Made available in DSpace on 2014-10-09T12:36:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:56:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 04372.pdf: 1844488 bytes, checksum: bef7e49c03ee7008c698544bd70ca1a7 (MD5) / Disserta‡ao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:50:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:58:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 00629.pdf: 698191 bytes, checksum: 13b6a1876cd1e8729bc9cd5ae7842ff2 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IEA/D / Instituto de Biociencias, Universidade de Sao Paulo - IB/USP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:05:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A variabilidade na composição e nas atividades biológicas dos venenos de serpentes vem sendo documentada por diversos autores e pode ser observada em diversos níveis. As diferenças na composição dos venenos apresentam relevância na terapêutica dos envenenamentos ofídicos, tornando o estudo da variação dos venenos de extrema importância para a confecção de antivenenos mais específicos e de maior eficácia nos tratamentos de envenenamentos ofídicos em humanos. Os estudos das variações do veneno de serpentes em populações isoladas são raros, sendo no Brasil os casos mais conhecidos os da Bothrops insularis e Bothrops alcatraz. Diversos estudos sugerem que as oscilações do nível marinho, ocorridas há 11.000 anos, teriam isolado populações de serpentes nas ilhas recentemente formadas, resultando em duas diferentes rotas evolutivas que deram origem a estas espécies. Tendo em vista que a formação da Ilha de São Sebastião-SP ocorreu no mesmo período, isolando populações de animais ali existentes, nos propusemos a avaliar a variação nas atividades do veneno de 80 exemplares de serpentes Bothrops jararaca provenientes da ilha e da sua área de distribuição continental, comparando-as com o Veneno Referência Nacional, para as atividades proteolítica sobre caseína, fosfolipásica indireta, hemorrágica e amidolítica, assim como de seus perfis eletroforéticos (SDS-PAGE) e seu reconhecimento pelo soro antibotrópico comercial através da técnica de Western Blot. A análise eletroforética (SDS-PAGE 12,5%) através de densitometria óptica evidenciou, em sua maioria bandas protéicas de baixo peso molecular e a presença de duas áreas majoritárias com grande variação no número, disposição e intensidade das bandas nas faixas de pesos moleculares de 45 kDa e 25 kDa. A variação da disposição das bandas apresentadas nos géis correlacionou-se com a variação nas atividades. Amostras que apresentaram baixa atividade fosfolipásica foram exatamente aquelas que apresentaram poucas e tênues bandas com aproximadamente 14 kDa. A análise das atividades proteolítica sobre caseína, fosfolipásica e esterásica apresentou um padrão de similaridade que nos permitiu estabelecer duas grandes subpopulações de venenos; uma ao norte da distribuição geográfica amostrada, apresentando altas atividades proteolítica sobre caseína, fosfolipásica e amidolítica e outra ao sul apresentando menores valores para tais variedades. Não foi possível estabelecer uma relação direta entre o padrão de distribuição geográfica com a variação nas atividades hemorrágicas dos venenos amostrados. A técnica de Western Blot permitiu concluir que o soro antibotrópico comercial não apresenta um bom reconhecimento para proteínas de baixo peso molecular. A análise das atividades dos venenos dos exemplares insulares apresentou similaridade com as atividades das amostras de veneno de serpentes coletadas próximas à ilha, sugerindo que o intercâmbio gênico não tenha sido de todo interrompido, provavelmente devido à sua proximidade para com o continente. / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:32:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:10:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 03135.pdf: 1843926 bytes, checksum: 6a5bb0439cd164e64d829b870c943fcd (MD5) / Tese(doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Eastern Oysters, or Crassostrea virginica, are an important dietary component in the Chesapeake region and have supported a major fishery in the Chesapeake for more than 100 years. Virginia oysters do not always receive attention in up-scale markets. It is possible that the lack of information on sensory characteristics of Chesapeake oysters may contribute to this problem. In order to differentiate Chesapeake oysters from other oysters, a descriptive sensory test (n=8) was conducted and chemical composition attributes were measured, including glycogen content, proximate analysis, sodium chloride content, and fatty acid analysis. Statistical differences were found for the attributes: volume of liquor, gray/brown and tan colors, roundness of shell, plumpness and salty taste when comparing eastern oysters from Chesapeake to oysters from Rhode Island and New Brunswick, Canada. The glycogen contents in eastern oysters followed the reproductive cycle and glycogen increased from September to December, and started to decrease by April. There were small but significant (p<.05) differences in the contents of moisture, ash, protein and fat of oysters from Chesapeake and other areas. Oysters from Chesapeake had higher percentages of long-chain n-3 fatty acids, which were about 4 times higher than Beau Soleil, an oyster from New Brunswick, Canada. The high percentage of long chain n-3 fatty acids in Chesapeake oysters may be valuable for marketing. / Master of Science

