Submitted by Márcio Maia (marciokjmaia@gmail.com) on 2016-09-08T19:00:34Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1813229 bytes, checksum: 9baf431a2df59a0cbf6ce91d58a3ce3c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-08T19:00:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1813229 bytes, checksum: 9baf431a2df59a0cbf6ce91d58a3ce3c (MD5) Previous issue date: 2015-02-23 / Dematiaceous, demaceous or dark fungi comprise a large, heterogeneous group of fungi that cause a variety of diseases, including feohifomycoses, cromoblastomycoses, mycetoma and allergies. Species of the genus Cladosporium are relevant in developing cromoblatomycoses, and stand out as plant contaminants. The toxicity of conventional antifungal and increased resistance to therapeutic regimens, driving the study of the antifungal activity of new alternatives, including natural sources. Given this context, the aim of this study was to evaluate the In vitro antifungal activity of seven essential oils (Laurus nobilis L., Mentha arvensis, Mentha X piperita L., Mentha spicata, Ocimum basilicum L., Cymbopogon nardus L. Rendle e Origanum vulgare) and the phytoconstituent citronellal on strains of dematiaceous fungi. In this study, the following methods were used: microbiological screening, determining the minimum inhibitory concentration (MIC) and Minimum Fungicidal Concentration (MFC), kinetics of microbial death, inhibition of conidial germination and evaluation of morphological changes. Among the essential oils tested, the C. nardus essential oil demonstrated potent antifungal activity, inhibiting the growth of 83,3% of strains used. The Cymbopogon Nardus L. Rendle (citronella grass) belongs to the family Poaceae, subfamily Panicoideae. The Cymbopogon genus consists of eighty-five species. C. nardus presents constitution of essential oil with two major compounds: the citronellal and geraniol. Citronellal is a monoterpene, predominantly formed by the secondary metabolism of plants. The essential oil of C. nardus had its MIC and MFC established at 64 mg / mL and the citronellal in 32 mg / mL. Both the essential oil of C. nardus as citronellal significantly inhibited the radial mycelial growth of the tested strains, the MIC concentrations, MICx2 and MICx4 after 12 days of exposure. In MIC50 concentrations (64 ug / ml- essential oil and 32μg / ml -citronellal) and MIC90 (128 ug / ml - 512μg essential oil and / ml - citronellal), were able to significantly inhibit the germination of fungal conidia from both strains tested. The determination of the effect of the essential oil of C. nardus and citronellal on the morphogenesis of C. carrionii strains showed that both were capable of inducing morphological changes, as development tortuous hyphae, fine and decreased conidiation in MIC concentrations, MICx2 and MICx4. Thus, it is concluded that the essential oil of C. nardus and its phytoconstituent citronellal showed pronounced antifungal activity against the strains of C. carrionii tested, what drives the study of its In vivo antifungal activity, as well as the search for pharmaceutical formulations to be used for the therapy of certain mycoses, especially those caused by dematiaceous fungi. / Fungos dematiáceos, demáceos ou escuros compõem um grupo grande e heterogêneo de fungos que causam uma variedade de doenças, incluindo feohifomicoses, cromoblastomicoses, micetomas e alergias. Espécies do gênero Cladosporium são relevantes no desenvolvimento de cromoblatomicoses, e se destacam como contaminantes de plantas. A toxicidade dos antifúngicos convencionais e o aumento da resistência aos esquemas terapêuticos utilizados impulsionam o estudo da atividade antifúngica de novas alternativas, incluindo as de fonte natural. Diante desse contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antifúngica In vitro de sete óleos essenciais (Laurus nobilis L., Mentha arvensis, Mentha X piperita L., Mentha spicata, Ocimum basilicum L., Cymbopogon nardus L. Rendle e Origanum vulgare) e do fitoconstituinte citronelal sobre cepas de fungos dematiáceos. Neste estudo, os seguintes métodos foram utilizados: triagem microbiológica, determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM), cinética de morte microbiana, inibição da germinação de conídios e avaliação de alterações morfológicas. Dentre os óleos essenciais testados, o de C. nardus demonstrou uma potente atividade antifúngica, inibindo o crescimento de 83,3% das cepas de fungos demáceos utilizadas. O Cymbopogon nardus L. Rendle (capim-citronela) pertence à família Poaceae, subfamília Panicoideae. O gênero Cymbopogon é constituído de oitenta e cinco espécies. O C. nardus apresenta constituição do óleo essencial com dois compostos majoritários: o citronelal e o geraniol. Citronelal é um monoterpeno, predominantemente formado pelo metabolismo secundário de plantas. O óleo essencial de C. nardus teve sua CIM e CFM estabelecidas em 64 μg/ mL e o citronelal em 32 μg/ mL. Tanto o óleo essencial de C. nardus quanto o citronelal inibiram de forma significativa o crescimento micelial radial das cepas testadas, nas concentrações CIM, CIMx2 e CIMx4, após 12 dias de exposição. Nas concentrações CIM50 (64 μg/ mL- óleo essencial e 32μg/mL -citronelal) e CIM90 (128 μg/mL - óleo essencial e 512μg/mL - citronelal), foram capazes de inibir de forma significativa a germinação dos conídios fúngicos de ambas as cepas testadas. A determinação do efeito do óleo essencial de C. nardus e do citronelal sobre a morfogênese das cepas de C. carrionii demonstrou que ambos foram capazes de induzir alterações morfológicas, como desenvolvimento de hifas tortuosas, finas e diminuição da conidiação, nas concentrações CIM, CIMx2 e CIMx4. Dessa forma, conclui-se que o óleo essencial de C. nardus e o seu fitoconstituinte citronelal mostraram pronunciada atividade antifúngica sobre as cepas de C. carrionii testadas, o que impulsiona o estudo de suas atividades antifúngicas In vivo, bem como a busca por formulações farmacêuticas a serem utilizadas para a terapia de algumas micoses, especialmente aquelas causadas por fungos demáceos.