Pé diabético é uma infecção, ulceração e ou destruição do tecido devido neuropatia e doença vascular; e precedem 84% de todas as amputações dos membros inferiores relacionadas ao diabetes. A cicatrização prejudicada de feridas cutâneas em pessoas com diabetes envolve, principalmente, hipóxia, disfunção dos fibroblastos e células epiteliais, diminuição da angiogênese e neovascularização, altos níveis de metaloproteases, danos causados por espécies reativas de oxigênio (ROS), produtos finais da glicação avançada (AGEs), diminuição da resistência imunológica do hospedeiro e neuropatia. Desta forma o objetivo deste trabalho foi propor a análise do efeito da pomada de própolis a 10%, no reparo tecidual de feridas cutâneas de ratos diabéticos. Foram utilizados 32 animais, que foram divididos em GRUPO 1 (24 animais) e GRUPO 2 (8 animais), todos os animais foram submetidos ao protocolo de indução do diabetes, porém, o GRUPO 1 recebeu solução aquosa de aloxana via intraperitoneal, enquanto que, o GRUPO 2 recebeu solução salina a 0,9% na mesma via. Após a constatação do diabetes ao décimo dia após a indução do diabetes experimental, cada animal foi anestesiado e submetido a realização de 3 lesões com Punch de 5mm na linha média no dorso do animal. A primeira lesão recebeu tratamento tópico com pomada de própolis comercial a 10%; a segunda lesão recebeu tratamento tópico com dexametasona a 0,1%, e a terceira lesão recebeu tratamento tópico com solução salina a 0,9%, todos cobrindo a totalidade da ferida. As lesões foram mensuradas e o valor do diâmetro utilizado para o cálculo da contração de lesão. Os animais foram eutanasiados e os espécimes das lesões foram fixados em paraformaldeído tamponado com pH 7,4 por 48 horas. Os espécimes foram processados, montados em blocos de parafina, cortados em micrótomo a 4 μm e corados com técnica de coloração por Hematoxilina e Eosina. Foram analisados: infiltrado de neutrófilos, infiltrado de macrófagos, tecido de granulação e reepitelização. A análise microscópica desses fenômenos foi qualitativa, global e subjetiva e considerou a presença e a intensidade desses fenômenos, comparativamente entre os grupos experimentais. Os resultados encontrados demostram que: A contração das lesões cutâneas dos grupos foi sempre maior nos animais tratados com própolis, seguido pelos tratados com dexametasona e solução salina (p=0,03). A média do infiltrado de macrófagos dos animais no grupo 2, foi: 1,72 (p=0,02) para os tratados com própolis, de 1,47 para os tratados com dexametasona e de 1,40 para os tratados com solução salina. A média do infiltrado de neutrófilos dos animais no grupo 1, foi: 1,22 (p=0,0036) para os tratados com própolis, de 1,31 para os tratados com dexametasona e de 1,49 para os tratados com salina. A média de formação do tecido de granulação no grupo 1, foi: 1,87 (p=0,01) para os tratados com própolis, de 1,58 para os tratados com dexametasona e de 1,58 para os tratados com salina. E a média de reepitelização dos animais tratados no grupo 1, foi: 1,72 (p=0,03) para os tratados com própolis, de 1,58 para os tratados com dexametasona e de 1,65 para os tratados com salina. / Diabetic foot is an infection, and ulceration or tissue destruction due to neuropathy and vascular disease , and above 84 % of all lower limb amputations related to diabetes . The impaired healing of skin wounds in people with diabetes mainly involves hypoxia, dysfunction of fibroblasts and epithelial cells, decreased angiogenesis and neovascularization, high levels of metalloproteinases, damage caused by reactive oxygen species ( ROS ), advanced glycation end products ( AGEs ), decreased resistance of the host immune and neuropathy. Thus the aim of this work was to propose an analysis of the effect of propolis cream 10% in tissue repair of skin wounds in diabetic rats . 