Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-02-19T13:06:21Z No. of bitstreams: 1 Leandro de Oliveira Cedraz Concentrações... 2015.pdf: 1784489 bytes, checksum: 5639169c6995e05270cd7c552e5ccb71 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-02-19T13:06:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Leandro de Oliveira Cedraz Concentrações... 2015.pdf: 1784489 bytes, checksum: 5639169c6995e05270cd7c552e5ccb71 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-19T13:06:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leandro de Oliveira Cedraz Concentrações... 2015.pdf: 1784489 bytes, checksum: 5639169c6995e05270cd7c552e5ccb71 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz, Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / INTRODUÇÃO: O vírus linfotrópico das células T humano tipo 1 (HTLV-1) é endêmico na Bahia e está associado com doenças graves, como a Paraparesia Espástica Tropical/Mielopatia associada ao HTLV-1 (HAM/TSP) e a Dermatite Infecciosa associada ao HTLV-1 (DIH). Escassos trabalhos tem sido reportados com a avaliação de citocinas e quimiocinas em indivíduos jovens infectados pelo HTLV-1 e não existem dados sobre a manifestação simultânea DIH e HAM/TSP na faixa infanto-juvenil. OBJETIVO: Avaliar as concentrações plasmáticas de citocinas e quimiocinas na infecção pelo HTLV-1 em indivíduos infanto-juvenis. MÉTODO: Foram incluídos 61 indivíduos portadores do HTLV-1 distribuídos nos grupos Portadores assintomáticos, pacientes com a DIH, pacientes com DIH/HAM/TSP, pacientes com a HAM/TSP e 20 indivíduos saudáveis sem a infecção pelo HTLV-1, todos na faixa infanto-juvenil. As concentrações plasmáticas foram comparadas através do método de Elisa e de Cytometric Bead Array (CBA). As análises estatísticas foram realizadas com o GraphPad Prism 6.1 através do teste Mann Whitney para comparação das medianas e pelo teste Wilcoxon para comparação das amostras pareadas, e a avaliação das correlações pelo coeficiente de Spearman. RESULTADOS: As citocinas IL-2, IL-6 estiveram em maiores concentrações em todos os grupos de portadores do HTLV-1. Os indivíduos saudáveis apresentaram menores concentrações de IFN-γ que o grupo de indivíduos portadores assintomáticos e o grupo de pacientes com a DIH, além de menores concentrações de IL-4 e IL-10 quando comparado com os indivíduos infectados, contudo apenas a IL-10 esteve em concentrações diferentes nos indivíduos com o vírus. Os indivíduos saudáveis apresentaram maiores concentrações da quimiocina CCL-22. Portadores assintomáticos e pacientes com a DIH apresentaram menores concentrações de IL-1β quando comparados com indivíduos saudáveis. Os portadores assintomáticos apresentaram menores concentrações da IL-17 que os indivíduos não infectados. Os pacientes com a DIH/HAM/TSP apresentaram maiores concentrações para a IL-1β, quando comparado com o grupo de pacientes com a DIH e com o grupo de pacientes com a HAM/TSP, além de menores concentrações da quimiocina CCL-27. O grupo HAM/TSP apresentou menores concentrações de IL-8 que os grupos DIH e DIH/HAM/TSP. A carga proviral foi menor no grupo dos portadores assintomáticos, seguidos do grupo de pacientes com DIH, e do grupo de pacientes de DIH que também manifestaram HAM/TSP, já o grupo de pacientes com a HAM/TSP apresentaram cargas provirais menores que o grupo DIH e o grupo DIH/HAM/TSP. Apenas a IL-8 e IL-10 apresentaram correlações fracas com a carga proviral. Na remissão da DIH, houve maiores concentrações da CCL-27, enquanto o TNF-α esteve em maiores concentrações no momento em que o paciente apresentou a DIH/HAM/TSP. CONSIDERAÇÕES FINAIS: Na infecção pelo HTLV-1 na faixa infanto-juvenil ocorre uma desregulação imunológica acompanhada de um mecanismo imunomodulador. Nos portadores assintomáticos, parece existir um maior equilíbrio entre a resposta pro e anti-inflamatória. A manifestação de DIH e da HAM/TSP, parece estar relacionada com um maior desequilíbrio entre a resposta imunológica, e nos pacientes com a DIH/HAM/TSP esta resposta parece sofrer influência de mecanismos da comanifestação. / INTRODUCTION: The lymphotropic virus of cells T human type 1 (HTLV ) is endemic in Bahia and it is associated with serious diseases such as Tropical Spastic Paraparesis/associated myelopathy with HTLV-1 and Infectious Dermatitis associated with HTLV -1 (IDH). Very little work has been reported with the evaluation of cytokines and chemokines in the IDH and there has been no data on the manifestation simultaneous IDH and HAM\TSP in children and youth range. OBJECTIVE: To evaluate the plasma concentrations of cytokines and chemokines in HTLV-1 infection in children and young individuals. METHOD: We included 61 individuals HTLV-1 spread in groups Asymptomatic Carriers, patients with IDH, patients with IDH/HAM/TSP, patients with HAM/TSP and 20 healthy individuals without HTLV-1, all in children's range. Plasma concentrations were compared using the ELISA method and Cytometric Bead Array (CBA). Statistical analyzes were performed using GraphPad Prism 6.1 using the Mann Whitney test to compare the medians and the Wilcoxon test for comparison of paired samples, and evaluation of correlations by Spearman coefficient. RESULTS: The cytokines IL-2 and IL-6 concentrations were higher in all groups of patients with HTLV-1. Healthy individuals showed lower concentrations of IFN-γ to the group of asymptomatic individuals and the group of patients with IDH, in addition to lower concentrations of IL-4 and IL-10 when compared to infected individuals, but only IL-10 was in different concentrations in subjects with the virus. Healthy individuals showed higher concentrations of the chemokine CCL-22. Asymptomatic carriers and patients with IDH had lower IL-1β levels in comparison with healthy subjects. Asymptomatic carriers had lower IL-17 concentrations that Healthy individuals. Patients with IDH/HAM/TSP had higher concentrations of IL-1β compared with the group of patients with the IDH and the group of patients with HAM/TSP, and lower concentrations of CCL-27 chemokine. The HAM/TSP group had lower IL-8 concentrations of the IDH and IDH/HAM/TSP groups. The proviral load was lower in asymptomatic patients, followed by the group of patients with IDH, and the group of IDH patients also expressed HAM/TSP, the group of patients with HAM/TSP had lower proviral loads that the IDH group and IDH/HAM/TSP group. As IL-8 and IL-10 exhibit weak correlation with proviral load. In Remission IDH, there were higher concentrations of CCL-27, while TNF-α was higher concentrations at the time the patient showed IDH/HAM/TSP. CONCLUSIONS: In the HTLV-1 infection in children and young occurs an immune dysregulation accompanied of an immunomodulatory mechanism. In asymptomatic patients, there seems to be a greater balance between the response pro and anti-inflammatory. The manifestation of IDH and HAM/TSP seems to be related to a greater imbalance between the immune response, and in patients with IDH/HAM/TSP this answer seems to be influenced by mechanisms of co-expression mechanisms.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-03-06T16:12:54Z No. of bitstreams: 1 Juliana Moreira Argolo Análise...2014.pdf: 2379371 bytes, checksum: 6533fc64b2d6221825fc83948cfb30eb (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-03-06T16:25:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Juliana Moreira Argolo Análise...2014.pdf: 2379371 bytes, checksum: 6533fc64b2d6221825fc83948cfb30eb (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-03-06T16:28:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Juliana Moreira Argolo Análise...2014.pdf: 2379371 bytes, checksum: 6533fc64b2d6221825fc83948cfb30eb (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-06T16:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliana Moreira Argolo Análise...2014.pdf: 2379371 bytes, checksum: 6533fc64b2d6221825fc83948cfb30eb (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A dermatite infecciosa associada ao vírus linfotrópico de células T humanas tipo 1 (HTLV-1), DIH, é uma forma de eczema grave e recidivante que incide principalmente em crianças que em geral foram