La alta incidencia de las enfermedades infecciosas, la importancia de las enterobacterias como agentes causales más frecuentes y el surgimiento de cepas resistentes a los antibióticos son factores que concurren en uno de los mayores problemas de la medicina actual y del futuro: la multiresistencia. En esta Tesis se aborda el problema de las cepas de enterobacterias portadores de b-lactamasas de espectro extendido (BLEAs) y cefamicinasas, en el ámbito de la población atendida en el Hospital de la Santa Creu y Sant Pau de Barcelona.De 1997 a 1999 se han obtenido en el Hospital de la Santa Creu i Sant Pau, 13800 cepas de enterobacterias, entre las cuales se identificaron y caracterizaron las portadoras de BLEAs y cefamicinasas. Después de una primera selección, en función al patrón de resistencia por la técnica de disco difusión y la posterior caracterización fenotípica y genotípica de las b-lactamasas, fueron identificadas 35 cepas de Escherichia coli (0.45% de las cepas aisladas de esta especie bacteriana); 9 de Klebsiella pneumoniae (1.83%); 2 cepas de Salmonella enterica (0.11%); y una de Proteus mirabilis (0.11%) portadoras de las enzimas investigadas. Además del patrón de resistencia, la caracterización incluyó ensayos de sinergia, biotipado, punto isoeléctrico e identificación del gen respectivo mediante PCR. Las b-lactamasas de espectro extendido en E. coli han sido CTX-M-9 (27 cepas); SHV-2 (6 cepas); TEM-10 (1 cepa) y TEM-12 (1 cepa). CTX-M-9, actualmente predominante, ha aumentado su incidencia cinco veces (0.45%) respecto al trienio anterior (0.08% en 1994-1996). Por otra parte, se ha observado por primera vez en el ámbito de nuestro hospital, la presencia de cefamicinasas plasmídicas tipo CMY-2 en una cepa de cada una de las siguientes especies Klebsiella pneumoniae, Salmonella enterica y Proteus mirabilis. Respecto a las características de los pacientes y naturaleza de la infección, en el 73% de los casos la infección estaba localizada a nivel del tracto urinario y en el 61% de los casos, el paciente era mayor de 60 años; el 80% de los pacientes fue de sexo femenino y la enfermedad de base predominante fue la neoplasia sólida.Como dato relevante para efectos de vigilancia epidemiológica, se constata que la incidencia de b-lactamasas de espectro extendido y cefamicinasas plasmídicas en el ámbito de nuestro hospital aunque es pequeña ha aumentado tres veces (0.48%) respecto al trienio anterior (0.14%), no evidenciándose en ningún caso la presencia de brotes epidémicos intrahospitalarios. / Factors as high incidence of infectious diseases, the enterobacterias as infectious agent and the development of antibiotic frecuence of resistant strains, meets in one of the bigger problems of the actual medicine: the multiresistance. These Thesis deals about specific problem of carrier strains of extended spectrum b-lactamases (BLEAs) and cephamcynases, in the scope of the population attended in the Hospital de la Santa Creu i Sant Pau.In this hospital, from 1997 to 1999, 13,800 isolates of enterobacterias were obtained. In these, were identified and characterized the carrier of BLEAs and cephamycinases. After a first selection, using diffusion disk technique in function to its pattern resistance, and continuing with genotypic and phenotypic characterization of BLEA, were identified the following strains: 35 strains of E. coli (0.45% of the E. coli isolates); 9 Klebsiella pneumoniae (1.83%); 2 Salmonella enterica (0.11%); and one of Proteus mirabilis (0.11%). Characterization includes assays of sinergy, biotyping, pI and identification of the respective gene using PCR.In E. coli the BLEAs were CTX-M-9 (27 isolates), SHV-2 (6 isolates); TEM-10 (1 isolate); and TEM-12 (1 isolate). Actual predominance of CTX-M-9 has increased its incidence five fold (0.45%) in respect of the period 1994-1996 (0.08%). In our hospital, the presence of plasmidic cephamycinase CMY-2 in one isolated of the following species Klebsiella pneumoniae, Salmonella enterica and Proteus mirabilis, were by first time observed.In relation to the patients characteristics and the origin of infections, 73% of cases were localized in the urinary tract; while in 61% of the cases, the patients were older than 60, 80% were female and the predisposing base prevalent disease was solid neoplasia.As a relevant data, in order to the epidemiological alert, deserves mention that BLEAs incidences and plasmidic cephamycinases were increased three folded (0.48%) respect to past period (0.14%). There were no evidences in any case of the intrahospitalary epidemic outbreak.

