Mundialmente los residuos lignocelulósicos constituyen el recurso renovable más importante que existen y está compuesto en su mayor parte por celulosa la que es degradada principalmente por hongos. En el Perú se conoce poco acerca del potencial celulolítico de las cepas fúngicas nativas en las distintas regiones de nuestro país. Este trabajo tuvo como objetivo seleccionar cepas fúngicas productoras de celulasas de los mantenidos en el cepario del laboratorio de micología aplicada, identificarlas morfológicamente y evaluar su actividad enzimática. Se evaluaron 289 cepas semicuantitativamente mediante la técnica de difusión radial en agar czapeck Na-CMC y cuantitativamente por el método de Somogy Nelson. Se seleccionaron cinco cepas: tres del genero Paecilomyces sp (SA – 726; SA - 668; SA – 651), una de Fusarium sp (SA - 683) y una de Aspergillus sp HN – 566), los que presentaron áreas de hidrólisis de 14.9; 12.5, 12.0, 14.4 y 12.7 x 10² mm² respectivamente. La actividad enzimática de las cepas seleccionadas mostró los siguientes valores: 0.048, 0.042, 0.042, 0.080 y 0.048 UI/mL respectivamente. Los resultados muestran que existen cepas nativas en las zonas de Satipo y Huancayo con buena actividad enzimática, las cuales tienen un alto potencial para la producción o la investigación. Palabras claves: Celulasas, Czapeck, difusión radial, Somogy Nelson, actividad enzimática. / --- Lignocellulosic residues are the largest renewable resource that exists in the world, for the most part composed of cellulose and is degraded mainly by fungi. In the Peru, little is known about the cellulolytic potential of native fungal strains in the different regions of our country. The objective of this work was to make a selection of cellulolytic fungal strains, identify them morphologically, and evaluate their enzymatic activity. Two hundred and eightynine strains were reactivated and evaluate semi quantitatively and qualitatively by the radial diffusion technique in czapeck agar Na-CMC and Nelson-Somogy method respectively. Five strains were selected: from sort Paecilomyces sp (SA-726; SA-668; SA-651) a Fusarium sp (SA-683) and an Aspergillus sp (HN-566), with hydrolysis of 14.9; 12.5; 12.0; 14.4 and 12.7 x 10² mM². Enzyme activity was evaluated revealing the following values: 0.048, 0.042, 0.080, and 0.048 UI/mL, respectively. Results show that exist native strains with good enzymatic activity which have high potential for production and investigation.

Con el objetivo de determinar su potencial como cepas productoras de uno de los componentes del complejo enzimático celulasa: las exoglucanasas, se evaluaron inicialmente 104 cepas de hongos celulolíticos aislados de muestras de tierra con hojarascas de las provincias de Huaylas y Huaraz. De estas cepas, 10 (9,6%) fueron aisladas en el año 2000; las 94 cepas restantes (90,4%) en 1990. Estas últimas fueron reactivadas en medio APD y sólo 43 cepas (45,7%) fueron verificadas como celulolíticas por su desarrollo en sustratos celulósicos. La actividad de exoglucanasas de las cepas celulolíticas se determinó cualitativamente mediante la evaluación del grado de desintegración del papel filtro en cultivos en medio Czapeck. Los sobrenadantes libres de células de estos cultivos se utilizaron para evaluar la pérdida de peso en 100 mg de papel filtro (para cada sobrenadante). En base a estos resultados se seleccionaron presuntivamente 25 cepas (55,6%), las que fueron cultivadas en medio Czapeck con papel filtro (0,5%) como única fuente de carbono. A partir de estos cultivos se realizó la evaluación cuantitativa de la actividad de exoglucanasas utilizando los sobrenadantes libres de células, mediante la actividad sobre papel filtro(APF). Para determinar esta actividad se cuantificaron los azúcares reductores por el método de Nelson(1944) y Somogyi. Las cepas con niveles mayores a 0,1 UI/ml de actividad exoglucanasa fueron seleccionadas y se evaluó su producción en medio Czapeck con diferentes fuentes de carbono (algodón,celulosa y papel filtro), asi como también la actividad de exoglucanasas en medio Czapeck y medio Mandels, determinandose además biomasa, pH y proteínas solubles. / --- Were analyzed one hundred and four native fungi isolated of samples of ground with dead leaves