Orientador: Ione Salgado / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:06:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Modolo_LuziaValentina_D.pdf: 799010 bytes, checksum: 1363bbb027c17ac1fd3b4e9f93479455 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A origem do óxido nítrico (?NO) em plantas tem sido controversa e uma enzima do tipo óxido nítrico sintase (NOS), bem como nitrato redutase (NR) são consideradas possíveis fontes deste radical livre. Contudo, ainda não há nenhuma evidência direta da formação de ?NO a partir da NR durante interações planta-patógeno. Nos estudos aqui descritos foram utilizadas plantas de Arabidopsis thaliana deficientes na enzima NR para investigar o mecanismo de produção de ?NO em resposta à inoculação da bactéria Pseudomonas syringae pv. maculicola (Psm). Aumento na síntese de L-citrulina a partir de L-arginina foi observado em homogenatos de folhas de plantas do tipo selvagem e daquelas deficientes na síntese de NR, após inoculação com Psm. Experimentos de ressonância paramagnética eletrônica, contudo, mostraram uma produção muito maior de ?NO dependente de NO2-, mas não de L-arginina ou NO3-, síntese esta inibida por alta concentração de L-arginina. A inibição da cadeia de transporte de elétrons da mitocôndria aboliu ou inibiu parcialmente esta atividade em plantas mutantes ou selvagens, respectivamente. A utilização do marcador fluorescente 4,5 diaminofluoresceína diacetato (DAF-2DA) mostrou que a inoculação com Psm aumentou substancialmente a produção de ?NO in situ em plantas selvagens, mas não em mutantes deficientes na síntese de NR. No entanto, a infiltração de L-arginina ou NO2- causou uma produção de ?NO in vivo nas plantas mutantes. Plantas de A. thaliana deficientes na síntese de NR mostraram suscetibilidade à P. syringae que foi prevenida pela co-infiltração de NO2-. O conjunto de resultados sugere que NOS, NR e uma importante atividade mitocondrial de redução de NO2- podem cooperar para produzir ?NO em quantidade suficiente para prevenir a disseminação de Psm em plantas de A. thaliana / Abstract: The origin of nitric oxide (?NO) in plants has been controversial and nitric oxide synthase (NOS)-like enzyme and nitrate reductase (NR) are claimed as potential sources. However, there is still no direct evidence for ?NO formation from NR during plant-pathogen interactions. Here, we used NR-defective double mutants of Arabidopsis thaliana to investigate the mechanism of ?NO production following infection by an avirulent strain of Pseudomonas syringae pv. maculicola (Psm). Increased formation of L-citrulline from L-arginine was observed in leaf homogenates of both wild-type and nia1 nia2 mutant plants. Electron paramagnetic resonance experiments, however, showed a much higher ?NO production that was dependent on NO2- rather than on L-arginine or NO3- and was also inhibited at high L-arginine concentrations. Inhibition of mitochondrial electron transport abolished and inhibited partially this activity in nia1 nia2 mutants and wild-types, respectively. In situ ?NO production was substantially increased in wild type-plants but not in mutants, following Psm challenge, as measured with the fluorescent probe 4,5-diaminofluorescein diacetate. However, in vivo ·NO production in NR-deficient mutants was visualized only after L-arginine or NO2- infiltration into the leaves. A. thaliana plants defective in NR showed susceptibility to P. syringae that was prevented by infiltration of NO2-. The overall results suggest that NOS, NR, and an important mitochondrial-dependent nitrite-reducing activity cooperate to produce ?NO in amounts enough to prevent Psm dissemination in A. thaliana plants / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Jose Roberto Trigo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:24:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sa_FlaviaNogueirade_D.pdf: 6566750 bytes, checksum: 549b197ce5bb0689fe934291e6863ee4 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Besouros da família Chrysomelidae apresentam uma grande diversidade de inimigos naturais e uma grande variedade de estratégias de defesa contra estes. Neste trabalho, estudamos larvas de duas espécies de Cassidinae (subfamilia de Chrysomelidae), Plagjometriona flavescens eStolas areolata, com o objetivo principal de entender se as mesmas se protegem contra predadores utilizando escudos de fezes e/ou outros tipos de defesas. Realizamos experimentos de curta duração de campo e laboratório para testar a proteção dos escudos, comparando a mortalidade de larvas de ambas as espécies com o escudo mantido, removido, ou substituído por um escudo artificial, feito com fezes da larva da mariposa noctuídea Spodoptera frogiperda. Experimentos de campo mostraram que larvas de ambas as espécies. com o escudo natural mantido tiveram a sobrevivência significativamente maior do que larvas sem escudo ou com escudo artificial; demonstrando que esta estrutura não as protegem fisicamente. Esses resultados sugeriram que a proteção dos escudos poderia ser de natureza química. Oferecendo larvas para dois modelos de predadores, a