ABREU, R. N. D. C. Efeitos comportamentais, neuroquímicos e antioxidante da hecogenina obtida de Agave sisalana Perrine em Camundongos. 2013. 164 f. Tese (Doutorado em Biotecnologia) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-26T19:57:56Z No. of bitstreams: 1 2013_tese_rndcabreu.pdf: 4690389 bytes, checksum: e7a804bac7f7b01a438b851a2dbecdfe (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-01-21T17:53:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_tese_rndcabreu.pdf: 4690389 bytes, checksum: e7a804bac7f7b01a438b851a2dbecdfe (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-21T17:53:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_tese_rndcabreu.pdf: 4690389 bytes, checksum: e7a804bac7f7b01a438b851a2dbecdfe (MD5) Previous issue date: 2013 / Agave sisalana, popularly known as sisal, is a plant originaly from Mexico and belongs to the family Agavaceae. Hecogenin (HEC) is a steroidal sapogenin found in the juice from the leaves of Agave. The purpose was to study the behavioral, neurochemical and antioxidant effects of HEC in mice. We used swiss mice weighing 25-35 g. The behavioral effects of HEC‟s acute administration (5, 10, 20, or 40 mg/kg intraperitoneally – i.p.) or in repeated doses for seven days (20 or 40 mg/kg, i.p.), were evaluated by tests: elevated plus maze, open field, hole board test and tail suspension. In these tests, we determined the mechanism of action of HEC with acute administration of Flumazenil 2.5 mg/kg (FLU) or Reserpine 2 mg/kg (RES). After the behavioral tests, the brain areas pre-frontal cortex (PFC), hippocampus (HC) and striatum (CE) were dissected. The elevated plus-maze test showed that HEC, acutely administered, at doses of 10, 20 or 40 mg/kg, caused a significant increase in the number of entries in the open arms (NEOA) compared to control. A similar effect was observed in the time spent in the open arms (TPOA) at doses of 20 or 40 mg/ kg compared to the control group. The administering repeated doses of HEC (20 or 40 mg/kg) increased the NEOA. HEC (20 or 40 mg/kg) administered acutely increased the number of head dips compared to control. A similar effect was observed after treatment with repeated doses of HEC at a dose of 40 mg/kg compared to the control group. The FLU was unable to reverse the acute anxiolytic effects of HEC in the elevated plus-maze test and in the hole board test. Hecogenin reduced the immobility time in the tail suspension test after acute treatment or repeated doses. The molecule under study (HEC) reversed the depressant effect of RES. Related to the effects of acute administration of HEC on lipid peroxidation, we observed a decrease in the three studied areas at 5, 10, 20 or 40 mg/kg doses, compared to control groups. At doses of 20 or 40 mg/kg, HEC caused decreased levels of nitrite in the PFC, HC and CE compared to control. In PFC‟s mice acutely treated with HEC, the excitatory amino acid glutamate (GLU) increased at doses of 10, 20 or 40mg/kg, while the inhibitory gamaaminobutiric acid (GABA) and taurine (TAU) increased at doses of 20 or 40mg/kg. In the mice‟s hippocampus treated with HEC, there was increased aspartate (ASP), GLU, glycine (GLY) and TAU only at the highest dose HEC. In the striatum, there was an increase of ASP, and GLU and TAU after doses of 20 or 40 mg/kg of HEC. Concentrations of GLY and GABA increased HEC at the highest dose (40 mg/kg) in this brain area. The 5-HT and 5-HIAA levels were increased only in 40 mg/kg dose of HEC. We concluded that HEC (20 or 40 mg/kg) showed