from Huaylas and Huaraz provinces, with regarding their potential as producing strains of one of the enzymes of the cellulase complex: the exoglucanases. Of these strains, ten were isolated lately(2000 year) and ninety four in the 1990 year; the latter were reactivate in PDA media and just fourty three strains were verified like cellulolytic by their growth in cellulosic substrates. The exoglucanases activity of the cellulolytic strains was determined in qualitative form by means the filter paper desintegration in cultivations in Czapeck media. The loss in weight of insoluble substrate was evaluated with the culture filtrates. Twenty five fungal (55,6%) strains were selected and evaluated in quantitative form by means filter paper activity (FPA), measuring the reducing sugar produced by the Nelson (1944) and Somogyi method. / Tesis

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Memoria para optar al título de Ingeniero Civil en Biotecnología / Debido a la alta demanda de combustibles y la creciente alza en el precio del petróleo es primordial buscar nuevas alternativas energéticas para satisfacer las necesidades de la población. Dentro de este escenario, considerando la abundancia de residuos lignocelulósicos forestales y agroindustriales en nuestro país, la posibilidad de producir bioetanol a partir de éstos parece ser una alternativa bastante atractiva en los aspectos estratégicos y ambientales. La hidrólisis de la celulosa es una de las etapas que tiene mayores posibilidades de ser optimizada con el fin de reducir los costos de producción del bioetanol de segunda generación. Ésta se basa en la utilización de una mezcla de celulasas que causan la depolimerización de la celulosa con el fin de generar azúcares simples (glucosa). Considerando lo anterior, el presente Trabajo de Memoria de Título, tuvo como objetivo la identificación de secuencias pertenecientes a nuevas endoglucanasas que puedan ser utilizadas en el proceso de hidrólisis de celulosa. La estrategia utilizada se dividió en tres etapas principales: (i) la realización de un screening de actividad endoglucanasa sobre un conjunto de hongos de pudrición blanca, para identificar cuales poseían enzimas con esta actividad; (ii) la amplificación por PCR desde DNA genómico y cDNA de fragmentos pertenecientes a secuencias que codifican para estas enzimas, utilizando partidores degenerados diseñados a partir de regiones de homología de endoglucanasas de hongos; y (iii) la amplificación de regiones aledañas a las secuencias obtenidas utilizando la estrategia RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends). Mediante la utilización de esta metodología, fue posible obtener fragmentos de secuencias de genes de glicosil hidrolasas, los cuales fueron clonados y analizados in sílico, obteniéndose los siguientes resultados: a partir del cDNA se obtuvieron fragmentos de cuatro endoglucanasas y una exoglucanasa. Una de las secuencias de endoglucanasa pertenece a la familia 5 y procede del hongo Polystictus versicolor; la segunda pertenece a la familia 7 y procede de Fusarium oxysporum; una tercera pertenece a la familia 61 y procede del hongo Ganoderma applanatum, mientras que la cuarta pertenece a la familia 61 y procede del hongo Fusarium oxysporum. Las secuencias se compararon con secuencias de endoglucanasas presentes en las bases de datos, encontrándose que poseen un porcentaje de identidad a nivel de secuencia aminoacídica de 93, 100, 58 y 60 % con respecto al mejor alineamiento observado, respectivamente. La secuencia de exoglucanasa proviene del hongo Polystictus versicolor y se clasifica dentro de la familia 7, con un 80% de identidad aminoacídica con respecto al mejor alineamiento observado. De todas las endoglucanasas identificadas en este trabajo, sólo la proveniente del hongo Fusarium oxysporum se encontraba previamente descrita. A partir de DNA genómico, no fue posible obtener fragmentos con utilidad para el proceso de hidrólisis de celulosa. En conclusión, la estrategia utilizada fue exitosa, siendo posible obtener fragmentos de secuencia de tres endoglucanasas de hongos no descritas, que pueden ser potencialmente útiles en el proceso de hidrólisis de celulosa para la producción de bioetanol de segunda generación.