formiga Camponotus crassus e a ave Gallus gallus, em bioensaios em laboratório, não obtivemos para P. flavescens padrões semelhantes aos obtidos no campo. Confirmamos a proteção química dos .escudos de P. flavescens ao verificarmos em experimentos de campo- e de laboratório que iscas tratadas com extratos de escudo foram rejeitadas. Larvas de S. areolata foram pouco predadas por ambos os predadores no laboratório, independentemente do tratamento. Em experimentos de longa duração, no campo e em laboratório, observamos que a manutenção dos escudos de P. flavescens não representa um custo para o desempenho. e nem para a sobrevivência das larvas. Portanto, pode-se concluir que o escudo é um tipo de defesa desta espécie por serem impalatáveis e poucos custosos para a larva. Para S. areolata, em experimentos de longa duração no laboratório, verificamos' que seus escudos provocam. um aumento significativo na mortalidade, apesar de não representarem nenhum custo para o seu desempenho. No experimento semelhante, rea1izadono campo, não encontramos diferença significativa na mortalidade de larvas com ou sem o escudo. Neste caso, sugerimos que o escudo possa apresentar outra função, que não a proteção contra predadores. No segundo capítulo da tese testamos a eficiência de outras estratégias de defesa. química das larvas estudadas. Verificamos que P. flavescensprotegem.;.se de predadores quimicamente orientados através da camuflagem química, já quehidrocarbonetos cuticularesdas larvas- ede folhas de sua planta hospedeira apresentam 780./0 de similaridade. - Devido a esta estratégia, observamos em experimentos de laboratório que formigas. C. crassus não são capazes de encontrar as larvas. Larvas de S. areolata se protegem através de substâncias apoIares presentes nos seus corpos. Verificamos em experimentos de laboratório que iscas tratadas com extratos apoIares de larvas são rejeitadas por G. gallus. Não verificamos o mesmo tipo de.reação em predadores no campo, mas é possível que as substâncias apoIares do corpo das larvas sejam potencia1mente uma estratégia de defesa de S. areo/ata. Este trabalho demonstra que duas esPécies de uma mesma sub-familia podem se. proteger de maneiras distintas dos seus predadores / Abstract: Chrysomelidae beetles have a great diversity of natural enemies .and also present many different defensive strategies. In this work we have studied two Cassidinae species (a Chrysomelidae .subfamily), P/agiometriona flavescens and StoIas areolata, with the main objective to understand if these species can protect themselves against predators using their fecal shields or chemical substances.. We have carried. out short-term experiments in the field and in the laboratory to test shield protection by comparing the mortality of larvae of both species with their fecal shield maintained,. removed or substituted by an artificial shield, without unpalatable chemical substances. Field experiment revealed that larvae of both species experimented with their natural shield survived more. frequently than larvae without shield or with artificial shield, thus suggesting the chemical nature of the defense. In .laboratory experiments we have offered larvae to ants. Camponoms crassus and to chicks, Gallus gallus. We have obtained for P. flavescens similar patterns of those obtained in the field, but with non-significant differences. We have confirmed the chemical protection provided by its shield because of the high rejection rates of baits treated with shield extract both in the fie1d and laboratory bioassays. Both predators preyed upon few S. areolata larvae, independently or the treatment they were submitted. In long-term experiments in the field and in the laboratory using P. flavescens larvae, we have observed that the maintenance of the shields did not represent any cost in the performance and survivorship of the larvae. Therefore, shields represent a defense for being unpalatable and cheap for larvae. Long-term experiments in the laboratory, using S. areo/ata larvae, showed the presence of the shield increases larval mortality, although no difference in the performance of larvae with and without shield was detected. In a similar experiment conducted in the field we did not detect any significant difference in the mortality of larvae with or without shields. In this case, we concluded that this structure may have a different function than protecting larvae against predators. In the second chapter, We have tested the efficiency of other strategies or chemical defense: We have observed that. P. flavescens larvae protect themselves against chemically oriented predators by the chemical camouflage. Cuticular hydrocarbons of larvae are 78% similar to the hydrocarbons of its host plant; thus C. crassus ants were not able to find P. flavescens. Larvae of S. areolata protect themselves by apoIar compounds, which are present in their body. We have observed in laboratory bioassays that baits treated with the apolar extract of larvae are rejected by G. gallus. We did no! observe the same type of predator behavior in a field experiment. However, it is possible that such apolar substances could -be potentially defensive to S. areo/ata larvae. Finally, this work shows that two different species belonging to the same sub-family can protect themselves-against predators-somfferently / Doutorado / Doutor em Ecologia

