BARROSO, Elizabeth Clara. Estudo da barreira funcional intestinal e concentrações séricas de rifampicina e isoniazida em pacientes com tuberculose multirresistente. 2009. 273 f. : Tese (doutorado) - Universidade Federal do Ceará, Pós-graduação em Ciências Médicas, Fortaleza-CE, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-10-05T16:08:40Z No. of bitstreams: 1 2009_tese_ecbarroso.pdf: 1809068 bytes, checksum: c03d5566f77fc2c4be9489f73a210705 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-10-07T16:25:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_tese_ecbarroso.pdf: 1809068 bytes, checksum: c03d5566f77fc2c4be9489f73a210705 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-07T16:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_tese_ecbarroso.pdf: 1809068 bytes, checksum: c03d5566f77fc2c4be9489f73a210705 (MD5) Previous issue date: 2009 / Reduced antituberculosis drugs concentrations are associated with Mycobacterium tuberculosis resistance. This study aims to evaluate intestinal permeability and serum concentrations of rifampin (RIF) and isoniazid (INH) in patients with multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB). A case-control was conducted with outpatients who attended Messejana’s Hospital in Fortaleza-Ceará from August 2006 to April 2007. MDR-TB (case) was defined as resistance to at least RIF+INH according to the susceptibility test by the proportion method. Two control groups were formed. The drug sensible TB (DS-TB) group defined so when the isolate was sensible to RIF, INHH, streptomycin and ethambutol and the healthy control group (HC). The final MDR-TB, DS-TB and health control groups composition was 41, 33 and 41 respectively, matched by sex and age. Biochemical and haematological examinatios, lactulose:mannitol (L/M) test (to access intestinal absorption) were performed as well as social and clinical interview in all volunteers. To access the serum concentrations two blood samples were collect at two and six hours after RIF and INH ingestion in 32 MDR-TB and 28 DS-TB patients and 30 HC. The drug serum concentrations and L/M test in urine were performed by HPLC. After univariate analysis the median/range of the L and M urinary excretion percentage was significantly lower in MDR-TB patients comparing to HC (p<0.05). Adjusting for alcoholism+tabagism association or Body Mass Index (BMI), this difference disappeared for lactulose. After multivariate analysis the mean ± standard (sd) deviation M urinary excretion percentage was lower in MDR-TB than in HC (p=0.0291) group or DS-TB (p=0.0369) group. The L:M ratio did not differ between the groups (p=0.4747). The mean±sd of the INH maximum serum concentration (HCmax) was higher in MDR-TB (3.82±1.18) than in HC (2.79±1.19) group, p<0.01 and there was no difference between DS-TB and HC nor between MDR-TB and DS-TB groups. After multivariate analysis the HCmax increased in HC (3.07±0.24), but, remained to be higher in MDR-TB group, and now, significantly higher only than DS-TB group. There was HCmax < 3 µg/ml in 18.8% (6/32) of the cases and 56.7% (17/30) of the HC (p<0.05) and no difference between DS-TB (39.3%, 11/28) and HC. After multivariate analysis the mean±sd RIF maximum serum concentration (RCmax) was lower in MDR-TB than in HC(p,0.05) and in DS-TB than in HC (p<0.001), with no difference between MDR-TB and DS-TB groups. The RCmax was < 8 µg/ml in 90.6% (29/32) of the cases and 66.7% (20/30) of HC (p<0.05) and in 82.1% (23/28) of the DS-TB patients (comparing to HC, p<0.05). In conclusion there was reduction in transcellular intestinal absorption in MDR-TB versus DS-TB or HC and the data suggest that alcoholism+tabagism association and BMI have an important role in the reduction of paracellular transport in MDR-TB patients. The RCmax was low in MDR-TB and DS-TB patients with high proportions of subtherapeutic levels in theses groups, mainly for RCmax, but also worrying for HCmax. / Baixos níveis sangüíneos de drogas antituberculose podem ser causa de resistência do Mycobacterium tuberculosis. Este estudo objetivou avaliar a absorção intestinal transcelular e paracelular e verificar possível repercussão nas concentra-ções séricas de de rifampicina (RMP) e isoniazida (INH) em pacientes com tuberculose multirresistente (TBMR). Realizou-se estudo caso-controle no Ambulatório de Tisiologia do Hospital de Messejana, em Fortaleza-Ceará, entre agosto de 2006 e abril de 2007. TBMR foi definida como o caso de portador de bacilo resistente a pelo menos RMP+INH, de acordo com o teste de sensibilidade realizado pelo método das proporções. Foram formados dois grupos para controle, o dos portadores de tuberculose sensível (TBS) e o dos voluntários sãos (VS). Realizaram-se exames hematológicos e bioquímicos, o teste da lactulose / manitol (L/M) (para avaliar a absorção intestinal) e coleta de dados clínicos e sociais de todos os voluntários. Para a avaliação das concentrações séricas foi coletado sangue duas e seis horas após a ingestão observada da RMP+INH. A técnica utilizada para a quantificação da L e M na urina e dosagem sérica de RMP e INH foi a cromatografia líquida de alta pressão. O total de componentes dos grupos com TBMR, TBS e de sadios foi, respectivamente, 41, 33 e 41, emparelhados por gênero e idade. Na análise univariada, encontrou-se mediana / variação do percentual de excreção urinária da L e M menor no grupo com TBMR em relação aos sadios (p<0,05). Ao se corrigir para a associação alcoolismo + tabagismo ou índice de massa corporal (IMC), desapareceu a significância da menor excreção de lactulose nos portadores de TBMR. Após a análise multivariada, a média±desvio-padrão (dv) do percentual de excreção urinária do M foi menor no grupo com TBMR em relação ao grupo de VS (p=0,0291) e em relação ao de TBS (p=0,0369). A relação L/M foi semelhante entre os grupos (p=0,4747). A concentração sérica máxima de INH (CHX) média±desvio-padrão foi maior no grupo com TBMR (3,82±1,18) em relação ao VS (2,79±1,19), p<0,01, não havendo diferença entre TBS e VS nem entre TBMR e TBS. Após a análise multivariada, a CHX aumentou no grupo VS (3,07±0,24), mas continuou a ser maior no grupo com TBMR e, agora, com diferença significante em relação apenas à TBS. Houve CHX < 3 µg/ml em 18,8% (6/32) dos casos e 56,7% (17/30) dos sadios (p<0,05), não havendo diferença entre TBS, 39,3% (11/28) e sadios. Após a análise multivariada, a media±dp da concentração sérica máxima de RMP (CRX) foi menor no grupo com TBMR do que nos sadios (p<0,05) e no grupo com TBS do que nos sadios (p<0,001), não havendo diferença entre TBMR e TBS. Houve (CRX) < 8 µg/ml em 90,6% (29/32) dos portadores de TBMR e 66,7% (20/30) dos sadios (p<0,05) e em 82,1% (23/28) do grupo com TBS (em relação aos sadios, p<0,05). Em conclusão, observou-se redução na absorção transcelular intestinal em pacientes com TBMR versus TBS ou sadios, e os dados sugerem significante participação do alcoolismo+tabagismo e IMC na redução do transporte paracelular em portadores de TBMR. A CRX foi mais baixa em portadores de TBMR e TBS do que em sadios, com altas proporções de níveis subterapêuticos de RMP e INH nos três grupos, principalmente para CRX, mas, também preocupante para CHX.

