The function of CABP1, a novel cAMP-binding protein in Dictyostelium discoideum, has been investigated. Previously, it has been shown that the molecular weight of CABP1 varies in different strains and that this variation is correlated with differences in response to cAMP. Sequence analysis showed that compared to its counterpart in strain AX2, the gene encoding CABP1 of strain V12M2 is missing 27 bp. AX2 transformants expressing the capA gene of V12M2 exhibited no change in phenotype, suggesting that CABP1 is not involved in the features examined or that the V12M2 variant is recessive. Disruption of capA by homologous recombination was attempted with no success, suggesting that this gene might be essential. Proteins interacting with CABP1 have been identified by immunoprecipitation using specific antibodies, CABP1 was also found to copurify with annexin VII, a calcium-dependent phospholipid-binding protein, suggesting that CABP1 and annexin VII might interact.

Universiẗat, Diss., 2006--Frankfurt (Main).

Thesis (Ph. D.)--University of Texas at Austin, 2008. / Vita. Includes bibliographical references.

Universiẗat, Diss., 2001--München.

Thesis (Ph. D.)--University of Wisconsin, 1967. / Typescript. Vita. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

University, Diss., 2004--Köln.

Univ., Diss., 2002--Frankfurt (Main)

The effects of stalk cell differentiation inducing factor (DIF) on stalk cell induction from vegetative cells and prestalk cells of Dictyostelium discoideum were investigated. It was found that the major DIF component DIF-1 is a poor inducer of stalk cell formation from prestalk cells, but a minor component, DIF-2 is a more important inducer for the conversion of prestalk to stalk cells. Evidence is presented that DIF-2 synergizes the activity of the other DIF components for prestalk to stalk cell conversion. In contrast DIF-5 inhibits the activity of DIF-1 and DIF-3/4. A model is proposed to explain those results. / Science, Faculty of / Microbiology and Immunology, Department of / Graduate

Tableau d'honneur de la Faculté des études supérieures et postdorales, 2015-2016 / Plusieurs protozoaires se nourrissant de bactéries peuvent sécréter des corps multilamellaires (CML) dans lesquels se retrouvent certaines bactéries pathogènes ayant résisté à la digestion par la cellule hôte. Ces bactéries enrobées dans des CML bénéficient de protections supplémentaires contre divers stress et sont susceptibles d’être aérosolisées et inhalées par l’humain. La présente étude visait à élucider le rôle physiologique des CML et les mécanismes de leur formation chez l’amibe modèle Dictyostelium discoideum. L’analyse en spectrométrie de masse du contenu protéique des CML a révélé la présence de quatre protéines majeures, incluant SctA communément associée aux pycnosomes. La fonction biologique des CML reste inconnue, mais il a été déterminé que les amibes et autres protozoaires pouvaient réinternaliser les CML sécrétés. Ces résultats permettent d’orienter les recherches afin d’élucider le véritable rôle des CML et ainsi mieux comprendre leur implication dans la transmission de bactéries pathogènes d’origine environnementale. / Many protozoa that feed on bacteria secrete multilamellar bodies (MLBs). MLBs have been found to harbour pathogenic bacteria that are resistant to degradation by the host cell. MLBs serve to protect these bacteria from various external stresses and could be aerosolized and subsequently inhaled by humans. The aim of this study was to elucidate the physiological role of MLBs and the mechanisms governing their formation in the model amoeba Dictyostelium discoideum. Mass spectrometric analyses of purified MLBs revealed the presence of four major proteins, including SctA, a protein generally associated with pycnosomes. The biological function of MLBs remains unclear, but we demonstrated that the amoeba and another protozoan can reinternalize secreted MLBs. These results provide new insight into the role of MLBs in the cell and deepen our understanding of the involvement of MLBs in the transmission of environmental pathogenic bacteria.

Titre de l'écran-titre (visionné le 2 mai 2023) / Dictyostelium discoideum est un protozoaire largement utilisé comme organisme modèle. Cette amibe se nourrit majoritairement via la phagocytose de bactéries, qui sont digérées dans la voie phago-endocytique. Lorsque nourrie avec des bactéries digestibles, D. discoideum produit des corps fécaux composés de membranes lipidiques concentriques appelés corps multilamellaires (CML). Le rôle exact des CML ainsi que les mécanismes régissant leur production sont encore peu connus. Dans l'optique d'approfondir les connaissances sur les CML et sur le fonctionnement de la voie phago-endocytique en général, la souche mutante de D. discoideum tstD- a été caractérisée. Ce mutant ne possède pas de protéine TSPOON fonctionnelle, une protéine faisant partie du complexe TSET. Chez D. discoideum, le complexe protéique TSET est impliqué dans le transport vésiculaire et dans le renouvellement de la membrane plasmique. Le mutant tstD- semble avoir une morphologie cellulaire et des CML semblables à ceux de sa souche parentale Ax2. De plus, l'osmorégulation, la cytokinèse ainsi que la capacité de prédation ne semblent pas altérées chez le mutant tstD-. Cependant, le mutant tstD- produit des plages de phagocytose différentes de celles d'Ax2 sur des souches d'Aeromonas salmonicida qui ne possèdent pas de système de sécrétion de type trois (SSTT). Au niveau de l'organisation de la voie phago-endocytique, elle semble similaire pour le mutant tstD- et Ax2 de manière générale, mais la détection de la protéine p25 semble affectée en fonction du produit utilisé pour la perméabilisation des cellules et de la souche parentale testée. Cette étude a permis d'en apprendre davantage sur les moyens employés pour étudier les CML chez D. discoideum et ouvre aussi la porte à une meilleure compréhension du fonctionnement de la voie-phago-endocytique et des outils utilisés pour la caractériser à travers l'étude du mutant tstD-. / Dictyostelium discoideum is a protozoan widely used as a model organism. This amoeba feeds mainly through phagocytosis of bacteria, which are digested in the phago-endocytic pathway. When fed with digestible bacteria, D. discoideum produces faecal pellets composed of concentric lipid membranes called multilamellar bodies (MLBs). The exact role of MLBs and the mechanisms governing their production are still poorly understood. In order to deepen the knowledge on MLBs and on the functioning of the phago-endocytic pathway in general, the mutant strain of D. discoideum tstD- was characterized. This mutant lacks a functional TSPOON protein, a protein that is part of the TSET protein complex. In D. discoideum, the protein complex TSET is involved in vesicular transport and in plasma membrane turnover. The mutant tstD- appears to have similar cell morphology and MLBs to its parental strain Ax2. In addition, osmoregulation, cytokinesis, and predation capacity do not seem to be altered in the tstD- mutant. However, tstD- produces different phagocytosis plaques than Ax2 on strains of Aeromonas salmonicida that lack a type three secretion system. Regarding the organization of the phago-endocytic pathway, it seems generally similar in both tstD- and Ax2, but the detection of the p25 protein seems affected depending on the product used for cell permeabilization and the parental strain tested. This study has made it possible to learn more about the means used to study MLBs in D. discoideum and opens the door to a better understanding of the functioning of the phago-endocytic pathway as well as the tools available to characterize it through the study of the mutant tstD-.