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Associação de bactérias à cápsula de Anabaena spiroides (Cyanobacteria) em culturaBagatini, Inessa Lacativa 30 May 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-05-30 / Financiadora de Estudos e Projetos / The cyanobacterium Anabaena spiroides, a cosmopolitan species occurring in eutrophic
environments as in Barra Bonita reservoir, is covered by a thick polysaccharide capsule
that provides a microenvironment for association of bacterial communities. The aims of
this study were: to identify bacteria attached to A. spiroides capsule to evaluate
interspecific relationships among bacteria communities and A. spiroides, considering
bacteria selectivity and succession dynamics of attached bacteria; as well as the effect of
bacterial inoculum (1.2 µm filtered water from Barra Bonita reservoir) on
cyanobacterial growth. For this purpose, density, production, biomass and diversity of
bacteria attached to cyanobacteria capsules and free-living bacteria were determined in
two replicate cultures of A. spiroides inoculated with bacteria from Barra Bonita
reservoir. The diversity was verified by the number of bands obtained through
separation of PCR amplification products of 16S rDNA from free-living and attached
bacterial communities using Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE).
Bacteria attached to the capsule were identified by sequencing the fragment of 16S
rDNA. A set of cultures were performed to evaluate cyanobacterial growth as affected
by Barra Bonita filtered water. A. spiroides cultures without Barra Bonita inoculum
were used as control. The results showed that bacterial density, biomass and total
production were higher for free-living bacteria, but no significant difference was
obtained between attached and free-living bacteria regarding production per cell. The
diversity was lower for the attached bacteria than free-living ones. Three strains of
attached bacteria present in A. spiroides inoculum, identified as one Acidobacteria and
two Alphaproteobacteria, remained up to the beginning of exponential growth phase. At
the senescence phase these bacteria were replaced by four strains identified as one
Deltaproteobacteria, one Betaproteobacteria, one Bacilli (Firmicutes) and one
unidentified strain. This research demonstrated that there were selectivity and
succession in the bacterial community attached to A. spiroides, and that the addition of
the filtered water from Barra Bonita inoculum accelerates the death of cyanobacterium
cultures / A cianobactéria Anabaena spiroides, cosmopolita em ambientes eutrofizados como o reservatório de Barra Bonita, é recoberta por uma espessa cápsula de polissacarídeo que fornece um microambiente para o crescimento de uma comunidade bacteriana particular. Os objetivos deste trabalho foram: identificar as bactérias associadas à cápsula de A. spiroides para detectar possíveis relações interespecíficas entre estas e a cianobactéria, considerando a seletividade e a dinâmica de sucessão das bactérias associadas; verificar o efeito da adição do inóculo bacteriano (água do reservatório de Barra Bonita filtrada em 1,2 µm) no crescimento da cianobactéria. Para tanto, a densidade, produção, biomassa e a diversidade das bactérias livres e aderidas à cianobactéria, assim como a identificação das bactérias aderidas foram determinadas em duas culturas de A. spiroides inoculadas com bactérias do reservatório de Barra Bonita.