Com o evento da resistência dos microrganismos aos antimicrobianos, surgiram as cepas multirresistentes de difícil tratamento, e com isso tornou-se imprescindível a adesão total dos profissionais de saúde às precauções empregadas na assistência aos portadores desses microrganismos, visando evitar a sua disseminação no ambiente hospitalar. Este estudo do tipo descritivo transversal foi realizado em uma instituição de saúde filantrópica do interior de Minas Gerais, teve como objetivos avaliar a adesão dos enfermeiros, técnicos e auxiliares de enfermagem às medidas preventivas empregadas na assistência aos portadores desses microrganismos multirresistentes. A coleta de dados ocorreu no período de outubro a novembro de 2003 e os dados foram analisados qualitativa e quantitativamente. Utilizou-se do Método de análise de conteúdo de BARDIN (1977) e para a análise quantitativa de alguns dados, empregou-se a estatística descritiva, sendo os mesmos interpretados com base no significado atribuído por ROSENSTOCK (1974a). O Modelo de Crenças em Saúde (MCS) possibilitou identificar as barreiras físicas, cognitivas e psicológicas que justificaram a não-adesão de alguns profissionais às medidas preventivas direcionadas ao portador de Bactérias Multirresistentes (BMR). Como resultado destas avaliações, identificou-se que as percepções dos profissionais de enfermagem relacionadas à severidade das doenças causadas por BMR eram adequadas, que a maioria dos profissionais entrevistados associou a gravidade das doenças causadas por BMR a tratamento difícil ou a maior índice de mortalidade, e outros associaram-nas a tratamento inexistente. Quanto à susceptibilidade da doença, o conhecimento dos profissionais a respeito da temática apresentou-se bastante limitado. Os profissionais se aperceberam como susceptíveis de contrair BMR, entretanto, somente alguns conseguiram identificar os grupos mais susceptíveis à infecção causada por BMR. Observou-se uma influência favorável da instituição ao se constatar que proporciona aos profissionais as condições necessárias para que estes empreguem o Protocolo de Isolamento Específico. O comportamento dos profissionais em relação ao uso dos Equipamentos de Proteção Individual (EPI) evidenciou controvérsias, pois muitos relataram utilizar freqüentemente os paramentos, contudo admitiram que alguns profissionais não os utilizam rigorosamente por diversos motivos, sendo mais freqüentes: a crença de que não vão contrair a doença, diagnóstico tardio, ou por resistência, ou seja, injustificadamente “ ... não usa porque não quer ...". Observou-se que muitos profissionais não aderem totalmente às precauções por opção pessoal, eles não têm o hábito de lavar as mãos ou friccioná-las com álcool na freqüência que deveriam, apesar de terem os materiais disponíveis. Acreditam que os benefícios à adesão são: proteção, prevenção de adquirir infecção/doenças, o fato de evitar a disseminação e sua segurança. Quanto às barreiras, mencionaram principalmente a falta de vagas, o diagnóstico tardio e a falta de alguns materiais. O estímulo para a ação, referido preferencialmente pelos profissionais, foi a abordagem informal na prática diária. Identificaram-se, ainda, a necessidade de elaborar estratégias de intervenção capazes de aprimorar a conduta dos profissionais de enfermagem e o levantamento dos problemas considerados imprescindíveis para percepção das crenças dos profissionais, a fim de se implementar efetivamente as estratégias que devem alterar positivamente a situação observada. / As microorganisms acquired resistance against antimicrobial agents, multiresistant strains appeared which are difficult to treat. Hence, the total adhesion of health professionals to the precaution measures used in care for patients with multiresistant microorganisms has become essential, with a view to avoiding their dissemination in the hospital environment. This descriptive transverse study was carried out at a philanthropic health institution in the interior of Minas Gerais, Brazil and aimed to evaluate the adhesion of nurses, nursing technicians and auxiliaries to prevention measures used in care for patients with these multiresistant microorganisms. Data were collected in October and November 2003 and were subject to qualitative and quantitative analysis. BARDIN’s (1977) content analysis method was used. Descriptive statistics was used with a view to the quantitative analysis of some data, which were interpreted on the basis of the meaning attributed by ROSENSTOCK (1974a). The Health Belief Model (HBM) allowed us to identify the physical, cognitive and psychological obstacles that justify some professionals’ non-adhesion to the prevention measures oriented towards patients with Multiresistant Bacteria (MRB). As a result of these evaluations, it was identified that nursing professionals adequately perceived the seriousness of diseases caused by MRB, that most of the interviewees linked up the gravity of diseases caused by MRB with difficult treatment or higher mortality rates, while others associated it with the inexistence of treatment. With respect to disease susceptibility, professionals demonstrated a rather limited knowledge about the theme. They perceived themselves as susceptible to MRB, although only some professionals managed to identify the groups that are most susceptible to infection by MRB. A favorable institutional influence was observed when verifying that the institution provides its professionals with the necessary conditions to use the Specific Isolation Protocol. Professional behavior in relation to Individual Protection Equipment (IPE) usage revealed controversies, since many of them mentioned frequent usage, although they admitted that some professionals do not use this equipment in a strict way, for different reasons, among which the most frequent were: the belief that they will not contract the disease, late diagnosis, or due to resistance, that is, without any justification “ ... they do not use it because they do not want to ...". It was observed that many professionals choose not to adhere totally to the precaution measures. They are not used to washing their hands or scrubbing them with alcohol as frequently as they should, although the material is available. They believe that benefits of adhesion are: protection, prevention of infection/diseases, avoiding dissemination and their safety. With respect to obstacles, they mainly mentioned the lack of beds, late diagnosis and the lack of some kinds of material. As a stimulus towards action, professionals prefer the informal approach in daily practice. We also identified the need to elaborate intervention strategies capable of improving nursing professionals’ behavior and surveyed the problems considered essential to perceive professional beliefs, with a view to the efficient implementation of strategies that should positively change this situation.

