Thèse d'exercice : Pharmacie : Université de Nantes : 2004. / Bibliogr. f. 77-90 [162 réf.].

This study confirms the presence of Gambierdiscus sp., Ostreopsis sp. as well as other epiphytic benthic dinoflagellates associated with Ciguatera Fish Poisoning (CFP) in the Central Red Sea, highlighting the potential occurrence of CFP in this region. These species are reported for the first time in Saudi Arabian coastal waters. A total of 80 Turbinaria and Halimeda macroalgae samples were collected from coral reefs off the Saudi Arabian coast. Sample analyses indicated low average cell abundances (< 40 cells g-1 wet weight algae) of Gambierdiscus sp. and Ostreopsis sp. Subsequent statistical analyses indicated a significant difference in the cell abundances of both genera between sampling sites, between species and between inshore and offshore reefs. The presence of several potentially toxigenic dinoflagellate species in the Red Sea and the statistical differences in abundances between different sampling sites merits future study on possible impacts of these dinoflagellates on marine food webs and human health.

The suitability of neuroblastoma cell-based assays (Neuro-2a CBAs) was examined in order to characterize toxin profiles in ciguatera-related natural samples: microlagae (Gambierdiscus spp. and Prorocentrum rhathymum) and ciguatera-suspected fish samples from the Canary Islands. The elimination of the interferences of biological matrices and the specificity of the Neuro-2a CBA for ciguatoxins and maitotoxins were two aspects examined to favor the applicability of the Neuro-2a CBA for marine toxins detection. The results presented in this work have contributed to ciguatera risk assessment in the Canary Islands and support the use of CBAs as an alternative or complementary approach to the mouse bioassay for the determination of marine toxins. / La eficacia de los ensayos con células de neuroblastoma (Neuro-2a) ha sido examinada para la caracterización del perfil toxínico en muestras naturales asociadas a la ciguatera: microalgas (Gambierdiscus spp. y Prorocentrum rhathymum) y muestras de pescado potencialmente ciguatóxico procedentes de las Islas Canarias. La eliminación de las interferencias de las matrices biológicas y la especificidad de los ensayos con células Neuro-2a para ciguatoxinas y maitotoxinas han sido dos aspectos examinados para favorecer la aplicabilidad de los ensayos con células Neuro-2a a la detección de toxinas. Los resultados presentados en este trabajo han contribuido a la evaluación del riesgo de ciguatera en las Islas Canarias y apoyan el uso de los ensayos celulares como una aproximación alternativa o complementaria al bioensayo ratón para la determinación de toxinas marinas.

Malgré leur existence ancienne et leur incidence dans la zone intertropicale, aucun traitement efficace, autre que symptomatique, n’est disponible à l’heure actuelle pour traiter les intoxications ciguatériques. La médecine traditionnelle à base de plantes vient alors au secours des populations. Dans la région du Pacifique, une des plantes les plus utilisées, et présentant des potentialités dans le traitement de la ciguatéra, est Heliotropium foertherianum Diane & Hilger. Toutefois, cette plante, de la famille des Borraginacées, est connue pour produire des alcaloïdes pyrrolizidiniques, composés hépatotoxiques. Dans ce travail, l’activité biologique sur cellules neuronales et la composition chimique d’H. foertherianum ont été étudiées, en vue d’une valorisation d’un extrait de cette plante. Dans un premier temps, la confirmation de l’activité biologique in vitro de l’extrait aqueux d’H. foertherianum et de ses principes actifs, les acides rosmarinique et caféique, a été apportée. Ensuite, la caractérisation chimique de l’extrait aqueux par CLHP-SM a mené à l’identification potentielle de 25 composés et à la vérification de l’absence des alcaloïdes pyrrolizidiniques. Enfin, l’étude des paramètres de récolte, de conservation et d’extraction des feuilles et extraits a permis de détailler les conditions nécessaires à l’obtention d’un extrait à la teneur maximale en principes actifs dont l’activité biologique serait garantie. Ainsi, la production locale d’un extrait d’H. foertherianum, dosé en principes actifs et dont l’innocuité est vérifiée, en tant que traitement contre les intoxications ciguatériques peut être sérieusement envisagée. / Despite its former existence and its impact in the intertropical zone, no effective treatment, other than symptomatic, is available to treat ciguatera fish poisoning yet. People can only rely on traditional herbal medicine. In the Pacific region, one of the most used plants, which is promising for the treatment of ciguatera fish poisoning, is Heliotropium foertherianum Diane & Hilger. However, this plant, from the Boraginaceae family, is known for producing hepatotoxic compounds such as pyrrolizidine alkaloids. In order to valorize this plant extract, its biological activity on neuronal cells and its chemical composition with the means of HPLC-DAD and HPLC-MS have been studied in this work. First, the in vitro biological activity of the aqueous extract of H. foertherianum and its active principles, rosmarinic and caffeic acids, was confirmed. Then the chemical characterization of the aqueous extract led to the possible identification of 25 compounds and the verification of the absence of pyrrolizidine alkaloids. Finally, the study of the harvest, conservation and extraction parameters of leaves and extracts permits to specify the conditions needed for obtaining an extract with high level of active principles and whose biological activity is guaranteed. Therefore, a local production of an extract from H. foertherianum as a treatment against ciguatera fish poisoning, dosed in active principles and whose safety is established, can be seriously considered.

