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Estudo soroepidemiológico da bactéria Helicobacter pylori em populações ribeirinhas amazônicas e a validação de um ensaio copromolecular para determinação da infecçãoSilva, Jocilene Guimaraes 23 July 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-07-23 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The Amazonian riverine communities seem to have all of the conditions of sanitation and
socioeconomic suspicions for the conditioning to the infection for Helicobacter pylori,
bacterium associated to the etiopatogenia of several diseases gastrointestinais. In Brazil,
they are registered on average, fifteen thousand cases of cancer of the digestive system a
year, with a percentile adult in the north area. Once the H. pylori is considered one of the
etiological agents of this malignitude, the objective of this study was to determine the
prevalence of the infection for H. pylori and to accomplish the rising of epidemic variables
and of susceptibility related to the bacterial infection in riverine communities, and to
validate a rehearsal copromolecular for diagnosis of the infection. The accomplished study
was of the type traverse, contemporary, analytical and observacional, understanding a
sample of 200 individuals, of which they were collected blood, saliva and feces, besides
the application of a questionnaire epidemic employee, with subjects driven to his/her
identification, obtaining data on the conditions socioeconomic, hygienic, sanitary and
symptoms. For detection sorologic of antibodies of the type IgG anti-H. pylori were used
plasma samples that were tested for systemic antibodies of the type IgG anti-H. pylori
through a rehearsal immunological, using the Kit Ridascreen Helicobacter IgG (RBiopharm
AG, Germany); for detection it activates of the H. pylori, it was used the
samples of feces that were tested through the Kit MKBIO H. pylori (MK BIO GMBH,
DIMA, Germany). Besides the detection of antibodies and antigens for H. pylori, they
were also applied techniques of molecular biology, in the fecal samples, to confirm the
diagnosis of the infection, for direct detection of bacterial DNA, using the primers
RNAr16S that amplify a fragment gene of 1200bp of the gender Helicobacter and the
primers p1 and p2, which amplify a fragment gênico of 298 pb that codifies a protein
antigenic of 26kDa species specify of the H. pylori. This research had about central point
to the infection for the bacterium H. pylori, that was detected through three diagnosis
methods: The sorologia, fecal antigen and PCR. The sorologia went to the chosen
technique to relate with the epidemic aspects regarding the study, and the obtained results
revealed a frequency of soropositive of 83,5% (167/200). The analysis of the epidemic
variables related to the bacterial infection demonstrated a larger frequency of infected
individuals female, in the age group from 0 to 17 years, in addition 97,4% of the
population that ingested water without treatment were positive the infection. The
comparison of the prevalence of the infection, obtained through the three different
detection methods, they were high, however the detection copromolecular was what
detected a smaller number of positive individuals (113/200), although it presents the
largest indexes of sensibility 79% and specificities 100%. The detection copromolecular
demonstrated to be an important tool in the detection of the bacterial infection, making
possible in these populations the application of a test high sensibility and specificity, could
be applied in the precocious detection of the patogen. / e sócio-econômicas suspeitas para o condicionamento à infecção por Helicobacter
pylori, bactéria associada à etiopatogenia de várias doenças gastrointestinais. No Brasil,
são registrados em média, quinze mil casos de câncer do aparelho digestivo por ano,
com um maior percentual na região norte. Uma vez que o H. pylori é considerada um
dos agentes etiológicos desta malignitude, o objetivo deste estudo foi determinar a
prevalência da infecção por H. pylori e realizar o levantamento de variáveis
epidemiológicas e de suscetibilidade relacionados à infecção bacteriana em
comunidades ribeirinhas, e validar um ensaio copromolecular para diagnóstico da
infecção. O estudo realizado foi do tipo transversal, contemporâneo, analítico e
observacional, compreendendo uma amostra de 200 indivíduos, dos quais foram
coletados sangue, saliva e fezes, além da aplicação de um questionário epidemiológico
empregado, com questões dirigidas à sua identificação, obtendo dados sobre as
condições socioeconômicas, higiênicas, sanitárias e sintomatologia apresentada. Para
detecção sorológica de anticorpos do tipo IgG anti-H. pylori específicos foram
utilizados amostras de plasma que foram testadas para anticorpos sistêmicos do tipo IgG
anti-H. pylori através de um ensaio imunoenzimático, usando o Kit Ridascreen
Helicobacter IgG (R-Biopharm AG, Alemanha); para detecção ativa do H. pylori, foi
utilizado as amostras de fezes que foram testadas através do Kit MKBIO H. pylori (MK
BIO GMBH, DIMA, Alemanha). Além da detecção de anticorpos e antígenos para H.
pylori, também foram aplicadas técnicas de biologia molecular, nas amostras fecais,
para confirmar o diagnóstico da infecção, por detecção direta do DNA bacteriano,
utilizando os primers RNAr16S que amplificam um fragmento gênico de 1200bp do
gênero Helicobacter e os primers P1 e P2, os quais amplificam um fragmento gênico de
298 pb que codifica uma proteína antigênica de 26kDa espécie especifica da H. pylori.
Esta pesquisa teve como ponto central à infecção pela bactéria H. pylori, que foi detectada
através de três métodos de diagnóstico: A sorologia, o antígeno fecal e PCR. A sorologia
foi à técnica escolhida para relacionar com os aspectos epidemiológicos referentes ao
estudo, sendo que os resultados obtidos revelaram uma frequência de soropositividade de
83,5% (167/200). A análise das variáveis epidemiológicas relacionadas à infecção
bacteriana demonstrou uma maior frequência de indivíduos infectados do sexo
feminino, na faixa etária de 0 a 17 anos, além do que 97,4% da população que ingeriam
água sem tratamento foram positivos a infecção. A comparação da prevalência da
infecção, obtidas através dos três diferentes métodos de detecção, foram elevadas, no
entanto a detecção copromolecular foi o que detectou um menor número de indivíduos
positivos (113/200), embora apresente os maiores índices de sensibilidade 79% e
especificidades 100%. A detecção copromolecular demonstrou ser uma ferramenta
importante na detecção da infecção bacteriana, possibilitando nestas populações a
aplicação de um teste de elevada sensibilidade e especificidade, podendo ser aplicada na
detecção precoce do patógeno.
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