Tesis para optar al grado de Magíster en Finanzas / Este informe presenta la valoración por Flujo de Caja Descontados (FCD) deEmpresas CMPC,firma que encuentra enfocada en los negocios: forestal, celulosa, papel y tissue. Este último,junto con la celulosa, conforma el 69% de los ingresos de la empresa. Entre las empresas competencia de CMPC, se encuentran Suzano Pulp and Paper, StoraEnso, Fibria, Copec,SvenskaCellulosaAktiebolaget, entre otras. La compañía actualmente se encuentra en un proceso de fuertes inversiones (proyecto principal Guaiba II), financiadas mayormente con deuda financiera, bancaria (68%) y bonos (30%). Posee una serie de bonos emitidos en el extranjero, con una clasificación crediticia de grado de inversión. Se valoró CMPC según los flujos de caja libre a 10 años proyectados a partir de los datos históricos desde el 2010 a septiembre 2014, expresados en USD (monera funcional de la firma). Los ingresos se estimaron según línea de negocio, apoyados en proyecciones de demanda, precios y/o capacidad instaladas futuras, según lo esperado por el mercado, anunciado por la empresa y/o basados en su historia. Mientras que los Costos y GAV se estimaron como una proporción sobre los ingresos, respecto a datos trimestrales de los últimos dos años. Otras partidas operacionales como la Depreciación y Otros Ingresos (Egresos) y las partidas no operacionales fueron proyectadas de manera conservadora, usando el mismo valor de septiembre-2014. Para el WACC se consideró una estructura de capital objetivo, en base a la media armónica (0,45x B/P). El Beta desapalancado se calculó con el Beta apalancado obtenido con los datos semanales de los últimos dos años a septiembre 2014, considerando el levegare como el B/P promedio del periodo de 2 años considerado. Dado que la valoración se realizó en moneda estadounidense, la tasa libre de riesgo(𝑅𝑓 ) y la tasa de la deuda de CMPC utilizadas para el cálculo del WACC, fueron el último bono soberano de largo plazo emitido por Chile en USD y el bono más largo emitido por CMPC en USD, respectivamente. Con esto el WACC obtenido fue 8.31%. Valor de la empresa se obtuvo calculando un valor terminal con crecimiento g de 2,8% y tasa de retención de 70%, según el ROA histórico y el mínimo payout que debe realizar la empresa chilena por ley. Además, se sumaron activos prescindibles: garantías, inversiones en sociedades, plusvalía, cuentas por cobrar no asociados al negocio, etc. Finalmente, se restó la Deuda Financiera Neta, obteniendo un Precio de $1.723. Como una forma de validar la valoración por FCD, se emplearon los múltiplos P/U, EV/EBITDA, Precio/Ventas y EV/Ventas, para obtener estimaciones de precio a partir de los ratios de la industria (promedios de comparables de CMPC). Con esto, se obtuvo un rango de precio de $1.028 a $2.005 por P/U y EV/EBITDA, respectivamente.