Orientador: João Vasconcelos-Neto / Texto em portugues e ingles / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:20:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gonzaga_MarcelodeOliveira_D.pdf: 16698153 bytes, checksum: 3f0c2c8094e807b06ce7b16381ffabe3 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: ranhas são atacadas por uma grande variedade de inimigos naturais. A pressão de predação e/ou parasitismo pode ter influenciado inúmeras características comportamentais, como a permanência em abrigos construídos na periferia das teias orbiculares e a construção de barreiras de fios. Assim como estas estruturas, os estabilimentos adicionados às teias orbiculares de várias espécies das famílias Araneidae, Tetragnathidae e Uloboridae podem constituir componentes de defesa. As possíveis funções destas decorações compostas por seda e/ou detritos, entretanto, vem sendo intensivamente discutidas deste sua descrição, no final do século XIX. Atração de presas, proteção contra a exposição ao sol, estabilidade, diminuição de danos às teias foram algumas outras funções já atribuídas aos estabilimentos. Neste trabalho apresentamos uma revisão sobre predadores e parasitas de aranhas e sobre as estratégias de defesa utilizadas para minimizar seu sucesso. Em seguida analisamos as presas coletadas por espécies de vespas-caçadoras em duas áreas de Mata Atlântica do sudeste brasileiro, comparando estes dados com a disponibilidade de aranhas no campo. A composição em espécies de aranhas orbitelas e o tamanho das presas capturadas pelas vespas indicaram que a seleção de presas não está baseada apenas na abundância relativa de espécies de aranhas e em seus tamanhos. Aranhas construtoras de estabilimentos, por exemplo, foram capturadas com uma freqüência bem menor que a esperada, sugerindo que essas estruturas podem evitar a predação por vespas. No capítulo seguinte são apresentados dados referentes a variabilidade estrutural dos estabilimentos construídos por Cyc/osa fililineata e Cyclosa morretes. Colunas de detritos são mais freqüentes nas duas espécies, mas estruturas descontínuas são relativamente comuns em teias de imaturos e machos de C. morretes. Este tipo, assim como estruturas compostas por seda (espiral e linear) constituem estágios de transição na construção de estruturas contínuas. Observamos também uma grande variação na posição ocupada pelas aranhas na coluna de detritos, o que pode reduzir ainda mais a eficiência de ataques por predadores visualmente orientados. Em seguida apresentamos um trabalho testando as duas principais hipóteses sobre as funções dos estabilimentos, defesa contra predação e atração de presas. Os resultados obtidos sugerem que as estruturas de detritos de C. morretes e C. fililineata não atraem presas, mas podem reduzir a freqüência de ataques por possíveis predadores. No último capítulo investigamos a ocorrência de parasitismo em jovens e adultos, por ichneumonídeos, e em ootecas, por parasitóides de ovos da família Scelionidae. As duas espécies são igualmente atacadas por Po/ysphincta sp. (Ichneumonidae), mas com uma baixa freqüência. Baeus sp. (Scelionidae) ataca preferencialmente as ootecas de C. morretes, o que pode constituir um dos fatores que explicam sua menor abundância no Parque Estadual de Intervales. Apresentamos ainda dois trabalhos descrevendo novas espécies de aranhas orbitelas coletadas durante a realização do capítulo 2, e um trabalho sinonimizando uma espécie de cleptoparasita que ocorre nas teias de Cyc/osa e de várias outras espécies de aranhas orbitelas, em uma das áreas de estudo / Abstract: Spiders are attacked by a number of natural enemies. Predation and/or parasitism pressures may have influenced many behavioral characteristics, such as the permanence in shelters constructed in the periphery of orb-webs and the addition of web barriers. The stabilimenta added to the central portion of the orb-webs of many species of Araneidae, Tetragnathidae and Uloboridae, just like these other devices, may constitute a defensive component. The possible functions of these structures composed by silk and/or detritus, however, are subject of a intense discussion since their description, in the end of XIX century. Prey attraction, protection against the direct incidence of sun rays, stability, reduction of damage promoted by birds were some functions already proposed to explain the presence of stabilimenta. In this study we present a revision about predators and parasites of spiders and about the defenses used to minimize their success. In the second chapter we analyzed the prey collected by hunting wasps in two areas of Atlantic Forest in southeastern Brazil, comparing these data with prey availability in the field. The species composition of orb-web spiders and the size of prey captured by wasps indicated that prey selection is not based only on the relative abundance