LINO, Juliana Arcanjo. Efeito protetor da amifostina na neuropatia sensitiva periférica experimental induzida por oxaliplatina. 2011. 134 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-04-12T13:07:05Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_jalino.pdf: 9085073 bytes, checksum: 0d105aa873f279927dcd40623cde4463 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-04-13T16:16:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_jalino.pdf: 9085073 bytes, checksum: 0d105aa873f279927dcd40623cde4463 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-04-13T16:16:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_jalino.pdf: 9085073 bytes, checksum: 0d105aa873f279927dcd40623cde4463 (MD5) Previous issue date: 2011 / Oxaliplatin (OXP) is a third-generation platinum agent with potent cytotoxic activity in several cancers. Its limiting toxicity is a sensory peripheral neuropathy (SPN) of acute onset, which becomes chronic after cumulative doses. Amifostine (AMF) is a broad spectrum antioxidant and is currently being studied as a cell-protecting agent against the adverse effects of radiotherapy and chemotherapy in cancer patients. This study was aimed to evaluate the effect of AMF on plantar mechanical hyperalgesia and thermal allodynia, as well as on histopathological alterations and immune expression of markers such as c-Fos protein, caspase 3, IL-1, nitrotyrosine, iNOS, nNOS and NMDA, observed in experimental OXL-induced SPN. The study was approved by the Ethics Committee on Animal Research, Federal University of Ceará, through protocol 27/08. Male Swiss mice (25-35g) were treated with OXL (1 mg/kg, i.v.) and pre-treated with AMF (1, 5, 25, 50 or 100 mg/kg, s.c.) for 4,5 weeks, in addition to the performance of nociceptive tests. Thermal allodynia was evaluated by tail immersion in cold water (10ºC), and plantar mechanical hyperalgesia by the Electronic Von Frey test. The histopathological and immunohistochemical analysis of samples taken from the dorsal horn of the lumbar spinal cord of the animals was performed in 24 hours, 7, 14, 21 and 28 days. OXP significantly decreased mechanic and thermal nociceptive threshold since 21th day (p<0,001) and 14th day (p<0,01), respectively, when compared to control group. AMF treatment inhibited these effects in all doses tested (p<0,001), and the dose of 25mg/kg had the most significant effect. Locomotor impairment was not evidenced through Rota-Rod test. Furthermore, we observed edema and neurons atrophy in dorsal horn of OXP group, not showed in AMF group. OXP group had overexpression of c-Fos, caspase 3, nNOS, iNOS, and nitrotyrosine, but a reduced NMDA receptor expression when compared to control group. AMF group had hypoexpression of c-Fos and nitrotyrosine and increased NMDA receptor expression, but not altered caspase 3, nNOS and iNOS expression. There was no immunoexpression of IL-1 in the tested groups. Although preliminary, the data suggest that AMF promoted an important protection in OXL-induced SPN sensory changes, since it inhibited the hyperalgesia and allodynia, as well as the immunoexpression of c-Fos. Additionally AMF promoted significant protective action on tissue lesions, being able to exert antioxidant and antiapoptotic action by inhibiting the expression of nitrotyrosine and increasing expression of NMDA receptors, respectively. / Oxaliplatina (OXL) é um agente platínico de 3ª geração com potente atividade citotóxica em diversos cânceres. Tem como toxicidade limitante uma neuropatia sensitiva periférica (NSP) de início agudo, tornando-se crônica com doses cumulativas. Amifostina (AMF) é um agente antioxidante de largo espectro, que vem sendo atualmente estudado na citoproteção dos efeitos adversos da radioterapia e quimioterapia do câncer. Esta pesquisa objetivou avaliar o efeito da AMF sobre a hiperalgesia mecânica plantar e alodinia térmica, assim como sobre as alterações histopatológicas e imunoexpressão de marcadores, tais como a proteína c-Fos, caspase 3, IL-1, nitrotirosina, NOSi, NOSn e NMDA, observadas na NSP experimental induzida por OXL. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da Universidade Federal do Ceará, com o protocolo 27/08. Camundongos Swiss machos (25-35g) foram tratados com OXL (1mg/kg, i.v.) e pré-tratados com AMF (1, 5, 25, 50 ou 100mg/kg, s.c.) por 4,5 semanas, paralelamente aos testes nociceptivos. A alodínia térmica foi avaliada pelo teste de imersão da cauda em água fria (10ºC) e a hiperalgesia mecânica plantar pelo teste do Von Frey Eletrônico. Foi realizada a análise histopatológica e imunohistoquímica de amostras obtidas do corno dorsal da medula espinhal lombar dos animais em 24h, 7, 14, 21 e 28 dias. Demonstrou-se que a OXL diminuiu significativamente o limiar nociceptivo mecânico e térmico, a partir do 21º dia (p<0,001) e 14º dia (p<0,01), respectivamente, quando comparados ao grupo controle. O tratamento com AMF inibiu esses efeitos em todas as doses testadas (p<0,001), sendo a dose de 25mg/kg aquela com efeito mais significativo. No teste do Rota-Rod não foi observada variação significativa entre os grupos, indicando ausência de comprometimento motor. Na análise histopatológica foram observados edema do tecido nervoso e atrofia dos neurônios nos animais tratados com OXL, o que não ocorreu nos animais pré-tratados com AMF. Observou-se a imunoexpressão importante de c-Fos, caspase 3, NOSn, NOSi e nitrotirosina nos animais tratados apenas com OXL, e uma imunoexpressão reduzida do receptor NMDA, quando comparado com o grupo controle. AMF reduziu a expressão de c-Fos e de nitrotrosina, mas não da caspase 3, NOSn e NOSi, e aumentou a expressão do receptor NMDA. Não houve imunoexpressão de IL-1 nos grupos testados. Embora preliminares, os dados sugerem que a AMF promoveu uma importante proteção nas alterações sensitivas da NSP induzida por OXL, desde que inibiu a hiperalgesia e a alodinia, além da imunoexpressão de c-Fos. Adicionalmente AMF promoveu importante ação protetora nas lesões teciduais, sendo capaz de exercer ação antioxidante e antiapoptótica, através da inibição da expressão de nitrotirosina e do aumento da expressão do receptor NMDA, respectivamente.

