Esse estudo levanta dados sobre a reprodução em Cubozoa por meio de análises histo-morfológicos. Nossos objetivos foram (1) estabelecer um padrão geral na morfologia das gônadas masculinas em relação ao tipo de fertilização; (2) estabelecer relações entre a diversidade de modos de reprodução e as morfologias associadas com a filogenia do grupo; (3) definir estruturas pós-espermáticas (espermatóforo e espermatozeugma) para Cubozoa Carybdeida; (4) investigar a existência de novas estruturas de armazenamento de esperma em Tripedaliidae. Para tal, estudamos seis espécies de famílias diferentes, cinco da ordem Carybdeida (Alatina alata, Carybdea marsupialis, Copula sivickisi, Morbakka virulenta e Tamoya haplonema) e uma Chirodropida (Chiropsalmus quadrumanus), com diferentes tipos de reprodução (fertilização externa ou interna). Nossos resultados demonstram que a organização histológica das gônadas masculinas não tem uma correlação funcional com modos de reprodução, nem e evolutiva com propostas filogenéticas. Somos o primeiro estudo a descrever a espermatogênese em Cubozoa, e modo de liberação dos espermatozóides, podendo ser liberados individualmente por meio de diferentes pontos de ruptura na gônada (no caso de Tamoya cf. haplonema) ou mediante a formação de pacotes de esperma: encapsulados (= espermatóforo em C. sivickisi) ou não capsulados (= espermatozeugma em A. alata). Propomos uma revisão da terminologia das estruturas pós-espermáticas (pacotes de esperma, a saber, espermatóforo e espermatozeugmata), quem vêm sendo indistintamente utilizadas em estudos em Tripedaliidae. Também definimos estruturas de armazenamento de esperma nas fêmeas de C. sivickisi ainda desconhecidas, como manchas velariais (\"velarial spots\"), reportando espermatozóides em seu interior, mas descartando que sacos subgástricos possuam esta função. No entanto, resultados histológicos mostram que há nematoblastos e nematocistos euritelos no interior desses sacos subgástricos (estruturas particulares de Tripedaliidae), podendo colaborar na inclusão desses nematocistos na cadeia de embriões (\"embryo strand\") no caso das fêmeas, e no espermatóforo no caso dos machos, participando assim na reprodução em Cubozoa / This study raises data on reproduction in Cubozoa through histo-morphological analysis. Our objectives were to (1) determine a general pattern in the morphology of male gonads in relation to the mode of fertilization; (2) establish relationships between the diversity of reproduction modes and morphologies associated with the phylogeny of the group; (3) define post-spermatic structures (spermatophore and espermatozeugma) to Cubozoa Carybdeida; (4) investigate the existence of new sperm storage structures in Tripedaliidae. To accomplish that, we studied six species of different families, five from Carybdeida (Alatina alata, Carybdea marsupialis, Copula sivickisi, Morbakka virulenta e Tamoya haplonema) and one Chirodropida (Chiropsalmus quadrumanus) with different types of reproduction (internal or external fertilization). Our results demonstrate that the histological organization of male gonads do not have a functional correlation with reproduction modes or with phylogenetic and evolutionary trends. We are the first study to describe the spermatogenesis in Cubozoa and the mode of release of sperm, which can be released individually by different rupture sites in gonadal tissue (as in Tamoya cf. haplonema) or by formation of sperm packages: encapsulated (= spermatophore in C. sivickisi) or not encapsulated (= spermatozeugma in A. alata). We propose a review of terminology of post-sperm structures (sperm packages, namely spermatophore and espermatozeugmata), that have been used interchangeably in studies of Tripedaliidae. We also defined still unknown sperm storage structures in the C. sivickisi females, as velarial spots, reporting sperm inside it, and discarding that subgastric sacs have this function. However, histological findings show that there are nematoblasts and euryteles nematocysts within these subgastric sacs (unique structures of Tripedaliidae) and may collaborate on the inclusion of these nematocysts in the embryo strand, in females, and spermatophore, in males, thus participating in the reproduction of Cubozoa

