Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T20:36:49Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_VivianePedrosoFausto.pdf: 2096881 bytes, checksum: c58d1ae11d22b250146714c3cf084b16 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T20:36:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_VivianePedrosoFausto.pdf: 2096881 bytes, checksum: c58d1ae11d22b250146714c3cf084b16 (MD5) Previous issue date: 2017-04-28 / Listeria monocytogenes is a food-borne bacterium that causes an infection called listeriosis, Although rare, this infection can be lethal for immunocompromised, pregnant, and stillborn. The objective of this work was to develop, characterize, evaluate the stability, anti-Listeria monocytogenes activity, cytotoxicity and genotoxicity of nanostructures (nanocapsules and nanoemulsion) containing Geranium essential oil (OEG), as well as verify synergistic effects with the essential oils of Cinnamon, Lemongrass And Thyme. The characterization of the essential oils was performed by GCMS. The nanocapsules (NC) were prepared by the interfacial deposition method of the preformed polymer while Geranium nanoemulsion (NEG) was prepared by homogenization using an Ultra-Turrax T18. The analysis of the stability indicators was performed by the evaluation of particle size, polydispersity index, zeta potential and pH for 60 days. The bactericidal effect of the different concentrations of the essential oils, pure or in combination and the synergism were determined by the serial microdilution technique, the cytotoxicity was determined by the MTT assays and determination of the LDH in VERO cells and the genotoxicity was evaluated by the GEMO test. Results: The NCGs produced had mean nanometer diameters of (232.6 nm), polydispersity indices below 0.053, pH 3.5 and zeta potentials of about -20.7 mV. The study demonstrated that the stability of the formulations is temperature dependent, remaining more stable at refrigeration temperatures (4 °C) or at stable temperatures (25 ° C). The NEG had mean nanometer diameters of (136.2.6 nm), polydispersity indices below 0.039, pH 3.4 and zeta potentials of about -8.1 mV. The MICs obtained for Geranium, Cinnamon, Campi-lemon and Thyme oils were 10975 mg / ml, 0.05 mg / ml, 0.18 mg / ml and 0.35 mg / ml, respectively. The CIM of NEG was 0.0625 mg / ml and the nanocapsules did not demonstrate antimicrobial activity in the test performed. It was possible to observe at least one point of synergism between the OE of geraniums and the tested EOs.the nanostructures did not show synergistic effect with OE. In the MTT assay OEG and NEG showed increased cell viability at concentrations of 10, 100 and 1000 μg / μl as compared to the control, the LDH assay shows that both OEG and NEG at concentrations of 0,1, 1, 10, 100 and 1000 μg / μl were not cytotoxic. In the GEMO test the OEG had a genoprotective effect on lymphocytes at concentrations of 10, 100 and 1000 μg / μl. The study demonstrated that both OG and NEG do not present tocicity 7 and genotoxicity but present very high MIC values to be used in food, and the synergism and nanostructuring were a good alternative to reduce the amount of oil required for an antimicrobial response. / A Listeria monocytogenes é um microrganismo contaminante de alimentos causador da listeriose, uma infecção que embora rara pode ser letal para indivíduos imunodeficientes, gestantes e neonatos. O objetivo deste trabalho foi desenvolver, nanoestruturas contendo óleo essencial de Gerânio (OEG), caracterizar, avaliar a atividade contra L. monocytogenes, a cito e genotoxicidade, bem como verificar efeitos sinérgicos com os óleos essenciais de Canela, Capim-limão e Tomilho. A caracterização dos óleos essenciais foi realizada por GC-MS. As nanocápsulas (NC) foram preparadas pelo método de deposição interfacial do polímero pré-formado enquanto a nanoemulsão de Gerânio (NEG) foi preparada por homogeneização utilizando um T18 Ultra-Turrax. A análise dos indicadores de estabilidade foi realizada pela avaliação do tamanho de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta e pH por 60 dias. O efeito bactericida das diferentes concentrações dos óleos essenciais e o sinergismo foram determinados pela técnica de microdiluição seriada, a citotoxicidade foi determinada pelos ensaios