PONTES, Renata Bessa. Desenvolvimento de modelo experimental de neuropatia sensitiva periférica induzida pelo agente antineoplásico oxaliplatina em camundongos. 2009. 132 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-11T13:46:09Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_rbpontes.pdf: 1412246 bytes, checksum: 85a8fe5226022dbfb049f0bba5afde76 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-14T16:02:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_rbpontes.pdf: 1412246 bytes, checksum: 85a8fe5226022dbfb049f0bba5afde76 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-14T16:02:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_rbpontes.pdf: 1412246 bytes, checksum: 85a8fe5226022dbfb049f0bba5afde76 (MD5) Previous issue date: 2009 / Oxaliplatin (OXL) is a third-generation platinum-based chemotherapy with broad spectrum of anti-tumoral activity. Exhibt potent cytotoxic activity including against cancer colorectal, ovarian and lung cancer. Among the toxic effects are: laryngospasm, nauseas, vomiting, fatigue and peripheral neuropathy, focus of that work. That research planned to develop an experimental model for study of the peripheral neuropathy induced by OXL in mice that are animal genetically more similar to the human, economic and given the knockout species existence for several factors. The study was approved by the Committee of Ethics in Animal Research of the UFC (protocol nº 70/07). Mice Swiss male (20-40g) were treated with OXL (1-4 mg/kg, EV) for 4 weeks in parallel to the neurophatic tests utilized for evaluate the development of the peripheral neuropathy and Route Rod for verify some motor compromise. To mechanical hyperalgesia and allodynia thermal were evaluated by the test of immersion of the tail (TIC) in cold water (4 or 10ºC) and in water heated (46 or 42ºC). The test of hyperalgesia and allodynia (HPM; Von Frey) consisted of the stimulation of the rear paws with a sensor of force (g) up to his retreat by a movement of "flinch". It was still verified the analgesic action of the carbamezepine (CZP), oxcarbazepine (OZP), gabapentin (GABAP) and indomethacin (INDO) in the TIC cold water. It was carried out to immunohistochemical of the hands paws of the animals in 24h and of 7 to 28 days. The results shows that in the HPM had a significant reduction (p<0,001) in the nociceptive threshold from the 14º day reaching the maximum one in the dose of 2mg/kg compared to the control group. In the TIC 4ºC had a significant reduction (p<0,05) in the nociceptive threshold in the 56º day, in the TIC allodynia by the cold one (10ºC) was observed a significant reduction (p<0,01) in the nociceptive threshold also in the 56º day, in the TIC allodynia by the hot one (42ºC) was observed a significant reduction (p<0,05) in the nociceptive threshold from the 35º day. Those tests reached the maximum one in the dose of 1mg/kg compared with the control group and in the TIC 46ºC was observed a significant reduction (p<0,01) in the nociceptive threshold from the 49º day reaching the maximum one in the doses of 1 and 4mg/kg compared to the control group. In the test Route Rod no significant variation was observed in no of the groups, indicating the absence of motor compromise. The handling with CZP (0,3-30mg/kg), OZP (0,3-100mg/kg) and GABAP (6-54mg/kg) increased the nociceptive threshold, indicating analgesic effect and INDO (1-4mg/kg) did not show analgesic activity in that model. In the analysis of the immunohistochemical was verified that exists the probable participation of SP, CGRP and NMDA peripheral and nitrotyrosine. Therefore, the use of mice and of the different approach of administration of the OXL (EV) can be utilized in future models making feasible the use of the drug for handling of the cancer, mainly the colorectal, with all the therapeutic plan without that to NSP interfere in the activities of the treated patient. / Oxaliplatina (OXL) é a 3ª geração de agentes platinos com amplo espectro de atividade antitumoral. Exibe potente atividade citotóxica, incluindo câncer colorretal, ovariano e pulmonar. Dentre os efeitos tóxicos estão: laringoespasmo, náuseas, vômitos, fadiga e neuropatia periférica, foco desse trabalho. Essa pesquisa objetivou desenvolver um modelo experimental para estudo da neuropatia sensitiva periférica induzida por OXL em camundongos que são animais geneticamente mais semelhantes ao ser humano, econômicos e dado a existência de espécies diferentes para vários fatores. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da UFC (protocolo nº 70/07). Camundongos Swiss machos (20-40g) foram tratados com OXL (1-4 mg/kg, EV) por 4 semanas paralelamente aos testes neuropáticos utilizados para avaliar o desenvolvimento da neuropatia sensitiva e Rota Rod para verificar comprometimento motor. A hiperalgesia e alodínia térmica foram avaliadas pelo teste de imersão da cauda (TIC) em água fria (4 ou 10ºC) e em água aquecida (46 ou 42ºC). O teste de hiperalgesia e alodínia mecânico (HPM; Von Frey) consistiu na estimulação das patas traseiras com um sensor de força (g) até a sua retirada por um movimento de “flinch”. Foi ainda verificado a ação analgésica da carbamezepina (CZP), oxcarbazepina (OZP), gabapentina (GABAP) e indometacina (INDO) no TIC água fria. Foi realizado a imunohistoquímica das patas traseiras dos