Com o evento da resistência dos microrganismos aos antimicrobianos, surgiram as cepas multirresistentes de difícil tratamento, e com isso tornou-se imprescindível a adesão total dos profissionais de saúde às precauções empregadas na assistência aos portadores desses microrganismos, visando evitar a sua disseminação no ambiente hospitalar. Este estudo do tipo descritivo transversal foi realizado em uma instituição de saúde filantrópica do interior de Minas Gerais, teve como objetivos avaliar a adesão dos enfermeiros, técnicos e auxiliares de enfermagem às medidas preventivas empregadas na assistência aos portadores desses microrganismos multirresistentes. A coleta de dados ocorreu no período de outubro a novembro de 2003 e os dados foram analisados qualitativa e quantitativamente. Utilizou-se do Método de análise de conteúdo de BARDIN (1977) e para a análise quantitativa de alguns dados, empregou-se a estatística descritiva, sendo os mesmos interpretados com base no significado atribuído por ROSENSTOCK (1974a). O Modelo de Crenças em Saúde (MCS) possibilitou identificar as barreiras físicas, cognitivas e psicológicas que justificaram a não-adesão de alguns profissionais às medidas preventivas direcionadas ao portador de Bactérias Multirresistentes (BMR). Como resultado destas avaliações, identificou-se que as percepções dos profissionais de enfermagem relacionadas à severidade das doenças causadas por BMR eram adequadas, que a maioria dos profissionais entrevistados associou a gravidade das doenças causadas por BMR a tratamento difícil ou a maior índice de mortalidade, e outros associaram-nas a tratamento inexistente. Quanto à susceptibilidade da doença, o conhecimento dos profissionais a respeito da temática apresentou-se bastante limitado. Os profissionais se aperceberam como susceptíveis de contrair BMR, entretanto, somente alguns conseguiram identificar os grupos mais susceptíveis à infecção causada por BMR. Observou-se uma influência favorável da instituição ao se constatar que proporciona aos profissionais as condições necessárias para que estes empreguem o Protocolo de Isolamento Específico. O comportamento dos profissionais em relação ao uso dos Equipamentos de Proteção Individual (EPI) evidenciou controvérsias, pois muitos relataram utilizar freqüentemente os paramentos, contudo admitiram que alguns profissionais não os utilizam rigorosamente por diversos motivos, sendo mais freqüentes: a crença de que não vão contrair a doença, diagnóstico tardio, ou por resistência, ou seja, injustificadamente “ ... não usa porque não quer ...”. Observou-se que muitos profissionais não aderem totalmente às precauções por opção pessoal, eles não têm o hábito de lavar as mãos ou friccioná-las com álcool na freqüência que deveriam, apesar de terem os materiais disponíveis. Acreditam que os benefícios à adesão são: proteção, prevenção de adquirir infecção/doenças, o fato de evitar a disseminação e sua segurança. Quanto às barreiras, mencionaram principalmente a falta de vagas, o diagnóstico tardio e a falta de alguns materiais. O estímulo para a ação, referido preferencialmente pelos profissionais, foi a abordagem informal na prática diária. Identificaram-se, ainda, a necessidade de elaborar estratégias de intervenção capazes de aprimorar a conduta dos profissionais de enfermagem e o levantamento dos problemas considerados imprescindíveis para percepção das crenças dos profissionais, a fim de se implementar efetivamente as estratégias que devem alterar positivamente a situação observada. / As microorganisms acquired resistance against antimicrobial agents, multiresistant strains appeared which are difficult to treat. Hence, the total adhesion of health professionals to the precaution measures used in care for patients with multiresistant microorganisms has become essential, with a view to avoiding their dissemination in the hospital environment. This descriptive transverse study was carried out at a philanthropic health institution in the interior of Minas Gerais, Brazil and aimed to evaluate the adhesion of nurses, nursing technicians and auxiliaries to prevention measures used in care for patients with these multiresistant microorganisms. Data were collected in October and November 2003 and were subject to qualitative and quantitative analysis. BARDIN’s (1977) content analysis method was used. Descriptive statistics was used with a view to the quantitative analysis of some data, which were interpreted on the basis of the meaning attributed by ROSENSTOCK (1974a). The Health Belief Model (HBM) allowed us to identify the physical, cognitive and psychological obstacles that justify some professionals’ non-adhesion to the prevention measures oriented towards patients with Multiresistant Bacteria (MRB). As a result of these evaluations, it was identified that nursing professionals adequately perceived the seriousness of diseases caused by MRB, that most of the interviewees linked up the gravity of diseases caused by MRB with difficult treatment or higher mortality rates, while others associated it with the inexistence of treatment. With respect to disease susceptibility, professionals demonstrated a rather limited knowledge about the theme. They perceived themselves as susceptible to MRB, although only some professionals managed to identify the groups that are most susceptible to infection by MRB. A favorable institutional influence was observed when verifying that the institution provides its professionals with the necessary conditions to use the Specific Isolation Protocol. Professional behavior in relation to Individual Protection Equipment (IPE) usage revealed controversies, since many of them mentioned frequent usage, although they admitted that some professionals do not use this equipment in a strict way, for different reasons, among which the most frequent were: the belief that they will not contract the disease, late diagnosis, or due to resistance, that is, without any justification “ ... they do not use it because they do not want to ...”