O uso das plantas medicinais confunde-se com a história do ser vivente. Desde a idade da pedra até meados do século XX elas constituíram a principal fonte medicamentosa para a nossa sociedade. Hoje o mercado de fitoterápicos e fitocosméticos vem movimentando bilhões de dólares a cada ano. Apesar de possuir representantes de cerca de 70% de toda a flora mundial, historicamente o Brasil não apresenta tradição cientifica no uso de medicamentos vegetais, sendo a fitoterapia praticada principalmente por caboclos, curandeiros e xamãs. Apenas recentemente, com a \"biopirataria\" e com o crescimento constante do interesse de grandes multinacionais na Amazônia e Mata Atlântica é que está se observando uma movimentação nacional no sentido da legalização e controle de fitoterápicos e da flora Nacional. Neste contexto o Governo Brasileiro formulou uma Resolução em Fevereiro de 2000, regulamentando a produção de fitoterápicos no País, a qual preconiza o controle de qualidade, tanto da matéria-prima quanto do produto acabado. O presente trabalho propõe metodologias para análise de compostos fenólicos (cumarinas, fenilpropanóides e f1avonóides) em extratos metanólico, glicólico e hidroalcoólico de camomila (Matricaria recutita L.) através das técnicas de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), cromatografia líquida capilar (&#181;HPLC), eletroforese capilar de zona livre (FSCE), cromatografia eletrocinética micelar (MEKC) e eletrocromatografia capilar (CEC). O desempenho de cada técnica foi avaliado comparativamente em termos de disponibilidade e tipo de coluna, número de pratos, fator de retenção, seletividade, resolução, tempo e custo de análise. Um estudo de pré-purificação dos extratos foi feito utilizando extração em fase sólida (ODS e HLB) e RMN 1H para acompanhamento das substâncias invisíveis no UV. Propõe-se ainda um protocolo para empacotamento de colunas capilares para &#181;HPLC e CEC. Os extratos foram doseados quanto ao teor de apigenina livre e total, utilizando metodologia validada segundo a USP 24. / The use of medicinal plants for the cure of ailments is as old as mankind. From the Stone Ages throughout the first part of last century, they were the main sources of medicines for our society. Today, the commercial markets are investing billions of dollars every year into the research and development of medicinal plants. Despite having about 70% of the whole world flora, historically Brazil does not have a scientific tradition in the use of herbal medicines. Until very recently, mainly mestizos, healers and xamãs have practiced phytotherapy. But now, with the growth of the interest of pharmaceutical companies in the Amazonian and Atlantic rain forests, there has been a national movement in the way of legalization and control of the National flora. In this context, the Brazilian Government formulated a resolution in February 2000, regulating the production of phytomedicines in this country, which requires the quality control of such products. The present work proposes methodologies for the analysis of the phenolic substances (coumarins, phenylpropanoids and flavonoids) present in methanolic, glycolic and ethanolic extracts of chamomile (Matricaria recutita L.) by the use of High Performance Liquid Chromatography (HPLC), micro Liquid Chromatography (&#181HPLC). Free Solution Capillary Electrophoresis (FSCE), Micellar Electroknetic Chromatography (MEKC) and Capillary Electrochromatography (CEC). These techniques were evaluated comparatively in terms of column performance, plate number, retention factor, selectivity, resolution, time and analysis cost. Pre-purification studies using Solid Phase Extraction (SPE) cartridges (ODS and HLB Oassis) were also carried out and the collected fractions were analyzed by FSCE and RMN 1H. This fatter technique was applied in order to monitor the presence of fat acids on the eluates. A packing procedure for micro columns to use in &#181;HPLC and in CEC is also proposed. Methanolic, glycolic and ethanolic extracts of Matricaria recutita L. were standardized relatively to the total apigenin contents and the CE methodology was thoroughly validated following the United States Pharmacopoea 24 protocol.