of spider species and on their size. Spiders that build stabilimenta, for example, were captured in a frequency much lower than the expected, suggesting that this structures may protect the spiders against hunting wasps. In the next chapter we presented data regarding the structural variability of the stabilimenta constructed by Cyclosa fililineata and by Cyclosa morretes. Detritus columns are more frequent for both species, but discontinuous linear structures (blobs of detritus) are relatively common in webs of males and juveniles of C. morretes. This last kind, as well as structures composed by silk (spiral and linear) constitute intermediate stages towards the construction of detritus columns. We observed a great variation in the position occupied by the spiders within the columns, what may reduce even more the efficiency of attacks by visually oriented predators. Then we present a study testing the two main hypothesis about the functions of stabilimenta, the defense against predators and prey attraction. The results obtained suggest that the detritus structures of C. morretes and C. fililineata do not attract prey, but may reduce the frequency of attacks by possible predators. 'n the last chapter we investigated the occurrence of parasitism in juveniles and adults, by ichneumonids, and in egg sacs, by Baeus sp (Scelionidae). 80th spider species are equally attacked by Po/ysphincta sp. (Ichneumonidae), but in a low frequency. Baeus sp. attacks preferentially egg sacs of C. mo"etes, what may constitute an important factor to explain the lower abundance of this species in P.E. Intervales. We also present two studies describing new species of orb-weavers collected during the surveys of chapter 2, and a study sinonimizing one species of kleptoparasite (Argyrodes rigidus, Theridiidae) usually found using webs of Cyc/osa and other orb-weavers in P.E. Intervales / Doutorado / Doutor em Ecologia

A relação entre as concentrações intracelulares de glutationa (GSH) e dissulfeto de glutationa (GSSG), dita o estado redox celular que, por sua vez, modula a atividade de muitos genes e proteínas sensíveis às alterações de potencial redox. As proteínas de choque térmico (HSP) são fundamentais na defesa contra o estresse oxidativo e em processos de reparo celular. Já a bomba GS-X codificada pelo gene MRP1 pode regular o estado redox celular exportando dissulfeto de glutationa (GSSG), prevenindo o estresse oxidativo. Nosso objetivo foi verificar a expressão de HSP70, da bomba MRP1 e sua atividade, bem como o metabolismo da glutationa (GSH) no miocárdio e gastrocnêmio de ratos submetidos ao exercício agudo e ao treinamento físico de natação. Ratos machos Wistar, separados em controle e exercício (n=6; treinamento de uma semana, com carga de 5% do peso corporal na cauda, temperatura da água ± 30°C). Após o exercício os ratos foram sacrificados e o músculo cardíaco e gastrocnêmio retirados. Para análise do estado redox, foram utilizadas técnicas bioquímicas de análise do conteúdo intracelular de GSH e GSSG; para análise da expressão de HSP70 e MRP1 foram utilizadas técnicas de SDS-PAGE e Western blotting. A atividade da bomba MRP1 foi medida por técnicas espectrofotométricas em membranas isoladas dos músculos em estudo. Os resultados foram expressos como média  desvio padrão da média. Foi utilizado o teste de análise de variância complementado com o teste de comparações múltiplas de Student-Newmann-Keus, para p < 0,05. Na análise do estado redox celular ([GSSG]/[GSH]), o miocárdio não apresentou mudanças significativas, enquanto que o gastrocnêmio do grupo exercício demonstrou aumento nesta modalidade indicando estresse (controle: 0,424± 0,056 e exercício: 3,775 ± 0,466). Com relação à expressão de HSP70 (unidades arbitrárias), o miocárdio não apresentou diferença, enquanto o gastrocnêmio do grupo exercício obteve um aumento significativo (controle 0,602± 0,047 e exercício 0,807 ± 0,224). Na expressão da MRP1, o coração apresentou diferença significativa (controle: 0,360± 0,028 e exercício: 0,800 ± 0,094), enquanto o gastrocnêmio não. A atividade da bomba MRP1 foi 21,4% maior no coração, e essa atividade foi diminuída pelo treinamento em 27,76% em relação ao controle. Os dados obtidos indicam que o miocárdio parece estar mais protegido do que o gastrocnêmio contra o estresse oxidativo induzido pelo exercício por apresentar maior expressão e atividade da bomba MRP1, uma vez que esta previne o acúmulo de GSSG intracelular bombeando o mesmo para o exterior da célula.