anxiolytic effects and this effect was not related to benzodiazepine receptors. The molecule did not cause oxidative stress to the CNS. / Agave sisalana, popularmente conhecida como sisal, é uma planta originada do México, fazendo parte da família Agavaceae. No suco das folhas de Agave é encontrado hecogenina (HEC), uma sapogenina esteroidal. O objetivo foi estudar os efeitos comportamentais, neuroquímicos e antioxidante de HEC em camundongos. Foram utilizados camundongos Swiss, machos, pesando de 25-35 g. Os efeitos comportamentais da administração aguda da HEC (5, 10, 20 ou 40 mg/kg, via intraperitoneal - ip) ou em doses repetidas por sete dias (20 ou 40 mg/kg, ip) foram avaliados pelos testes: labirinto em cruz elevado, campo aberto, placa perfurada e suspensão de cauda. Nestes testes, determinou-se o mecanismo de ação da HEC com administração aguda de Flumazenil 2,5 mg/kg (FLU) ou Reserpina 2 mg/kg (RES). Após os testes comportamentais, as áreas cerebrais córtex Pré-frontal (CPF), hipocampo (HC) e corpo estriado (CE) foram dissecadas. O teste de labirinto em cruz elevado mostrou que a HEC, administrada agudamente, nas doses de 10, 20 ou 40 mg/kg, causou aumento significativo no número de entradas nos braços abertos (NEBA) comparado ao controle. Efeito semelhante foi observado no tempo de permanência nos braços abertos (TPBA) nas doses de 20 ou 40 mg/kg em relação ao grupo controle. A administração em doses repetidas da HEC (20 ou 40 mg/kg) também aumentou o NEBA. HEC (20 ou 40 mg/kg), administrada agudamente, aumentou o número de head dips comparado ao controle. Efeito semelhante foi observado após o tratamento em doses repetidas com a HEC na dose de 40 mg/kg em relação ao grupo controle. O FLU não foi capaz de reverter os efeitos ansiolíticos agudos da HEC no labirinto em cruz elevado e no teste de placa perfurada. Hecogenina reduziu o tempo de imobilidade no teste de suspensão de cauda após o tratamento agudo ou em doses repetidas. A molécula em estudo (HEC) reverteu o efeito depressor da RES. Referente aos efeitos da administração aguda da HEC sobre a peroxidação lipídica, observou-se uma diminuição nas três areas estudadas nas doses 5, 10, 20 ou 40 mg/kg, comparado com os grupos controles. Nas doses de 20 ou 40 mg/kg, HEC causou diminuição dos níveis de nitrito no CPF, HC e CE comparado ao controle. No CPF, de camundongos tratados agudamente com HEC, o aminoácido excitatório glutamato (GLU) aumentou nas doses de 10, 20 ou 40mg/kg. Enquanto os inibitórios ácido gamaaminobutírico (GABA) e Taurina (TAU) aumentaram nas doses de 20 ou 40mg/kg. No hipocampo, houve aumento de Aspartato (ASP), GLU, Glicina (GLI) e TAU apenas na maior dose de HEC. No corpo estriado, ocorreu o aumento do ASP, GLU e TAU após as doses de 20 ou 40 mg/kg de HEC. As concentrações de GLI e GABA aumentaram na maior dose de HEC (40 mg/kg) nesta área cerebral. Os níveis de 5-HT e 5-HIAA foram aumentados apenas na dose de 40 mg/kg de HEC. Concluiu-se que HEC (20 ou 11 40 mg/kg) apresentou efeitos ansiolíticos e este efeito não foi relacionado aos receptores benzodiazepínicos. A molécula não causou estresse oxidativo ao SNC.

