selection of strains carrying this kind of enzymes is due not only to clinic environments otherwise to all human environments. In the other hand, we have described two new betalactamase, CTX-M-14b and CTX-M-51, both deriving from CTX-M-9.The finding of strains carrying these enzymes in all the environments is of great concerning. We need not to select these strains, and to know what are the mechanisms of expansion of these enzymes. The epidemiologic study of the resistance mechanism is of great interest, not only in hospitals also in veterinarian environment, because knowing the prevalence and the type of enzymes, we can design specific antibiotic policy.