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-08-25T16:40:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1084743 bytes, checksum: 1f4401e739fab43ab255d4a9e73125c1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-25T16:40:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1084743 bytes, checksum: 1f4401e739fab43ab255d4a9e73125c1 (MD5) Previous issue date: 2015-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Animais e microrganismos causadores de doenças estão em constante confronto. Enquanto patógenos evoluem de forma a superar barreiras dos hospedeiros, as defesas imunes do hospedeiro são aprimoradas para impedir o estabelecimento de doenças. Não só indivíduos, mas populações podem ser afetadas pela ação de patógenos. Assim, organismos possuem mecanismos que evitam o processo infeccioso através da percepção de sinais ambientais. O aumento da densidade de co-específicos é um destes sinais e indivíduos capazes de percebê-los poderiam aumentar plasticamente o investimento em defesas imunes; hipótese conhecida como “Profilaxia Densidade- Dependente” (PDD). Outra forma de proteção em nível de população é a transferência de defesas imunes para a prole, especialmente via herança epigenética. Defesas imunes tem um alto custo metabólico e a combinação de ambas as estratégias, PDD e transferência vertical, poderia otimizar a prevenção de doenças em organismos que estão sujeitos a surtos populacionais e possivelmente apresentam sobreposição de gerações, como insetos-praga. Anticarsia gemmatalis é conhecida por ter hábito solitário, porém apresenta plasticidade fenotípica dependente da densidade como algumas espécies de insetos gregários. Por isso, A. gemmatalis foi escolhida como modelo para testar se há transferência transgeracional de PDD. Para isso, avaliamos a atividade antimicrobiana (provavelmente uma lisozima), através da zona de inibição em placas contendo a bactéria Micrococcus lysodeikticus, em ovos de mariposas de diferentes fenótipos (i.e. lagartas foram criadas solitárias ou gregárias e expressaram o fenótipo verde ou preto, respectivamente). Casais foram acasalados em gaiolas nas quatro combinações possíveis entre fêmeas e machos exibindo os fenótipos “verde” ou “preto”. Dessa forma, seria possível identificar qual dos parceiros estaria contribuindo mais para a transferência de defesas à prole. Além disso, foram avaliados o número de ovos por fêmea como forma de investigar possíveis trade-offs entre a defesa imune e reprodução. Não houve diferenças significativas na atividade antimicrobiana nem no número de ovos de mariposas expressando o fenótipo verde ou preto na fase larval. Os resultados indicam que, pelo menos para essa defesa imunológica, não há transferência transgeracional de PDD à prole de A. gemmatalis. Como essa espécie é migratória, talvez a prole não experimente as mesmas condições ambientais dos pais, não precisando assim transferir defesas imunológicas à prole mediante estímulos sofridos pelos pais. Propomos investigar a transferência de DDP em outros ínstares larvais da prole, através da avaliação de diferentes parâmetros imunes, para melhor subsidiar nossa conclusão. / Animals and disease-causing microorganisms are in a constant fight. While pathogens evolve ways to breach the host defences, hosts enhance defences to prevent the establishment of diseases. Not only individuals themselves, but populations may be affected by pathogens. Thus, organisms have mechanisms to avoid infectious processes through perception of environmental clues. The increase in population density of conspecifics may be such a clue, and individuals able to perceiving it could increase plastically the investment in immune defences; hypothesis known as ‘Density- dependent prophylaxis’ (DDP). Furthermore, organisms may invest plastically in defences of offspring via epigenetic. It is known that immune defences pose a high cost to hosts, and the use of the two strategies – DDP and transgenerational transfer – could optimize the prevention of disease in organisms subject to population fluctuation and likely overlap of generations, such as insect pests. Anticarsia gemmatalis is known to be a lone-living insect, but presents density-dependent plasticity in phenotype as such group-living insects. Thus, A. gemmatalis was chosen as model to test if there is transgenerational transfer of DDP. It was assessed the antimicrobial activity (lysozyme- like activity), through inhibition zone in plates with the bacterium Micrococcus lysodeikticus, in eggs of moths from different phenotypes (i.e. caterpillars were raised alone or in groups and expressed green or black phenotype, respectively). Moths were paired in cages in four possible combinations between females and males expressing “green” or “black” phenotypes. Thus, it was possible to identify the contribution of each partner in the provision of immune defence to offspring. Furthermore, it was assessed the number of eggs per female as a way to find out likely trade offs between immunity and reproduction. There were no significant differences in antimicrobial activity neither in the number of eggs from moths of green or black phenotype. These results indicate that, at least for the immune defence assessed here, there is no transgenerational transfer of DDP to offspring. As this is a migratory species, maybe the offspring do not experience the same environmental conditions of the parents; hence they do not transfer immune defences to offspring by stimuli experienced by parents. It is proposed to investigate the transfer of DDP in other larval instars of offspring, through the assessing of different immune parameters, to better support our conclusion. / O autor não apresentou título em português.