de MTT e LDH e a genotoxicidade foi avaliada pelo teste GEMO. Resultados: As NCG produzidas apresentaram diâmetros nanométricos médios de (232,6 nm), índices de polidispersão abaixo de 0,053, pH de 3,5 e potenciais zeta de cerca de -20,7 mV. O estudo demonstrou que a estabilidade das formulações são mais estáveis em temperatura ambiente (25 ºC). A NEG apresentou diâmetros nanométricos médio de (136,2 nm), índices de polidispersão abaixo de 0,039, pH de 3,4 e potenciais zeta de cerca de -8,1 mV. As CIM obtidas para os óleos de Gerânio, Canela, Campi-limão e Tomilho foram de 10975 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,18 mg/ml e 0,35 mg/ml respectivamente. A CIM da NEG foi de 0,0625 mg/ml e as nanocápsulas não demonstraram atividade antimicrobiana no teste realizado. Foi possível observar pelo menos um ponto de sinergismo entre o OEG os OE testados. As nanoestruturas não apresentaram efeito sinérgico com os OE. No ensaio de MTT o OEG e a NEG apresentaram um aumento da viabilidade celular nas concentrações de 10, 100 e 1000 μg/μl quando comparado com o controle. O ensaio de LDH mostrou que tanto o OEG quanto a NEG nas concentrações de 0,1, 1, 10, 100 e 1000 μg/μl não foram citotóxicas. No teste GEMO o OEG apresentou um efeito genoprotetor sobre os linfócitos nas concentrações de 10, 100 e 1000 μg/μl. O presente estudo demonstrou que tanto o OEG quanto a NEG não apresentaram toxicidade e genotoxicidade porém apresentam valores de CIM muito altos para poder serem utilizados em alimentos, podendo ser o sinergismo e a nanoestruturação uma boa alternativa para reduzir a quantidade de óleo necessária para uma resposta antimicrobiana.

<p>U skladu sa postavljenim ciljevima rada formirana je kolekcija&nbsp;<br />fenotipski i genotipski okarakterisanih multiplo rezistentnih&nbsp;<br />kultura genomske vrste <em>Acinetobacter baumannii</em>. Za sojeve iz&nbsp;<br />kolekcije kultura utvrđen je anti-<em>A. baumannii</em> efekat etarskih&nbsp;<br />ulja, biljnih ekstrakata i njihovih bioaktivnih komponenti, kao&nbsp;<br />nekonvencionalnih antimikrobnih agensa. Takođe, osim njihovog&nbsp;<br />pojedinačnog efekta utvrđen je i kombinovani efekat&nbsp;<br />konvencionalnih i nekonvencionalnih antimikrobnih agenasa, koji&nbsp;<br />je dovedo do redukcije minimalnih ihnibitronih koncentracija oba&nbsp;<br />agensa u kombinaciji. Kombinacije etarskih ulja i njihovih&nbsp;<br />bioaktivnih komponenti sa trenutno dostupnim konvencionalnim&nbsp;<br />antibioticima, čija je efikasnost smanjena kada se primenjuju&nbsp;<br />pojedinačno, predstavljaju novu perspektivnu strategiju u terapiji&nbsp;<br />infekcija multiplo rezistentnim sojevima vrste <em>A. baumannii</em>.</p> / <p>In accordance to the aims of the work the collection of phenotypic and<br />genotypic characterized multidrug-resistant cultures of genomic species<br /><em>Acinetobacter baumannii</em> was formed. For the strains from the culture<br />collection an anti-<em>A. baumannii </em>effect of the essential oils, plant extracts<br />and their bioactive components, as non-conventional antimicrobial<br />agents, was determined. Also, in addition to their individual effect the<br />combined effect of conventional and non-conventional antimicrobial<br />agents was determined, which lead to a reduction of the minimal<br />inhibitroy cocnentrations of both agents in combination. Combinations<br />of the essential oils and their bioactive components with the currently<br />available conventional antibiotics, whose efficiency reduced when<br />administered individually, represent a promising new strategy for the<br />treatment of infections caused by multidrug-resistant <em>A. baumannii.</em></p>