La ciguatéra est une forme d’intoxication faisant suite à l’ingestion de poissons contaminés par des toxines appelées « ciguatoxines ». Cette intoxication endémique des régions tropicales est un problème économique et de santé non négligeable qui tend à prendre de plus en plus d’ampleur. L’essor du tourisme, le réchauffement climatique et la hausse des exportations internationales de poissons tropicaux favorisent l’expansion de la ciguatéra aux parties du globe au climat tempéré, jusqu’alors peu concernées par cette maladie. Les enjeux thérapeutiques et économiques de la ciguatéra sont de taille puisqu’il n’existe aucun moyen rapide et fiable de détecter un poisson contaminé et qu’aucun traitement efficace permettant sa prise en charge n’a actuellement été établi.Le prurit, terme médical désignant les démangeaisons est un symptôme notamment associé aux maladies de peau qui impacte grandement la qualité de vie des patients qui en souffrent.Ces dernières décennies, de nombreuses études scientifiques ont permis de mieux comprendre sa physiopathologie. Le prurit est un symptôme fréquemment observé chez les personnes atteintes de ciguatéra, d’où l’appellation « la Gratte », souvent employée pour faire référence à la pathologie.Dans le but d’étudier les mécanismes cellulaires à l’origine du prurit et des autres troubles sensoriels cutanés survenant lors de la ciguatéra, nous avons étudié l’effet des ciguatoxines sur un modèle in vitro de neurones sensoriels cocultivés avec des kératinocytes. Nous avons mis en évidence la libération dans le surnageant des neuropeptides de l'inflammation neurogène, SP et CGRP. L'effet d'antagonistes sélectionnés a été testé afin mettre en évidence les médiateurs impliqués dans la libération de neuropeptides. Par ailleurs, la signalisation cellulaire sous-jacente de cette sécrétion de neuropeptides a été étudiée par des expériences d’imagerie calcique réalisées sur neurones et kératinocytes.Les résultats obtenus valident notre coculture en tant que modèle de choix pour l’étude in vitro des mécanismes cellulaires, et plus généralement, dans les troubles neurocutanés impliqués dans le prurit ciguatérique. Parmi les antagonistes testés, une molécule s’est avérée particulièrement intéressante pour inhiber les effets constatés de la toxine. Ces résultats originaux, obtenus avec l’antagoniste d’un médiateur du prurit, présentent une perspective thérapeutique nouvelle et prometteuse, pour répondre à un enjeu de santé publique futur. / Ciguatera fish poisoning (CFP) is a seafood poisoning occurring after contaminated fish fleshes ingestion containing toxins called « ciguatoxines » (CTXs). This illness, originating from tropical and subtropical areas, is an economic and health problems which becomes substantial in relation to international tropical fishes export and tourism development, as well as global warming rise. Those factors contribute to CFP sprouting in non-endemic temperate climate regions which were not until then concerned by CFP. Economic and health stakes of CFP are important since no reliable and ready-to-use detection system for CTXs in fishes have been developed, along with no relevant cure has been established to treat CFP.Pruritus, medical term refer to itch, is a clinical sign usually associated to skin diseases which strongly alter patients’ quality of life. Last decades, several studies allowed to better understand pruritus pathophysiology. Interestingly, people suffering from CFP frequently present pruritus, hence designation “La Gratte” or “La Gratel (le)” employed in endemic areas.The aim of these works was to study cellular and molecular mechanisms of CTXs at the root of neurological cutaneous troubles occurring in CFP. Here, we evaluated CTXs effects on in vitro model composed of sensory neurons cocultived with primary keratinocytes, quantifying neuropeptides known to be involved in pruritus. Compiling knowledges about CFP and pruritus pathophysiology, some antagonists were tested to neutralize CTXs-mediated neuropeptide release. To deal with signaling pathways in depth of neuropeptide exocytosis induced by CTXs, mechanism known to be accurately regulated by calcium homeostasis, calcium imaging experiments were performed.Results obtained in this project confirm the use of such a model to elucidate cellular mechanism of CFP pruritus, but also constitute an alternative in vitro tool to study chemicals inducing abnormal cutaneous senses. Among antagonists tested, one stands out from the crowd and was proved to be effective to inhibit CTXs-evoked effects studied. Those originals results, collected with antagonist of pruritus mediator, show new and promiscuous therapeutic prospects for future health concern.