A relação entre as concentrações intracelulares de glutationa (GSH) e dissulfeto de glutationa (GSSG), dita o estado redox celular que, por sua vez, modula a atividade de muitos genes e proteínas sensíveis às alterações de potencial redox. As proteínas de choque térmico (HSP) são fundamentais na defesa contra o estresse oxidativo e em processos de reparo celular. Já a bomba GS-X codificada pelo gene MRP1 pode regular o estado redox celular exportando dissulfeto de glutationa (GSSG), prevenindo o estresse oxidativo. Nosso objetivo foi verificar a expressão de HSP70, da bomba MRP1 e sua atividade, bem como o metabolismo da glutationa (GSH) no miocárdio e gastrocnêmio de ratos submetidos ao exercício agudo e ao treinamento físico de natação. Ratos machos Wistar, separados em controle e exercício (n=6; treinamento de uma semana, com carga de 5% do peso corporal na cauda, temperatura da água ± 30°C). Após o exercício os ratos foram sacrificados e o músculo cardíaco e gastrocnêmio retirados. Para análise do estado redox, foram utilizadas técnicas bioquímicas de análise do conteúdo intracelular de GSH e GSSG; para análise da expressão de HSP70 e MRP1 foram utilizadas técnicas de SDS-PAGE e Western blotting. A atividade da bomba MRP1 foi medida por técnicas espectrofotométricas em membranas isoladas dos músculos em estudo. Os resultados foram expressos como média  desvio padrão da média. Foi utilizado o teste de análise de variância complementado com o teste de comparações múltiplas de Student-Newmann-Keus, para p < 0,05. Na análise do estado redox celular ([GSSG]/[GSH]), o miocárdio não apresentou mudanças significativas, enquanto que o gastrocnêmio do grupo exercício demonstrou aumento nesta modalidade indicando estresse (controle: 0,424± 0,056 e exercício: 3,775 ± 0,466). Com relação à expressão de HSP70 (unidades arbitrárias), o miocárdio não apresentou diferença, enquanto o gastrocnêmio do grupo exercício obteve um aumento significativo (controle 0,602± 0,047 e exercício 0,807 ± 0,224). Na expressão da MRP1, o coração apresentou diferença significativa (controle: 0,360± 0,028 e exercício: 0,800 ± 0,094), enquanto o gastrocnêmio não. A atividade da bomba MRP1 foi 21,4% maior no coração, e essa atividade foi diminuída pelo treinamento em 27,76% em relação ao controle. Os dados obtidos indicam que o miocárdio parece estar mais protegido do que o gastrocnêmio contra o estresse oxidativo induzido pelo exercício por apresentar maior expressão e atividade da bomba MRP1, uma vez que esta previne o acúmulo de GSSG intracelular bombeando o mesmo para o exterior da célula.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-18Bitstream added on 2014-06-13T20:39:40Z : No. of bitstreams: 1 dallaqua_b_me_botfm.pdf: 325279 bytes, checksum: eb0d311f7c51273f4d17cae5ac02ffc7 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Diabetes mellitus (DM) é uma síndrome de etiologia múltipla caracterizada por hiperglicemia crônica. Esta hiperglicemia induz o aumento na produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) e diminuição das defesas antioxidantes. Devido às complicações causadas pelo diabete, muitos indivíduos optam por terapias alternativas à base de plantas medicinais para amenizar seus efeitos. Sendo assim, nesta revisão de literatura, foram analisados e descritos diversos trabalhos experimentais com a utilização de animais diabéticos para comprovar os efeitos antioxidantes de algumas dessas plantas e verificar se os títulos e resumos disponibilizados nos artigos são compatíveis aos objetivos de nossa busca / Diabetes mellitus (DM) is a syndrome of multiple etiologies characterized by chronic hyperglycemia. This hyperglycemia induces increased production of reactive oxygen species (ROS) and decreased antioxidant defenses. Due to complications caused by diabetes, many people choose for alternative therapies and herbal medicine to alleviate its effects. Thus, in this literature review, several experimental studies with the use of diabetic animals were analyzed to demonstrate the antioxidant effects of some plants and to verify if the titles and abstracts provided in the articles are compatible to the aims of our search

