Cartas al editor

Thesis (Ph. D.)--University of Queensland, 2002. / Includes bibliographical references.

The life cycle of enveloped viruses is a complex process relying on specific interactions with host factors that, in turn, represent potential targets for interfering with viral replication and pathogenesis. Although the molecular identity of cellular receptors involved in virion entry has been established for many viruses, few studies have investigated whether host proteins on intracellular compartments may function as receptors to facilitate viral trafficking and release from infected cells. In particular, viral-host interactions during dengue virus (DENV) egress are still poorly characterized and most cellular targets identified in high-throughput screens have not been mapped to the secretory pathway. DENV structural glycoproteins, pre-membrane (prM) and envelope (E), are sufficient to assemble native Recombinant Subviral Particles (RSPs) in the endoplasmic reticulum (ER). Newly formed RSPs mimic nascent virions and traffic through the secretory pathway, where they are processed into mature particles, before being released from cells. This study demonstrated that DENV requires host KDEL receptors (KDELRs), which cycle between the ER and Golgi apparatus to retrieve resident ER proteins, for vesicular transport from ER to Golgi. Depletion of KDELRs by siRNA reduced egress of both DENV progeny virions and RSPs produced in stable cell lines expressing prM and E. A direct interaction between KDELRs and DENV prM was demonstrated in either prME expressing or DENV infected cells by co-immunoprecipitation (co-IP) experiments. By immunoblotting with specific antibodies we first showed that KDELRs interacted with prM portion. By interfering with RSPs’ maturation, we then obtained conclusive evidence that interaction was restricted to the pr fragment which released from the mature RSPs after cleavage of prM by cellular protease furin. This finding was further confirmed by GST pull down assay, which mapped the interacting domain to the N-terminal 40 residues of the pr fragment, and by mutagenesis experiments, which showed that KDELRs interact with prM through three positively charged amino-terminal residues. Biochemical analysis and immunofluorescence microscopy indicated that mutations impairing KDELRs/prM binding did not affect RSPs formation, and translocation within the ER, whereas they strongly inhibited trafficking from ER to Golgi apparatus and, consequently, their release into the supernatant. Moreover, perturbation of KDELR cycle by siRNA-mediated depletion of class II Arfs, which accumulates KDELRs in the Golgi, phenocopied results obtained with both an interaction-deficient mutant and KDELR knockdowns. Finally, we compared the effect of KDELRs on all four DENV serotypes and found significant reductions of DENV1-3, but not DENV4, in keeping with the co-IP results that demonstrated, using RSP-producing cell lines, that only DENV1-3 prM proteins interacted with KDELRs. Of note, KDELRs depletion did not affect West Nile Virus progeny virus egress, suggesting that KDELRs might not be utilized by all Flavivirus. Taken together, several lines of evidence have been presented to indicate that the loss of interaction with KDELRs reduced DENV transport from ER to Golgi and, consequently, release from infected cells. These findings, therefore, have uncovered a novel function for KDELRs as an internal receptor required for DENV trafficking and identified a rate-limiting molecular step in the late stages of DENV lifecycle. / published_or_final_version / Public Health / Doctoral / Doctor of Philosophy

Th.--Méd.--Bordeaux 2, 1979. N°: 484 d.