animais em 24h e de 7 a 28 dias. Como resultados observou-se que no HPM houve uma diminuição significativa (p<0,001) no limiar nociceptivo a partir do 14º dia atingindo o máximo na dose de 2mg/kg comparado ao grupo controle. No TIC 4ºC houve uma diminuição significativa (p<0,05) no limiar nociceptivo no 56º dia, no TIC alodínia pelo frio (10ºC) foi observado uma diminuição significativa (p<0,01) no limiar nociceptivo também no 56º dia, no TIC alodínia pelo quente (42ºC) foi observado uma diminuição significativa (p<0,05) no limiar nociceptivo a partir do 35º dia. Esses testes atingiram o máximo na dose de 1mg/kg comparados com o grupo controle e no TIC 46ºC foi observado uma diminuição significativa (p<0,01) no limiar nociceptivo a partir do 49º dia atingindo o máximo na dose de 1 e de 4mg/kg comparado ao grupo controle. No teste Rota Rod nenhuma variação significativa foi observada em nenhum dos grupos, indicando a ausência de comprometimento motor. O tratamento com CZP (0,3-30mg/kg), OZP (0,3-100mg/kg) e GABAP (6-54mg/kg) aumentou o limiar nociceptivo, indicando efeito analgésico e INDO (1-4mg/kg) não demonstrou atividade analgésica nesse modelo. Na análise da imunohistoquímica ficou comprovado que existe a participação provável de SP, CGRP e NMDA periféricos e nitrotirosina. Portanto, o uso de camundongos e do diferente método de administração da OXL (EV) pode ser utilizado em modelos futuros viabilizando o uso do fármaco para tratamento do câncer, principalmente o colorretal, com todo o esquema terapêutico, sem que a NSP interfira nas atividades de vida do paciente tratado.

PEREIRA, Anamaria Falcão. Papel do oxalato na neuropatia sensitiva periférica induzida por oxaliplatina em camungondos: comparação entre a oxaliplatina e seu análogo livre de oxalato. 2015. 132 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-12-01T11:55:07Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_afpereira.pdf: 7609663 bytes, checksum: f3e33f5179642dd8d68a256fc098954f (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-12-01T12:20:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_afpereira.pdf: 7609663 bytes, checksum: f3e33f5179642dd8d68a256fc098954f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-01T12:20:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_afpereira.pdf: 7609663 bytes, checksum: f3e33f5179642dd8d68a256fc098954f (MD5) Previous issue date: 2015 / Oxaliplatin (OXL) is a third generation platinum compound with potent cytotoxic activity against several types of cancers, having a side effect is difficult to treat, a severe peripheral neuropathy. Studies suggest that oxalate, OXL metabolite, is involved in the development of peripheral sensory neuropathy (PSN); so that was published the synthesis of an OXL analogue (LLC-1402), oxalate free, which has antitumor properties (LIU et al., 2013). The objective of this research is to study the role of oxalate in OXL induced neuropathy in mice, comparing OXL with LLC-1402. The PSN was induced by two injections (iv.) OXL (2 mg/ kg) per week, in male Swiss mice, for 4 ½ weeks, totaling 9 injections. LLC-1402 (7, 14 and 28 mg / kg) was administered (iv.) following the same scheme. Nociceptive tests were performed (electronic von Frey and tail immersion test) weekly. After, it was chosen dose of 14 mg / kg of the LLC-1402 to perform another experiment, in which was added oxalate injection (1.7 mg/kg). In the 28th day, it was made blood collection for total leukocyte count and biochemical measurement. In the 28th and 56th days, spinal cord and DRG were removed for immunofluorescence for ATF-3, c-FOS, iNOS and NeuN. The results showed that both OXL and LLC-1402 were able to decrease the paw withdrawal threshold and tail withdrawal time significantly (p<0.05) compared to the control group. The injection of LLC-1402 together with oxalate and only oxalate was also able to reduce the paw withdrawal threshold and the tail withdrawal time. Moreover, all groups treated with OXL, LLC-1402 and oxalate showed a significant reduction in the total leukocyte count. The biochemical measurement (glutamic oxaloacetic transaminase, glutamic pyruvic transaminase, urea, creatinine) showed no statistical difference between the groups. The results also showed increased c-Fos immunoexpression in GRD in groups treated with OXL, LLC-1402 and LLC-1402 together with oxalate in the 28 and 56 days, and only oxalate the 28th day. This increase was observed in the dorsal horn of the spinal cord at 28th day in all the treated groups. It was not observed this increase in the dorsal horn of the spinal cord in the 56th day. It was observed an increase in immunoexpression of ATF3 in DRG and spinal cord of dorsal horn in all treated groups in the 28th and 56th days. iNOS immunofluorescence showed no significant difference between groups in the DRG nor spinal cord, already in the 28th day, there was an increase in immunoexpression of iNOS in GRD. Thus, the results showed that the oxalate may be partially involved in PSN induced OXL. / Oxaliplatina (OXL) é um composto de platina de terceira geração com potente atividade citotóxica contra vários tipos de câncer, possuindo um efeito colateral de difícil tratamento, uma severa neuropatia periférica. Estudos sugerem que o oxalato, metabólito da OXL, está envolvido no desenvolvimento dessa neuropatia