A relação entre as concentrações intracelulares de glutationa (GSH) e dissulfeto de glutationa (GSSG), dita o estado redox celular que, por sua vez, modula a atividade de muitos genes e proteínas sensíveis às alterações de potencial redox. As proteínas de choque térmico (HSP) são fundamentais na defesa contra o estresse oxidativo e em processos de reparo celular. Já a bomba GS-X codificada pelo gene MRP1 pode regular o estado redox celular exportando dissulfeto de glutationa (GSSG), prevenindo o estresse oxidativo. Nosso objetivo foi verificar a expressão de HSP70, da bomba MRP1 e sua atividade, bem como o metabolismo da glutationa (GSH) no miocárdio e gastrocnêmio de ratos submetidos ao exercício agudo e ao treinamento físico de natação. Ratos machos Wistar, separados em controle e exercício (n=6; treinamento de uma semana, com carga de 5% do peso corporal na cauda, temperatura da água ± 30°C). Após o exercício os ratos foram sacrificados e o músculo cardíaco e gastrocnêmio retirados. Para análise do estado redox, foram utilizadas técnicas bioquímicas de análise do conteúdo intracelular de GSH e GSSG; para análise da expressão de HSP70 e MRP1 foram utilizadas técnicas de SDS-PAGE e Western blotting. A atividade da bomba MRP1 foi medida por técnicas espectrofotométricas em membranas isoladas dos músculos em estudo. Os resultados foram expressos como média  desvio padrão da média. Foi utilizado o teste de análise de variância complementado com o teste de comparações múltiplas de Student-Newmann-Keus, para p < 0,05. Na análise do estado redox celular ([GSSG]/[GSH]), o miocárdio não apresentou mudanças significativas, enquanto que o gastrocnêmio do grupo exercício demonstrou aumento nesta modalidade indicando estresse (controle: 0,424± 0,056 e exercício: 3,775 ± 0,466). Com relação à expressão de HSP70 (unidades arbitrárias), o miocárdio não apresentou diferença, enquanto o gastrocnêmio do grupo exercício obteve um aumento significativo (controle 0,602± 0,047 e exercício 0,807 ± 0,224). Na expressão da MRP1, o coração apresentou diferença significativa (controle: 0,360± 0,028 e exercício: 0,800 ± 0,094), enquanto o gastrocnêmio não. A atividade da bomba MRP1 foi 21,4% maior no coração, e essa atividade foi diminuída pelo treinamento em 27,76% em relação ao controle. Os dados obtidos indicam que o miocárdio parece estar mais protegido do que o gastrocnêmio contra o estresse oxidativo induzido pelo exercício por apresentar maior expressão e atividade da bomba MRP1, uma vez que esta previne o acúmulo de GSSG intracelular bombeando o mesmo para o exterior da célula.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:22:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Antonio Paulino de Mello.pdf: 1386709 bytes, checksum: a1f2fae115f36a9f2b90a08bd6c47f88 (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fungi are one of the most impactful to sanity termíticas colonies of entomopathogenic microorganisms. The ability to control microbial growth, especially pathogenic fungi and competitors, it can be beneficial to termites. The defensive secretion of Nasutitermitinae show evidence of working in this control, but this secretion has intraspecific variation in their chemical composition. The study evaluated the variability of the substances found in 20 populations of Nasutitermes corniger urban area, 10 nests in areas of heath altitude and 10 in Caatinga in northeastern Brazil. Also there was a fungal richness associated with nests, and antimycotic action of the major chemical compounds (&#945; - pinene, &#946; - pinene and limonene) produced by N. corniger front of the colonization of pathogenic fungi isolated from nests. The identification of the chemical composition was performed by mass spectrometer coupled to cromatrografia gas. For bioassays, the fungi were isolated from the nest material, diluting 1 g of each sample to 10 -4 then sown in Petri dishes on PDA medium. The assay was performed with four replicas and the plates incubated for five days at room temperature. Of the 18 substances have been identified, &#945; - pinene accounted for 64.89 % in one population. The PCA analysis showed that the first two components accounted for 95.43% of the total variance. And cluster analysis classified the populations into two main groups: Group I, altitude heath area revealed high amounts of &#945; - pinene, &#946; - pinene, 2 - hexanol and 3 - hexanol, whereas group II area caatinga showed high amounts of &#945; - pinene, &#946; - pinene and limonene. Registered 23 morphotypes of fungi, belonging to eight genera. Nests located in two areas of heath Altitude higher richness (A1: A2 17 and 12) and fungal diversity (H = 1.04 and H = 0.92 , respectively) . Penicillium sp.1, Aspergillus