Orientador: José Roberto Bosqueiro / Resumo: O Diabetes mellitus (DM) é conhecido como uma doença metabólica caracterizada pela hiperglicemia de jejum levando a alterações no metabolismo de carboidratos, lipídeos e proteínas. Nos últimos anos houve um aumento de pesquisas envolvendo plantas medicinais no tratamento de muitas doenças, inclusive DM, no entanto, são poucos os dados que elucidam o mecanismo de ação dessas plantas hipoglicemiantes. O objetivo do presente trabalho foi verificar o mecanismo de ação do extrato bruto de B. holophylla em camundongos diabéticos induzidos por estreptozotocina, avaliando expressão gênica e proteica da via de sinalização de insulina em tecidos periféricos como fígado e músculo esquelético, bem como avaliar a atividade inibitória para as enzimas α- amilases e α-glicosidades em testes in vitro e in vivo. O tratamento com o extrato de B. holophylla promoveu a diminuição da expressão gênica e proteica das enzimas G6Pase, PEPCK e Glicogênio Fosforilase e aumento da expressão proteica AMPK em fígado. Em músculo, promoveu o aumento da expressão das proteínas PI3K, AKT e GLUT4 e diminuição da expressão da PTP1B. Além disso, o extrato mostrou potente atividade inibitória para as enzimas α-amilases e α-glicosidases in vitro e in vivo. Portanto, conclui-se que a atividade hipoglicemiante do extrato de B. holophylla foi através da ativação da via da glicogênese e inibição da gliconeogêse e glicogenólise em fígado, ativando as vias dependente e independente de insulina para captação de glicose em... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Submitted by NATHALIA APARECIDA DE PAULA CAMAFORTE HENRIQUES null (nah_paula@msn.com) on 2017-04-07T20:03:12Z No. of bitstreams: 1 tese de doutorado FINAL.pdf: 2502031 bytes, checksum: 903c99f0499717023da4a4ac01dd66da (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-17T14:26:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 camafortehenriques_nap_dr_bot.pdf: 2502031 bytes, checksum: 903c99f0499717023da4a4ac01dd66da (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-17T14:26:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 camafortehenriques_nap_dr_bot.pdf: 2502031 bytes, checksum: 903c99f0499717023da4a4ac01dd66da (MD5) Previous issue date: 2017-01-26 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O Diabetes mellitus (DM) é conhecido como uma doença metabólica caracterizada pela hiperglicemia de jejum levando a alterações no metabolismo de carboidratos, lipídeos e proteínas. Nos últimos anos houve um aumento de pesquisas envolvendo plantas medicinais no tratamento de muitas doenças, inclusive DM, no entanto, são poucos os dados que elucidam o mecanismo de ação dessas plantas hipoglicemiantes. O objetivo do presente trabalho foi verificar o mecanismo de ação do extrato bruto de B. holophylla em camundongos diabéticos induzidos por estreptozotocina, avaliando expressão gênica e proteica da via de sinalização de insulina em tecidos periféricos como fígado e músculo esquelético, bem como avaliar a atividade inibitória para as enzimas α- amilases e α-glicosidades em testes in vitro e in vivo. O tratamento com o extrato de B. holophylla promoveu a diminuição da expressão gênica e proteica das enzimas G6Pase, PEPCK e Glicogênio Fosforilase e aumento da expressão proteica AMPK em fígado. Em músculo, promoveu o aumento da expressão das proteínas PI3K, AKT e GLUT4 e diminuição da expressão da PTP1B. Além disso, o extrato mostrou potente atividade inibitória para as enzimas α-amilases e α-glicosidases in vitro e in vivo. Portanto, conclui-se que a atividade hipoglicemiante do extrato de B. holophylla foi através da ativação da via da glicogênese e inibição da gliconeogêse e glicogenólise em fígado, ativando as vias dependente e independente de insulina para captação de glicose em músuclo esquelético e inibindo a absorção de glicose no intestino. / Diabetes mellitus (DM) is a metabolic disease characterized by chronic hyperglycemia (equal or higher than 126 mg/dL) resulting in alterations on fatty, protein and carbohydrate metabolism. In the past years many researches of medicinal plants area to treat a great sort of diseases, including DM was done, however, there are few data with the elucidation of mechanism of action of these medicinal plants. The aim of this study was to verify the hypoglycemic mechanism of action of B. holophylla in