OLIVEIRA, Rhaquel de Morais Alves Barbosa. Aspectos entomo-epidemiológicos das epidemias de dengue ocorridas entre 2001 e 2012, no município de Fortaleza, Ceará. 2014. 95 f. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-06-05T13:23:48Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_rmaboliveira.pdf: 5902067 bytes, checksum: d68955ff228bc31b4eb902dd5f3fa780 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-06-05T13:24:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_rmaboliveira.pdf: 5902067 bytes, checksum: d68955ff228bc31b4eb902dd5f3fa780 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-05T13:24:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_rmaboliveira.pdf: 5902067 bytes, checksum: d68955ff228bc31b4eb902dd5f3fa780 (MD5) Previous issue date: 2014 / The city of Fortaleza has been a dengue epidemics scenario since 1986 with high rates of mortality. This study aimed at characterizing the entomo-epidemiological aspects of major epidemics of dengue fever occurred in Fortaleza / CE, between the years 2001-2012. We conducted a descriptive research, cross-sectional and quantitative approach. Which used secondary data registered in SINAN, SIH and SISFAD, plus information on infestation generated by the Municipal Programme for Control of Aedes aegypti in Fortaleza. In order to define the epidemic years studied were considered those which had an incidence percentile higher than 75 between 2001 and 2012. The epidemic years selected were 2001, 2006, 2008, 2011 and 2012, all with more than 500/100.000 in hab incidence. Epidemics were marked by different serological characteristics, with the 2001 presenting the DENV-2 and DENV-1, and the 2006 presenting the prevalence of DENV-3 serotype, the 2008 presenting the DENV-2 serotype, the 2011 presenting the DENV-1 serotype and 2012 presenting the DENV-4 serotype. The year 2008 evidenced a grat number of confirmed as DCC, DHF and DSS cases. The female sex predominated both in confirmed cases as in hospital admissions. The average age of confirmed and hospitalized cases was 27.7 and 29.3 years old when considered all epidemics. The lethality was higher in the epidemics of 2001 and 2012. The infestation was greater than 1% in all years studied. A reduction was detected of more than three times in the proportional percentage of infested water storage tanks and more than nine times for tires when compared to the epidemics of 2001 and 2012. It can be concluded that the epidemics of dengue in Fortaleza presented significant differences in relation to the circulating serotypes, predominantly infested deposits, age of the most serious cases and number of hospitalization. / A cidade de Fortaleza tem sido cenário de epidemias de dengue desde 1986 com elevados coeficientes de letalidade, portanto o objetivo principal do estudo foi caracterizar os aspectos entomo-epidemiológicos das grandes epidemias de dengue ocorridas no município de Fortaleza/CE, entre os anos de 2001 e 2012. Realizou-se uma pesquisa descritiva, com corte transversal e abordagem quantitativa, a qual utilizou dados secundários registrados no SINAN, SIH e SISFAD, além de informações sobre infestação geradas pelo Programa municipal de Controle do Aedes aegypti de Fortaleza. Foram considerados anos epidêmicos aqueles que presentaram incidência superior ao percentil 75, entre os anos de 2001 e 2012. Os anos epidêmicos selecionados foram 2001, 2006, 2008, 2011 e 2012, todos com incidência superior a 500/100.000 hab. As epidemias foram marcadas por características sorológicas diferentes, tendo as de 2001 a presença do DENV-2 e DENV-1, a de 2006 predominância do sorotipo DENV-3, a de 2008 do sorotipo DENV-2, a de 2011 do sorotipo DENV-1 e a de 2012 do sorotipo DENV-4. O ano de 2008 evidenciou um maior número de casos confirmados como DCC/FHD/SCD. Houve predominância do sexo feminino, tanto para os casos confirmados como nas internações. A média de idade dos casos confirmados e internados foi de 27,7 e 29,3 anos, quando consideradas todas as epidemias. A letalidade foi maior nas epidemias de 2001 e 2012. A infestação predial foi superior a 1% em todos os anos estudados. Detectou-se uma redução de mais de três vezes no percentual proporcional de caixas d´água infestadas e de mais de nove vezes para pneus, quando comparadas as epidemias de 2001 e 2012. Conclui-se que as epidemias de dengue em Fortaleza apresentaram diferenças importantes em relação aos sorotipos circulantes, depósitos predominantemente infestados, faixa etária dos casos mais graves e número de internações.