flavus and A. niger were present in all nests studied. Penicillium , Cladosporium and Aspergillus (A. flavus and A. niger) genera were the most frequent and abundant isolates in the four collection points. The &#945; - pinene, the main component of the defensive secretion, showed efficiency of contact and volatile during vegetative and reproductive stages of the fungi tested, verifying changes according to the stage of development and species of the fungus. However, the synergistic effect tests showed the best results in inhibition efficiency with the substances in all concentrations tested, even at low concentrations. It is suggested that environmental stress and climatic factors of each ecoregion influence on ecological patterns of richness, abundance and fungal diversity in the nests of N. corniger, and also to characterize the phenotypes of the defensive secretion, resulting in the formation of two ecotypes. However, this statement should be strengthened by future studies with larger samples and analysis effort of a possible seasonal effect. / Os fungos constituem um dos micro-organismos entomopatógenos mais impactantes à sanidade das colônias termíticas. A capacidade de controlar o crescimento microbiano, especialmente de fungos patogênicos e competidores, pode ser benéfica para os cupins. A secreção defensiva dos Nasutitermitinae apresenta indícios de atuar neste controle, porém esta secreção apresenta variações químicas intraespecíficas na sua composição. O estudo avaliou a variabilidade das substâncias encontradas em 20 populações de Nasutitermes corniger de área urbana, 10 ninhos em áreas de Brejo de altitude e 10 em Caatinga no Nordeste do Brasil. Também verificou-se a riqueza fúngica associada aos ninhos, e a ação antimicótica dos compostos químicos majoritários (&#945;-pineno, &#946;- pineno e Limoneno) produzidos por N. corniger frente à colonização de fungos patógenos isolados dos ninhos. A identificação da composição química foi realizada por cromatrografia gasosa acoplada ao espectrômetro de massas. Para os bioensaios, os fungos foram isolados do material do ninho, diluindo-se 1 g de cada amostra até 10- 4 , em seguida semeada em placas de Petri, sob o meio BDA. O ensaio foi realizado com quatro réplicas e as placas incubadas durante cinco dias à temperatura ambiente. Das 18 substâncias foram identificadas, &#945;-pineno representou 64,89% em uma das populações. A análise de PCA mostrou que os dois primeiros componentes foram responsáveis por 95,43% da variância total. E a análise de agrupamento classificou as populações em dois grupos principais: O grupo I, área de Brejo de altitude, revelou elevadas quantidades de &#945;-pineno, &#946;- pineno, 2-hexanol e 3-hexanol, enquanto o grupo II, área de caatinga, mostrou elevadas quantidades de &#945;-pineno, &#946;- pineno e limoneno. Registrou-se 23 morfotipos de fungos, distribuídos em oito gêneros. Os ninhos localizados nas duas áreas de Brejo de Altitude apresentaram maior riqueza (A1: 17 e A2: 12) e diversidade de fungos (H=1,04 e H=0,92, respectivamente). Penicillium sp.1, Aspegillus flavus e A. niger estiveram presentes em todos os ninhos estudados. Os gêneros Penicillium, Cladosporium e Aspergillus (A. flavus e A. niger) foram os isolados mais frequentes e abundantes nos quatro pontos de coleta. O &#945;-pineno, principal componente da secreção defensiva, apresentou eficiência de contato e volátil nas fases vegetativa e reprodutiva dos fungos testados, verificando-se variações conforme a fase de desenvolvimento e a espécie do fungo. Contudo, os testes do efeito sinergético mostraram os melhores resultados de inibição, com eficiência das substâncias em todas as concentrações testadas, mesmo em baixas concentrações. Sugere-se que as pressões ambientais e os fatores climáticos de cada ecorregião influenciem nos padrões ecológicos de riqueza, abundância e diversidade micótica nos ninhos de N. corniger, e ainda na caracterização dos padrões fenotípicos da secreção defensiva, resultando na formação de dois ecótipos. No entanto, esta afirmação deve ser reforçada por estudos futuros, com ampliação do esforço amostral e análise de um possível efeito sazonal.

Orientador : Paulo S. Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T00:16:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Machado_Glauco_D.pdf: 9750618 bytes, checksum: 94f27fcd7900bbd2ff2d556a3bdcc219 (MD5) Previous issue date: 2002 / Doutorado / Doutor em Ecologia