streptozotocin diabetic mice, evaluating key-proteins and gene expression from insulin pathway in muscle and liver, and the inhibitory effect for the α-amylases and α-glucosidases in vitro and in vivo tests. We also tested the hypoglycemic effect of fractions and the isolated compound by the crude extract of B. holophylla. The treatment with the extract of B. holophylla, the gene and protein expression analysis showed a decrease of G6Pase, PEPCK and increase of AMPK and GSk3β in liver. In muscle, the treatment was able to increase the PI3K, AKT and GLUT4 and decrease of PTP1B protein expression. Beyond this, the extract showed potent inhibitory effect against α-amylases and α-glucosidases in in vitro and in vivo tests. In conclusion, the mechanism of hypoglycemic action of B. holophylla was activating glycogenesis and inhibiting gluconeogenesis and glycogenolisis in liver, activating dependents and independent insulin pathway for glucose intake in muscle and decreasing the glucose absorption in intestine. / FAPESP: 2010/10708-0

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T13:37:10Z No. of bitstreams: 1 Jobson Filipe de Paula Cajueiro.pdf: 767324 bytes, checksum: 776ab3e5c28585de71b32d4d723d5483 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T13:37:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jobson Filipe de Paula Cajueiro.pdf: 767324 bytes, checksum: 776ab3e5c28585de71b32d4d723d5483 (MD5) Previous issue date: 2014-02-07 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Hypocalcemia in dairy cows has been studied around the world, mainly due to its impact on animal production and productivity, will be related to various diseases. However, few studies have been conducted on this disease in small ruminants, especially in dairy goats. Therefore , the aim of this study was to determine the concentrations of calcium during the transition period in dairy goats in order to differentiate groups of hypocalcemic animals (G1) and normal calcium (G2), in order to infer the influence of subclinical hypocalcemia in profile metabolic thereof. For this, 35 goats, otherwise healthy, pregnant, primiparous and multiparous, crossbred or purebred dairy breeds used. Blood samples were collected by jugular venipuncture before delivery [30 , 20 and 10 days before parturition (dap)] , on the day of partum and post -partum [10,20,30,40,50 and 60 days later parturition (dpp)]. The variables measured were: glucose, non-esterified fatty acids (NEFA), β - hydroxybutyrate (BHB), cholesterol, triglycerides, amylase, total protein (TP), albumin, urea, creatinine, aspartate aminotransferase (AST), gamma glutamyl transferase (GGT), creatine kinase (CK), total calcium, phosphorus (P), magnesium (Mg), chlorides, hormones cortisol and insulin, as well as ions Ca++, Na+ and K+. Were considered to have subclinical hypocalcemia goats showed that Ca++≤ 0.72mmol/L. The statistical model used for analysis was ANOVA . In G1 concentrations of Ca++ remained below that of G2 and the biggest difference ( P < 0.001 ) occurred at parturition . The highest concentrations of NEFA were observed at birth in both groups, but were higher in G1 (P< 0.03) than the G2 at delivery and during the pre -partum. The BHB had a slight growth from beginning to 40dpp in both the G1 and G2 and there were no differences between them. The behavior of amylase was increased in antepartum reaching their highest values to 10dpp and remained stable postpartum in both groups, did not return to their initial values. A decrease in the values of triglycerides 20dap until 10dpp and differences (P<0.05) were found between the pre-and postpartum in both groups occurred. Cholesterol remained slight growth in postpartum, a little more evident in G2 than in G1, however these did not differ. Reduction in the concentration of insulin to 10dap in both groups, but in this G1 was greater (P˂0.001) that some times postpartum. The highest values of cortisol and glucose occurred at delivery and there were no differences between groups. The PT values were rising delivery to 30dpp not returning to baseline values in both G1 and G2. Albumin fell to 20dap and grew from birth up to 30dpp when returned to its initial value in both groups. The lower (P<0.05) values of total calcium is given at birth and the G1 was lower than G2 in almost the entire period. It is concluded that in subclinically goats