verticalmente infectadas pelo HTLV-1, ocorrendo lesões eritematosas, escamativas e crostosas, sendo geralmente localizadas nas regiões do couro cabeludo e retroauriculares, assim como pescoço, virilha, região paranasal, axilas, ouvido externo e narinas. Inicia-se após os 18 meses de vida e raramente persiste até a vida adulta. No Brasil, muitos casos têm sido diagnosticados na Bahia, estado brasileiro que atualmente conta com a maior casuística da literatura depois da Jamaica. Acompanhando uma coorte de 31 pacientes da faixa etária infanto-juvenil com DIH em Salvador, observou-se em esfregaço do sangue periférico, em 11 dos indivíduos, o aparecimento de linfócitos atípicos (LA) e/ou células em flor (CF), que não são comumente observados em pacientes com DIH, mas ocorrem com frequência em pacientes com leucemia/linfoma de células T do adulto (ATL). Submetemos amostras dos 31 pacientes a reações em cadeia da polimerase (PCR) para verificar se havia um clone majoritário através do padrão de clonalidade do TCR-gama. Para este ensaio, todos os 31 pacientes apresentaram padrão oligoclonal ou policlonal típico para DIH, onde não ocorre um clone predominante. A fim de verificar se o aparecimento dos linfócitos atipicos estava relacionado ao possível desenvolvimento da ATL, para os 11 indivíduos que apresentaram os LA e/ou CF em esfregaço do sangue periférico, realizamos ensaios de ILPCR para verificar a clonalidade dos linfócitos infectados pelo vírus e posteriormente sequenciamos as amostras a fim de identificar o local de integração do provírus ao genoma do portador hospedeiro. Em 7 dos 11 indivíduos identificou-se um único clone predominante nos produtos de PCR em pelo menos uma das coletas avaliadas. Nesses casos, o DNA proviral não interrompeu regiões codificadoras para genes humanos. Para um paciente, o provírus se integrou na região do gene da MAP2K1 (proteína quinase 1 ativadora de mitose), localizado no cromossomo 15. Observou-se que na presença de LA e/ou CF podem existir clones majoritários circulantes em portadores do HTLV-1 com DIH. / Infective dermatitis associated with human T lymphotropic cells virus type 1 (HTLV-1), IDH, is a form of severe and recurrent dermatitis that occurs mostly in children who were mainly vertically infected with HTLV-1, occurring erythematous, desquamative and crusty, being generally located in regions of the scalp and retroauricular, neck, groin, paranasal region, armpits, outer ear and nostrils. It begins after 18 months of life and rarely persists into adulthood. In Brazil, several cases have been diagnosed in Bahia, the Brazilian state that currently has the highest incidence after Jamaica. Tracking a cohort of 31 patients in the juvenile age group with IDH in Salvador, we observed the appearance of atypical lymphocytes (AL) and/or flower cells (FC), which are not commonly observed in patients with IDH, but occur frequently in patients with adult T cell leukemia/lymphoma (ATL), in peripheral blood smear in 11 of the subjects. Samples of 31 patients underwent tests of PCR assays to verify if there was a major clone by the clonality patterns of gamma-TCR. For this test, all 31 patients had oligoclonal pattern or typical polyclonal of IDH, where there isn’t a predominant clone. In order to verify if the appearance of the atypical cells was related to the future ATL we submitted the 11 subjects who had the AL and/or FC in peripheral blood smear to ILPCR tests conducted to analyze clonality of lymphocytes infected by the virus and subsequently these samples were sequenced to identify the integrations sites of the provirus in the host-carrier genome. A single dominant clone was observed in the PCR products from at least one of the tested samples in 7 of 11 individuals. In such cases, the proviral DNA did not interrupt coding regions for human gene. For a patient, the provirus was integrated in the region of the MAP2K1 gene (mitosis protein kinase activator 1), located on chromosome 15. We observed that in the presence of AL and/or FC may be majority clones circulating in HTLV- 1 carries with IDH.