Agave sisalana, popularmente conhecida como sisal, à uma planta originada do MÃxico, fazendo parte da famÃlia Agavaceae. No suco das folhas de Agave à encontrado hecogenina (HEC), uma sapogenina esteroidal. O objetivo foi estudar os efeitos comportamentais, neuroquÃmicos e antioxidante de HEC em camundongos. Foram utilizados camundongos Swiss, machos, pesando de 25-35 g. Os efeitos comportamentais da administraÃÃo aguda da HEC (5, 10, 20 ou 40 mg/kg, via intraperitoneal - ip) ou em doses repetidas por sete dias (20 ou 40 mg/kg, ip) foram avaliados pelos testes: labirinto em cruz elevado, campo aberto, placa perfurada e suspensÃo de cauda. Nestes testes, determinou-se o mecanismo de aÃÃo da HEC com administraÃÃo aguda de Flumazenil 2,5 mg/kg (FLU) ou Reserpina 2 mg/kg (RES). ApÃs os testes comportamentais, as Ãreas cerebrais cÃrtex PrÃ-frontal (CPF), hipocampo (HC) e corpo estriado (CE) foram dissecadas. O teste de labirinto em cruz elevado mostrou que a HEC, administrada agudamente, nas doses de 10, 20 ou 40 mg/kg, causou aumento significativo no nÃmero de entradas nos braÃos abertos (NEBA) comparado ao controle. Efeito semelhante foi observado no tempo de permanÃncia nos braÃos abertos (TPBA) nas doses de 20 ou 40 mg/kg em relaÃÃo ao grupo controle. A administraÃÃo em doses repetidas da HEC (20 ou 40 mg/kg) tambÃm aumentou o NEBA. HEC (20 ou 40 mg/kg), administrada agudamente, aumentou o nÃmero de head dips comparado ao controle. Efeito semelhante foi observado apÃs o tratamento em doses repetidas com a HEC na dose de 40 mg/kg em relaÃÃo ao grupo controle. O FLU nÃo foi capaz de reverter os efeitos ansiolÃticos agudos da HEC no labirinto em cruz elevado e no teste de placa perfurada. Hecogenina reduziu o tempo de imobilidade no teste de suspensÃo de cauda apÃs o tratamento agudo ou em doses repetidas. A molÃcula em estudo (HEC) reverteu o efeito depressor da RES. Referente aos efeitos da administraÃÃo aguda da HEC sobre a peroxidaÃÃo lipÃdica, observou-se uma diminuiÃÃo nas trÃs areas estudadas nas doses 5, 10, 20 ou 40 mg/kg, comparado com os grupos controles. Nas doses de 20 ou 40 mg/kg, HEC causou diminuiÃÃo dos nÃveis de nitrito no CPF, HC e CE comparado ao controle. No CPF, de camundongos tratados agudamente com HEC, o aminoÃcido excitatÃrio glutamato (GLU) aumentou nas doses de 10, 20 ou 40mg/kg. Enquanto os inibitÃrios Ãcido gamaaminobutÃrico (GABA) e Taurina (TAU) aumentaram nas doses de 20 ou 40mg/kg. No hipocampo, houve aumento de Aspartato (ASP), GLU, Glicina (GLI) e TAU apenas na maior dose de HEC. No corpo estriado, ocorreu o aumento do ASP, GLU e TAU apÃs as doses de 20 ou 40 mg/kg de HEC. As concentraÃÃes de GLI e GABA aumentaram na maior dose de HEC (40 mg/kg) nesta Ãrea cerebral. Os nÃveis de 5-HT e 5-HIAA foram aumentados apenas na dose de 40 mg/kg de HEC. Concluiu-se que HEC (20 ou 11 40 mg/kg) apresentou efeitos ansiolÃticos e este efeito nÃo foi relacionado aos receptores benzodiazepÃnicos. A molÃcula nÃo causou estresse oxidativo ao SNC. / Agave sisalana, popularly known as sisal, is a plant originaly from Mexico and belongs to the family Agavaceae. Hecogenin (HEC) is a steroidal sapogenin found in the juice from the leaves of Agave. The purpose was to study the behavioral, neurochemical and antioxidant effects of HEC in mice. We used swiss mice weighing 25-35 g. The behavioral effects of HEC‟s acute administration (5, 10, 20, or 40 mg/kg intraperitoneally â i.p.) or in repeated doses for seven days (20 or 40 mg/kg, i.p.), were evaluated by tests: elevated plus maze, open field, hole board test and tail suspension. In these tests, we determined the mechanism of action of HEC with acute administration of Flumazenil 2.5 mg/kg (FLU) or Reserpine 2 mg/kg (RES). After the behavioral tests, the brain areas pre-frontal cortex (PFC), hippocampus (HC) and striatum (CE) were dissected. The elevated plus-maze test showed that HEC, acutely administered, at