Dissertação (mestrado)-Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2011 / Submitted by Jadiana Paiva Dantas (jadi@bce.unb.br) on 2011-07-07T00:18:56Z No. of bitstreams: 1 2011_FagnerNevesOliveira.pdf: 6604665 bytes, checksum: 83446b3563aee26adcf024e43f3ad2cf (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-07-08T14:13:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_FagnerNevesOliveira.pdf: 6604665 bytes, checksum: 83446b3563aee26adcf024e43f3ad2cf (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-08T14:13:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_FagnerNevesOliveira.pdf: 6604665 bytes, checksum: 83446b3563aee26adcf024e43f3ad2cf (MD5) / O escorpião Tityus serrulatus, espécie endêmica do Brasil, é responsável pelos acidentes mais graves frequentemente registrados no país, particularmente na região Sudeste. A principal causa de morte por este agravo é o edema pulmonar agudo (EPA). A incidência desta espécie no DF tem aumentado, porém, não existem registros de escorpionismo grave nesta região. Diante disso, os objetivos do presente trabalho foram avaliar a toxicidade da peçonha de T. serrulatus do DF (TS-DF), por meio da avaliação da DL50 e das alterações induzidas pela peçonha em camundongos; avaliar a capacidade de indução de EPA em ratos por meio da relação entre a massa úmida do pulmão e a massa corpórea de ratos tratados e não tratados com peçonha; avaliar a permeabilidade vascular pulmonar (PVP), utilizando o protocolo de azul de Evans (AE); realizar análises histológicas do pulmão e do coração dos animais experimentados; e determinar as dosagens séricas de CK e CK-MB, além da contagem total de leucócitos no lavado bronco-aveolar (LBA) dos ratos. Todos esses ensaios foram também conduzidos com a peçonha de T. serrulatus de MG (TS-MG) para fins de comparação. A peçonha de TS-DF apresentou-se duas vezes menos tóxica a camundongos (51,6 ?g/kg) que a peçonha de TS-MG (26 ?g/kg). Foi verificado um aumento significativo na relação massa úmida dos pulmões / massa corpórea e um aumento na PVP nos ratos do grupo TS-MG (p> 0,001) em relação ao controle e ao TS-DF, sendo que, entre esses dois últimos grupos, essas diferenças não foram observadas (p <0,05). As análises histológicas mostraram EPA intra-alveolar multifocal apenas em animais do grupo TS-MG. Os tecidos cardíacos de todos os animais apresentaram-se normais. No entanto, as dosagens séricas de CK e CK-MB e a quantidade de leucócitos encontrados no LBA foram maiores apenas nos animais do grupo TS-MG (p>0.05). Os perfis cromatográficos obtidos para as peçonhas de T. serrulatus das duas populações estudadas foram qualitativamente semelhantes. Algumas diferenças quantitativas foram observadas e podem explicar as diferenças na toxicidade e nas atividades biológicas dessas peçonhas. Assim, a peçonha de TS-DF é duas vezes menos tóxica a camundongos que a peçonha de TS-MG e não é capaz de induzir EPA em ratos, ao contrário do que é observado para a peçonha de TS-MG. É possível que a peçonha de TS-DF possua uma menor quantidade de peptídeos que atuam em canais para Na+, que são considerados os principais responsáveis pela maioria dos sintomas apresentados no escorpionismo. Estes resultados corroboram com os sintomas descritos para o escorpionismo no DF causado por esta espécie de escorpião e confirmam a variação na peçonha das duas populações estudadas.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Biologia, 2013. / Submitted by Marília Freitas (marilia@bce.unb.br) on 2013-08-28T12:44:12Z No. of bitstreams: 1 2013_ClaudiaJimenaArenasBelalcazar.pdf: 1730997 bytes, checksum: 861e17da08068b3d98f5f667cbb20564 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2013-08-28T12:47:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_ClaudiaJimenaArenasBelalcazar.pdf: 1730997 bytes, checksum: 861e17da08068b3d98f5f667cbb20564 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-08-28T12:47:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_ClaudiaJimenaArenasBelalcazar.pdf: 1730997 bytes, checksum: 861e17da08068b3d98f5f667cbb20564 (MD5) / As peçonhas dos escorpiões se caracterizam por apresentarem componentes farmacologicamente ativos; entre eles, as toxinas que agem em canais para sódio (NaScTxs), que são as responsáveis dos mais fortes efeitos neurotoxicos observados durante o envenenamento causado pela picada de escorpião. O presente projeto tem como objetivo principal identificar toxinas moduladoras de canais para sódio na peçonha do escorpião Tityus sp. identificando e caracterizando-as por meio de técnicas como Cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e espectrometria de massa tipo MALDI-TOF/TOF. As sequencias parciais de aminoácidos dos peptídeos purificados foram determinadas por espectrometria de massa (MS/MS) para posteriormente ser testados por meio da técnica electrofisiológica de Patch clamp em canais de sódio expressos em células dissociadas de gânglios da raiz dorsal de ratos (DRG). A peçonha bruta do escorpião Tityus sp. resultou em 54 frações cromatográficas. Três sequencias parciais que correspondem a três NaScTxs foram obtidas, com massas moleculares de 7342 Da, 6971Da, 7970Da. Duas delas ao serem testadas nas células DRG reduziram as correntes de sódio classificando-as como βNaScTxs. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The venom of scorpions are characterized by presenting pharmacologically active components, including toxins that act on sodium channels (NaScTxs), which are responsible of the strongest neurotoxic effects observed during poisoning caused by the bite of a scorpion. This project aimed to identify new toxins having sodium channels as molecular targets in the venom of the scorpion Tityus sp. identifying and characterizing them by standard techniques such as high performance liquid chromatography (HPLC) and mass spectrometry MALDI-TOF/TOF type. The partial amino acid sequences of the purified peptides were determined by mass spectrometry (MS/MS) to be subsequently tested by electrophysiological patch clamp technique on sodium channels expressed in dissociated cells from dorsal root ganglion of rats (DRG). The crude venom of the scorpion Tityus sp. resulted in 54 chromatography fractions. Three partial sequences corresponding to three NaScTxs were obtained with molecular weights of 7342 Da, 6971Da, 7970Da. Two of them to be tested in DRG cells reduced sodium currents classifying them as βNaScTxs.