32 animals were used, which were divided into group 1 ( 24 animals ) and group 2 ( 8 animals ) , all animals were subjected to the protocol of induction of diabetes, however, the first group received aqueous alloxan intraperitoneally, while the second group received saline 0.9 % in the same pathway. After the introduction of the tenth day after diabetes induction of experimental diabetes, each animal was anesthetized and subjected to three conducting lesions with a 5mm punch in the dorsal midline of the animal. The first lesion was treated with topical ointment commercial 10% propolis, the second lesion received topical treatment with 0.1% dexamethasone, and the third lesion received topical treatment with 0.9% saline solution, each covering the entire wound. The lesions were measured diameter value and used to calculate the contraction of injury. The animals were euthanized and specimens of lesions were fixed in paraformaldehyde buffered at pH 7.4 for 48 hours. The specimens were processed, mounted in paraffin, cut in the microtome at 4 m and stained with staining technique by hematoxylin and eosin. Were analyzed neutrophil infiltration, macrophage infiltration, granulation tissue and epithelialization. Microscopic analysis of these phenomena is qualitative and subjective global and considered the presence and intensity of these phenomena compared between the experimental groups. The results show that: The contraction of the cutaneous lesions of both groups was always greater in animals treated with propolis, followed by dexamethasone treated and saline (p = 0.03). Mean macrophage infiltration of animals in group 2, was: 1.72 ( p = 0.02) for those treated with propolis, 1.47 for those treated with dexamethasone and 1.40 for saline-treated. The mean neutrophil infiltration of the animals in group 1 were: 1.22 ( p = 0.0036 ) for those treated with propolis, 1.31 for those treated with dexamethasone and 1.49 for those treated with saline. The average formation of granulation tissue in group 1 were: 1.87 ( p = 0.01) for those treated with propolis, 1.58 for those treated with dexamethasone and 1.58 for those treated with saline. And the average epithelialization of the treated animals in group 1 were: 1.72 ( p = 0.03 ) for those treated with propolis, 1.58 for those treated with dexamethasone and 1.65 for those treated with saline. / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

O objetivo deste trabalho foi avaliar as atividades osteoindutoras e osteocondutoras da matriz alogênica óssea desmineralizada (MAOD) frente à diabetes no reparo de defeito de tamanho crítico em calvárias de ratos diabéticos. Para isso, 100 ratos machos Wistar foram divididos em 2 grupos: no grupo diabético (DIAB, n=50) foi injetado 47 mg/Kg de massa corporal de estreptozotocina, enquanto que no grupo controle (CTL, n=50) foi injetado solução fisiológica a 0,9%. A MAOD foi obtida de 50 ratos, cujo fêmur e tíbia foram retirados, desmineralizados com HCl a 0,6M por 24 horas, particulados em 1-2mm³, neutralizados com soro fisiológico e armazenados em álcool. Após a anestesia, foram realizados defeitos ósseos de 8 mm nas calvárias dos animais, sendo os grupos CTL COAG (n=25) e DIAB COAG (n=25) preenchidos com coágulo e os grupos CTL MAOD (n=25) e DIAB MAOD (n=25) preenchidos com MAOD. Após os períodos de 0, 7, 14, 21 e 42 dias, as calvárias foram coletadas. A análise radiográfica mostrou que houve formação de ilhas radiodensas no interior dos defeitos nos grupos CTL e DIAB tratados com MAOD, enquanto que nos grupos tratados com coágulo houve formação de áreas mais radiodensas somente nas bordas do defeito, corroborando com os resultados morfológicos, que mostraram nos grupos tratados com coágulo que o reparo ósseo teve início nas bordas do defeito, enquanto que nos grupos tratados com MAOD, a neoformação óssea ocorreu também nas áreas de reabsorção nas partículas de MAOD. De acordo com os resultados morfométricos, o volume de tecido ósseo aumentou gradativamente em todos os grupos, porém, esse aumento foi maior nos grupos CTL em relação aos seus respectivos tratamentos nos grupos DIAB (CTL COAG > DIAB COAG e CTL MAOD > DIAB MAOD) e maior quando comparados os grupos tratados com MAOD versus os respectivos grupos tratados com COAG (CTL MAOD > CTL COAG e DIAB MAOD > DIAB COAG). Assim, ao término de 42 dias, o volume de tecido ósseo no grupo CTL MAOD foi em média 3,24 vezes maior em relação aos demais grupos, os grupos CTL COAG e DIAB MAOD não apresentaram diferenças significativas e o