Made available in DSpace on 2012-05-07T15:26:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000014.pdf: 4633907 bytes, checksum: e050111245c15d94b3a5781c3995bef4 (MD5) Previous issue date: 2007 / (...) Este estudo analisou a competência vetorial de uma população colonizada de A. aegypti ao DENV-2 além da existência da transmissão vertical do vírus por esta população e a capacidade de transmissão vertical destas fêmeas. Fêmeas de A. aegypti foram infectadas com o DENV-2 através de alimentação oral. Para analisar se a infecção artificial funcionou insetos foram dissecados e imunomarcados para o vírus dengue e observados ao microscópio laser confocal. Esta análise mostrou que intestinos, ovários e glândulas salivares apresentaram marcação para o vírus. Para confirmação dos dados de microscopia, fêmeas foram analisadas por RT-PCR e também se observou a positividade da infecção em 75 por cento das amostras testadas. A presença do vírus nos ovários nos levou a testar a capacidade das fêmeas em transmitir o vírus para a sua progênie. Para isso, mosquitos infectados puderam ovipor e as larvas do terceiro e quarto estádios foram separadas e analisadas por RT-PCR. Verificou-se que após a primeira oviposição 100 por cento das fêmeas transmitiram o vírus verticalmente e após uma segunda oviposição duas fêmeas das 25positivas, não transmitiram o vírus à sua progênie. Estes resultados mostram que a metodologia utilizada para infecção artificial foi bem sucedida e demonstrou que as fêmeas dacolônia são susceptíveis à infecção. Isto prova que, além de se infectarem, as fêmeas são também capazes de transmitir o vírus para a sua progênie. Estudos estão em progresso paraque se entenda melhor o processo de invasão do vírus dengue nos mosquitos do gênero Aedes

CAVALCANTI, Luciano Pamplona de Góes. Eficácia de peixes larvófagos na redução de larvas de Aedes aegypti em depósitos domiciliares com água. 2009. 120 f. : Tese (doutorado) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Fortaleza-CE, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-10-06T12:15:10Z No. of bitstreams: 1 2009_tese_lpgcavalcanti.pdf: 4185538 bytes, checksum: 668a717795695c79d1a1489916b23d77 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-10-07T16:32:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_tese_lpgcavalcanti.pdf: 4185538 bytes, checksum: 668a717795695c79d1a1489916b23d77 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-07T16:32:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_tese_lpgcavalcanti.pdf: 4185538 bytes, checksum: 668a717795695c79d1a1489916b23d77 (MD5) Previous issue date: 2009 / Dengue fever remains an important public health problem in northeast Brazil. Large domestic containers used to store water are important breeding sites of Aedes aegypti, the main vector. The use of alternatives to chemical vector control has increased in the last years. The objectives of this study were: to evaluate the inhibition of oviposition by female Ae. aegypti in domestic containers with larvivorous fish; to describe the survival of larvivorous fish to different chlorine concentrations; and to describe the efficacy of Betta splendens fish under field conditions. Oviposition was assessed in a cage of 6 m3 of size. The fish species Poecilia reticulata and B. splendens were used in the laboratory assays. In the cage, eight water containers were placed - four with fish, four without fish (control), and 100 mosquitoes. In each container with 15 l water eucatex strips were placed to facilitate oviposition. At the end of each week, eggs laid on these strips were counted. For each species, the assays were repeated for seven consecutive weeks. Survival of B. splendens and P. reticulata to different concentrations of chlorine (1.0, 1.5 and 2.0 mg / L) was assessed in drums with 35 liters of water. We used 105, 140 and 175 fish for each concentration: six test containers with chlorine for each control without chlorine. Secondary data of the Municipal Dengue Control Program of the city of Fortaleza were analyzed to assess the efficacy of B. splendens under field conditions. The presence of fish in household containers was verified after several weeks. Infestation of containers with mosquito larvae was compared to containers with the larvicide Bacillus thuringiensis israelensis. The presence of B. splendens inhibited oviposition by Ae. aegypti with an activity oviposition index of -0.627. The mean number of eggs laid in deposits with B. splendens (32.5 / week) was lower than in deposits with P. reticulata (200.5 / week) and controls (186.5 / week, p <0.0001). All B. splendens specimens survived a chlorine concentration of 1.0 mg / L, and 72.5% and 39.3% survived concentrations of 1.5 and 2.0 mg / L, respectively. On the other hand, only 4.4% of P. reticulata survived a concentration of 1.0 mg / L. Under field conditions, three containers were encountered with B. splendens and mosquito larvae (1.6%), significantly less than infested deposits with Bti (10.9%; p <0.001). In containers where the fish died or disappeared, infestation was 27.8% higher than in deposits with Bti (p <0.010). In deposits where the fish remained, efficacy was 85% better than Bti. The permanence of fish was higher