Tesis para optar al grado de Magíster en Finanzas / Este informe presenta la valoración por Flujo de Caja Descontados (FCD) deEmpresas CMPC, firma que encuentra enfocada en los negocios: forestal, celulosa, papel y tissue. Este último, junto con la celulosa, conforma el 69% de los ingresos de la empresa. Entre las empresas competencia de CMPC, se encuentran Suzano Pulp and Paper, StoraEnso, Fibria, Copec, SvenskaCellulosaAktiebolaget, entre otras. La compañía actualmente se encuentra en un proceso de fuertes inversiones (proyecto principal Guaiba II), financiadas mayormente con deuda financiera, bancaria (68%) y bonos (30%). Posee una serie de bonos emitidos en el extranjero, con una clasificación crediticia de grado de inversión. Se valoró CMPC según los flujos de caja libre a 10 años proyectados a partir de los datos históricos desde el 2010 a septiembre 2014, expresados en USD (monera funcional de la firma). Los ingresos se estimaron según línea de negocio, apoyados en proyecciones de demanda, precios y/o capacidad instaladas futuras, según lo esperado por el mercado, anunciado por la empresa y/o basados en su historia. Mientras que los Costos y GAV se estimaron como una proporción sobre los ingresos, respecto a datos trimestrales de los últimos dos años. Otras partidas operacionales como la Depreciación y Otros Ingresos (Egresos) y las partidas no operacionales fueron proyectadas de manera conservadora, usando el mismo valor de septiembre-2014. Para el WACC se consideró una estructura de capital objetivo, en base a la media armónica (0,45x B/P). El Beta desapalancado se calculó con el Beta apalancado obtenido con los datos semanales de los últimos dos años a septiembre 2014, considerando el levegare como el B/P promedio del periodo de 2 años considerado. Dado que la valoración se realizó en moneda estadounidense, la tasa libre de riesgo (𝑅𝑓 ) y la tasa de la deuda de CMPC utilizadas para el cálculo del WACC, fueron el último bono soberano de largo plazo emitido por Chile en USD y el bono más largo emitido por CMPC en USD, respectivamente. Con esto el WACC obtenido fue 8.31%. Valor de la empresa se obtuvo calculando un valor terminal con crecimiento g de 2,8% y tasa de retención de 70%, según el ROA histórico y el mínimo payout que debe realizar la empresa chilena por ley. Además, se sumaron activos prescindibles: garantías, inversiones en sociedades, plusvalía, cuentas por cobrar no asociados al negocio, etc. Finalmente, se restó la Deuda Financiera Neta, obteniendo un Precio de $1.723. Como una forma de validar la valoración por FCD, se emplearon los múltiplos P/U, EV/EBITDA, Precio/Ventas y EV/Ventas, para obtener estimaciones de precio a partir de los ratios de la industria (promedios de comparables de CMPC). Con esto, se obtuvo un rango de precio de $1.028 a $2.005 por P/U y EV/EBITDA, respectivamente.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero de la Madera / El proceso de blanqueo de pastas celulosicas persigue eliminar y/o modificar la lignina residual presente en las pulpas una vez finalizada la cocción. Para su desarrollo se emplean distintos reactivos químicos, entre los cuales se cuentan, en muchos casos, el cloro ó derivados de éste, como el dióxido de cloro y el hipoclorito de sodio. El empleo de estos reactivos conlleva la formación de compuestos organoclorados (cloroligninas), los que presentan una alta toxicidad y son bioacumulables. En el presente trabajo se investigó la posibilidad de emplear una enzima lacasa, de origen industrial, como primera etapa de deslignificación de pasta Kraft de Eucaliptus globulus (Labill), a fin de desminuir el empleo de reactivos químicos durante la etapa de blanqueo. En el estudio se empleó la enzima lacasa NS-51003, producida por la empresa NOVOZYMES. Esta enzima fue aplicada a una pasta Kraft cruda de Eucaliptus globulus proporcionada por la empresa Celulosa Arauco y Constitución S.A., planta LICANTEN.