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3313855 bytes, checksum: 4725cee09197381bbb8d4bb6107255b2 (MD5) Previous issue date: 2012-11-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The genus includes many species of Cladosporium fungi and opportunistic dematiaceous contaminants being found in diverse environments. Cladosporium carrionii is considered the most important pathogenic species of this genus due to the numerous cases of disease caused by this fungus in the world, being an agent of chromoblastomycosis, feohifomicoses and allergies. The increased resistance to antifungal agents available and their toxicity lead to search for new antifungals, more effective and less toxic. In this context, this study aimed to identify the components of the essential oil of Melissa officinalis L. and investigate their antifungal activity in vitro against strains of Cladosporium carrionii. The chemical composition of the oil was performed by gas chromatography coupled to mass spectrometer (GC-MS). Assays of antifungal activity were performed by microbiological screening by diffusion technique in solid medium; determination of minimum inhibitory concentration (MIC) by microdilution; minimum fungicidal concentration (MFC); measure radial growth at different time intervals; Inhibition of conidial germination and assessment of morphological changes in the presence of the essential oil. The results of GC-MS showed 4 major components, being geranial (52%) the major constituent, followed by the citral (38.90%), trans-&#946;-caryophyllene (1.22%) and germacrene D (0.84%), in descending order of percentage. In antifungal activity assays, the essential oil of M. officinalis inhibited the growth of 100% of the strains of C. carrionii tested, and its MIC and MFC established at 256 mg / mL, and is considered a product with strong antifungal activity. Was able to induce radial mycelial growth inhibition from the concentration of 128 mg / ml (MIC/2), and the concentrations MICX2 and MICX4, there was complete inhibition of the growth. It was also observed significant inhibition of conidial germination in all concentrations compared to control (p <0.05), those potentiated inhibition with increased concentration so that the concentration was MICX2 100% inhibition of germination of conidia counted. Furthermore, morphological changes such as decreased conidiation and structural changes in hyphae were observed in the strains tested, after exposure to oil concentrations MIC/2, MIC and MICX2. Given the foregoing, it is concluded that the essential oil of M. officinalis has a significant antifungal activity against strains of C. carrionii, representing a new possibility in the arsenal of products for treatment of mycoses caused by Cladosporium carrionii. / O gênero Cladosporium abrange muitas espécies de fungos contaminantes e oportunistas dematiáceos, sendo encontrados em diversos ambientes. Cladosporium carrionii é considerada a espécie patogênica mais importante desse gênero, devido aos inúmeros casos de doenças causadas por este fungo em todo o mundo, sendo agente da cromoblastomicose, feo-hifomicoses e quadros alérgicos. O aumento da resistência aos antifúngicos disponíveis e a sua toxicidade levam a busca por novos antifúngicos, mais eficazes e menos tóxicos. Neste contexto, este estudo teve como objetivo identificar os componentes do óleo essencial de Melissa officinalis L. e investigar sua atividade antifúngica, in vitro, sobre cepas de Cladosporium carrionii. A análise da composição química do óleo foi realizada por cromatografia a gás acoplada ao espectrômetro de massas (CG-EM). Os ensaios da atividade antifúngica foram realizados por meio da triagem microbiológica pela técnica de difusão em meio sólido; determinação da concentração inibitória mínima (CIM) pela técnica de microdiluição; concentração fungicida mínima (CFM); medida do crescimento radial em diferentes intervalos de tempo; inibição da germinação de conídios e avaliação das alterações morfológicas na presença do óleo essencial. Os resultados da CG-EM mostraram 4 componentes principais, sendo o geranial (52 %) o constituinte majoritário, seguido do citral (38,90 %), trans &#946;-cariofileno (1,22 %) e germacrene D (0,84 %), em ordem decrescente de percentual. Nos ensaios de atividade antifúngica, o óleo essencial de M. officinalis inibiu o crescimento de 100 % das cepas de C. carrionii ensaiadas, tendo sua CIM e CFM estabelecidas em 256 &#956;g/mL, sendo considerado um produto com forte atividade antifúngica. Foi capaz de induzir inibição do crescimento micelial radial a partir da concentração de 128 &#956;g/mL (CIM/2), e nas concentrações CIMX2 e CIMX4, houve inibição total deste crescimento. Também foi observada inibição significante da germinação de conídios, em todas as concentrações testadas, quando comparados ao controle (p<0,05), sendo estas inibições potencializadas com o aumento da concentração, de modo que na concentração CIMX2 houve inibição de 100% da germinação dos conídios contados. Além disso, alterações morfológicas como diminuição da conidiação e alterações estruturais nas hifas foram observadas nas cepas ensaiadas, após a exposição ao óleo nas concentrações CIM/2, CIM e CIMX2. Diante do exposto, conclui-se que o óleo essencial de M. officinalis apresenta importante atividade antifúngica contra cepas de C. carrionii, representando uma nova possibilidade no arsenal de produtos para terapêutica das micoses causadas por Cladosporium carrionii.