hypocalcemic serum concentrations of Ca++ fall before the normocalcêmicas goats and remain lower throughout the transition period and that some variables of the metabolic profile as NEFA, glucose, insulin and total calcium are strongly influenced by the Ca++. Furthermore, the lower food intake by goats with subclinical hypocalcemia is one of the main factors affecting the metabolic profile and probably the productivity of these animals. However, other studies should be conducted to measure the effects of this disease in its subclinical form , the production rates and the emergence of other diseases in the transition period in dairy goats. / A hipocalcemia em vacas leiteiras tem sido objeto de estudos ao redor do mundo, principalmente em função de seu impacto na produção e produtividade animal, por estar relacionada á diversas enfermidades. Entretanto, poucos trabalhos sobre esta enfermidade foram realizados em pequenos ruminantes, sobretudo em cabras leiteiras. Portanto, o objetivo deste trabalho foi determinar as concentrações de cálcio durante o período de transição em cabras leiteiras, afim de, diferenciar grupos de animais hipocalcêmicos (G1) e normocalcêmicos (G2), com o objetivo de inferir a influência da hipocalcemia subclínica no perfil metabólico destes. Para tanto, 35 cabras, hígidas, gestantes, primíparas e multíparas, mestiças ou puras de raças leiteiras foram utilizadas. Amostras de sangue foram colhidas por venopunção jugular no pré-parto [30, 20 e 10 dias antes do parto (dap)], no dia do parto e no pós-parto [10, 20, 30, 40, 50 e 60 dias depois do parto (dpp)]. As variáveis mensuradas foram: glicose, ácidos graxos não esterificados (AGNE), β-hidroxibutirato (BHB), colesterol, triglicerídeos, amilase, proteínas totais (PT), albumina, uréia, creatinina, aspartato aminotransferase (AST), gama glutamiltransferase (GGT), creatina quinase (CK), cálcio total, fósforo (P), magnésio (Mg), cloretos, os hormônios cortisol e insulina, bem como os íons Ca++, Na+ e K+. Foram considerados com hipocalcemia subclínica as cabras que apresentaram Ca++≤0,72mmol/L. O modelo estatístico empregado para análise dos resultados foi a ANOVA. No G1 as concentrações de Ca++ mantiveram-se sempre abaixo do G2 e a maior diferença (P<0,001) ocorreu no dia do parto. As maiores concentrações de AGNE foram verificadas no parto, em ambos os grupos, porém no G1 foram maiores (P<0,03) que no G2 no parto e durante o pré-parto. O BHB teve um discreto crescimento do início até o 40dpp, tanto no G1 quanto no G2 e não houve diferenças entre eles. O comportamento da amilase foi crescente no pré-parto alcançando seus maiores valores aos 10dpp e manteve-se estável no pós-parto, em ambos os grupos, não retornando aos seus valores iniciais. Ocorreu uma queda nos valores dos triglicerídeos dos 20dap até os 10dpp e diferenças (P<0,05) foram verificadas entre o pré e o pós-parto, em ambos os grupos. O colesterol manteve discreto crescimento no pós parto, um pouco mais evidente no G2 que no G1, entretanto estes não diferiram. Houve redução na concentração da insulina aos 10dap em ambos os grupos, porém no G1 esta foi mais expressiva (P˂0,001) que alguns momentos do pós-parto. Os maiores valores do cortisol e da glicose ocorreram no parto e não ocorreram diferenças entre os grupos. Os valores de PT foram crescentes do parto aos 30dpp não retornando aos valores iniciais tanto no G1 quanto no G2. A albumina caiu aos 20dap e apresentou crescimento a partir do parto até aos 30dpp quando retornou ao seu valor inicial em ambos os grupos. Os menores (P<0,05) valores do cálcio total se deram no parto e o G1 foi menor que o G2 em quase todo o período. Conclui-se então que em cabras subclinicamente hipocalcêmicas as concentrações séricas do Ca++ caem antes que nas cabras normocalcêmicas e permanecem mais baixas durante todo o período de transição e que algumas variáveis do perfil metabólico como AGNE, glicose, insulina e o cálcio total sofrem forte influência do Ca++. Além disso, a menor ingestão alimentos pelas cabras com hipocalcemia subclínica é um dos principais fatores de interferência no perfil metabólico e provavelmente na produtividade destes animais. Contudo, outros trabalhos devem ser realizados a fim de mensurar os efeitos desta doença, na sua forma subclínica, nos índices produtivos e no surgimento de outras enfermidades no período de transição em cabras leiteiras.