. It was observed that many professionals choose not to adhere totally to the precaution measures. They are not used to washing their hands or scrubbing them with alcohol as frequently as they should, although the material is available. They believe that benefits of adhesion are: protection, prevention of infection/diseases, avoiding dissemination and their safety. With respect to obstacles, they mainly mentioned the lack of beds, late diagnosis and the lack of some kinds of material. As a stimulus towards action, professionals prefer the informal approach in daily practice. We also identified the need to elaborate intervention strategies capable of improving nursing professionals’ behavior and surveyed the problems considered essential to perceive professional beliefs, with a view to the efficient implementation of strategies that should positively change this situation.

Pseudomonas aeruginosa é um patógeno oportunista que ocasiona diferentes infecções em humanos. O surgimento de linhagens multirresistentes (MRs), contra os antibióticos comercialmente disponíveis, tem causado elevados níveis de morbidade e mortalidade. O objetivo deste estudo foi identificar uma molécula de piocina que apresente potente atividade bactericida contra cepas de P. aeruginosa MRs. Uma piocina de baixo peso molecular, produzida pela cepa ET02, apresentou potente atividade bactericida contra treze linhagens de P. aeruginosa produtoras de -lactamases (SPM-1, GIM-1, VIM-1, IMP-1, KPC-2, OXA-18 e GES-5). Essa piocina foi purificada e identificada como S8 através de espectrometria de massas e sequenciamento de DNA. Os genes codificadores da piocina S8 estão presentes no interior de um transposon localizado no cromossomo bacteriano da cepa ET02. Estes resultados demonstram que S8 possui potente atividade bactericida contra linhagens de P. aeruginosa MRs, podendo vir a ser utilizada como um composto antimicrobiano no tratamento de infecções hospitalares. / Pseudomonas aeruginosa is an opportunist pathogen that causes human infections. The emergence of multidrug resistant strains (MRs) against antibiotics commercially available has been causing elevated mortality and morbidity levels. The purpose of this study was to identify a molecule of pyocin with a potent bactericidal activity against P. aeruginosa MRs strains. A low molecular weight pyocin, produced by ET02 strain, has presented wide bactericidal activity against thirteen lineages of P. aeruginosa, producers of -lactamases (SPM-1, GIM-1, VIM-1, IMP-1, KPC-2, OXA-18 e GES-5). This pyocin was purified and identified as S8 through mass spectrometry and DNA sequencing. The pyocin S8 encoding genes are present in the interior of a transposon located in the bacterial chromosome of the ET02 strain. These results demonstrate that S8 have potent bactericidal activity against P. aeruginosa MRs lineages, and may well be used as an antimicrobial compound on treatment of hospital infections.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-02T13:40:56Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eveleise Samira.pdf: 2454087 bytes, checksum: e24ae7df218baac3e3e57b486c915428 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-03T20:20:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eveleise Samira.pdf: 2454087 bytes, checksum: e24ae7df218baac3e3e57b486c915428 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-04T13:04:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eveleise Samira.pdf: 2454087 bytes, checksum: e24ae7df218baac3e3e57b486c915428 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-04T13:04:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eveleise Samira.pdf: 2454087 bytes, checksum: e24ae7df218baac3e3e57b486c915428 (MD5) Previous issue date: 2010-04-27 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Tuberculosis (Tb) is an infectious disease of international distribution. Problems in the diagnosis, as time requirement and high costs for implementation in public health care, increases the number of the disease cases. Specifically about the most important antibiogram assays, the “nitrate reduction assay” (MRN) provides faster results (7 to 14 days) than the “proportion method (MP)” (28 days), however this last one is considered as “gold standard” by the World Health Organization. The aim of this work was to evaluate modification in the method of nitrate reduction (MRN), used to check the sensitivity of M. tuberculosis strains to primary drugs administered for the treatment of TB, as an alternative to reduce costs and to simplify this methodology, in order carry out it in the primary health care to verify the resistance of TB. It was evaluated the accuracy (2X2 table) and agreement (observed agreement and Kappa) between the MP and six variations of NRM: two sources of nitrate (NaNO3 and KNO3); and three different media for solid cultivation (Middlebrook 7H10, Löwenstein-Jensen and Ogawa). The drugs evaluated were: isoniazid (INH), rifampicin (RIF), streptomycin (STR) and ethambutol (EMB); and the tests were conducted with: a strain of Mycobacterium tuberculosis H37Rv (standard sensitivity), four resistant strains (different patterns of resistance to each drug) and twenty-four clinical isolates with unknown antibiotic