sensitiva periférica (NSP); de modo que foi publicada a síntese de um análogo (LLC-1402) da OXL, livre de oxalato, tendo propriedades antitumorais (LIU et al., 2013). O objetivo do trabalho é estudar o papel do oxalato na neuropatia induzida por OXL em camundongos, comparando a OXL com LLC-1402. A NSP foi induzida por 2 injeções (iv.) por semana de OXL (2 mg/kg), em camundongos machos Swiss, durante 4 ½ semanas, totalizando 9 injeções. LLC-1402 (7, 14 e 28 mg/kg) foi administrado (iv.) seguindo o mesmo esquema. Foram realizados testes nociceptivos (Von Frey eletrônico e TIC), semanalmente. Depois, foi escolhida a dose de 14 mg/kg do LLC-1402 para fazer um outro experimento, no qual foi acrescentada a injeção ip. de oxalato (1,7 mg/kg). No 28º dia, foi feita coleta de sangue para contagem total de leucócitos e dosagens bioquímicas. Nos 28° e 56º dias, foi feita a coleta de medula espinhal e GRD para imunofluorescência para ATF-3, c-FOS, iNOS e NeuN. Os resultados mostraram que a OXL e o LLC-1402 foram capazes de diminuir o limiar de retirada da pata e o tempo de retirada da cauda significativamente (p<0,05), comparado ao grupo controle. A injeção de LLC-1402 junto com oxalato e somente oxalato também foi capaz de reduzir o limiar de retirada da pata e o tempo de retirada da cauda. Os grupos tratados com OXL, LLC-1402 e oxalato mostraram uma redução significativa da contagem total de leucócitos. Para as dosagens bioquímicas (TGO, TGP, ureia, creatinina), não houve diferença estatística entre os grupos. Houve um aumento da imunoexpressão de c-Fos no GRD nos grupos tratados com OXL, LLC-1402 e LLC-1402 junto com oxalato nos 28° e 56° dias, e somente oxalato no 28° dia. Foi observado esse aumento no corno dorsal da medula espinhal no 28° dia em todos os grupos tratados. Foi observado um aumento da imunoexpressão de ATF-3, no GRD e corno dorsal da medula espinhal, em todos os grupos tratados, nos 28° e 56° dias. Não houve diferença significativa entre os grupos no GRD nem medula espinhal na imunoexpressão de iNOS no 56° dia; já, no 28° dia, houve um aumento da imunoexpressão de iNOS no GRD. Os resultados mostraram que o oxalato pode estar envolvido parcialmente na NSP induzida por OXL.

PONTES, Renata Bessa. Envolvimento da endotelina-1, de receptores (TRPV1 E NMDA) e da substância p na neuropatia sensitiva periférica induzida pelo agente antineoplásico oxaliplatina. 2015. 138 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-12-01T12:05:39Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_rbpontes.pdf: 1953785 bytes, checksum: 7c89921708b538e38f85458d5b33f44e (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-12-01T12:21:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_rbpontes.pdf: 1953785 bytes, checksum: 7c89921708b538e38f85458d5b33f44e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-01T12:21:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_rbpontes.pdf: 1953785 bytes, checksum: 7c89921708b538e38f85458d5b33f44e (MD5) Previous issue date: 2015 / Introduction: The cumulative neurotoxicity is a toxicity that can result from oxaliplatin-based therapy (OXL), which is the 3rd generation platinum agent with broad spectrum of antitumor activity, including colorectal, ovarian and lung cancer. Neurotoxicity associated with OXL generates a dose-limiting toxicity, chronic, peripheral sensory neuropathy (NSP). Objective: To investigate the involvement of endothelin-1, TRPV1 receptors and NMDA and substance P involved in the pathogenesis of peripheral sensory neuropathy induced by oxaliplatin antineoplastic agent. Methods: Male Swiss mice (20g) were pre-treated with antagonists of endothelin-1 receptors (Bosentan 100mg / kg orally; BQ-123 and BQ-788 30μl, intraplantar) and TRPV1 receptor antagonists (capsazepine, 5mg / kg , IP), antagonist of NK-1 receptor for substance P (apreptanto, 1 mg / kg, IP), and a NMDA receptor antagonist (MK-801, 0.5mg / kg, IP) 30 minutes before administration of OXL (1mg / kg, IV) for 4.5 weeks. Parallel nociceptive tests performed to assess the development of peripheral sensory neuropathy. The hyperalgesia assessed by the tail immersion test (ICT) in cold water (10° C) or warm (43° C) and test Von Frey (HPM). Then it was performed spinal segment, and the dorsal root ganglion immunofluorescence and RT-PCR the Ethics Committee approved the study for Animal Research UFC (Protocol 75/12). Results: The results observed when using the antagonists, as a pretreatment to the use of OXL there was attenuation of the induced hyperalgesia (NSP) OXL. Upon administration of selective antagonists of endothelin in the right paw was significant reduction in paw hyperalgesia in the right (treated) compared to the left paw (control). By analyzing the gene expression of cFos, NK-1 and endothelin B receptor, it was observed that there was significant reduction of expression of the markers in pre-treated bosentan group versus OXL group that showed increased expression for these markers. Conclusion: It was concluded in this study that there is evidence of the role of endothelin-1 receptors (TRPV1 and NMDA) and substance SP in the pathogenesis of NSP induced antineoplastic agent OXL. / Introdução: A neurotoxicidade cumulativa é uma toxicidade que pode advir da terapia à base de oxaliplatina (OXL), que é a 3ª geração de agentes platinos