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We also aimed to detect co-colonization by Staphylococcus and Pseudomonas, as well as describe the profile socio-demographic, professional, disease/infection and behavioral of individuals colonized by Enterobacteriaceae. It was a descriptive cross-sectional epidemiological study conducted from May/2009 to November/2010 and saliva was collected a from each subjected. A total of 294 individuals participated in the research, being 149 healthcare members and 145 from the support team. The microbiological procedures were performed according to recommended techniques and data collection obtained by a questionnaire and analyzed through descriptive statistics. Among the participants, 55 (18.7%) were colonized by Enterobacteriaceae in the oral cavity. Were isolated 64 bacteria, including species potentially pathogenic. The most prevalent specie was gergoviae Enterobacter (17.2%). The highest rates of resistance were observed to β-lactams and 48.4% of isolates were considered multiresistant. The Extended Spectrum β-lactamases (ESBL) production was negative for the Enterobacteriaceae and none Klebsiella pneumoniae produced Carbapenemase (KPC). However, among the 43 CESP isolates group (Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Providencia), 51.2% produced AmpC β- lactamase by induction and 48.8% were hiper producers. Staphylococcus and Pseudomonas were detected in the saliva of 56.4% individuals. The majory of the healthcare workers colonized by Enterobacteriaceae was men over 40 years. The nursing technician was the professional category most colonized (52.7%), followed by the cleaning staff (23.6%). The cleaning and hygiene sector (23.6%) and nursing stations (18.2%) represented the largest number of workers colonized. Some professionals (27.3%) had second job in another health service, while 41.8% remained in the institution around 40 hours or more a week. Some infection was reported among carriers, as tonsillitis, sinusitis and pharyngitis, being the first the most frequent (52.7%). Enterobacteriaceae carriage (18.2%) reported the use of personal protective equipment (PPE) as unnecessary to their s activity, 7.3% did not use the mask as precautionary measure, 23.6% realized sporadically the exchange of mask and 1.8 % never changed. The use of oral antiseptics was observed in 29.1% of the workers, the recent use of antimicrobials in 16.4% and self-medication in 27.3%. Among the colonized persons was observed lack of knowledge about multiresistant microorganisms. The prevalence Enterobacteriaceae carriage is considered high and the resistance is a problem especially due to multidrug resistance and production of β-lactamase AmpC observed. The results of this research contribute with important subsidies to the programs for nosocomial infections prevention and control of, since knowledge of carrier status reduces the risk of transmission of microorganisms. / O ambiente da assistência à saúde apresenta inúmeros riscos que o torna um local insalubre, propício à colonização e ao desenvolvimento de infecções. Inseridos neste cenário estão os trabalhadores dos serviços de saúde, os quais são vulneráveis à condição de portador. A cavidade bucal representa assim um importante sítio de colonização. Este estudo buscou caracterizar o fenótipo de Enterobacteriaceae isoladas da cavidade bucal de trabalhadores de um hospital oncológico referência no Centro-Oeste brasileiro. Também fizeram parte dos objetivos desta pesquisa detectar co-colonização por Staphylococcus e Pseudomonas, bem como descrever o perfil sócio-demográfico, profissional, doença/infecção e comportamental dos indivíduos colonizados por Enterobacteriaceae. Estudo epidemiológico transversal do tipo descritivo realizado de maio/2009 a novembro/2010. Participaram 294 trabalhadores, sendo 149 membros da equipe de saúde e 145 da equipe de apoio. Os procedimentos microbiológicos foram realizados segundo técnicas padronizadas e a coleta de dados realizada por meio da aplicação de um formulário. Foi coletada uma amostra de saliva de cada sujeito Os dados foram analisados por meio de estatística descritiva. Dentre os participantes, 55 (18,7%) estavam colonizados por Enterobacteriaceae na cavidade bucal. Foram isoladas 64 bactérias, incluindo espécies potencialmente patogênicas. A espécie mais prevalente foi Enterobacter gergoviae (17,2%). As maiores taxas de resistências foram observadas para os β-lactâmicos e 48,4% dos isolados foram considerados multirresistentes. Para as enterobactérias pesquisadas, a produção de β-lactamase de Espectro Ampliado (ESBL) e Klebsiella pneumoniae Carbapenemase (KPC) foi negativa. Porém, dentre os 43 isolados do grupo CESP (Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Providencia), 51,2% foram considerados produtores de β-lactamase AmpC por indução e 48,8% mutantes hiperprodutores. Staphylococcus e Pseudomonas estavam presentes na saliva de 56,4% dos sujeitos colonizados por Enterobacteriaceae. O maior número de portadores foi constituído por homens acima de 40 anos. Entre os técnicos de enfermagem, 52,7% estavam colonizados, seguidos dos auxiliares de limpeza (23,6%). O setor de higienização e limpeza (23,6%) e os postos de enfermagem (18,2%) contemplaram o maior número de trabalhadores colonizados. Alguns trabalhadores (27,3%) possuíam segundo emprego em outro serviço de saúde, enquanto que 41,8% permaneciam na instituição 40 horas ou mais na semana. Quadros frequentes de infecção foram relatados entre os portadores, como amigdalites, sinusites e faringites, sendo o primeiro o mais frequente (52,7%). Alguns portadores de Enterobacteriaceae (18,2%) relataram o uso de EPI como desnecessário à sua atividade, 7,3% não faziam o uso de máscara como medida de precaução, 23,6% realizavam a troca de máscara esporadicamente e 1,8% nunca trocava. O uso de antissépticos bucais foi observado em 29,1% dos trabalhadores, o uso recente de antimicrobianos em 16,4% e a prática da automedicação em 27,3%. A desinformação sobre micro-organismos multirresistentes foi comum entre os colonizados. A prevalência de portadores de Enterobacteriaceae foi elevada e o fenótipo de resistência dos isolados preocupante, especialmente pela multirresistência e produção de β-lactamases AmpC. As variáveis avaliadas revelaram realidades relevantes para o contexto da assistência à saúde e para a saúde do trabalhador. Os resultados desta pesquisa contribuíram com subsídios importantes para os programas de prevenção e controle das infecções nosocomiais, pois o conhecimento do estado portador reduz os riscos de transmissão de micro-organismos.