susceptibility results. Under the studied conditions, excellent reproducibility and agreement was obtained between the original NRM and the MP, confirming that the original NRM is an alternative to antibiogram assays. In the assays carried out with modified MRN (potassium nitrate was substituted by sodium nitrate) it was obtained faster results and full agreement comparing with the results of the MP and the original MRN, indicating that this modified medium could be used in antibiogram assays in the basic care health, since sodium nitrate is a nitrogen source cheaper and more easily obtained. The result of the assays using STR, in all variations of the MRN, indicates that are necessary further evaluation, especially using OG medium. The Middlebrook medium presented recurrent contamination making impossible to carry out analysis. / A Tuberculose (Tb) é uma doença infecto-contagiosa de caráter mundial, sendo que a demora no seu diagnóstico é um dos fatores que intensificam o número de casos da doença. Os métodos de diagnóstico convencionais demandam tempo e possuem custo elevados, dificultando sua implantação nos laboratórios da rede básica de saúde. Entre os métodos de antibiograma se destaca o método de redução de nitrato (MRN), que propicia um resultado mais rápidos (de 7 a 14 dias) que o método das proporções (MP-28 dias), considerado padrão ouro pela Organização Mundial de Saúde. O presente trabalho tem como objetivo, avaliar modificações no método de redução de nitrato (MRN), utilizado para verificação da sensibilidade de cepas de M. tuberculosis aos principais fármacos administrados na terapêutica da Tb, como alternativa de baixo custo e de fácil realização pela rede básica de saúde na verificação da resistência de Tb. No presente estudo, foi avaliada a acuidade (tabela 2X2) e concordância (concordância observada e índice Kappa) entre o MP, e seis variações de MRN, nas quais foram utilizadas duas fontes de nitrato (KNO3 e NaNO3), acrescido a três diferentes meios sólidos de cultivo, Middlebrook 7H10, Lowenstein-Jensen (LJ) e Ogawa (OG). Os fármacos testados foram isoniazida (INH), rifampicina (RIF), estreptomicina (STR) e etambutol (EMB) e os testes foram realizados com cepa de Mycobacterium tuberculosis H37Rv (padrão de sensibilidade), quatro cepas (padrões de resistência diferentes a cada fármaco) e vinte e quatro isolados clínicos com resultado de antibiograma desconhecido. Devido a excelente reprodutibilidade e concordância do MRN original com o MP para os quatro fármacos testados pode-se confirmar que o MRN é uma metodologia alternativa na detecção de isolados de M. tuberculosis resistente aos principais fármacos utilizados na terapêutica da Tb. O resultado de total concordância do MRN modificado pela substituição do nitrato de potássio pelo nitrato de sódio com o MP e com o MRN original para os fármacos RIF, INH e EMB, indica que a modificação é uma ótima alternativa para a rede básica de saúde, visto que a fonte de nitrogênio é de fácil aquisição pelos serviços de saúde. Além disso, mostrou ser mais rápido na liberação dos resultados. Os resultados do fármaco STR, executado em todas as modificações do MRN, indicam a necessidade de avaliações futuras em suas concentrações, principalmente quando utilizado no meio de OG. O meio Middlebrook apresentou freqüentes contaminações em todos os ensaios realizados, não sendo possível realizar sua análise.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-03-16T21:40:17Z No. of bitstreams: 2 Tese - Lara Stefânia Netto de Oliveira Leão Vasconcelos - 2013.pdf: 3438615 bytes, checksum: 0860846b3615244c0123e230f0e5c789 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-03-16T21:41:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Lara Stefânia Netto de Oliveira Leão Vasconcelos - 2013.pdf: 3438615 bytes, checksum: 0860846b3615244c0123e230f0e5c789 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-16T21:41:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Lara Stefânia Netto de Oliveira Leão Vasconcelos - 2013.pdf: 3438615 bytes, checksum: 0860846b3615244c0123e230f0e5c789 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-03-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / The health care environment presents numerous risks making it anharmful place, propitious to colonization and development of infections. Inserted in this scenario are the healthcare workers which are vulnerable to the carrier condition. and the oral cavity represents an important site of colonization. This study aimed to characterize the phenotype of Enterobacteriaceae isolated from the oral cavity of healthcare workers from an oncologic reference hospital in the central area of Brazil. We also aimed to detect co-colonization by Staphylococcus and Pseudomonas, as well as describe the profile socio-demographic, professional, disease/infection and behavioral of individuals colonized by Enterobacteriaceae. It was a descriptive cross-sectional epidemiological study conducted from May/2009 to November/2010 and saliva was collected a from each subjected. A total of 294 individuals participated in the research, being 149 healthcare members and 145 from the support team. The microbiological procedures were performed according to recommended techniques and data collection obtained by a questionnaire and analyzed through descriptive statistics. Among the participants, 55 (18.7%) were colonized by Enterobacteriaceae in the oral cavity. Were isolated 64 bacteria, including species potentially pathogenic. The most prevalent specie was gergoviae Enterobacter (17.2%). The highest rates of resistance were observed to β-lactams and 