grupo DIAB MAOD foi 1,81 vezes maior em relação ao DIAB COAG. Com esses resultados, conclui-se que embora o quadro de diabetes tenha influenciado no atraso do reparo, ainda assim, pode-se afirmar que a MAOD contribuiu com a neoformação óssea e com o reparo do defeito na calvária de animais saudáveis e diabéticos, por terem sido preservadas as suas características osteoindutoras e osteocondutoras. / The aim of this work was to evaluate the osteoinductive and osteoconductive activities of demineralized allogeneic bone matrix (DABM) against diabetes in repairing critical size defects in diabetic rats skulls. Therefore, 100 male Wistar rats were shered into two groups: in the diabetic group (DIAB, n=50) was 47 mg/Kg of body weight streptozotocin, while in the control group (CTL, n=50) was injected saline 0.9%. The DABM was obteined using 50 rats which were removed their femur and tibia bones, demineralized in 0.6 N HCl during 24 hours, cut into 1-2mm³ pieces, neutralized in saline and stored in alcohol. After anesthesia, were made 8 mm bone defects on skulls of rats, being the CTL CLOT group (n=25) and DIAB CLOT group (n=25) filled with blood clot and the CTL DABM group (n=25) and DIAB DABM group (n=25) filled with DABM. After 0, 7, 14, 21 and 42 days, the skulls were collected. The radiographic analysis showed radiodense islets inside the defects filled with DABM in CTL and DIAB groups, while groups filled with blood clot showed radiodense areas near the defect border, which is in agreement to the morphologic results, that had showed the begining of bone healing was near the defects border in groups filled with blood clot, while groups filled with DABM showed new bone formation also in resorption DABM areas. According to morphometric results, the volume of bone tissue had increased in all groups, however, this increase was more accentuated in CTL groups when compared to DIAB groups with respected treatments (CTL CLOT > DIAB CLOT and CTL DABM > DIAB DABM) and bigger when groups treated with DABM are compared to respestive groups treated with CLOT (CTL DABM > CTL CLOT e DIAB DABM > DIAB CLOT). Thereby, at the end of 42 days, the CTL DABM bone tissue volume was 3.24 greater than the other groups, the CTL CLOT and DIAB DABM groups didnt show any significant differenceand the DIAB DABM was 1,81 greater than DIAB CLOT. From these results, the conclusion is that although diabetes had delayed the repair, nevertheless, DABM contributed to bone neoformation and to the defect repair in skulls of healthy and diabetic animals, due to the osteoinductive and osteoconductive qualities had been preserved.

Resumo: Este trabalho teve como objetivo analisar a dinâmica da reparação de alvéolos preenchidos com coágulo sanguineo e com vidro bioativo (Perioglass®) em ratos não diabéticos, diabéticos controlados e não controlados através de técnica histológica, histométrica e imunoistoquímica. Para tanto foram utilizados 90 ratos Wistar, machos, com peso entre 230-310g que foram divididos em 3 grupos: Grupo I (grupo controle), Grupo II (grupo diabético não controlado) e Grupo III (grupo diabético controlado); os animais dos Grupos II e III foram induzidos a diabetes através da administração de Streptozotocina (STZ) dissolvida em tampão citrato a 0,01M via veia peniana na concentração de 35mg/Kg de peso do animal enquanto os animais do grupo I receberam apenas a administração de tampão citrato a 0,01M. Os animais do Grupo III receberam diariamente a partir do 4º dia da indução do diabetes a administração de insulina NPH via subcutânea. No 12º após administração do diabetogênico ou tampão citrato os animais foram induzidos a anestesia geral e tiveram o incisivo superior direito extraídos. Metade dos animais de cada grupo tiveram o alvéolo preenchido com coágulo sanguineo e a outra metade teve o alvéolo preenchido parcialmente com Perioglass®; todos os animais foram suturados com o fio de poliglactina 910. Os períodos experimentais foram aos 7, 14 e 28 dias pós-operatórios. Foram realizadas análise histológica qualitativa em lâminas coradas pela HE e análise histométrica em dois campos de tamanhos idênticos localizados na porção lingual do terço médio alveolar utilizando o Software Imagelab 2000 (Diracon 3) em lâminas coradas pelo Tricrômico de Masson; as médias percentuais de tecido ósseo neoformado foram submetidos ao teste estatístico de Análise de Variância e o pós teste de Holm Sidak... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study has the aim to evaluate the dynamics of the bone repair in dental sockets filled with blood clot and with bioactive glass (Perioglass®) in non diabetics, controlled diabetics and non controlled diabetics rats through a histological, histometric and immunohistochemistry approach. To perform this study, 90 Wistar rats, male, wheighing between 230-310g were divided in three groups: Group I (Control Group), Group II (Non controlled diabetic Group) and Group III (Controled Diabetic Group); the animals of Groups II and III were induced to diabetics disease through the administration of Streptozotocin (STZ) dissolved in 0,01M citrate buffer in penis vein in concentration of 35mg/kg corporal weigh while the animals of Group I received the administration of 0,01M citrate buffer. The animals of Group III received daily, since the 4th day after the diabetics induction, the administration of NPH insuline in a subcutaneous way. In the 12th day after the administration of STZ or citrate buffer, the animals were induced to general anesthesia and had the upper right incisive extracted. Half of the animals of each group had the dental socket filled with blood clot and the other animals had the dental socket partially filled with Perioglass®. All of the animals were sutured with 910 poliglactine thread. The experimental periods were at 7, 14 and 28 pos extraction days. It was performed a qualitative histological analysis in slices stained with HE and the histometric analysis in two sites with same size localized in the lingual portion of the middle third of the dental socket was performed using the Imagelab 2000 Software (Diracon 3) in slices stained with Masson' s Tricromic; the percentual mean values of neoformed bone tissue were submitted to the statistical test of Variance Analysis and the post test of Holm Sidak... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Roberta Okamoto / Coorientador: Roelf Justino Cruz Rizzolo / Banca: Osvaldo Magro Filho / Banca: Alessandra Marcondes Aranega / Banca: Teresa Lúcia Colussi Lamano / Banca: Victor Elias Arana-Chavez / Doutor

O transportador de cátions orgânicos 2 (OCT2), expresso na membrana basolateral do túbulo proximal dos rins, promove a eliminação de compostos endógenos e de vários fármacos em uso na clínica. A gabapentina (GAB), anticonvulsivante utilizado para tratamento de dor neuropática, é eliminada principalmente por excreção renal e estudos sugerem participação da secreção ativa via OCT2. Dados experimentais observados em ratos com diabetes mellitus experimental (DME) induzido por estreptozotocina (STZ) sugerem que a hiperglicemia e/ou a redução dos níveis circulantes de insulina reduzem a expressão do OCT2. O objetivo do estudo é investigar a influência do DME, e do DME após administração de insulina, da cimetidina (inibidor de OCT2) e da metformina (substrato de OCT2) na disposição cinética da GAB em ratos. Ratos machos Wistar (n = 6 por tempo de coleta) foram divididos em cinco grupos: controle, cimetidina (dose única de cimetidina 100 mg/kg via intraperitonial), diabético (dose única de STZ 40 mg/kg via intravenosa), diabético tratado com insulina (dose única de STZ 40 mg/kg via intravenosa e doses de insulina 2 UI duas vezes por dia, por 15 dias) e metformina (dose única de metformina 100 mg/kg). Todos os animais receberam dose única de GAB (50 mg/kg, via gavagem). Amostras de plasma e urina foram coletadas até 12 horas após a administração da GAB. As concentrações plasmáticas e urinárias de GAB foram determinadas por cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por espectrometria de massas e ultravioleta, respectivamente. A área sob a curva concentração plasmática versus tempo extrapolado ao infintito (ASC0-?) da GAB foi calculada pela quadratura de Gauss-Laguerre. A administração de dose única de GAB 50 mg/kg em ratos Wistar machos resultou em valores (média ± desvio padrão) de ASC0-?, Cmáx, Tmáx, CLT/F, t1/2, CLr e Fel de 96,31 ± 12,28 ?g.h/mL, 24,75 ± 9,26 ?g/mL, 3,66 ± 1,11 h, 0,52 ± 0,07 L/h.kg, 0,25 ± 0,07 L/h.kg e 0,48 ± 0,13, respectivamente. A disposição cinética da GAB não foi alterada após a administração simultânea de cimetidina ou metformina. O grupo diabético apresentou maiores valores de Fel quando comparado com o grupo controle (0.83 ± 0.25 × 0.48 ± 0.13, respectivamente). O Grupo Diabético tratado com insulina também apresentou maior Fel (0.85 ± 0.10) e CLr quando comparado ao grupo controle (0.55 ± 0.10 L/h.kg × 0.25 ± 0.07 L/h.kg). As diferenças encontradas podem ser explicadas pela hiperfiltração glomerular induzida pelo diabetes e pelo tratamento com insulina, devido ao aumento no fluxo sanguíneo renal. Conclui-se que o transporte ativo por OCT2 não é relevante para a disposição cinética da GAB em ratos. A hiperfiltração glomerular induzida pela diabetes mellitus experimental e pela administração de insulina sugerem que a filtração glomerular é o principal processo na eliminação renal da GAB. / The organic cation transporter 2 (OCT2), expressed on the basolateral membrane of the proximal kidney tubule, promotes the elimination of endogenous compounds and various drugs in clinical use. Gabapentin (GAB), an anticonvulsant used to treat neuropathic pain, is eliminated primarily by renal excretion, and studies suggest participation of active secretion via OCT2. Experimental data observed in mice with streptozotocin (STZ) induced experimental diabetes mellitus (EDM) suggest that hyperglycemia and/or reduction of circulating insulin levels reduce OCT2 expression. The aim of the study is to investigate the influence of EDM, EDM after insulin administration, cimetidine (OCT2 inhibitor) and metformin (OCT2 substrate) on the kinetic dispostion of GAB in rats. Male Wistar rats were divided into five groups: control, cimetidine (single dose of cimetidine 100 mg/kg intraperitoneally), diabetic (single dose of STZ 40 mg/kg intravenously), diabetic treated (single dose of STZ 40 mg/kg intravenously and 2 IU twice daily for 15 days) and metformin (single dose metformin 100 mg/kg). All animals received a single dose of GAB (50 mg/kg, via gavage). Plasma and urine samples were collected up to 12 hours after GAB administration. Plasma and urine concentrations of GAB were determined by high performance liquid chromatography with detection by mass spectrometry and ultraviolet, respectively. The area under the plasma concentration versus time-extrapolated to infinity (ASC0-?) curve of GAB was calculated by the Gauss-Laguerre quadrature. Single dose administration of 50 mg/kg GAB in male Wistar rats resulted in values (mean ± standard deviation) of ASC0-?, Cmax, Tmax, CLT / F, T1/2, CLr and Fel of 96.31 ± 12.28 ?g.h/mL, 24.75 ± 9.26 ?g/mL, 3.66 ± 1.11 h, 0.52 ± 0.07 L/h.kg, 0.25 ± 0.07 L/h.kg and 0.48 ± 0.13, respectively. The kinetic disposition of GAB was not altered after the simultaneous administration of cimetidine or metformin. The diabetic group had higher Fel values when compared to the control group (0.83 ± 0.25 × 0.48 ± 0.13, respectively). The Diabetic Group treated with insulin also had higher Fel (0.85 ± 0.10) and CLr when compared to the control group (0.55 ± 0.10 L/hr.kg × 0.25 ± 0.07 L/hr.kg). The differences found may be explained by glomerular hyperfiltration induced by diabetes and by insulin treatment, due to increased renal blood flow. We concluded that the active transport by OCT2 is not relevant for the GAB kinetic disposition. Glomerular hyperfiltration induced by EDM and by insulin administration suggest that glomerular filtration is the main process in the renal elimination of GAB.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karolinska institutet, 2010. / Härtill 3 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Univ., 2002. / Härtill 4 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2004. / Härtill 5 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2004. / Härtill 4 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2003. / Härtill 5 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2005. / Härtill 4 uppsatser.