Tesis para optar al grado de Magíster en Finanzas / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / El presente informe analiza empresas CMPC a nivel de grupo económico, buscando determinar su valor a través de sus fundamentales, el valor de mercado se obtendrá mediante técnicas de valorización por flujos libres descontados y por múltiplos En las valoración de CMPC existe un factor esencial a considerar que es la alta correlación del precio de la empresa con el precio de la celulosa a nivel internacional y también una alta correlación con el IPSA, ya que los resultados de la empresa están muy ligados a los ciclos económicos. Dada esta condición estructural del negocio en torno a la ciclicidad y volatilidad de su principal segmento de negocio ponderaremos nuestra valorización 50% por flujo y 50% por múltiplo y seremos conservadores en nuestras proyecciones. La primera sección de este informe entrega un perfil general de la empresa destacando su estrategia continua de crecimiento, diversificación, operando en toda la cadena productiva del papel, un desarrollo agresivo a nivel internacional que pueden posicionar a CMPC como una de las tres empresas productoras de celulosa más grandes del mundo. En esta primera sección se destaca igualmente la política financiera altamente conservadora de la empresa, que le ha permitido sostener sus ventajas competitivas y aprovechar oportunidades de inversión. En la sección dos se revisa en forma detallada la valoración de la empresa, tomando para tal efecto seis años histórico de información, estos cinco años están influenciados con la crisis económica de 2008, lo que agrega mayor conservadurismo a las proyecciones. Dichas proyecciones son a 7 años 2014 a 2020 que se considera un ciclo adecuado para tener una perspectiva del crecimiento de largo plazo de la compañía, los primeros años de este periodo los analistas proyectan una situación de sobre-oferta de celulosa, que presionará los precios a la baja, solo compensado con la creciente demanda de China y una probable recuperación europea. Es importante destacar igualmente que al principio del periodo de la proyección, se encuentra uno de los hitos más importantes de la historia de la compañía, como lo es la puesta en marcha de la planta de celulosa Guaiba en Brasil, inversión que requerirá una inversión de 2.100 millones de dólares que generara presión sobre el precio de la acción de CMPC, pero a su vez contempla enormes posibilidades de desarrollo y mayor eficiencia en el mediano plazo. Por su parte el segundo segmento más importante de la compañía el papel Tissue seguirá su desarrollo creciente en Latinoamérica posicionándose en dos mercado de vital importancia como lo son Brasil y México y posibilitando de esta manera crecer por sobre la expansión natural de las economías latinoamericanas Se finaliza el presente trabajo con una serie de anexos que pueden ser interesantes de incorporar, para comprender en su totalidad el estudio y contar con cifras detalladas de las bases de proyección y análisis

Tesis para optar al grado de Magíster en Finanzas / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / El presente trabajo tiene como finalidad determinar el precio de la acción de EMPRESAS CMPC S.A. a través del método de flujos de caja descontado considerando información al 30.06.2014. Este trabajo contempla la descripción de la empresa y de la industria en la que participa la empresa, análisis del financiamiento y de la estructura de capital, análisis operacional, la proyección del estado de resultados y flujo de caja libre de la empresa. En la aplicación del método de flujos de caja descontados, se determinó a través del modelo de mercado el Beta de Empresas CMPC S.A., considerando el índice accionario de la Bolsa de Comercio de Santiago llamado Índice General de Precios de las Acciones (IGPA), para luego proceder a calcular la tasa de costo de capital de los activos de la empresa (WACC), con la cual se descontaron los flujos de caja libre proyectados. Producto de la valoración por flujos descontados se determinó un precio de la acción de $1.357, lo que significa un upside de 12,1% respecto del valor de la acción en la Bolsa de Santiago al cierre de junio del año 2014.