com amplo espectro de atividade antitumoral, incluindo câncer colorretal, ovariano e pulmonar. A neurotoxicidade associada à OXL gera uma toxicidade dose-limitante, crônica, a neuropatia sensitiva periférica (NSP). Objetivo: Investigar o envolvimento da endotelina-1, de receptores TRPV1 e NMDA e da substância P envolvidos na patogênese da neuropatia sensitiva periférica induzida pelo agente antineoplásico oxaliplatina. Materiais e métodos: O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da UFC (protocolo nº 75/12). Camundongos Swiss machos (20g) foram pré-tratados com antagonistas de receptores de endotelina-1 (Bosentana 100mg/kg, VO; BQ-123 e BQ-788 30µl, intraplantar) e antagonistas do receptor TRPV1 (capsazepina, 5mg/kg, IP), antagonista do receptor NK-1 da Substancia P (apreptanto, 1mg/kg, IP) e antagonista de receptores NMDA (MK-801, 0,5mg/kg, IP) 30 minutos antes da administração de OXL (1mg/kg, IV) por 4 semanas e meia. Paralelamente foram realizados testes nociceptivos para avaliar o desenvolvimento da neuropatia sensitiva periférica. A hipernocicepção foi avaliada pelo teste de imersão da cauda (TIC) em água fria (10ºC) ou aquecida (43ºC) e pelo teste Von Frey (HPM). Em seguida, foi realizado imunofluorescência do segmento medular e gânglio da raiz dorsal e RT-PCR. Resultados: Como resultados observou-se que com o pré-tratamento ao uso de OXL que houve atenuação da hiperalgesia da NSP induzida por OXL. Ao realizar a administração de antagonistas seletivos de endotelina-1 intraplantar na pata direita observou-se redução significativa na hiperalgesia na pata direita (tratada) em comparação à pata esquerda (controle). Ao analisar a expressão gênica para cFos, NK-1 e o receptor de endotelina B, observou-se que houve redução significativa da expressão dos marcadores no grupo pré-tratado com Bosentana ao comparar com o grupo OXL, que demonstrou a expressão aumentada para esses marcadores. Conclusão: Conclui-se no presente estudo que há evidências do papel da endotelina-1, de receptores (TRPV1 e NMDA) e da substância P na patogênese da NSP induzida pelo agente antineoplásico OXL

PEREIRA, L. M. S. Neuropatia sensitiva periférica induzida por oxaliplatina em camundongos: influência do Diabetes Mellitus e o efeito protetor da metformina. 2017. 141 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-02T15:31:47Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_lmspereira.pdf: 3082215 bytes, checksum: 43d36dfd736f933c7b7118d03f6d6def (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-02T15:31:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_lmspereira.pdf: 3082215 bytes, checksum: 43d36dfd736f933c7b7118d03f6d6def (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-02T15:31:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_lmspereira.pdf: 3082215 bytes, checksum: 43d36dfd736f933c7b7118d03f6d6def (MD5) Previous issue date: 2017-01-18 / Retrospective clinical studies have shown no significant statistical difference between diabetic and non-diabetic patients to present peripheral sensory neuropathy (PSN) using cumulative doses of oxaliplatin (OXL). These studies, however, present limitations on the reduced number of patients investigated and the difficulty to obtain a control group compatible with the treated group and exclusion of patients with initial degrees of neuropathy. Metformin (MTF) is an oral antihyperglycemic drug widely used in the treatment of type 2 diabetes mellitus. Studies have also shown important role of MTF in the fight against cancer and neuropathy caused by chemotherapy. In the present study, we aimed to study whether a pre-existing condition of diabetes mellitus (DM) could influence the onset and / or course of OXL-induced PSN and the protective effect of MTF on OXL-induced PSN. DM and PSN were each induced with alloxan (50 mg/kg, iv) single dose and OXL (4.0 mg/kg, iv) twice a week for 4.5 weeks respectively in mice that were evaluated weekly for 35 or 56 days. Nociceptive tests (Von Frey, rota-rod and tail immersion test) were performed on blood glucose and weight-for-weight measurements before and after animal treatments weekly or biweekly. After the 35- or 56-day periods the pancreas, dorsal root ganglion (DRG) and spinal cord (SC) of the animals were removed for immunofluorescence and analysis for neuronal activation protein (c-Fos) and transcription factor and activation 3 (ATF-3). The results showed that alloxan (50 mg/kg, iv) was the best dose capable of inducing DM in the animals without causing neuropathy or altering the reaction time in the animals in the rota-rod in relation to the control group. OXL (4.0 mg/kg, iv) was the best dose able to induce PSN in animals without altering the motor coordination of the animals in the spinning rod. The combination of the treatments with the best doses of alloxan and OXL induced DM with hyperglycemia and weight loss in animals significantly (p <0.05) compared to the control and OXL groups. OXL treatment induced PSN from the 28th day in the animals. In addition, the combination of alloxan and OXL treatments in addition to anticipating the PSN from the 28th day to the 21st day also amplified the establishment of the PSN in the animals compared to the OXL group. Analysis of the pancreas of the animals treated with alloxan and combined with OXL showed a decrease in