O uso das plantas medicinais confunde-se com a história do ser vivente. Desde a idade da pedra até meados do século XX elas constituíram a principal fonte medicamentosa para a nossa sociedade. Hoje o mercado de fitoterápicos e fitocosméticos vem movimentando bilhões de dólares a cada ano. Apesar de possuir representantes de cerca de 70% de toda a flora mundial, historicamente o Brasil não apresenta tradição cientifica no uso de medicamentos vegetais, sendo a fitoterapia praticada principalmente por caboclos, curandeiros e xamãs. Apenas recentemente, com a \"biopirataria\" e com o crescimento constante do interesse de grandes multinacionais na Amazônia e Mata Atlântica é que está se observando uma movimentação nacional no sentido da legalização e controle de fitoterápicos e da flora Nacional. Neste contexto o Governo Brasileiro formulou uma Resolução em Fevereiro de 2000, regulamentando a produção de fitoterápicos no País, a qual preconiza o controle de qualidade, tanto da matéria-prima quanto do produto acabado. O presente trabalho propõe metodologias para análise de compostos fenólicos (cumarinas, fenilpropanóides e f1avonóides) em extratos metanólico, glicólico e hidroalcoólico de camomila (Matricaria recutita L.) através das técnicas de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), cromatografia líquida capilar (&#181;HPLC), eletroforese capilar de zona livre (FSCE), cromatografia eletrocinética micelar (MEKC) e eletrocromatografia capilar (CEC). O desempenho de cada técnica foi avaliado comparativamente em termos de disponibilidade e tipo de coluna, número de pratos, fator de retenção, seletividade, resolução, tempo e custo de análise. Um estudo de pré-purificação dos extratos foi feito utilizando extração em fase sólida (ODS e HLB) e RMN 1H para acompanhamento das substâncias invisíveis no UV. Propõe-se ainda um protocolo para empacotamento de colunas capilares para &#181;HPLC e CEC. Os extratos foram doseados quanto ao teor de apigenina livre e total, utilizando metodologia validada segundo a USP 24. / The use of medicinal plants for the cure of ailments is as old as mankind. From the Stone Ages throughout the first part of last century, they were the main sources of medicines for our society. Today, the commercial markets are investing billions of dollars every year into the research and development of medicinal plants. Despite having about 70% of the whole world flora, historically Brazil does not have a scientific tradition in the use of herbal medicines. Until very recently, mainly mestizos, healers and xamãs have practiced phytotherapy. But now, with the growth of the interest of pharmaceutical companies in the Amazonian and Atlantic rain forests, there has been a national movement in the way of legalization and control of the National flora. In this context, the Brazilian Government formulated a resolution in February 2000, regulating the production of phytomedicines in this country, which requires the quality control of such products. The present work proposes methodologies for the analysis of the phenolic substances (coumarins, phenylpropanoids and flavonoids) present in methanolic, glycolic and ethanolic extracts of chamomile (Matricaria recutita L.) by the use of High Performance Liquid Chromatography (HPLC), micro Liquid Chromatography (&#181HPLC). Free Solution Capillary Electrophoresis (FSCE), Micellar Electroknetic Chromatography (MEKC) and Capillary Electrochromatography (CEC). These techniques were evaluated comparatively in terms of column performance, plate number, retention factor, selectivity, resolution, time and analysis cost. Pre-purification studies using Solid Phase Extraction (SPE) cartridges (ODS and HLB Oassis) were also carried out and the collected fractions were analyzed by FSCE and RMN 1H. This fatter technique was applied in order to monitor the presence of fat acids on the eluates. A packing procedure for micro columns to use in &#181;HPLC and in CEC is also proposed. Methanolic, glycolic and ethanolic extracts of Matricaria recutita L. were standardized relatively to the total apigenin contents and the CE methodology was thoroughly validated following the United States Pharmacopoea 24 protocol.