A diversidade foi verificada pelo número de bandas obtidas em Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE) após a amplificação do 16S rDNA das comunidades bacterianas das frações livre e aderida e as bactérias aderidas à cápsula foram identificadas pelo seqüenciamento do fragmento do 16S rDNA. Em outro experimento, o crescimento da cianobactéria foi verificado pela concentração de clorofila a e carbono orgânico total após a adição da água de Barra Bonita (filtrada em 1,2µm) em quatro culturas experimentais de A. spiroides. Os controles consistiram em culturas de A. spiroides sem o inóculo de Barra Bonita. Os resultados mostraram que a densidade, biomassa e produção total das bactérias foram sempre maiores para as bactérias livres, no entanto, com relação à produção por célula, não houve diferença significativa entre aderidas e livres. Este estudo também mostrou que a diversidade das bactérias aderidas foi menor do que das livres e que três linhagens de bactérias aderidas que estavam presentes no inóculo de A. spiroides, permaneceram até o início da fase de crescimento exponencial. Essas bactérias foram identificadas como uma Acidobacteria e duas Alphaproteobacteria. Na fase de senescência essas bactérias foram substituídas por outras quatro linhagens: uma Deltaproteobacteria, uma Betaproteobacteria e uma Bacilli (Firmicutes) e uma linhagem não identificada. No segundo experimento as concentrações de clorofila e carbono foram menores nas culturas adicionadas do inóculo bacteriano do que nos controles. O presente estudo demonstrou que houve seleção e sucessão das bactérias aderidas a A. spiroides e que a adição da água de Barra Bonita acelera a morte das culturas da cianobactéria
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Valida??o de esp?cies de Centropomus (Centropomidae, Perciformes) do litoral do Rio Grande do Norte atrav?s de caracteriza??o citogen?tica e molecularBorges, Amanda T?rres 27 March 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-03-27 / A fam?lia Centropomidae ? composta por tr?s g?neros, Centropomus, Lates e Psammoperca. Centropomus ? o grupo mais diversificado, apresentando seis esp?cies com ocorr?ncia no Oceano Atl?ntico Ocidental, C. undecimalis (Bloch, 1792), C. poeyi Ch?vez, 1961, C. parallelus Poey, 1860, C. mexicanus Bocourt, 1868, C. pectinatus Poey, 1860 e C. ensiferus Poey, 1860. Algumas destas esp?cies s?o consideradas cr?pticas, por apresentarem caracter?sticas morfol?gicas pouco resolutivas para fins de identifica??o. Apesar do grande interesse como recurso natural e para cultivo, aspectos sobre sua diversidade e padr?es cariot?picos s?o pouco conhecidos. Neste trabalho classifica??es morfol?gicas e compara??es de sequ?ncias mitocondriais 16S foram utilizadas para identifica??o das esp?cies do g?nero Centropomus com ocorr?ncia no Rio Grande do Norte, nordeste do Brasil. Duas esp?cies foram identificadas, C. undecimalis e C. mexicanus, que tiveram seus aspectos cromoss?micos analisados atrav?s de m?todos citogen?ticos cl?ssicos (colora??o convencional, bandamento C, Ag-RONs), colora??o com fluorocromos AT- e GC-espec?ficos, bandas de replica??o pela incorpora??o do an?logo de base 5?BrdU ( 5-bromo-2?-deoxiuridina) e mapeamento cromoss?mico in situ de sequ?ncias (TTAGGG)n e dos genes RNAr 18S e 5S. Ambas as esp?cies apresentaram 2n=48 cromossomos acroc?ntricos, com s?tios ribossomais (Ag-RON/DNAr 18S/Mitramicina+) no segundo par cromoss?mico, em posi??o telom?rica no bra?o longo de C. mexicanus) e intersticial em C. undecimalis. O par organizador nucleolar (par 2) se mostra um marcador citotaxon?mico resolutivo para estas duas esp?cies. Os dados gerados revelam uma menor diversidade de esp?cies de Centropomus do que se acreditava, sugerindo uma maior aten??o na identifica??o taxon?mica das esp?cies, tendo em vista otimizar a??es de explora??o comercial, conserva??o biol?gica e cultivo. / The Centropomidae family consists of three genera, Centropomus, Lates and Psammoperca. Centropomus is the most diverse group, with six Centropomus species occur in the Western Atlantic Ocean C. poeyi Ch?vez, 1961, C. parallelus Poey, 1860, C. mexicanus Bocourt, 1868, C. pectinatus Poey, 1860 and C. ensiferus Poey, 1860. Some of these species are considered cryptic, because of its morphological traits showed low resolution for identification purposes. Despite showing great interest as a natural resource and fish culture, aspects of their diversity and karyotypic patterns are poorly understood. In this work morphological identification and comparison of mitochondrial 16S gene sequence were used to identify the species of the genus Centropomus occurring in Rio Grande do Norte, northeastern Brazil. Two sepecies were identified, C. undecimalis and C. mexicanus, which had the chromosomal aspects analyzed, through Classical cytogenetic method analyzes (conventional staining, C-banding, Ag-NORs), fluorochrome staining AT- and GC-specific, replication bands by incorporating of the base analog 5-Bromo-2?-deoxyuridine (5-BrdU), in situ chromosomal mapping of (TTAGGG)n sequences and in situ chromosome mapping 18S and 5S rRNA genes. Both species show 2n=48 acrocentric chromosomes, with ribosomal sites (Ag-NOR/18S rDNA/ Mitramycin+) in second chromosomal pair, in telomeric position on the long arm in C. mexicanus and interstitial in C. undecimalis. The nuclear organization pair (pair 2) shown a resolutive cytotaxonomic marker for these two species. The generated data reveal a lower species diversity than previously believed, suggesting that greater attention should be paid in taxonomic identification of the species, in view of optimize commercial actions exploitation, biological conservation and cultivation.