48.4% of isolates were considered multiresistant. The Extended Spectrum β-lactamases (ESBL) production was negative for the Enterobacteriaceae and none Klebsiella pneumoniae produced Carbapenemase (KPC). However, among the 43 CESP isolates group (Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Providencia), 51.2% produced AmpC β- lactamase by induction and 48.8% were hiper producers. Staphylococcus and Pseudomonas were detected in the saliva of 56.4% individuals. The majory of the healthcare workers colonized by Enterobacteriaceae was men over 40 years. The nursing technician was the professional category most colonized (52.7%), followed by the cleaning staff (23.6%). The cleaning and hygiene sector (23.6%) and nursing stations (18.2%) represented the largest number of workers colonized. Some professionals (27.3%) had second job in another health service, while 41.8% remained in the institution around 40 hours or more a week. Some infection was reported among carriers, as tonsillitis, sinusitis and pharyngitis, being the first the most frequent (52.7%). Enterobacteriaceae carriage (18.2%) reported the use of personal protective equipment (PPE) as unnecessary to their s activity, 7.3% did not use the mask as precautionary measure, 23.6% realized sporadically the exchange of mask and 1.8 % never changed. The use of oral antiseptics was observed in 29.1% of the workers, the recent use of antimicrobials in 16.4% and self-medication in 27.3%. Among the colonized persons was observed lack of knowledge about multiresistant microorganisms. The prevalence Enterobacteriaceae carriage is considered high and the resistance is a problem especially due to multidrug resistance and production of β-lactamase AmpC observed. The results of this research contribute with important subsidies to the programs for nosocomial infections prevention and control of, since knowledge of carrier status reduces the risk of transmission of microorganisms. / O ambiente da assistência à saúde apresenta inúmeros riscos que o torna um local insalubre, propício à colonização e ao desenvolvimento de infecções. Inseridos neste cenário estão os trabalhadores dos serviços de saúde, os quais são vulneráveis à condição de portador. A cavidade bucal representa assim um importante sítio de colonização. Este estudo buscou caracterizar o fenótipo de Enterobacteriaceae isoladas da cavidade bucal de trabalhadores de um hospital oncológico referência no Centro-Oeste brasileiro. Também fizeram parte dos objetivos desta pesquisa detectar co-colonização por Staphylococcus e Pseudomonas, bem como descrever o perfil sócio-demográfico, profissional, doença/infecção e comportamental dos indivíduos colonizados por Enterobacteriaceae. Estudo epidemiológico transversal do tipo descritivo realizado de maio/2009 a novembro/2010. Participaram 294 trabalhadores, sendo 149 membros da equipe de saúde e 145 da equipe de apoio. Os procedimentos microbiológicos foram realizados segundo técnicas padronizadas e a coleta de dados realizada por meio da aplicação de um formulário. Foi coletada uma amostra de saliva de cada sujeito Os dados foram analisados por meio de estatística descritiva. Dentre os participantes, 55 (18,7%) estavam colonizados por Enterobacteriaceae na cavidade bucal. Foram isoladas 64 bactérias, incluindo espécies potencialmente patogênicas. A espécie mais prevalente foi Enterobacter gergoviae (17,2%). As maiores taxas de resistências foram observadas para os β-lactâmicos e 48,4% dos isolados foram considerados multirresistentes. Para as enterobactérias pesquisadas, a produção de β-lactamase de Espectro Ampliado (ESBL) e Klebsiella pneumoniae Carbapenemase (KPC) foi negativa. Porém, dentre os 43 isolados do grupo CESP (Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Providencia), 51,2% foram considerados produtores de β-lactamase AmpC por indução e 48,8% mutantes hiperprodutores. Staphylococcus e Pseudomonas estavam presentes na saliva de 56,4% dos sujeitos colonizados por Enterobacteriaceae. O maior número de portadores foi constituído por homens acima de 40 anos. Entre os técnicos de enfermagem, 52,7% estavam colonizados, seguidos dos auxiliares de limpeza (23,6%). O setor de higienização e limpeza (23,6%) e os postos de enfermagem (18,2%) contemplaram o maior número de trabalhadores colonizados. Alguns trabalhadores (27,3%) possuíam segundo emprego em outro serviço de saúde, enquanto que 41,8% permaneciam na instituição 40 horas ou mais na semana. Quadros frequentes de infecção foram relatados entre os portadores, como amigdalites, sinusites e faringites, sendo o primeiro o mais frequente (52,7%). Alguns portadores de Enterobacteriaceae (18,2%) relataram o uso de EPI como desnecessário à sua atividade, 7,3% não faziam o uso de máscara como medida de precaução, 23,6% realizavam a troca de máscara esporadicamente e 1,8% nunca trocava. O uso de antissépticos bucais foi observado em 29,1% dos trabalhadores, o uso recente de antimicrobianos em 16,4% e a prática da automedicação em 27,3%. A desinformação sobre micro-organismos multirresistentes foi comum entre os colonizados. A prevalência de portadores de Enterobacteriaceae foi elevada e o fenótipo de resistência dos isolados preocupante, especialmente pela multirresistência e produção de β-lactamases AmpC. As variáveis avaliadas revelaram realidades relevantes para o contexto da assistência à saúde e para a saúde do trabalhador. Os resultados desta pesquisa contribuíram com subsídios importantes para os programas de prevenção e controle das infecções nosocomiais, pois o conhecimento do estado portador reduz os riscos de transmissão de micro-organismos.