Made available in DSpace on 2015-04-17T15:02:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ArquivoTotal.pdf: 874868 bytes, checksum: 906c92d1bd78bf185a1229380b994eeb (MD5) Previous issue date: 2013-03-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Isabella grape (Vitis labrusca L.), whose clusters have berries ripening fast and very crowded, it is a non-climacteric fruit with low physiological activity, very sensitive to dehydration and fungal infection during handling in post-harvest processing. The difficulty in the treatment and control of fungal infections and increasing recognition of their impact on fruit production has encouraged the search for alternative methods capable of controlling the growth of pathogens and thereby reducing post-harvest losses. The use of essential oils for use in foods has been shown as a promising method of preservation due to its antimicrobial properties and antioxidants. The present study evaluated the efficacy of the application of the essential oils of O. vulgare L. (OVEO) and R. officinalis L. (ROEO) alone and in combinations to inhibit R. stolonifer URM 3728, A. flavus URM 4540 and A. niger URM 5842 on laboratory media and on grapes (Vitis labrusca L.) and its influence on the autochthonous mycoflora, physical, physicochemical and sensory characteristics of the fruits during storage at room temperature (25 ° C for 12 days) and chilled (12 ° C for 24 days). The OVEO and ROEO revealed MIC values of 0.25 and 1 μL / ml, respectively, against all fungi tested. The application of essential oils in different concentrations (MIC ROEO 1 μL / ml, MIC OVEO 0.25 μL / mL, ½ MIC OVEO 0.125 L / μL + ½ MIC ROEO 0.5 μL / mL, ¼ CIM OVEO 0.06 μL / mL + ¼ MIC ROEO 0.25 μL / mL) inhibited the mycelial growth (95.18 to 99.46%) and spore germination (> 75%) of the assayed fungi strains in artificially infected grapes as well as the autochthonous mycoflora of grapes stored at both room and cold temperature. In general, the application of a coating composed of OVEO and or ROEO at sub-inhibitory amounts preserved the quality of grapes, which were measured by their physical attributes (color, firmness, weight loss), physico-chemical (acidity, soluble solids and relative acidity / soluble solids) and sensory over time storage evaluated. These results demonstrate the potential of the OVEO and ROEO to control post-harvest pathogenic fungi in fruits, in particular, R. stolonifer, A. flavus and A. niger in table grapes. / A uva Isabel (Vitis labrusca L.), é um fruto não climatérico, com baixa atividade fisiológica, muito sensível à desidratação e infecção fúngica durante o manuseio no processamento pós-colheita. A dificuldade no tratamento e controle de infecções fúngicas e o crescente reconhecimento de seu impacto na produção de frutos tem estimulado a pesquisa de métodos alternativos capazes de controlar o desenvolvimento de fitopatógenos e, consequentemente, a redução das perdas pós-colheita. A utilização de óleos essenciais para aplicação em alimentos tem se mostrado uma forma promissora como método de conservação devido às suas propriedades antimicrobianas e antioxidantes. O presente estudo avaliou a eficácia da aplicação dos óleos essenciais de Origanum vulgare L. (OEOV) e Rosmarinus officinalis L. (OERO) isoladamente e em combinação como inibidores de crescimento dos fungos patógenos pós-colheita Rizhopus stolonifer URM 3728, Aspergillus flavus URM 4540 e Aspergillus niger URM 5842 em meio laboratorial e em uvas Isabel (Vitis labrusca L.) e sua influência sobre a microbiota autóctone, características físicas, físico-químicas e sensoriais dos frutos durante o armazenamento em temperatura ambiente (25 °C por 12 dias) e refrigerada (12 °C por 24 dias). O OEOV e o OERO revelaram valores de CIM de 0,25 e 1 μL/mL, respectivamente, frente a todos os fungos testados. A aplicação dos óleos essenciais em diferentes concentrações (CIM OERO 1 μL/mL; CIM OEOV 0,25 μL/mL; 1/2 CIM OEOV 0,125 μL/mL + 1/2 CIM OERO 0,5 μL/mL; 1/4 CIM OEOV 0,06 μL/mL + 1/4 CIM OERO 0,25 μL/mL) inibiu o crescimento micelial (95,18 99,46%) e germinação de esporos (> 75%) dos fungos utilizados nos testes, além de inibir o crescimento de estirpes dos fungos testados em uvas artificialmente infectadas, bem como a micoflora autóctone de uvas armazenadas em temperatura ambiente e a baixa temperatura. Em geral, a aplicação do revestimento composto por OEOV e OERO em concentrações sub-letais preservou a qualidade das uvas, considerando seus atributos físicos (cor, firmeza, perda de massa), físico-químicos (acidez titulável, sólidos solúveis e relação acidez tituláveis/sólidos solúveis) e sensoriais ao longo dos tempos de armazenamento avaliados. Os resultados obtidos no estudo demonstraram o potencial de OEOV e OERO para o controle de fungos patogênicos pós-colheita de frutos, em particular, de R. stolonifer, A. flavus e A. niger em uvas de mesa.