doses of 10, 20 or 40 mg/kg, caused a significant increase in the number of entries in the open arms (NEOA) compared to control. A similar effect was observed in the time spent in the open arms (TPOA) at doses of 20 or 40 mg/ kg compared to the control group. The administering repeated doses of HEC (20 or 40 mg/kg) increased the NEOA. HEC (20 or 40 mg/kg) administered acutely increased the number of head dips compared to control. A similar effect was observed after treatment with repeated doses of HEC at a dose of 40 mg/kg compared to the control group. The FLU was unable to reverse the acute anxiolytic effects of HEC in the elevated plus-maze test and in the hole board test. Hecogenin reduced the immobility time in the tail suspension test after acute treatment or repeated doses. The molecule under study (HEC) reversed the depressant effect of RES. Related to the effects of acute administration of HEC on lipid peroxidation, we observed a decrease in the three studied areas at 5, 10, 20 or 40 mg/kg doses, compared to control groups. At doses of 20 or 40 mg/kg, HEC caused decreased levels of nitrite in the PFC, HC and CE compared to control. In PFC‟s mice acutely treated with HEC, the excitatory amino acid glutamate (GLU) increased at doses of 10, 20 or 40mg/kg, while the inhibitory gamaaminobutiric acid (GABA) and taurine (TAU) increased at doses of 20 or 40mg/kg. In the mice‟s hippocampus treated with HEC, there was increased aspartate (ASP), GLU, glycine (GLY) and TAU only at the highest dose HEC. In the striatum, there was an increase of ASP, and GLU and TAU after doses of 20 or 40 mg/kg of HEC. Concentrations of GLY and GABA increased HEC at the highest dose (40 mg/kg) in this brain area. The 5-HT and 5-HIAA levels were increased only in 40 mg/kg dose of HEC. We concluded that HEC (20 or 40 mg/kg) showed anxiolytic effects and this effect was not related to benzodiazepine receptors. The molecule did not cause oxidative stress to the CNS.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O triterpeno lupeol e o tanino hidrolisÃvel dilactona do Ãcido valonÃico (DAV), componentes majoritÃrios de Cenostigma macrophyllum Tul. (Leguminoseae), foram avaliados no modelo experimental de lesÃo gÃstrica induzida por etanol e em modelos comportamentais. O lupeol (3, 10 e 30mg/kg, v.o.) e a DAV (3, 10 e 30mg/kg, i.p.) atenuaram significativamente (p<0,05) as lesÃes gÃstricas induzidas por etanol. No estudo mecanÃstico, o lupeol (30mg/kg) e a DAV (10mg/kg) mostraram aÃÃo antioxidante, previnindo a depleÃÃo de grupos sulfidrilas nÃo protÃicos e a participaÃÃo do Ãxido nÃtrico, de prostaglandinas, de canais de potÃssio ATP-dependentes e canais de cÃlcio. Foi observada ainda a participaÃÃo de receptores alfa-adrenÃrgicos, mas nÃo de receptores opiÃides, no mecanismo gastroprotetor das substÃncias. Tanto o lupeol (30 mg/kg) quanto a DAV (10mg/kg) reduziram a acidez gÃstrica total sem alterar o volume secretÃrio gÃstrico no modelo de ligadura do piloro. Na avaliaÃÃo sobre a motilidade intestinal normal, o tratamento com lupeol (3, 10 e 30mg/kg) nÃo alterou o percentual de trÃnsito em relaÃÃo ao controle, contudo a DAV (3, 10 e 30mg/kg) reduziu de forma significativa (p<0,05) o percentual de trÃnsito, por um mecanismo que nÃo envolve receptores opiÃides ou adrenÃrgicos. DAV (10 mg/kg) tambÃm foi capaz de inibir significativamente (p<0,05) o trÃnsito estimulado por Ãleo de rÃcino. Nos modelos comportamentais, o lupeol (3, 10 e 30mg/kg, v.o.) nÃo produziu alteraÃÃo na atividade locomotora