nÃo hà / Baixos nÃveis sangÃÃneos de drogas antituberculose podem ser causa de resistÃncia do Mycobacterium tuberculosis. Este estudo objetivou avaliar a absorÃÃo intestinal transcelular e paracelular e verificar possÃvel repercussÃo nas concentra-ÃÃes sÃricas de de rifampicina (RMP) e isoniazida (INH) em pacientes com tuberculose multirresistente (TBMR). Realizou-se estudo caso-controle no AmbulatÃrio de Tisiologia do Hospital de Messejana, em Fortaleza-CearÃ, entre agosto de 2006 e abril de 2007. TBMR foi definida como o caso de portador de bacilo resistente a pelo menos RMP+INH, de acordo com o teste de sensibilidade realizado pelo mÃtodo das proporÃÃes. Foram formados dois grupos para controle, o dos portadores de tuberculose sensÃvel (TBS) e o dos voluntÃrios sÃos (VS). Realizaram-se exames hematolÃgicos e bioquÃmicos, o teste da lactulose / manitol (L/M) (para avaliar a absorÃÃo intestinal) e coleta de dados clÃnicos e sociais de todos os voluntÃrios. Para a avaliaÃÃo das concentraÃÃes sÃricas foi coletado sangue duas e seis horas apÃs a ingestÃo observada da RMP+INH. A tÃcnica utilizada para a quantificaÃÃo da L e M na urina e dosagem sÃrica de RMP e INH foi a cromatografia lÃquida de alta pressÃo. O total de componentes dos grupos com TBMR, TBS e de sadios foi, respectivamente, 41, 33 e 41, emparelhados por gÃnero e idade. Na anÃlise univariada, encontrou-se mediana / variaÃÃo do percentual de excreÃÃo urinÃria da L e M menor no grupo com TBMR em relaÃÃo aos sadios (p<0,05). Ao se corrigir para a associaÃÃo alcoolismo + tabagismo ou Ãndice de massa corporal (IMC), desapareceu a significÃncia da menor excreÃÃo de lactulose nos portadores de TBMR. ApÃs a anÃlise multivariada, a mÃdiaÂdesvio-padrÃo (dv) do percentual de excreÃÃo urinÃria do M foi menor no grupo com TBMR em relaÃÃo ao grupo de VS (p=0,0291) e em relaÃÃo ao de TBS (p=0,0369). A relaÃÃo L/M foi semelhante entre os grupos (p=0,4747). A concentraÃÃo sÃrica mÃxima de INH (CHX) mÃdiaÂdesvio-padrÃo foi maior no grupo com TBMR (3,82Â1,18) em relaÃÃo ao VS (2,79Â1,19), p<0,01, nÃo havendo diferenÃa entre TBS e VS nem entre TBMR e TBS. ApÃs a anÃlise multivariada, a CHX aumentou no grupo VS (3,07Â0,24), mas continuou a ser maior no grupo com TBMR e, agora, com diferenÃa significante em relaÃÃo apenas à TBS. Houve CHX < 3 Âg/ml em 18,8% (6/32) dos casos e 56,7% (17/30) dos sadios (p<0,05), nÃo havendo diferenÃa entre TBS, 39,3% (11/28) e sadios. ApÃs a anÃlise multivariada, a mediaÂdp da concentraÃÃo sÃrica mÃxima de RMP (CRX) foi menor no grupo com TBMR do que nos sadios (p<0,05) e no grupo com TBS do que nos sadios (p<0,001), nÃo havendo diferenÃa entre TBMR e TBS. Houve (CRX) < 8 Âg/ml em 90,6% (29/32) dos portadores de TBMR e 66,7% (20/30) dos sadios (p<0,05) e em 82,1% (23/28) do grupo com TBS (em relaÃÃo aos sadios, p<0,05). Em conclusÃo, observou-se reduÃÃo na absorÃÃo transcelular intestinal em pacientes com TBMR versus TBS ou sadios, e os dados sugerem significante participaÃÃo do alcoolismo+tabagismo e IMC na reduÃÃo do transporte paracelular em portadores de TBMR. A CRX foi mais baixa em portadores de TBMR e TBS do que em sadios, com altas proporÃÃes de nÃveis subterapÃuticos de RMP e INH nos trÃs grupos, principalmente para CRX, mas, tambÃm preocupante para CHX. / Reduced antituberculosis drugs concentrations are associated with Mycobacterium tuberculosis resistance. This study aims to evaluate intestinal permeability and serum concentrations of rifampin (RIF) and isoniazid (INH) in patients with multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB). A case-control was conducted with outpatients who attended Messejanaâs Hospital in Fortaleza-Cearà from August 2006 to April 2007. MDR-TB (case) was defined as resistance to at least RIF+INH according to the susceptibility test by the proportion method. Two control groups were formed. The drug sensible TB (DS-TB) group defined so when the isolate was sensible to RIF, INHH, streptomycin and ethambutol and the healthy control group (HC). The final MDR-TB, DS-TB and health control groups composition was 41, 33 and 41 respectively, matched by sex and age. Biochemical and haematological examinatios, lactulose:mannitol (L/M) test (to access intestinal absorption) were performed as well as social and clinical interview in all volunteers. To access the serum concentrations two blood samples were collect at two and six hours after RIF and INH ingestion in 32 MDR-TB and 28 DS-TB patients and 30 HC. The drug serum concentrations and L/M test in urine were performed by HPLC. After univariate analysis the median/range of the L and M urinary excretion percentage was significantly lower in MDR-TB patients comparing to HC (p<0.05). Adjusting for alcoholism+tabagism association or Body Mass Index (BMI), this difference disappeared for lactulose. After multivariate analysis the mean  standard (sd) deviation M urinary excretion percentage was lower in MDR-TB than in HC (p=0.0291) group or DS-TB (p=0.0369) group. The L:M ratio did not differ between the groups (p=0.4747). The meanÂsd of the INH maximum serum concentration (HCmax) was higher in MDR-TB (3.82Â1.18) than in HC (2.79Â1.19) group, p<0.01 and there was no difference between DS-TB and HC nor between MDR-TB and DS-TB groups. After multivariate analysis the HCmax increased in HC (3.07Â0.24), but, remained to be higher in MDR-TB group, and now, significantly higher only than DS-TB group. There was HCmax < 3 Âg/ml in 18.8% (6/32) of the cases and 56.7% (17/30) of the HC (p<0.05) and no difference between DS-TB (39.3%, 11/28) and HC. After multivariate analysis the meanÂsd RIF maximum serum concentration (RCmax) was lower in MDR-TB than in HC(p,0.05) and in DS-TB than in HC (p<0.001), with no difference between MDR-TB and DS-TB groups. The RCmax was < 8 Âg/ml in 90.6% (29/32) of the cases and 66.7% (20/30) of HC (p<0.05) and in 82.1% (23/28) of the DS-TB patients (comparing to HC, p<0.05). In conclusion there was reduction in transcellular intestinal absorption in MDR-TB versus DS-TB or HC and the data suggest that alcoholism+tabagism association and BMI have an important role in the reduction of paracellular transport in MDR-TB patients. The RCmax was low in MDR-TB and DS-TB patients with high proportions of subtherapeutic levels in theses groups, mainly for RCmax, but also worrying for HCmax.