O objetivo deste trabalho foi estudar o metabolismo secundário de Piper cernuum (Piperaceae) através do isolamento e caracterização dos principais produtos acumulados e a associação com a atividade enzimática da PAL (fenilalanina-amônia-liase) na planta diferenciada (adulta e plântulas) e nas suspensões celulares. Das folhas foram isolados diversos derivados do ácido cinâmico e a lignana cubebina. Entretanto, na análise do óleo volátil das folhas, através de CG-EM, observou-se somente a presença de mono- e sesquiterpenos, sendo que os mais abundantes foram biciclogermacreno (21,88%) e &#946; cariofileno (20,60%). O óleo apresentou atividade inibitória contra Staphylococcus aureus e Candida albicans. As suspensões celulares foram caracterizadas quanto à produção de biomassa, variação de pH e captação de açúcar. Os principais metabólitos foram isolados e caracterizados como sendo tiramina e dopamina que foram quantificadas por cromatografia líquida de alta eficiência através de seus derivados dansilados. As atividades da PAL nas plântulas cultivadas in vitro foram superiores às das plântulas cultivadas em campo e observou-se uma oscilação rítmica da sua atividade enzimática com picos às 6 e 18 horas. / The aim of this work was to investigate the secondary metabolism of Piper cernuum (Piperaceae) by means of isolation and characterization of major secondary compounds accumulated in association to the enzymatic activity of PAL in the differentiated plant material (adult and seedlings) and cell suspension cultures. The major compounds in leaves were derivatives of cinnamic acid and the lignan cubebin. Nevertheless, the analysis of essential oil from leaves by GC-MS indicated the presence of only mono- and sesquiterpenes, among which bicyclogermacrene (21.88%) and &#946;-cariophyllene (20.60%) were the predominant ones. The oil was active against Staphylococcus aureus and Candida albicans. The cell suspension cultures had their growth cycle characterized by means of evaluation of biomass production, pH variation and sugar uptake. The major secondary compounds in the cells were characterized as tyramine and dopamine which were quantified by HPLC as their dansylated derivatives. The PAL activities in the seedlings cultivated in vitro were higher than those in the seedlings growing in field conditions and a rithymic oscillation of enzyme activity was clearly observed with peaks at 6a.m. and 6p.m.

Nenhuma / Embora o titânio e suas ligas sejam amplamente utilizados na implantodontia e os resultados das experiências clínicas comprovarem que estes materiais apresentam excelente biocompatibilidade, existem questionamentos quanto às propriedades físico-químicas ideais das superfícies dos implantes de titânio cppaarrroaap crstieee rdoísabtdtieceras sus musãpaoe roifsmisceipaooiisnr ttdeagnorstae çismã, opu lmaadnaet qevusea zdd aeq ueti etd âuanr iaood soasuienroadi.na t Nenogã roea nçeãtsaotnã otéo ,di neotfsei nnmisdaoomdse enlnoats e l iptdaeerrpaae tnuddreaefi.n ntEiers tdaaass ligação das células com a superfície do implante. A composição química e a topografia da superfície e métodos de subtração e de revestimentos utilizados em modificações de superfícies de titânio comercial implantes dentários foram estudados por espectroscopia de emissão de fotoelétrons por raios-X (XPS), espectroscopia por energia dispersiva (EDS), microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia de força atômica (AFM), e difração de raios X (XRD). As amostras foram dispostas em cinco grupos, de acordo com tratamento de superfície: (1) duplo ataque ácido, (2) anodização e incorporação de Ca/P, (3) condicionamento ácido e deposição de Ca/P, (4) plasma spray de hidroxiapatita, e (5) jateamento de Ca/P mais ataque ácido. As análises através de XPS demonstraram que as concentrações de Ti, O e C na superfície foi diferente entre os grupos, o que pode ser atribuído a diversos processos que foram submetidos ao implante na sua fabricação. Além disso, foi demonstrada a presença dos elementos mencionados pelo fabricante nos grupos 1, 2 e 4, mas a ausência de Ca e P nos grupos 3 e 5, divergindo da informação fornecida pelo fabricante. No entanto, eles foram demonstrados em pequenas quantidades por EDS. A análise da composição de contaminação da superfície por EDS em todos os grupos revelou a presença dos elementos C, Na, Si, Nb, Cl, K, V, Al e Fe, atribuído aos elementos de liga, ao processo de fabricação ou à manipulação dos implantes. A análise por XRD demonstrou além da presença de titânio em todos os grupos, a presença de hidreto de titânio no grupo 1, anatase (TiO2) no grupo 2, e hidroxiapatita sintética no grupo 4. O aspecto topográfico do tratamento abrasivo, erosivo e tratamentos de revestimento foram diferentes para os diferentes tratamentos de superfície, como observado por SEM e AFM. O tratamento abrasivo associado ao erosivo aumentou o parâmetro de rugosidade Sa e o tratamento erosivo sozinho diminuiu o Sa. Os parâmetros Ssk e Ska para as superfícies estudadas variaram os valores entre negativos e positivos, indicando que as superfícies dos grupos 2 e 4 são compostas por uma superfície áspera com perfil aleatório de picos e vales, sendo a prevalência por vales apresentando boa molhabilidade. Na