the number of islets of Langerhans besides the presence of areas with intense basophilia and acinar cells with basophilic cytoplasm and disarrangement of the glandular architecture in comparison to the control group. Treatment of the animals with OXL combined with MTF (250 mg/kg, po) decreased the intensity of the PSN, and delayed tail removal time from animals from day 14 to day 28 significantly compared to OXL group. In addition, we observed increased immunoexpression of c-Fos and ATF-3 in the DRG of OXL-treated animals significantly compared to the control group. Already the treatment of the animals with MTF combined with OXL decreased the immunoexpression of c-Fos and ATF-3 in the animals DRG significantly compared to the OXL group. We also observed increased ATF-3 immunoexpression in SC of OXL-treated animals significantly compared to the control group, which was prevented by treatment of the MTF animals. There was no significant difference in c-Fos immunoexpression in SC between the treated groups and control. In the present study, the use of mice with DM associated with alloxan-induced hyperglycemia both anticipated and amplified the development of OXL-induced PSN. Additionally, we have demonstrated that the neuroprotective role of MTF probably occurs in the peripheral nervous system due to the decrease of c-Fos immunoexpression in the DRG, and there is no decrease in the immunoexpression in the SC. / Estudos clínicos retrospectivos mostraram não haver diferença estatística significativa entre pacientes diabéticos e não diabéticos em apresentar neuropatia sensitiva periférica (NSP) em uso de doses cumulativas de oxaliplatina (OXL). Estes estudos, porém apresentam limitações quanto ao número pequeno de pacientes investigados e dificuldade de se obter um grupo controle compatível com o grupo tratado e exclusão de pacientes com graus iniciais de neuropatia. A metformina (MTF) é um fármaco anti-hiperglicêmico oral bastante utilizado no tratamento do diabetes mellitus tipo 2. Estudos mostraram também importante papel da MTF no combate do câncer e neuropatia provocada por quimioterapia. No presente estudo, objetivou-se estudar se uma condição pré-existente de diabetes mellitus (DM) poderia influenciar o início e/ou curso da NSP induzida por OXL e o efeito protetor da MTF nessa condição. O DM e a NSP foram induzidas respectivamente com aloxano (50 mg/Kg, iv) em dose única e OXL (4,0 mg/Kg, iv) 2x por semana por 4,5 semanas em camundongos que foram avaliados semanalmente durante 35 ou 56 dias. Foram realizados testes nociceptivos (Von Frey, rota-rod e teste de imersão da cauda) dosagens de glicemia e avaliação ponderal antes e após os tratamentos dos animais semanalmente ou quinzenalmente. Após os períodos de 35 ou 56 dias o pâncreas, gânglio da raiz dorsal (GRD) e medula espinhal (ME) dos animais foram retirados para análise e imunofluorescência para proteína de ativação neuronal (c-Fos) e fator de transcrição e ativação 3 (ATF-3). Os resultados mostraram que aloxano (50 mg/Kg, iv) foi a melhor dose capaz de induzir DM nos animais sem causar neuropatia nem alterar o tempo de reação nos animais no rota-rod em relação ao grupo controle. A OXL (4,0 mg/Kg, iv) foi a melhor dose capaz de induzir NSP nos animais sem alterar a coordenação motora dos animais na barra giratória. A combinação dos tratamentos com as melhores doses de aloxano e OXL induziu DM com hiperglicemia e perda de peso nos animais de maneira significativa (p<0,05) em comparação ao grupo controle e OXL. Já o tratamento com OXL induziu NSP a partir do 28º dia nos animais. Adicionalmente a combinação dos tratamentos com aloxano e OXL além de antecipar a NSP do 28º dia para o 21º dia também amplificou o estabelecimento da NSP nos animais em comparação ao grupo OXL. A análise do pâncreas dos animais tratados com aloxano e combinado com OXL mostrou diminuição do Nº de ilhotas de Langerhans além da presença de áreas com intensa basofilia e células acinares com citoplasma basófilo e desarranjo da arquitetura glandular em comparação ao grupo controle. O tratamento dos animais com OXL combinado com MTF (250 mg/Kg, vo) diminuiu a intensidade da NSP, além de retardar o tempo de retirada da cauda dos animais do 14º dia para o 28º dia de maneira significativa em comparação ao grupo OXL. Adicionalmente, observamos aumento da imunoexpressão de c-Fos e ATF-3 no GRD dos animais tratados com OXL de maneira significativa em comparação ao grupo controle. Já o tratamento dos animais com MTF combinado com OXL diminuiu a imunoexpressão de c-Fos e ATF-3 no GRD dos animais de maneira significativa em comparação ao grupo OXL. Observamos também aumento da imunoexpressão de ATF-3 na ME dos animais tratados com OXL de maneira significativa em comparação ao grupo controle, o que foi prevenido pelo tratamento dos animais com MTF. Não houve diferença significativa na imunoexpressão de c-Fos na ME entre os grupos tratados e controle. No presente estudo, a utilização de camundongos com DM associada com hiperglicemia induzido por aloxano tanto anteciparam como amplificaram o desenvolvimento da NSP induzida por OXL. Adicionalmente, demonstramos que o papel neuroprotetor da MTF provavelmente aconteça no sistema nervoso periférico devido á diminuição da imunoexpressão de c-Fos no GRD, não havendo diminuição da imunoexpressão na ME.