No description available.

La ciguatéra est une intoxication liée à l'ingestion de poissons de récif corallien devenus toxiques par l'accumulation d'une ou plusieurs neurotoxines d'origine dinoflagellaire. Cet ichtyosarcotoxisme représente une des plus fréquentes formes d'intoxication dans les régions tropicales et subtropicales et se manifeste par une cohorte de symptômes complexes chez l'homme. La première partie de cette étude a consisté à mettre en évidence l'action de la CTX-1B du Pacifique (P-CTX-1B) sur la surproduction d'oxyde nitrique (NO) via la modulation de son enzyme de synthèse, la NO synthétase inductible (iNOS), impliquant ainsi pour la première fois ce mécanisme pathogénique inflammatoire dans la ciguatéra. La deuxième partie concerne les travaux de l'évaluation de potentiel thérapeutique d'une trentaine d'extraits de plantes. En effet, la médecine occidentale reste peu efficace et symptomatique pour traiter durablement les patients souffrant de ciguatéra. La troisième partie décrit la sélection de trois de ces plantes et les études phytochimiques menées. Ces travaux ont conduit à l'identification de trois molécules : la quercitrine, l'acide rosmarinique et l'agnuside. Cette thèse a abouti au dépôt d'un brevet sur l'activité détoxifiante de l'acide rosmarinique.

Innovative ways to conduct disease surveillance are required to address the complexity of Ciguatera Fish Poisoning (CFP). Mixed methods were employed to explore CFP epidemiology and interdisciplinary approaches to its surveillance in the Turks and Caicos Islands (TCI). Quantitative analyses of cross-sectional data collected by the TCI’s National Epidemiology and Research Unit in 2010 demonstrated that a low percentage of residents reported lifetime histories of illness following fish consumption (3.9%). Furthermore, gender, age, island, and home remedy use were significantly associated with reported clinic visitation by ill individuals. Next, a multisectoral CFP surveillance model was conceptualized. A qualitative exploration of the model’s hypothetical integration into TCI’s health system revealed that several systemic and contextual factors could influence the future uptake of interdisciplinary CFP surveillance. Targeted interventions are recommended to improve national CFP surveillance and to facilitate the growth of interdisciplinary networks between stakeholders from TCI’s health, fisheries and environment sectors. / Canadian Institutes of Health Research, Ontario Veterinary College, University of Guelph, Ministry of Health and Human Resources of the Turks and Caicos