in concrete tanks (48.5%), located outside the house (47.5%) and at ground level (53.3%). We conclude that B. splendens may be suitable for biological control of Ae. aegypti larvae in large domestic water containers / O dengue permanece como problema de saúde pública no Brasil. No nordeste brasileiro, os grandes depósitos domiciliares utilizados para acumular água são importantes criadouros para reprodução do Aedes aegypti, o principal transmissor do dengue. O uso de alternativas ao controle químico desse vetor vem sendo incentivado. Os objetivos desse trabalho foram avaliar se a presença de peixes larvófagos altera o padrão de postura do A. aegypti, identificar a sobrevivência de peixes larvófagos ao cloro e descrever a eficácia do peixe Betta splendens em condições de campo. O padrão de postura foi avaliado em uma gaiola com 6 m3. Os peixes avaliados foram Poecilia reticulata e B. splendens. Na gaiola foram inseridos oito depósitos, sendo quatro com peixes, quatro sem peixes (controle) e 100 mosquitos. Em cada depósito tinha água e uma palheta de eucatex para postura dos ovos. Ao final de cada semana os ovos postos nessas palhetas foram contados. Os ensaios foram replicados por sete semanas consecutivas para cada espécie. A sobrevivência do B. splendens e P. reticulata, ao cloro, foi avaliada para três concentrações (1,0; 1,5 e 2,0 mg/L) utilizando tambores com 35 litros de água. Foram utilizados 105, 140 e 175 peixes para cada concentração testada, na proporção de 6 depósitos com cloro para cada controle (sem cloro). A eficácia foi avaliada a partir de dados gerados pelo Programa Municipal de Controle do Dengue, na cidade de Fortaleza. Foi avaliada a permanência dos peixes em depósitos domiciliares e a infestação nesses depósitos com B. splendens e o larvicida Bacillus thuringiensis israelensis. A presença do B. splendens inibiu a postura de ovos pelas fêmeas de Aedes aegypti com um Índice de Atividade de Oviposição (IAO) de -0,627. O número médio de ovos postos em depósitos com B. splendens (32,5/semana) foi menor que nos depósitos com o P. reticulata (200,5/semana) e os controles (186,5/semana; p < 0,0001). Todos os B. splendens sobreviveram a concentração de cloro de 1,0 mg/L; 72,5 e 39,3% sobreviveram as concentrações de 1,5 e 2,0 mg/L. Por outro lado, apenas 4,4% do P. reticulata sobreviveram a concentração mínima de 1,0 mg/L. Em campo foram encontrados três depósitos com a presença do B. splendens e larvas de mosquitos (1,6%), infestação significativamente menor que nos depósitos com o Bti, onde essa infestação foi de 10,9% (p < 0,001). Nos depósitos onde o peixe não permaneceu a infestação foi de 27,8%, maior que nos depósitos com Bti (p < 0,010). Nos depósitos onde o peixe permaneceu ele foi 85% mais eficaz que o larvicida. A permanência dos peixes foi maior nos tanques de alvenaria (48,5%), localizados no peridomicílio (47,5%) e ao nível do solo (53,3%). Concluímos que o B. splendens pode ser apropriado para controle biológico de larvas de Ae. aegypti em grandes reservatórios domiciliares, desde que possa ser atestada sua permanência nesses depósitos.

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Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Saúde Coletiva, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-10-21T12:11:19Z No. of bitstreams: 1 2013_RodrigoLinsFrutuoso.pdf: 1778606 bytes, checksum: 4337d7575c45c940325f61f069e72b58 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-10-21T12:44:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_RodrigoLinsFrutuoso.pdf: 1778606 bytes, checksum: 4337d7575c45c940325f61f069e72b58 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-21T12:44:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_RodrigoLinsFrutuoso.pdf: 1778606 bytes, checksum: 4337d7575c45c940325f61f069e72b58 (MD5) / Introdução: A dengue é atualmente a arbovirose de maior magnitude e abrangência geográfica que atinge as populações humanas. No Brasil a epidemia mais recente ocorreu em 2010, com o registro de cerca de 1 milhão de casos. O cenário para o controle dessa doença não é estimulante. A redução da densidade de infestação do Aedes aegypti, ainda permanece como um desafio. Portanto, conhecer os fatores que contribuem para a proliferação do vetor, é de grande utilidade para o planejamento das ações de controle de dengue nos municípios. Objetivo: Verificar a correlação existente entre os fatores ambientais, sociais e de operacionalização dos programas municipais de controle da dengue que influenciaram o Índice de Infestação Predial, no ano de 2012, nos municípios brasileiros contemplados pela portaria n° 2557/2011. Método: O presente trabalho realizou um estudo ecológico, com enfoque na análise bivariada. Inicialmente foram selecionados 1.158 municípios que receberam incentivo financeiro para qualificação das ações de controle da dengue por meio da Portaria 2557/2011. Foram utilizadas variáveis contínuas (IIP, cobertura de imóveis trabalhados pelos agentes de endemias, índice de Desenvolvimento Humano, Densidade Demográfica e Índice de atendimento Urbano de Água) e variável dicotômica (coleta de resíduos sólidos). Os municípios foram agrupados por região geográfica e aqueles que não apresentaram dados referentes