Indivíduos diabéticos, principalmente aqueles que desenvolvem neuropatia periférica, são suscetíveis ao desenvolvimento de úlceras plantares relacionadas à neuropatia e ao aumento da pressão plantar na região anterior dos pés, decorrentes tanto da perda de sensibilidade quanto das deformidades nos pés, ambas associadas ao curso da doença. Indivíduos pré-diabéticos também apresentam risco em potencial para o desenvolvimento de neuropatias periféricas. A presente pesquisa teve como objetivo principal, estudar a distribuição da pressão plantar, através da baropodometria dinâmica, em um grupo de indivíduos diabéticos e um grupo de indivíduos pré-diabéticos (ambos com ou sem neuropatia periférica sensitivo motora ou autonômica cardíaca), em comparação à indivíduos controle. As variáveis baropodométricas foram comparadas entre os grupos e correlacionadas a fatores que podem interferir na distribuição da pressão plantar. O grupo diabético apresentou alteração na distribuição da pressão plantar, com aumento dos valores das variáveis picos de pressão plantar e integral da pressão versus o tempo nas regiões do mediopé, metatarsos e hálux, sem associação aos demais fatores intervenientes estudados, além de apresentar aumento do tempo de contato total do passo e do percentual do tempo de contato durante o passo na região do mediopé. O grupo pré-diabético apresentou um padrão similar ao diabético, em relação à distribuição da pressão plantar e aos demais parâmetros baropodométricos, exceto no tempo de contato total do passo que foi similar ao grupo controle. Conclui-se que indivíduos diabéticos sem deformidades nos pés, com e sem neuropatia periférica, apresentam alterações na distribuição da pressão plantar, e que os indivíduos pré-diabéticos já apresentam alterações similares às encontradas nos diabéticos. / Subjects with diabetic disease, mainly that with peripheral neuropathy, are susceptible to develop plantar ulcers that could be associated with neuropathy or with the high plantar pressure values found in the plantar forefoot (midfoot, metatarsal heads and hallux) due the peripheral sensory loss and/or foot deformities that occurs as the developing of diabetes. Pre-diabetic subjects show a potential risk for peripheral neuropathy development, too. The main objective of this work was to study the plantar pressure distribution, through baropodometry access, in a group of diabetic and a group of pre-diabetic subjects (both the two groups with or without peripheral neuropathy or autonomic cardiac neuropathy) comparing to a group of healthy subjects. The baropodometric variables were compared among the three groups and correlated whit intervenient factors that could modify plantar pressure distribution. The diabetic group showed alterations in plantar pressure distribution with increased peak plantar pressures and pressure time integral at midfoot, metatarsal heads and hallux, without association whit other studied intervenient factors, and an increase in the total step time contact and percentage of contact time, during the roll over progress, in the midfoot. The pre-diabetic group presented a plantar pressure distribution pattern and baropodometric parameters similar to the diabetic group, excepting the total step time contact which was similar to the healthy group. This fact is been shown for the first time and points to a demand of interventions to pre-diabetic in order to prevent plantar injuries, like ulcers. In conclusion, diabetic subjects without foot deformities, with or without peripheral neuropathy show early modifications in plantar pressure distribuition and pre-diabetic sujtects can show modifications in plantar pressure distribution similar to those found in the diabetic subjects.

Resumo não disponível.

