Determination of erythrocyte count in cerebrospinal fluid (CSF-EPC) is used to exclude various intracranial hemorrhage, especially subarachnoid hemorrhage (SAH). SAH means a bleeding between the pia mater and arachnoidea which occurs due to rupture of an aneurysm in the subarachnoid space. Manual counting of erythrocytes in the cerebrospinal fluid with Bürkers chamber and microscopy has been the gold standard for the past decades, but the manual method is time consuming and requires great experience. The purpose of this study was to evaluate if manual analysis of  CSF-EPC with counting chamber, and light microscopy can be replaced by automated analysis of CSF-EPC with Hematology Analyzer XN-1000 (Sysmex). Fortyeight cerebrospinal fluid samples with various concentrations of erythrocytes ware prepared by diluting known concentration of erythrocytes in cell-free CSF. Prepared CSF-samples with added erythrocytes were analyzed first on the XN-1000. Thereafter, manual counting of erythrocytes was performed using Bürkers counting chamber. A linear regression was established to describe the correlation between the automated analysis of the CSF-EPC and manual analysis of the CSF-EPC. Imprecision in the analysis of the CSF-EPC on the XN-1000 (Sysmex) was assessed by within-run imprecision. A very good correlation (r = 0.999) was found between the XN-1000 and manual counting. For results in the lower range, 100 - 5000 (106/L), correlation was also good (r = 0.997). The coefficient of variation was 19,8 % at CSF-EPC of 370 x 106/L and 3.1 % at CSF-EPC of 25 950 x 106/L. The sensitivity for analysis of CSF-EPC on XN-1000 was 370 x 106/L. The conclusion is that the analysis of Csv-EPC on XN-1000 can be used for clinical diagnostics of CSF- samples. However, it should be noted that XN-1000 has poor sensitivity for low CSF-EPC values < 370 x 106/L. To ensure high diagnostic quality even in CSF-samples with low erythrocyte counts are recommended a reference limit of < 500 x 106/L as a practical cut off for supplemental microscopic counting in routine healthcare laboratories. / SAMMANFATTNING Bestämning av antalet erytrocyter i cerebrospinalvätska (Csv-EPK) används för att utesluta olika intrakraniella blödningar, särskilt subaraknoidalblödning (SAB). SAB betyder en blödning mellan pia mater och araknoidea som uppstår på grund av ruptur av ett aneurysm i subaraknoidalrummet. Manuell räkning av antalet erytrocyter i cerebrospinalvätska med Bürkers kammare och mikroskopi har varit den gyllene standarden under de senaste decennierna, men den manuella metoden är tidskrävande och kräver stor erfarenhet. Syftet med detta examensarbete var att utvärdera om manuell analys av Csv-EPK med räknekammare och ljusmikroskopi kan ersättas med automatisk analys av Csv-EPK med hematologianalysatorn XN-1000 (Sysmex). Fyrtioåtta cerebrospinalvätskeprover med varierande koncentrationer av antalet erytrocyter framställdes genom att späda kända koncentrationer av erytrocyter i cellfri Csv. Framställda Csv-prover med tillsatta erytrocyter analyserades först på XN-1000. Efter detta utfördes manuell räkning av erytrocyter i Bürkers kammare. En linjär regression upprättades för att beskriva korrelation mellan automatiserad analys av Csv-EPK och manuell analys av Csv-EPK. Imprecisionen avseende analys av Csv-EPK på XN-1000 (Sysmex) bedömdes genom inom-serie-imprecision. En mycket god korrelation (r = 0,999) fanns mellan XN-1000 och manuell räkning. För analysresultat inom det lägre område 100 - 5000 (106/L) var korrelationen också god (r = 0,997). Variationskoefficienten var 19,8 % vid Csv-EPK på 370 x 106/L respektive 3,1 % vid Csv-EPK på 25950 x 106/L. Känsligheten för analys av Csv-EPK på XN-1000 var 370 x 106/L. Slutsatsen är att analys av Csv-EPK på XN-1000 kan användas för klinisk diagnostik av Csv-prover. Däremot bör det noteras att XN-1000 har sämre känslighet för låga Csv-EPK värden < 370 x 106/L. För att kunna säkerställa hög diagnostisk kvalitet även på Csv-prover med låga erytrocytantal rekommenderas en referensgräns på < 500 x 106/L som praktisk cut off för kompletterande mikroskopisk räkning vid rutinsjukvårdslaboratorier.