seqüência as superfícies dos grupos 4, 1 e 3, respectivamente apresentaram as mesmas características em menor relevância. / &#65279;Although titanium and its alloys are widely used in implantology and results of clinical trials demonstrate that these materials show excellent biocompatibility, there are doubts about the ideal physicochemical properties of the titanium implants surfaces to achieve an adequate and lasting osseointegration. However, the ideal parameters to define the titanium surface properties of dental implants are not yet defined in the literature. These features are important, since osseointegration is heavily dependent on the bonding of the cells with the implant surface. The chemical composition and the surface topography of subtractive and coating methods used in surface modifications of commercial titanium dental implants were studied by X-ray photoelectron spectroscopy (XPS), energy dispersive spectroscopy (EDS), scanning electron microscopy (SEM), atomic force microscopy (AFM), and X-ray diffraction (XRD). The groups were: (1) double acid etching, (2) anodization and incorporation of Ca/P, (3) acid etching and deposition of Ca/P, (4) hydroxyapatite- blasting, and (5) Ca/P-blasting and acid etching. The XPS analysis showed that the concentrations of O, Ti and C on the surface were different between the groups, which can be attributed to the different processes they are subjected to the implants in their manufacture. Analysis by XPS showed the presence of the elements mentioned by the manufacturer in groups 1, 4, and 5, did not reveal the presence of Ca and P in groups 2 and 3, as mentioned by the manufacturer. However, they were demonstrated in very small amounts by EDS. The composition analysis of surface contamination viewed by EDS in all groups revealed the presence of C, Na, Si, Nb, Cl, K, Al and Fe impurities, attributed to the manufacturing process and handling of the implants. The XRD analysis showed the presence of titanium hydride in group 1, the absence of Ca and P in group 2 and V and Al in group 3 (informed by the manufacturers). However, the presence of Al and V in the latter group was confirmed by the EDS analysis, but not the Ca in the former. The topographical aspect of abrasive, erosive and coating treatments were different for the different surface treatments, as observed by SEM and AFM. The abrasive treatment associated with the erosion increased the rugosity parameter Sa and the erosive treatment decreased it. The parameters Ssk and Ska ranged values between negative and positive, indicating that the areas in groups 2 and 4 were composed of a random rough surface with a profile of peaks and valleys, with the prevalence of valleys with good wettability. The surfaces of groups 4, 1, and 3 presented the same characteristics in lesser relevance.

O objetivo deste trabalho foi estudar o metabolismo secundário de Piper cernuum (Piperaceae) através do isolamento e caracterização dos principais produtos acumulados e a associação com a atividade enzimática da PAL (fenilalanina-amônia-liase) na planta diferenciada (adulta e plântulas) e nas suspensões celulares. Das folhas foram isolados diversos derivados do ácido cinâmico e a lignana cubebina. Entretanto, na análise do óleo volátil das folhas, através de CG-EM, observou-se somente a presença de mono- e sesquiterpenos, sendo que os mais abundantes foram biciclogermacreno (21,88%) e &#946; cariofileno (20,60%). O óleo apresentou atividade inibitória contra Staphylococcus aureus e Candida albicans. As suspensões celulares foram caracterizadas quanto à produção de biomassa, variação de pH e captação de açúcar. Os principais metabólitos foram isolados e caracterizados como sendo tiramina e dopamina que foram quantificadas por cromatografia líquida de alta eficiência através de seus derivados dansilados. As atividades da PAL nas plântulas cultivadas in vitro foram superiores às das plântulas cultivadas em campo e observou-se uma oscilação rítmica da sua atividade enzimática com picos às 6 e 18 horas. / The aim of this work was to investigate the secondary metabolism of Piper cernuum (Piperaceae) by means of isolation and characterization of major secondary compounds accumulated in association to the enzymatic activity of PAL in the differentiated plant material (adult and seedlings) and cell suspension cultures. The major compounds in leaves were derivatives of cinnamic acid and the lignan cubebin. Nevertheless, the analysis of essential oil from leaves by GC-MS indicated the presence of only mono- and sesquiterpenes, among which bicyclogermacrene (21.88%) and &#946;-cariophyllene (20.60%) were the predominant ones. The oil was active against Staphylococcus aureus and Candida albicans. The cell suspension cultures had their growth cycle characterized by means of evaluation of biomass production, pH variation and sugar uptake. The major secondary compounds in the cells were characterized as tyramine and dopamine which were quantified by HPLC as their dansylated derivatives. The PAL activities in the seedlings cultivated in vitro were higher than those in the seedlings growing in field conditions and a rithymic oscillation of enzyme activity was clearly observed with peaks at 6a.m. and 6p.m.