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Efeitos da exposição ao cloreto de mercúrio (HgCl2) sobre a qualidade e capacidade fértil de espermatozoides bovinos / Effects of mercury chloride exposure on quality and fertility capacity of bovine sperm

Silva, Elane Fabíola de Sousa Jerônimo da 14 December 2017 (has links)
Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-26T17:24:28Z No. of bitstreams: 1 ELANE SILVA.pdf: 1055103 bytes, checksum: f1d27a8bd44fffdeb0ab4baf10b24d9c (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-26T17:25:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ELANE SILVA.pdf: 1055103 bytes, checksum: f1d27a8bd44fffdeb0ab4baf10b24d9c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-26T17:25:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ELANE SILVA.pdf: 1055103 bytes, checksum: f1d27a8bd44fffdeb0ab4baf10b24d9c (MD5) Previous issue date: 2017-12-14 / O Hg é um metal pesado tóxico, bioacumulativo e de preocupação global, uma vez que suas emissões antropogênicas e naturais ainda representam um alto risco para a saúde humana e ambiental. O Hg pode ocasionar comprometimento da fertilidade masculina, entretanto a maioria dos estudos avaliaram exposição em altas doses. Nesse sentido, os efeitos adversos gerados pelo Hg em baixas doses no sistema reprodutor masculino são pouco elucidados e o uso do modelo bovino, em virtude da grande semelhança ao humano, pode contribuir para essa avaliação toxicológica neste sistema. Assim, este trabalho objetivou investigar os efeitos da exposição de diferentes concentrações ao cloreto mercúrio (HgCl2) sobre a qualidade e capacidade fértil de espermatozoides bovinos. Palhetas de sêmen de Bos taurus foram descongeladas, os espermatozoides selecionados por gradientes descontínuos de Percoll® (4x106espermatozoides/mL) e divididos em: Controle (sem exposição a HgCl2); Hg8nM; Hg8μM e Hg80μM, incubados por 0,5h, 1h e 2h. Após a exposição, foram analisados parâmetros espermáticos (motilidade, vigor, cinética espermática computadorizada, morfologia, integridade da membrana espermática) e biomarcadores de estresse oxidativo. Para a análise da fecundação in vitro, os oócitos bovinos maturados por 24h e, após 18 horas de co-cultivo de oócitos/espermatozoides (2x106 espermatozoides/mL) a taxa de penetração e fertilização total e normal foram avaliadas. A exposição de espermatozoides bovinos a diferentes concentrações de HgCl2 foi capaz de reduzir a motilidade espermática, aumentar os defeitos menores (Hg80μM), reduzir do número de 12 espermatozoides normais (Hg80μM e Hg8μM) e afetar a integridade da membrana plasmática (Hg8μM). Quanto aos biomarcadores bioquímicos avaliados nas doses baixas deste metal, houve aumento das especies reativas de oxigênio e peroxidação lipídica e redução da capacidade antioxidante total em ambas as doses (Hg8nM e Hg8μM) analisadas. Quanto à fertilização, houve uma redução na taxa de penetração e fertilização total e normal do grupo de Hg com a concentração de 8μM. A exposição de espermatozoides bovinos a baixas concentrações de Hg favorece o aumento do estresse oxidativo que pode desencadear alterações na qualidade espermática e refletir na redução da sua capacidade fértil. / Hg is a toxic heavy metal, bioaccumulative and of global concern, since its anthropogenic and natural emissions still pose a high risk for human and environmental health. Hg may cause impairment of male fertility, however, most studies have evaluated high dose exposure. In this sense, the adverse effects generated by low dose Hg in the male reproductive system are little elucidated and the use of the bovine model, due to the great similarity to the human, can contribute to this toxicological evaluation in this system. The objective of this work was to investigate the effects of mercury chloride (HgCl2) exposure at different concentrations on bovine spermatozoa and its fertilization capacity. Bos taurus semen straws were thawed, spermatozoa selected by discontinuous Percoll® gradients (4x106 sperm/mL) and divided into: Control (without exposure to HgCl2); Hg8nM; Hg8μM and Hg80μM, incubated for 0.5h, 1h and 2h. After the exposure, sperm parameters (motility, vigor, computerized sperm kinetics, morphology, sperm membrane integrity) and oxidative stress biomarkers were analyzed. For the analysis of in vitro fertilization, bovine oocytes matured for 24h and, after 18 hours of co-culture of oocytes/spermatozoa (2x106 spermatozoa/mL), total and normal penetration and fertilization rates were evaluated. Exposure of bovine spermatozoa at different concentrations of HgCl2 was able to reduce sperm motility, increase the minors defects (Hg80μM), reduce the number of normal spermatozoa (Hg80μM and Hg8μM) and affect the integrity of the plasma membrane (Hg8μM). Regarding the biochemical biomarkers evaluated in the low doses of this metal, there was an increase in the reactive oxygen species and lipid peroxidation and reduction of the total antioxidant capacity in both doses (Hg8nM and Hg8μM) analyzed. As for 14 fertilization, there was a reduction in the penetration rate and total and normal fertilization of the Hg group with the concentration of 8μM. Exposure of bovine spermatozoa at low concentrations of Hg favors the increase of oxidative stress that can trigger changes in sperm quality and reflect in the reduction of their capacity of IVF. KEYWORDS: Mercury, Toxicology; Sperm, Bovine model; Oxidative Stress; in vitro Fertilization (IVF).

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