às variáveis analisadas, foram automaticamente excluídos do estudo. Para analisar a relação entre as variáveis contínuas, foi utilizado o coeficiente de correlação de Pearson (r), coeficiente de determinação (r2) e gráficos de dispersão. Para a relação entre o IIP e a variável dicotômica, foi utilizada a tabela de contingência. Foi construído um banco de dados em Microsoft Excel 2010, que subsidiou todas as análises do estudo. Resultado: correlação entre cobertura de imóveis trabalhados e IIP: Foi encontrada correlação negativa muito baixa e baixa nas regiões sul e norte, correlação positiva muito baixa nas regiões nordeste e sudeste e na região centro-oeste correlação positiva alta; correlação entre IDH e IIP: Foi encontrada correlação negativa muito baixa e baixa nas regiões nordeste e centro-oeste, correlação positiva baixa nas regiões norte e sudeste e correlação positiva muito baixa na região sul; correlação entre IIP e densidade demográfica: Foi encontrada uma correlação positiva moderada na região norte, correlação inversa baixa nas regiões nordeste e sudeste e correlação inversa muito baixa nas regiões centro-oeste e sul; correlação entre índice de abastecimento urbano de água e IIP: Foi encontrada uma correlação negativa alta na região centro-oeste, uma correlação negativa muito baixa na região sul e correlações positivas muito baixas nas demais regiões; relação entre coleta diária de resíduos sólidos e IIP: Os resultados não permitiram evidenciar a importância deste indicador na manutenção do vetor nos municípios analisados. Conclusão: Com base nos achados a correlação entre o IIP com os indicadores sociais, ambientais e operacionais não apresentaram resultados esperados e concordantes. O presente estudo demonstrou que a política empregada pelo PNCD em relação às ações de controle do vetor deve ser repensada, já que uma alta cobertura de imóveis trabalhados não se traduziu em uma baixa densidade vetorial. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: Nowadays, the dengue is the principal and most widely distributed arbovirose that affect the human population. In Brazil, the most recently outbreak of dengue occurred in 2010 with about 1 million of cases. The scenery to control of this arbovirose is not encouraging. The reduction of the infestation index of the Aedes aegypti remains as a challenge to vector control. Because this, to know the factors that contribute to vector expansion is very important to planning actions in the counties. Goal: This study aimed to verify the association between environmental, social and operational factors of the program vector control that influenced the infestation index, in 2012, in Brazilian municipalities covered for the Portaria n° 2557/2011. Method: An ecologic study focused in bivariate analysis was carried. Firstly, 1.158 municipalities that received financial government support to development of actions of dengue through Portaria 2557/2011 to dengue control were selected. The analyses was realized with the following continuous variables (Household infestation rates (IIP), the number of building visited by Endemic Disease Control Agents, the development human index (IDH), demographic density and index of demand of Urban Water) and dichotomous variable (collection of solid waste). The municipalities were grouped by geographic region. Those who didn’t have data on the variables analyzed were excluded from the study. To analyses the relation between continuous variables were used the Pearson correlation coefficients (r), coefficient of determination (r2) and dispersion graphics. For the analysis of the correlation between IIP and collection of solid waste were used contingencies tables. All analyses were carried using a database constructed in Microsoft Excel 2010 for this study. Result: In the analyses of correlation between building visited and IPII, the results found are: very low and low negative in the South and North regions; very low positive in the Northeast and Southeast and high positive in Midwest. In the analyses between IDH and IPII was found very low and low negative correlation in the Northeast and Midwest regions, low positive correlation in the North and Southeast region; very low positive correlation in the South. In the analyses between IIP e demographic density was found a moderate positive correlation in the North, low inverse correlation in the Northeast and Southeast region and very low inverse correlation in the Midwest and South. In the analyses between index of demand of Urban Water and IIP was found a high negative correlation in the Midwest, a very low correlation in the South and very low positive correlations in the others regions. The results found of the analysis between daily collection of solid waste and IIP didn’t permit to demonstrate that this is an important index to maintain the vectors in these municipalities. Conclusion: The results of the analyses were different of expected data and it presented discrepancies in the correlations between IIP and environmental, social and operational index. This study shows the necessity to review the political of vector control used by PNCD because the high number of visited buildings didn’t interpret in a low vector density.