Os Cubozoa são animais de águas tropicais e subtropicais ao redor do mundo. A cubomedusa Chiropsalmus cf. quadrumanus (Cubozoa: Chiropsalmidae) habita na costa Atlântica americana entre os 35°N e 27°S, uma área com barreiras putativas que poderiam impedir a distribuição contínua de C. cf. quadrumanus, tornando-se um modelo interessante para estudos de estrutura populacional e filogeografia. O objetivo deste trabalho foi analisar a estrutura haplotípica de quatro populações da C. cf. quadrumanus da costa brasileira. Nossas análises foram baseadas nos marcadores mitocondriais COI e 16S e a região nuclear ITS de 40 indivíduos provenientes de Ceará (03°43S 038°29W); Rio de Janeiro (22°37S 041°54W); São Paulo (23°26S 45°04 W) e Paraná (25°41\'S 048°25\'W), assim como por estudos morfométricos de 5 indivíduos de cada população. Análises filogenéticas e de redes de haplótipos de cada marcador revelaram uma profunda divergência gênica entre duas linhagens, Ceará - São Paulo e Rio de Janeiro - Paraná, dados estes corroborados por alguns caracteres das analises morfométricas. Nossos resultados sugerem que a espécie Chiropsalmus cf. quadrumanus é um complexo de espécies resultado da combinação entre taxonomia conservadora e especiação críptica. Estudos mais abrangentes que contenham espécimes de outros pontos da costa brasileira, incluída a localidade tipo (Santa Catarina, Müller, 1859), poderão verificar a existência de outras possíveis espécies crípticas e ampliar o conhecimento sobre a distribuição das duas linhagens encontradas neste estudo. As conseqüências taxonômicas do presente trabalho são importantes e ainda deverão ser trabalhadas. A falta de informação sobre a espécie, em conjunto com atitudes taxonômicas conservadoras e eventos de especiação críptica, não nos permitem delimitar as novas espécies com clareza. De qualquer maneira, nossos resultados revelam que há um complexo de espécies com o nome Chiropsalmus quadrumanus no Atlântico Americano. O presente trabalho constitui o primeiro estudo filogeográfico para qualquer espécie de cubozoário. / Cubozoans live in tropical and subtropical waters around the world. Chiropsalmus cf. quadrumanus (Cubozoa: Chiropsalmidae) inhabits the Atlantic coast of America between 35°N and 27°S, an area with putative barriers that could prevent the continuous distribution of C. cf. quadrumanus, turning the species an interesting model to study population structure and phylogeography. The aim of this work was to analyze the haplotype structure of four populations of C. cf. quadrumanus from the Brazilian coast. We carried out our analyses based on the COI and 16S mitochondrial markers and the nuclear ITS region of 40 individuals from Ceará (03°43S 038°29W); Rio de Janeiro (22°37S 041°54W); São Paulo (23°26S 45°04 W) and Paraná (25°41\'S 048°25\'W), as well by morphometric surveys of 5 individuals from each population. Phylogenetic and haplotype network analyses of each marker reveled a deep genetic divergence between two lineages, Ceará - São Paulo and Rio de Janeiro - Paraná, this data were corroborated by some characters of the morphometrical analyses. Our results suggest that the species Chiropsalmus cf. quadrumanus is a complex of species resulting of the mixture of over-conservative taxonomy and cryptic speciation. More inclusive studies containing specimens from other points of the Brazilian coast, including the type locality (Santa Catarina, Müller, 1859),could verify the existence of other possible cryptic species and increase the knowledge about the distribution of the two lineages found in this study. The taxonomic consequences of this survey are important and should be overwrought. Lack of information about the species, conservative taxonomic attitudes and cryptic speciation events prevent us to delimit new species clearly. However, our results revealed a species complex named Chiropsalmus quadrumanus in the Atlantic coast of America. The present work represents the first phylogeographic approach of any cubozoan species.

