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Avalia??o morfol?gica e enzim?tica de plantas de Psidium spp. infectadas com Meloidogyne enterolobii

Ara?jo, Emanuela de Oliveira Alves 30 September 2016 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-07-04T11:53:11Z No. of bitstreams: 1 EmanuelaDeOliveiraAlvesAraujo_DISSERT.pdf: 2154879 bytes, checksum: b4993f6ac81bc279a0405849cbcdced2 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-07-11T12:30:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 EmanuelaDeOliveiraAlvesAraujo_DISSERT.pdf: 2154879 bytes, checksum: b4993f6ac81bc279a0405849cbcdced2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-11T12:30:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EmanuelaDeOliveiraAlvesAraujo_DISSERT.pdf: 2154879 bytes, checksum: b4993f6ac81bc279a0405849cbcdced2 (MD5) Previous issue date: 2016-09-30 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A goiabeira (Psidium guajava L.) ? amplamente cultivada por seus frutos comest?veis, ocupando lugar importante entre as frutas tropicais brasileiras. No entanto, a produ??o da goiabeira vem sendo prejudicada e inviabilizada em v?rias ?reas de cultivo, tendo como principal fator respons?vel, a infec??o parasit?ria do Meloidogyne enterolobii. Logo, considerando a problem?tica dos danos promovidos pelo M. enterolobii, este trabalho teve como objetivo analisar as poss?veis altera??es morfol?gicas e enzim?ticas, para entender os danos do estresse ocasionado aos 26 dias ap?s a infec??o (DAI), em plantas de Psidium spp. quando infectadas pelo nematoide M. enterolobii. Para isso, foram utilizados exemplares de goiabeira (Psidium guajava cv ?Paluma?), consideradas suscept?veis ao nematoide, e ara?azeiro da Costa Rica (Psidium friedrichstalianium), por ser uma esp?cie resistente ao nematoide e, por isso, ser utilizada como porta enxerto para P. guajava. Os exemplares, ao completarem quarenta dias ap?s plantio em casa de vegeta??o, foram submetidos ? inocula??o do nematoide M. enterolobii e, aos 26 dias ap?s a infec??o com o nematoide, foram coletadas folhas e ra?zes para an?lise morfol?gica (determina??o de ?rea foliar), an?lises anat?mica e histol?gica da raiz (an?lise de se??es anat?micas transversais e longitudinais) e an?lises enzim?ticas (an?lises de atividades de catalase, ascorbato peroxidase e peroxidase do guaiacol). Em paralelo, foi realizada uma pesquisa in silico de sequ?ncias de microarranjo relacionadas com a resist?ncia ao estresse bi?tico em Arabidopsis thaliana com o intuito de identificar genes associados a este processo e que possam ser utilizados como marcadores para Psidium spp. no futuro. As an?lises morfol?gica e histol?gica comprovaram os danos causados pela infec??o do M. enterolobii em goiabeiras e ara?azeiros da Costa Rica. Foi verificado que a ?rea foliar (AF) diminui com a infec??o do M. enterolobii em P. friedrichstalianium e, em P. guajava, houve um aumento na AF. As altera??es nas estruturas histol?gicas foram percept?veis, aonde foi poss?vel observar nos exemplares infectados a ocorr?ncia de galhas nas ra?zes, a presen?a de c?lulas desordenadas, hiperplasia e hipertrofia celular, danos no xilema e poss?veis forma??es de s?tios de alimenta??es. Com as an?lises enzim?ticas observamos que as atividades enzim?ticas relacionadas com a EROs podem estar envolvidas no processo de infec??o do nematoide em estudo. O tecido radicular da cv ?Paluma? apresentou menor atividade de ascorbato peroxidase (APX) em rela??o ao ara?azeiro da Costa Rica (P. friedrichstalianium). Diante dos resultados obtidos da parte in silico foi constru?do um interactoma composto por 78 prote?nas que foram apresentadas em grupos. As an?lises in silico em Arabidopsis thaliana sugerem poss?veis vias de resposta envolvidas com planta hospedeira ao estresse bi?tico, estresse oxidativo, prote?nas associadas direta e indiretamente com as duas vias, assim como tamb?m as localiza??es a n?vel celular dessas prote?nas. Os dados e as evid?ncias obtidas neste trabalho ser?o norteadores para futuros estudos, e a compreens?o do comportamento dos processos que ocasionam a resist?ncia das esp?cies de Psidium spp. a infec??o pelo nematoide Meloidogyne enterolobii. Al?m disso, os dados in silico contribu?ram em uma melhor compreens?o biol?gica, trazendo informa??es que poder?o auxiliar em estudos com estresse bi?tico ocasionado em outras dicotiled?neas. / The guava tree is widely cultivated due to its edible fruits, and it is considered an important Brazilian tropical fruits. However, the guava production has been affected in many cultivation areas by Meloidogyne enterolobii infection. For this reason, this work aimed to analyze the morphological and enzymatic changes promoted by the M. enterolobii. In order to understand this, Psidium spp plants when infested by the nematode M. enterolobii and after 26 days (DAI) were analyzed. For these assays, it was worked with Psidium guajava cv ?Paluma? (susceptible to the nematode) and Psidium friedrichstalianium (Costa Rican guava trees -resistant to the nematode). These plants were grown in green house and after forty days, these plants were infested with the M. enterolobii nematode, and after 26 days leaves and roots were collected for morphological analysis (determination of the leaf area), for anatomical and histological analyses of the root (analyses of cross-sectional and longitudinal anatomical sections), and for enzymatic analyses (analyses of catalase, ascorbate peroxidase, and guaiacol peroxidase activities). Furthermore, it was also used an in silico approach using microarray data related to biotic stress using Arabidopsis thaliana data. The morphological and histological analyses confirmed the damages promoted by the M. enterolobii in guava and Costa Rica guava trees. It was also observed that the leaf area (LA) reduce with the infection of M. enterolobii in P. friedrichstalianium, and, in P. guajava, there was an increase in the LA. The histological structures alterations were observed by the presence of galls on the roots, disordered cells presence, hyperplasia and cellular hypertrophy, xylem damage, and feeding sites formation. The enzymatic analyses showed an increase in ROS. It was observed in P. friedrichstalianium an increase from APX activity when compared to Psidium guajava. The results obtained in the in silico analysis allowed us to build an interactome formed by 78 proteins that were presented in groups. This data suggest a potential response pathways involved in biotic stress, oxidative stress, proteins direct and indirectly associated with the two pathways, as well as the locations of these proteins in a cellular level. The results showed here may be a guideline for future studies and it helped to understand better the effects of Meloidogyne enterolobii nematode in Psidium spp species.

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