dos animais no teste da movimentaÃÃo espontÃnea, entretanto o tratamento com DAV (3, 10 e 30mg/kg, i.p.) produziu uma diminuiÃÃo significativa (p<0,05) da atividade locomotora no mesmo teste, sem alterar a coordenaÃÃo motora dos animais no teste do rota rod. O tratamento com DAV (3,10 e 30mg/kg) reduziu a latÃncia e aumentou a duraÃÃo do sono induzido por pentobarbital sÃdico, assim como aumentou o tempo de imobilidade no teste da suspensÃo da cauda. A administraÃÃo de DAV nas doses de 3, 10 e 30mg/kg induziu catalepsia nos animais e a dose de 10mg/kg foi capaz de inibir a hiperlocomoÃÃo induzida por anfetamina (5 mg/kg). Estes dados sugerem que tanto o lupeol quanto a DAV possuem um potencial efeito gastroprotetor possivelmente relacionado a um mecanismo antioxidante, ao aumento de grupos NP-SH, com participaÃÃo do NO, das PGs, dos canais de K+ATP e do cÃlcio. A DAV demonstrou alteraÃÃes comportamentais que sugerem um efeito depressor do Sistema Nervoso Central com possÃvel envolvimento da dopamina. / The Lupeol triterpene and valoneic acid dilactone (VAD), two major chemical components isolated from Cenostigma macrophyllum Tul. (Leguminoseae) were evaluated in the experimental model gastric lesion induced by ethanol and in animal models of behavioral. Both lupeol (3, 10 and 30 mg/kg, p.o.), and VAD (3, 10 and 30 mg/kg, i.p.) afforded significant gastroprotection (p<0,05) against absolute ethanol-induced gastric lesions. In the mechanistic studies, lupeol (30mg/kg) and VAD (10mg/kg) demonstrated an antioxidant action by preventing the ethanol-evoked depletion of non-protein sulfhydryls (NP-SHs), the involvement of nitric oxide (NO), prostaglandins (PGs), and the ATP-dependent potassium and calcium channels. Also observed were the participation of &#61537;2-adrenoceptors but not the opioid receptors in the gastroprotective effect of these substances. Lupeol (30 mg/kg) as well as DAV (10mg/kg) effectively reduced the total acidity (p<0,05) in the stomach without altering the gastric secretory volume in pylorus-ligatet rat. While normal intestinal transit was unalttered by lupeol (3, 10 e 30 mg/kg). VAD (3, 10 e 30 mg/kg) significantly (p<0,05) reduced by a mechanism that do not involve either opioid or adrenergic receptors. In addition, VAD (10 mg/kg) was also able to inhibit significantly (p<0, 05) the intestinal transit promoted by castor oil in mice. In open field test, lupeol (3, 10 e 30mg/kg) failed to demonstrate no significant change in locomotor activity of animals. However VAD (3, 10 e 30mg/kg) showed significant diminution (p<0,05) of locomotor activity in this test, but did not affect the motor coordination in rota-rod test. Mice treated with VAD (3,10 and 30mg/kg) demonstrated reduced latency and increase duration of sleeping time induced by pentobarbital sodium and showed enhanced immobility time in tail-suspension test. VAD at the doses 3, 10 and 30 mg/kg induced catalepsy in animals and at 10 mg/kg, it could effectively counteract the hypermotility induced by amphetamine (5mg/kg). These results suggest that both lupeol and VAD can affored gastroprotection against ethanol induced gastric injuri primarily through anantioxidant mechanism by restoring glutathione (NS-PH). The study futher indicate the possible involviment of NO, PGs, KATP channel activationaswell as membrane calcium. Besides the gastroprotection, DAV evidenced depressant effects in behavioral tests, possibly involving monoaminergic or adenosinergic systems which need to be clarifield in a future study.