Magíster en Bioquímica, Especialización en Bioquímica Ambiental / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / En la actualidad el uso de combustibles alternativos al petróleo ha tomado auge por el agotamiento de los combustibles fósiles y por el daño al medio ambiente que éstos provocan. Por esta razón la búsqueda de nuevos combustibles ha adquirido gran relevancia. La producción de etanol a partir de biomasa, conocido como bioetanol, surgió como una posible solución al problema de los combustibles; sin embargo, la materia prima para su producción proviene de cultivos de origen alimenticio, utilizando para esto grandes zonas de cultivo, lo que genera una gran controversia. Debido a esto surgió el bioetanol de segunda generación, que utiliza para su producción biomasa lignocelulósica. Esta biomasa se encuentra en grandes cantidades, principalmente como desechos de la industria del papel y de residuos agrícolas. Para la producción de bioetanol desde material lignocelulósico, son necesarias dos etapas adicionales en comparación con la producción de bioetanol de primera generación: una etapa de pretratamiento del material lignocelulósico, y una etapa de hidrólisis de la celulosa. Para la segunda etapa se utilizan celulasas, enzimas que hidrolizan la celulosa para la generación de azúcares simples. El problema es el alto costo de producción asociado a la utilización de estas enzimas. Las investigaciones se han enfocado en el mejoramiento de las celulasas para optimizar el proceso de la hidrólisis de celulosa, con el fin de disminuir los costos de producción del bioetanol de origen lignocelulósico. En la etapa de hidrólisis de la celulosa actúan tres celulasas en forma sinérgica: endoglucanasas, celobiohidrolasas y ß-glucosidasas. Phanerochaete chrysosporium es un hongo que produce varias celulasas, entre ellas el complejo enzimático CBH-I constituido por varias celobiohidrolasas, que constituye el 12% de proteínas totales secretadas por este hongo. El objetivo general de este trabajo es estudiar el rol de CBH-I del hongo P. chysosporium en el proceso de hidrólisis del material lignocelulósico de Nothofagus pumilio (lenga), utilizando una fracción altamente enriquecida con CBH-I proveniente de P. chrysosporium y distintas concentraciones de una endoglucanasa comercial de T. viride, con el fin de obtener un mejor rendimiento de sacarificación que el preparado comercial de T. reesei. Se eligió lenga por ser la segunda especie nativa más abundante en Chile y que presenta residuos abundantes, cuya biomasa puede ser ocupada para la producción de bioetanol de segunda generación Se comparó la sacarificación de lenga por el tratamiento con extractos enzimáticos provenientes del hongo P. chrysosporium versus un preparado comercial de T. reesei. Al comparar la sacarificación, no se observaron grandes diferencias, solo se observó un aumento significativo en la sacarificación por T. reesei a las 48 horas de incubación con 40 μg de proteínas por mg de sustrato. Para determinar si era factible mejorar el proceso de sacarificación del material lignocelulósico, que utiliza enzimas comerciales del organismo T. reesei y estudiar el rol de CBH-I en la sacarificación, se aisló y purificó CBH-I desde un cultivo P. chrysosporium y se realizaron experimentos de comparación de la sacarificación entre CBH-I con una endoglucanasa de T. viride versus el preparado comercial de T. reesei, además se estudió la acción conjunta entre CBH-I y la endoglucanasa comercial T. viride. CBH-I en combinación con una endoglucanasa de T. viride produce una sacarificación mayor que el preparado comercial de T. reesei a las 72 horas de incubación. Se observó sinergismo a concentraciones menores de celulasas (20 μg/ml), encontrándose una disminución de la cooperación a concentraciones mayores (100 μg/ml). Se concluye que CBH-I proveniente de P. chrysosporium podría ser una alternativa para preparaciones enzimáticas comerciales para la degradación de lignocelulosa Además, con el fin de producir celobiohidrolasas CBH-I en mayor cantidad, se realizaron experimentos de expresión de proteínas recombinantes en el organismo E. coli Rosetta-gamiTMB. Para esto se ocuparon dos secuencias génicas de CBH-I aisladas desde el hongo P. chrysosporium denominadas CBH-I cel 7-1 y CBH-I cel 7-2. El uso del sistema de E. coli Rosetta-gami™B, permitió producir CBH-I cel 7-1, aunque en forma inactiva. No se produjo CBH-I cel 7-2 recombinante