Indivíduos diabéticos, principalmente aqueles que desenvolvem neuropatia periférica, são suscetíveis ao desenvolvimento de úlceras plantares relacionadas à neuropatia e ao aumento da pressão plantar na região anterior dos pés, decorrentes tanto da perda de sensibilidade quanto das deformidades nos pés, ambas associadas ao curso da doença. Indivíduos pré-diabéticos também apresentam risco em potencial para o desenvolvimento de neuropatias periféricas. A presente pesquisa teve como objetivo principal, estudar a distribuição da pressão plantar, através da baropodometria dinâmica, em um grupo de indivíduos diabéticos e um grupo de indivíduos pré-diabéticos (ambos com ou sem neuropatia periférica sensitivo motora ou autonômica cardíaca), em comparação à indivíduos controle. As variáveis baropodométricas foram comparadas entre os grupos e correlacionadas a fatores que podem interferir na distribuição da pressão plantar. O grupo diabético apresentou alteração na distribuição da pressão plantar, com aumento dos valores das variáveis picos de pressão plantar e integral da pressão versus o tempo nas regiões do mediopé, metatarsos e hálux, sem associação aos demais fatores intervenientes estudados, além de apresentar aumento do tempo de contato total do passo e do percentual do tempo de contato durante o passo na região do mediopé. O grupo pré-diabético apresentou um padrão similar ao diabético, em relação à distribuição da pressão plantar e aos demais parâmetros baropodométricos, exceto no tempo de contato total do passo que foi similar ao grupo controle. Conclui-se que indivíduos diabéticos sem deformidades nos pés, com e sem neuropatia periférica, apresentam alterações na distribuição da pressão plantar, e que os indivíduos pré-diabéticos já apresentam alterações similares às encontradas nos diabéticos. / Subjects with diabetic disease, mainly that with peripheral neuropathy, are susceptible to develop plantar ulcers that could be associated with neuropathy or with the high plantar pressure values found in the plantar forefoot (midfoot, metatarsal heads and hallux) due the peripheral sensory loss and/or foot deformities that occurs as the developing of diabetes. Pre-diabetic subjects show a potential risk for peripheral neuropathy development, too. The main objective of this work was to study the plantar pressure distribution, through baropodometry access, in a group of diabetic and a group of pre-diabetic subjects (both the two groups with or without peripheral neuropathy or autonomic cardiac neuropathy) comparing to a group of healthy subjects. The baropodometric variables were compared among the three groups and correlated whit intervenient factors that could modify plantar pressure distribution. The diabetic group showed alterations in plantar pressure distribution with increased peak plantar pressures and pressure time integral at midfoot, metatarsal heads and hallux, without association whit other studied intervenient factors, and an increase in the total step time contact and percentage of contact time, during the roll over progress, in the midfoot. The pre-diabetic group presented a plantar pressure distribution pattern and baropodometric parameters similar to the diabetic group, excepting the total step time contact which was similar to the healthy group. This fact is been shown for the first time and points to a demand of interventions to pre-diabetic in order to prevent plantar injuries, like ulcers. In conclusion, diabetic subjects without foot deformities, with or without peripheral neuropathy show early modifications in plantar pressure distribuition and pre-diabetic sujtects can show modifications in plantar pressure distribution similar to those found in the diabetic subjects.

Resumo não disponível.

Indivíduos diabéticos, principalmente aqueles que desenvolvem neuropatia periférica, são suscetíveis ao desenvolvimento de úlceras plantares relacionadas à neuropatia e ao aumento da pressão plantar na região anterior dos pés, decorrentes tanto da perda de sensibilidade quanto das deformidades nos pés, ambas associadas ao curso da doença. Indivíduos pré-diabéticos também apresentam risco em potencial para o desenvolvimento de neuropatias periféricas. A presente pesquisa teve como objetivo principal, estudar a distribuição da pressão plantar, através da baropodometria dinâmica, em um grupo de indivíduos diabéticos e um grupo de indivíduos pré-diabéticos (ambos com ou sem neuropatia periférica sensitivo motora ou autonômica cardíaca), em comparação à indivíduos controle. As variáveis baropodométricas foram comparadas entre os grupos e correlacionadas a fatores que podem interferir na distribuição da pressão plantar. O grupo diabético apresentou alteração na distribuição da pressão plantar, com aumento dos valores das variáveis picos de pressão plantar e integral da pressão versus o tempo nas regiões do mediopé, metatarsos e hálux, sem associação aos demais fatores intervenientes estudados, além de apresentar aumento do tempo de contato total do passo e do percentual do tempo de contato durante o passo na região do mediopé. O grupo pré-diabético apresentou um padrão similar ao diabético, em relação à distribuição da pressão plantar e aos demais parâmetros baropodométricos, exceto no tempo de contato total do passo que foi similar ao grupo controle. Conclui-se que indivíduos diabéticos sem deformidades nos pés, com e sem neuropatia periférica, apresentam alterações na distribuição da pressão plantar, e que os indivíduos pré-diabéticos já apresentam alterações similares às encontradas nos diabéticos. / Subjects with diabetic disease, mainly that with peripheral neuropathy, are susceptible to develop plantar ulcers that could be associated with neuropathy or with the high plantar pressure values found in the plantar forefoot (midfoot, metatarsal heads and hallux) due the peripheral sensory loss and/or foot deformities that occurs as the developing of diabetes. Pre-diabetic subjects show a potential risk for peripheral neuropathy development, too. The main objective of this work was to study the plantar pressure distribution, through baropodometry access, in a group of diabetic and a group of pre-diabetic subjects (both the two groups with or without peripheral neuropathy or autonomic cardiac neuropathy) comparing to a group of healthy subjects. The baropodometric variables were compared among the three groups and correlated whit intervenient factors that could modify plantar pressure distribution. The diabetic group showed alterations in plantar pressure distribution with increased peak plantar pressures and pressure time integral at midfoot, metatarsal heads and hallux, without association whit other studied intervenient factors, and an increase in the total step time contact and percentage of contact time, during the roll over progress, in the midfoot. The pre-diabetic group presented a plantar pressure distribution pattern and baropodometric parameters similar to the diabetic group, excepting the total step time contact which was similar to the healthy group. This fact is been shown for the first time and points to a demand of interventions to pre-diabetic in order to prevent plantar injuries, like ulcers. In conclusion, diabetic subjects without foot deformities, with or without peripheral neuropathy show early modifications in plantar pressure distribuition and pre-diabetic sujtects can show modifications in plantar pressure distribution similar to those found in the diabetic subjects.