Os Cubozoa são animais de águas tropicais e subtropicais ao redor do mundo. A cubomedusa Chiropsalmus cf. quadrumanus (Cubozoa: Chiropsalmidae) habita na costa Atlântica americana entre os 35°N e 27°S, uma área com barreiras putativas que poderiam impedir a distribuição contínua de C. cf. quadrumanus, tornando-se um modelo interessante para estudos de estrutura populacional e filogeografia. O objetivo deste trabalho foi analisar a estrutura haplotípica de quatro populações da C. cf. quadrumanus da costa brasileira. Nossas análises foram baseadas nos marcadores mitocondriais COI e 16S e a região nuclear ITS de 40 indivíduos provenientes de Ceará (03°43S 038°29W); Rio de Janeiro (22°37S 041°54W); São Paulo (23°26S 45°04 W) e Paraná (25°41\'S 048°25\'W), assim como por estudos morfométricos de 5 indivíduos de cada população. Análises filogenéticas e de redes de haplótipos de cada marcador revelaram uma profunda divergência gênica entre duas linhagens, Ceará - São Paulo e Rio de Janeiro - Paraná, dados estes corroborados por alguns caracteres das analises morfométricas. Nossos resultados sugerem que a espécie Chiropsalmus cf. quadrumanus é um complexo de espécies resultado da combinação entre taxonomia conservadora e especiação críptica. Estudos mais abrangentes que contenham espécimes de outros pontos da costa brasileira, incluída a localidade tipo (Santa Catarina, Müller, 1859), poderão verificar a existência de outras possíveis espécies crípticas e ampliar o conhecimento sobre a distribuição das duas linhagens encontradas neste estudo. As conseqüências taxonômicas do presente trabalho são importantes e ainda deverão ser trabalhadas. A falta de informação sobre a espécie, em conjunto com atitudes taxonômicas conservadoras e eventos de especiação críptica, não nos permitem delimitar as novas espécies com clareza. De qualquer maneira, nossos resultados revelam que há um complexo de espécies com o nome Chiropsalmus quadrumanus no Atlântico Americano. O presente trabalho constitui o primeiro estudo filogeográfico para qualquer espécie de cubozoário. / Cubozoans live in tropical and subtropical waters around the world. Chiropsalmus cf. quadrumanus (Cubozoa: Chiropsalmidae) inhabits the Atlantic coast of America between 35°N and 27°S, an area with putative barriers that could prevent the continuous distribution of C. cf. quadrumanus, turning the species an interesting model to study population structure and phylogeography. The aim of this work was to analyze the haplotype structure of four populations of C. cf. quadrumanus from the Brazilian coast. We carried out our analyses based on the COI and 16S mitochondrial markers and the nuclear ITS region of 40 individuals from Ceará (03°43S 038°29W); Rio de Janeiro (22°37S 041°54W); São Paulo (23°26S 45°04 W) and Paraná (25°41\'S 048°25\'W), as well by morphometric surveys of 5 individuals from each population. Phylogenetic and haplotype network analyses of each marker reveled a deep genetic divergence between two lineages, Ceará - São Paulo and Rio de Janeiro - Paraná, this data were corroborated by some characters of the morphometrical analyses. Our results suggest that the species Chiropsalmus cf. quadrumanus is a complex of species resulting of the mixture of over-conservative taxonomy and cryptic speciation. More inclusive studies containing specimens from other points of the Brazilian coast, including the type locality (Santa Catarina, Müller, 1859),could verify the existence of other possible cryptic species and increase the knowledge about the distribution of the two lineages found in this study. The taxonomic consequences of this survey are important and should be overwrought. Lack of information about the species, conservative taxonomic attitudes and cryptic speciation events prevent us to delimit new species clearly. However, our results revealed a species complex named Chiropsalmus quadrumanus in the Atlantic coast of America. The present work represents the first phylogeographic approach of any cubozoan species.

Programa LIFE Comisión Europea (LIFE NAT 080064 CUBOMED; Ministerio de Agricultura, Alimentación y Medio Ambiente; Fundación Biodiversidad; Dirección General del Agua, Generalitat Valenciana; Fundació Baleària; El Portet de Denia.