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Comparação da diversidade microbiana intestinal em larvas do campo e laboratório do bicudo da cana-de-açúcar, Sphenophorus levis (Coleoptera, Cucurlionidae)Rinke, Raquel 28 April 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-04-28 / Financiadora de Estudos e Projetos / The sugarcane weevil, Sphenophorus levis, is an important pest in sugarcane culture in São Paulo state, Brazil. To complete its life cycle, S. levis may depends on microorganisms that inhabit its intestinal tract and play an important key in the insect physiology and nutrition.
In this study we report the characterization of the intestinal microbiota from population of insect larvae from field and laboratory. Analysis of 16S rDNA sequences revealed a total of fourteen genera, one group from Candidatus category and two uncultivable groups represented by Alfa-Proteobacteria, Beta-Proteobacteria, Gamma-Proteobacteria, Firmicutes and Bacteroidetes phylum. Microorganisms isolated through culture-dependent methods were classified according morphological parameters and using 16S rDNA molecular marker. In addition to bacteria, four filamentous fungi were isolated. It was observed a slightly higher bacterial diversity in field than in laboratory according to Shannon index (Field H'= 3,36;
Laboratory H'= 3,26). It is also our objective in this work to search for microorganisms capable to degrade cellulose, an important event in the insect attack. From the cultivable
microorganisms, five genera of bacteria and two filamentous fungi presented cellulolytic activity. This is the first study about S. levis microbiota which may contribute to understand the interaction plant-pathogen and also be useful for future development of new strategies for
control of S. levis in sugarcane cultivation. / A cana-de-açúcar é uma das mais importantes culturas no Brasil. No entanto, muitas pragas atacam esta cultura causando prejuízos econômicos. O gorgulho da cana-deaçúcar,
Sphenophorus levis, é uma importante praga na cultura canavieira no Estado de São Paulo. Para completar o seu ciclo de vida, S. levis parece depender de microorganismos que
habitam o seu trato intestinal e desempenham um importante função na fisiologia e nutrição do inseto. Neste estudo, nós realizamos a caracterização da microbiota intestinal de população de larvas de inseto campo e de laboratório. As análises das seqüências de 16S rDNA revelaram um total de catorze gêneros, um grupo da categoria Candidatus e dois grupos nãocultiváveis representados pelos filos Alfa-Proteobacteria, Beta-Proteobacteria, Gamma- Proteobacteria, Firmicutes e Bacteroidetes tanto em larvas do campo quanto nas do laboratório. Os microrganismos isolados através dos métodos dependentes de cultura foram agrupados de acordo com parâmetros morfológicos e através do marcador moléculas 16S rDNA. Além das bactérias também foram isolados quatro fungos filamentosos. Observou-se uma diversidade bacteriana levemente superior no campo do que no laboratório de acordo com o índice de Shannon (Campo H '= 3,36; Laboratório H' = 3,26). É também nosso objetivo
neste trabalho encontrar microorganismos capazes de degradar celulose, um importante evento no ataque do inseto. Dos microorganismos cultiváveis, cinco gêneros de bactérias e
dois fungos filamentosos apresentaram atividade celulolítica. Este é o primeiro estudo sobre a microbiota do S. levis que pode contribuir para a compreensão da interação planta-patógeno e também ser útil para o futuro desenvolvimento de novas estratégias de controle de S. levis no cultivo da cana-de-açúcar.
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