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:06:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 eric lima.pdf: 633686 bytes, checksum: 0cc537b946f15fad5d8bce89fbe72b90 (MD5) Previous issue date: 2013-06-04 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Tuberculosis is an endemic disease of great importance to public health since the 1980, has had a significant change in their pattern of incidence and mortality due to advent of the epidemic with HIV. Recently, the increase in reported cases of drug resistance, has also contributed to the worsening of the disease, thus constituting one of the main problems that hinder the control of this disease at present, due to the impact it makes on the duration and cost of treatment. This paper addresses the issue of multidrug resistance in the context of the Amazon, which has the highest incidence rates among all states of the Brazilian federation. The study was developed in three stages corresponding to the goals set resulting papers. The first item corresponds to the product of the analysis of the database Sinan, treating the data Completeness of tuberculosis in Amazonas, in the period 2001-2010, comparing municipalities priority and non-priority. The second article discusses the issue of TB / HIV and its probable influence on the development of drug resistance, through a systematic review of scientific literature nationally and internationally. The third article is a descriptive cross-sectional study, referring to cases of multidrug-resistant tuberculosis reported in the state of Amazonas during the period 2006-2012. / A tuberculose é uma endemia de grande relevância para a saúde pública que, desde a década de 1980, tem apresentado uma alteração significativa no seu padrão de incidência e mortalidade, em decorrência advento da epidemia pelo vírus do HIV. Recentemente, o aumento do registro de casos de resistência aos tuberculostáticos, também tem contribuído para um agravamento do quadro da doença, constituindo assim um dos principais problemas que dificultam o controle deste agravo na atualidade, devido ao impacto que provoca na duração e custos do tratamento. Esta dissertação aborda a questão da multirresistência no contexto do Amazonas, que apresenta uma das maiores taxas de incidência entre todos os estados da federação brasileira. O estudo foi desenvolvido em três etapas correspondentes aos objetivos traçados que resultaram artigos científicos. O primeiro artigo corresponde ao produto da análise do banco de dados Sinan, tratando da Completitude dos dados de tuberculose notificados no Amazonas, no período de 2001 a 2010, comparando municípios prioritários e não prioritários. O segundo artigo discute a temática da coinfecção TB/HIV e sua provável influência no desenvolvimento da resistência aos tuberculostáticos, através de uma Revisão Sistemática da literatura cientifica nacional e internacional. O terceiro artigo trata de um estudo descritivo e transversal, referente aos casos de tuberculose multirresistente notificados no estado do Amazonas durante o período de 2006 a 2012.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:54:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcia Alves de Souza.pdf: 1923965 bytes, checksum: 3ad1484efad384495579203b0e85259c (MD5) Previous issue date: 2013-05-30 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / A Tuberculose (TB) é uma doença infecciosa causada pelo complexo Mycobacterium tuberculosis, sendo considerada um grave problema de saúde pública mundial. Atualmente, isolados de M. tuberculosis resistentes a pelo menos um medicamento utilizado no tratamento da TB tem sido documentados em todos os países. De acordo com a Organização Mundial de Saúde (OMS) a TB multirresistente (TBMR) é definida quando, isolados de M. tuberculosis de pacientes apresentam resistência a pelo menos Isoniazida e Rifampicina, os dois fármacos fundamentais no tratamento da TB. A resistência à Rifampicina tem sido associada às mutações gênicas no bacilo, no gene rpoB (referentes aos códons 531, 526 e 516). Para a Isoniazida, as mutações associadas à resistência têm sido relatadas nos genes katG, inhA, ahpC e kasA, sendo que a mutação no gene katG, referente ao códon 315, tem sido a mais citada para resistência a este fármaco. Neste contexto, métodos moleculares têm sido propostos pra detecção de mutações gênicas, em isolados de M. tuberculosis, que possam estar associadas à resistência aos fármacos. O presente estudo avaliou o desempenho da PCR multiplex alelo específico (PCR-MAS), diretamente em 86 amostras de escarro de pacientes com TB pulmonar multibacilares (n=42) e paucibacilares (n=44) da Policlínica Cardoso Fonte. A PCR-MAS teve como alvos: os genes katG ,inhA e rpoB. A concordância entre a PCR-MAS e o Método de Redução de Nitrato foi avaliada utilizando o teste kappa e a associação entre as mutações gênicas e a resistência fenotípica aos fármacos foi realizada pelo teste exato de Fisher. A análise de concordância, pelo teste kappa, foi realizada entre as PCR-MAS a partir de amostra de escarro e de isolados de M. tuberculosis. A PCR-MAS apresentou fraca concordância com o Método de Redução de Nitrato, pois de 18 amostras resistentes à Isoniazida, apenas em 4 (22,2%) foram detectadas as mutações para o gene katG ou inhA. No entanto, a avaliação da sensibilidade fenotípica à Rifampicina, apresentou boa concordância com a PCR-MAS (kappa = 0,7237), quando as amostras foram de pacientes de TB pulmonar multibacilar. Além disso, houve associação da presença de mutações no gene rpoB com resistência fenotípica à Rifampicina (p = 0.0014). Em relação a concordância entre as PCR-MAS, de amostras de escarro e seus respectivos isolados de M. tuberculosis, o desempenho foi excelente quando testados em amostras de pacientes com TB pulmonar multibacilar, para detecção de mutações no gene rpoB (kappa = 0,7742). Portanto, os resultados obtidos com a PCR-MAS, a partir de amostras de escarros, foram satisfatórios e poderão ser utilizados para monitorar e pesquisar as mutações associada à resistência à Rifampicina em pacientes de TB multibacilar na rede básica de saúde, pois é um teste rápido, reprodutível e de menor custo.