Syre transporteras från lungorna, via blodet bundet till erytrocyternas hemoglobin, till kroppens alla celler. En hemoglobinkoncentration i blodet under referensintervallet definieras som anemi och påverkar hela kroppen och försämrar den fysiska prestationsförmågan. Järnbristanemi är en anemi med otillräcklig järntillförsel till benmärgen på grund av tomma järnförråd (absolut järnbrist) eller försvårat järnutnyttjande (funktionell järnbrist). Analysparametern HYPO på analysinstrumentet Advia 2120 (Siemens) mäter andelen hypokroma erytrocyter (erytrocyter med lågt hemoglobininnehåll) och anses vara en av de bästa parametrarna för att påvisa funktionell järnbrist. Analysparametern Hypo-He på analysinstrumentet XN-1000 (Sysmex) är en forskningsparameter för samma ändamål. Syftet med detta arbete var att jämföra markörer för funktionellt järnstatus och utvärdera om analysen HYPO på Advia 2120 kan ersättas med Hypo-He på XN-1000. Fyrtiofyra patientprover, på vilka HYPO var beställt, analyserades, först på XN-1000 och därefter på Advia 2120. En linjär regressionmodell gjordes för att beskriva korrelationen mellan analyserna HYPO och Hypo-He. Imprecisionen för analysen Hypo-He beräknades genom inom-serie- och total-serie-imprecision. Korrelationen mellan analyserna var måttligt stark (r = 0,7185 (absoluta värden) och r = 0,8081 (logaritmerade värden)), dock med många analysresultat inom det lägre området. Variationskoefficienten för Hypo-He beräknades till mellan 0 % - 9,5 %. För att kunna avgöra om Hypo-He kan ersätta HYPO som indikator på funktionell järnbrist krävs kompletterande studier på välkaraktäriserade patientprover med varierande analysvärden inkluderande värden för HYPO på mer än 10 %.

Färsk fryst plasma (FFP) är en blodkomponent som utvinns genom separation från helblod. FFP innehåller livsviktiga plasmaproteiner, immunoglobuliner och koagulationsfaktorer. Produkten används främst till patienter med omfattande skador som lett till större blodförlust samt vid större kirurgiska blödningar vid operationer. Enligt riktlinjer stiftade av European Directorate for the quality of Medicines and healtcare (EDQM) bör samtliga plasmaenheter understiga 6,0 × 109/L erytrocyter för att produkten klassificeras som godtagbar för transfusion. Syftet med denna studie var att undersöka om Sysmex XN-550 med applikation ”Body Fluid” (BF) kan tillförlitligt koncentrationsbestämma erytrocyter i FFP och därmed ersätta Bürkerkammare som är den nuvarande metoden för dessa mätningar. För detta ändamål utfördes en undersökning av linjäritet hos instrumentet, en statistisk jämförelse med mätning av 30 prover samt fem upprepade mätningar av en känd koncentration för undersökning av reproducerbarheten. Resultaten visade en tydlig korrelation mellan analyserna med en jämn stegring av värden. Korrelationskoefficienten erhöll ett värde på 0,99. Bland Altmananalys visade att 95% av uppmätta värden förelåg inom konfidensintervallet vilket påvisar en överensstämmelse mellan metoderna med p-värde på 0,98. Mätningarna påvisade p-värden på 0,0005 vid analys av den lägsta koncentrationen (1 × 109/L), 0,5 vid anays av näst högsta koncentrationen (3 × 109/L) samt 0,9 vid analys av den högsta koncentrationen (6 × 109/L). / Fresh frozen plasma (FFP) is a blood component derived from separation of whole blood. FFP contains essential plasma proteins, immunoglobulins and coagulation factors. The product is mainly used for patients with extensive injuries which have led to major blood loss or for major bleeding due to surgical procedures. According to guidelines established by the European Directorate for the quality of Medicines and healtcare (EDQM), all plasma components should have an erythrocyte concentration of less than 6 × 109/L for the product to be classified as acceptable for transfusion. The purpose of this study was to investigate whether Sysmex XN-550 with the application “Body Fluid” (BF) could reliably determine the concentration of erythrocytes in FFP and thus replace the current method of Bürker chamber for these measurements. For this purpose, the linearity of the instruments was studied and a statistical comparison including measurements of 30 samples and five repeated measurements of a known concentration for examination of the reproducibility. The results showed a clear correlation between the analyses with an even increase in value. The correlation coefficient provided a value of 0,99. Bland Altman analysis showed that 95% of the measured values were within the confidence interval, which shows a correlation between the used methods and the calculated p-value was 0.98. The reproducibility measurements revealed a p-value of 0,0005 when measuring the lowest concentration (1 × 109/L), 0,5 when measuring the second to highest concentration (3 × 109/L) and 0,9 when measuring the highest concentration (6 × 109/L).